临床检验方法的评价CLSIEP文件

MgCl2 KH2PO4或NaHPO4 白蛋白干粉、人或牛的成份V
• UA： 在得不到高值病人样本时;使用标准储备液或干 燥尿酸 &
• BUN：在得不到高值病人样本时;使用标准储备液或干 燥尿素 &
样本分析顺序
• 分析序列应为随机排列& • 有显著携带污染时;应用空白隔开样本& • 每个实验组内应至少分析4个最好是5个
x5
y5-1 y5-2 y5-3 y5-4
数据评价
• 观察有无明显的数据错误& • 若有明显异常时应判断是否为离群点& • 如离群点超出2点;则保留全部数据或重
做全部实验&
离群点检查
• 用于特定浓度Y值离群点的检验& • 将4个重复值从大到小排列Y1到Y4& • 计算：D = Y1 - Y4 • 若Y1可能是离群点;计算：
推荐的样本添加材料
• CHOL：胆固醇纯品或稀释质控品 • CO2： CaCO3 • CREA：标准液或高值血清 • -ALT： 纯酶 • GLU： 右旋糖 • AST： 纯酶 • ALT： 纯酶
推荐的样本添加材料
• HBD： 纯酶
• LDH： 纯酶
• Lipase： 胰腺提取物
• Mg：
• P: • TP：
不同浓度水平的样本&
样本浓度范围
• 应覆盖待评线性范围的上、下限& • 评价结果不满意时应重新设定浓度& • 线性范围内至少应保留有4个浓度&
样本的准备
• 足量的混合血清& • 低浓度混合血清No1；高浓度混合血清
No5 • 血清No2：3份“No1” + 1份“No5” • 血清No3：2份“No1” + 2份“No5” • 血清No4：1份“No1” + 3份“No5”
样本浓度计算
C1×V1 + C5 ×V5 浓度 = ----------------------------------
V1 + V5
数据收集
x1
y1-1 y1-2 y1-3 y1-4
x2
y2-1 y2-2 y2-3 y2-4
x3
y3-1 y3-2 y3-3 y3-4
x4
y4-1 y4-2 y4-3 y4-4
临床检验方法的评价
卫生部临检中心
方法选择
方法评价
方法发展
常规分析前准备 预防措施
样品
常规分析
统计质控 报告结果
分析方法分级
决定性方法definitive method：经详尽研究 尚未发现不准确度或不确定性原因的方 法&
参考方法reference method：经详尽研究证 实其不准确度与不精密度可以忽略的方 法&
X最适范围检查—相关 （ALB）
N2
(xijx)(yijy)
r= i j N2
N2
(xijx)2 (yijy)2
ij
ij
r =0.9695
回归系数评价计算
截 距 a = - 9.05 斜 率 b = 1.17 Y = 1.17 X – 9.05
预期偏差及可信范围 线性回归方程 计算偏差高、中、低3组
41.1 0.1 -1.1
42
42 0 43.2 43.4 43.3 0.2 -1.3
38
38 0 38.6 38.9 38.7 0.3 -0.7
43
43 0 45 44.9 44.9 0.1 -1.9
35
35 0 36.9 37
36.9 0.1 -1.9
45
44.5 1 44.8 45.3
45 0.5 -0.5
二级标准物质
红细胞微粒标准物质—GBWE090001 胆红素标准物质—GBWE090002 氰化高铁血红蛋白溶液标准物质—GBWE090004 纯化血红蛋白标准物质—GBWE090011
方法的评价
评价内容：
初步评价NCCLS EP10 精密度 NCCLS EP5 对比及偏差 NCCLS EP9 线性 NCCLS EP6 抗干扰能力 NCCLS EP7 基质效应 NCCLS EP14 临床准确度敏感性和特异性
解释实验结果并与内部标准比较
BCP 与BCG 法测定血清ALB 时结果的预期偏倚估计
BPG 法(g/l)
BCP 法(g/l) 预期偏倚（g/l） 相对偏倚（%）
30
26.5
-3.5
11.6
40
37.8
-2.2
5.5
50
49.1
-0.9
1.8
定量分析方法的线性评价
Evaluation of The Linearity of Quantitative Analytical Methods
常规方法routing method：可满足临床或 其他目的需要的日常使用的方法&
分析物 决定性方法
Ca
ID-M S
电量滴定
Cl
中子活化法
Fe
ID-M S
Mg
ID-M S
P
ID-M S
ID-M S
K
中子活化法
重量分析法
Na
中子活化法
参考方法
原子吸收分光光度法 电流滴定法
沉淀蛋白后亚铁嗪反应 原子吸收分光光度法
0.37
0.41 -2.7
均值散点图X;Y
y = 1.1722x - 9.0485 R = 0.9695
50
BECKMAN CX9(BCP)
40
30
20
10
10
20
30
40
50
HITACHI 7170(BCG)
偏差图：每次测定的Y均值与X均值 之差-相应X均值图
Yi-Xi对Xi偏倚图
20
30
40
EP6-P
目的
• 为实验室中采用定量分析方法的用户提 供评价仪器或方法是否满足厂家线性指 标的评价方法&
• 用户可为分析方法设定线性范围&
定义
• Assay RangeLinear Range
The range of concentration or activity in which the final output value of a system is proportional to the analyte concentration or activity within a stated tolerance.
0 -3.7
8
42
43
42.5 1 43.8 43.9 43.9 0.1 -1.4
33
34
34
30
35
40
36
42
37
38
38
43
39
35
40
44
平均数
34
34 0 35.6 36.3 35.9 0.3 -1.9
30
30 0 32.1 32.6 32.3 0.5 -2.3
40
40 0 41.1 41
• 进行线性评价实验&
仪器的熟悉过程
• 执行分析过程的实验室人员必须掌握仪 器操作和维护程序、样本准备方法和校 准&
• 对较简单的设备需要5天或更少时间& • 对较复杂的多通道设备需要5天或更长时
间&
实验周期
• 在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集 数据&
• 全部实验和数据采集应在同一工作日内 完成&
实验样本：
来源于健康人或患者;无干扰;尽量避免贮存&
对比方法：
厂家要求的实验室常规方法或公认的参考方法& • 具有好的精密度 • 没有已知的干扰物 • 相同单位 • 相对国家标准或参考方法的偏差是已知的
测定范围：医学决定水平范围内均匀分布
样本数：至少40例;增加可提高可信性& 测定方法：两种方法分别做双份测定& 测定顺序：
定义
Linearity:
• The measure of the degree to which a curve approximates a straight line.
• It refers to overall system response i.e.; the final analytical answer rather than the instrument output
常规方法
参考方法 决定性 方法
标准品分级
标准品reference material：充分均匀并具有一个或 多个良好确定的特性值的材料或物质;用来校准仪器 设备、评估测定方法或给其它物质赋值&
• 一级标准品原级参考物：稳定、均一;由高度准确的 若干方法定值;可用于校准决定性方法及为二级标准 品定值&
50
15
10
5
Yi-Xi
0
-5
-10
-15 HITACHI 7170（BCG）
线性相关目测检查 两种方法间离群值目测检查
界限：4倍两种方法间绝对偏差的均值 绝对差值允许范围:
相对差值允许范围:
适合范围 计算 r;r2 >= 0.95 范围适合 r2 < 0.95 扩大数据范围
线性回归 计算 均匀离散度的直观检查
每天 ：1、2、3、4、5、6、7、8 8、7、6、5、4、3、2、1
测定次数： 每天分别用两种方法进行测定; 至少测定5天;共40个样本
数据监督：系统误差、人为误差
质控：常规质控
实验步骤
•熟悉仪器及方法 •收集数据 •检查方法内的离群点
界限： 双份测定相对差值均值的4 倍
绘图
• 均值散点图X;Y • 所有值散点图Yij;Xi • 偏差图 散点图 Yij -Xij;Xi
NCCLS GP10;ROC曲线
NCCLS文件EP9-A
用患者样本进行方法对比 及偏差评估
批准指南 1995年12月
目的： 引进新方法前或用一种方法替代另一种方 法时进行偏差分析&
用途：
评价两种分析方法同一分析项目 的偏差&
评价要求：
•熟悉仪器操作 •熟悉评价方案 •质控 •足够的数据最少5个工作日;40个样本
表 1 病人样本检验结果
B E C K M A N （ Y ）（ g / l ）
HITACHI(X)(g/l)
样品
结果
Yi-
号
结果
结果
均值
结果
DYi 1(X1
均值
DXi
Xi
1(Y1)
2(Y2) Yi)
2(X2) (Xi)
)
1
25
25
25
0 28.3 28.1 28.2 0.2 -3.2
2
47.5 0.1 -1
• Aqueous Solutions 一般无基质效应 • Solution in Other Solvents 基质效应与有
机溶剂相似
推荐的样本添加材料
• ALB：白蛋白干粉、human fraction V. • 乙醇：无水乙醇 • ALP：纯酶 • AMS：腮腺或胰腺提取物 • BIL： 胆红素纯品 • Ca: CaCO3 • Cl: NaCl
3
36
36
36
0 38.4 38.1 38.3 0.2 -2.3
4
39
40
39.5 1 41.3 40.8 41.1 0.5 -0.6
5
14
14
14
0 18.7 18.9 18.8 0.2 -4.8
6
32
32
32
0 36.1 36.2 36.2 0.1 -4.2
7
27
28
27.5 1 31.2 31.2 31.2
Scope and Limitations
• 线性是分析方法的一个特征;不同于准确 性和精密度&
• 线性实验应该使用与待分析物基质相似 的样本&
• 线性检验系统反应;包括校准、线性化技 术、系数和仪器反应&
使用者的需求
• 用简单的实验来检验厂家标示的线性范 围及定量分析方法的分析范围&
• 在实验室中作为方法学的信息方法线性 &
火焰光度法 火焰光度法
分析物
Alb TP Crea Urea UA Bil Glu Chol TG
决定性方法
ID-MS 中子活化法
ID-MS ID-MS
ID-MS ID-MS ID-MS
参考方法
免疫化学法 双缩脲法
离子交换层析 尿素酶法 尿酸酶法 重氮法
己糖激酶法 胆固醇氧化酶法
酶法
不同方法的关系
• 二级标准品：用一级标准品校准;参考方法定值&
• 校准品：用二级标准品校准;拟被用于校准的常规方 法定值&用于对常规方法和仪器的校准&
准确度的传递
一级标准品
决定性方法
参考方法
溯
二级标准品
校
源
厂家方法
准
校准品 常规分析
仪器参数 试剂
一级标准物质
人血清无机成分分析标准物质—GBW09135 血清胆固醇标准物质—GBW09138
线性评价实验
• 样本要求： 最少4个浓度水平;推荐5个水平&
• 基质效应： 应使用与病人样本相似的样本或注明
基质类型&
可以使用的样本
• 病人混合血清 理想的样本基质 高值样本：高于上限30% 低值样本：线性低限或更低&
可以使用的样本
• Patient-Sample Pool Spiked with Analyte 加入品在没有干扰物存在时不需高纯度& • Pool Diluted with Treated Pool Material 用于降低分析物浓度;如：透析、热处理、 层析&
可以使用的样本
• Pool Diluted with Saline& 在线性实验中使用此类样本可掩盖不同的基质 效应&
• Commercial Control/Calibrator Material 此类样本由于不是正常的生理形式;可掩盖实际 的线性结果&
可以使用的样本
• Underdiluted/Overdiluted Commercial Control Material