蜈蚣、地龙、地鳖虫镇痛作用比较的实验研究

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蜈蚣、地龙、地鳖虫镇痛作用比较的实验研究
汪梅姣;谢志军;谷焕鹏;温成平
【摘要】目的比较虫类药蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物的镇痛作用.方法选择清洁
级ICR小鼠,分为空白对照组、蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组、美洛昔康组,采用热板法和扭体法实验比较蜈蚣、地龙、地鳖虫的镇痛作用.结果热板法疼痛实验,蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物给药后与给药前比较小鼠舔足时间明显延长;其中在30、90、120 min时蜈蚣组与空白对照组比较,在120 min地龙组时与空白对照组比较;在120 min时地鳖虫组与美洛昔康组比较,差异均有统计学意义.其余各组各时间段与美洛昔康组相近.醋酸致小鼠扭体反应实验,蜈蚣、地鳖虫组小鼠扭体次数明显减少,各组与美洛昔康组情况相近.结论蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物对热板、醋酸导致的疼痛均有明显的缓解作用.其中蜈蚣在热板、醋酸导致的疼痛实验中表现出最强的
镇痛作用,在热板法疼痛实验中地龙的镇痛作用强于地鳖虫,但是在醋酸致小鼠扭体
反应实验中结果相反,表明地鳖虫短效镇痛作用较好,而地龙有长效的镇痛作
用.%Objective: To compare the analgesic effect of Centipede,Earthworm and Eupolyphaga sinensis. Methods: The analgesic effect of
Centipede,Earthworm and Eupolyphaga sinensis were observed by hotplate and acetic acid body torsion methods. Results:
Centipede .Earthworm and Eupolyphaga sinensis prolonged pain latency in mice and decreased the writhing number of induced by acetic acid. In hotplate method, Centipede remarkably prolonged pain latency in mice when 30,90 and 120 min,and Earthworm at the time of 120min. In acetic acid body torsion method,compared with control group,Centipede and Ground Beetle showed obviously the difference. Conclusion: Centipede,
Earthworm and Eupolyphaga sinensis nave analgesic effect. Centipede showed the strongest analgesic effect in the both experiment. In the hotplate experiment,analgesic effect of Earthworm is better than that of Eupolyphaga sinensis. The butthe results reversedinacetic acid body torsion method. So we conclud that Earthworm shows better short-acting analgesic action,and Eupolyphaga sinensis has better long-term effect.【期刊名称】《中国中医急症》
【年(卷),期】2012(021)009
【总页数】2页(P1435-1436)
【关键词】蜈蚣;地龙;地鳖虫;镇痛
【作者】汪梅姣;谢志军;谷焕鹏;温成平
【作者单位】浙江中医药大学,浙江杭州310053;浙江中医药大学,浙江杭州310053;浙江中医药大学,浙江杭州310053;浙江中医药大学,浙江杭州310053【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
虫类入药,历史悠久,其研究与应用前景广阔,比如蜈蚣、地龙、地鳖虫在镇痛方面具有明显优势。

本研究拟通过动物实验比较蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物的镇痛作用,为临床合理选择用药提供实验依据。

1 材料与仪器
1.1 药物蜈蚣(产地:浙江)、地龙(产地:上海)、地鳖虫(产地:山东),
由浙江中医药大学饮片厂提供。

美洛昔康,上海勃林格殷格翰药业有限公司(国药准字H20020217)。

取干燥的蜈蚣、地龙、地鳖虫药材切碎,分别用去离子水煎1 h,去渣后使用旋转蒸发仪浓缩,得水提物的生药浓度为0.10 g/mL。

美洛昔康溶液:去离子水配制药物浓度为15 mg/mL。

1.2 动物实验用清洁级ICR小鼠,体质量(20±2)g,由浙江中医药大学动物中
心提供。

1.3 仪器与试剂YLS-6B智能热板仪,济南益延科技发展有限公司;电子分析天平,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司(型号:00000246)。

旋转蒸发仪,电炉等实验室常用设备。

冰醋酸,杭州化学试剂有限公司(批号:20041201)。

1.4 热板法疼痛实验调节职能热板仪温度在(55±0.5)℃,热板预热10 min。

取雌性ICR小鼠,放在热板上,小鼠自放上热板到出现舔后足或抬后足并回头所需
时间(s)作为该鼠的痛阈值。

凡舔后足或抬后足时间<5 s或>30 s或跳跃者,
弃之不用。

取合格的小鼠40只,分为空白对照组(蒸馏水灌胃)、蜈蚣组(蜈蚣水提物灌胃,剂量1.12 g/kg,相当于人体用药 6 g/60 kg)、地龙组(地龙水提物灌胃,剂量1.12 g/kg)、地鳖虫组(地鳖虫水提物灌胃,剂量1.12 g/kg)、美洛昔康组(美洛昔康溶液灌胃,剂量1.4 mg/kg,相当于人体用药7.5 mg/60 kg),每组8只。

其中空白对照组、蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组均灌胃给药7 d,末次灌胃后0、30、60、90、120 min分别用智能热板仪测小鼠痛阈值。

美洛昔
康组只在测定当天灌胃,实验步骤同前。

如60 s小鼠仍无反应,取出小鼠停止实验,以免烫伤,其痛阈值以60 s计算。

1.5 醋酸致小鼠扭体反应实验取ICR小鼠40只,雌雄各半,分为空白对照组(蒸馏水灌胃)、蜈蚣组(蜈蚣水提物灌胃)、地龙组(地龙水提物灌胃)、地鳖虫组(地鳖虫水提物灌胃)、美洛昔康组(美洛昔康溶液灌胃),每组8只。

空白对
照组、蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组均灌胃给药7 d,末次灌胃给药50 min后,各
小鼠均腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/10 g。

美洛昔康组只在当天灌胃,实验步骤同前,观察15 min内各组小鼠出现扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、颠部抬高)次数,计算镇痛百分率,公式为:镇痛百分率=(对照组平均扭体次数-给药组平均
扭体次数)/对照组平均扭体次数×100%。

1.6 统计学处理应用SPSS16.0统计软件。

计量资料以(±s)表示,方差齐性检
验采用Levene检验,多组间方差齐性时采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t法,所有假设检验均采用双侧检验。

P≤0.05者将被认为有统计学意义。

2 结果
2.1 热板法疼痛实验见表1。

给药前各组小鼠添足反应时间差异无统计学意义(P
>0.05)。

给药后与给药前比较:蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组小鼠舔足时间明显延长,其中,在30、90、120 min时蜈蚣组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);在120 min时,地龙组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),地鳖虫组与美洛昔康组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余时间段差异均无统计学意义(P>0.05)。

表1 各组给药后不同时点痛阈(舔足反应时间)比较(s,±s)与美洛昔康组比较,*P<0.05;与空白对照组比较,△P<0.05。

下同。

组别 n 0 min 30 min 60 min 90 min 120 min空白对照组 8蜈蚣组8 11.75±1.53 13.26±2.59 38.94±30.80△ 38.43±31.19△地龙组8 10.68±5.91 23.20±21.99 14.36±8.10 31.16±22.43 38.81±23.92△地鳖虫组8 7.70±2.08 13.56±11.59 19.15±12.06 22.61±20.51 20.80±20.64*10.74±5.64 11.90±1.71 12.01±2.5110.74±4.92 30.41±15.58△ 17.26±6.37美洛昔康组812.92±5.86 21.75±10.03 37.47±16.6527.95±23.04 36.16±23.33
2.2 醋酸致小鼠扭体反应实验见表2。

给药前各组小鼠添足反应时间没有显著差异(P<0.05)。

蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组与空白对照组比较,小鼠扭体次数明显
减少,其中蜈蚣组、地鳖虫组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。

各组与美洛昔康组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组3组间差异均无统计学意义(P>0.05)。

表2 各组给药前后扭体次数与镇痛率比较(±s)组别 n 小鼠扭体次数疼痛率(%)空白对照组 8蜈蚣组8 33.0±6.5 —14.0±10.9△ 57.6地龙组8 28.0±14.1 15.2地鳖虫组8 27.0±13.6△ 18.2美洛昔康组813.0±7.9 60.6
3 讨论
虫类药用于镇痛治疗历史悠久,《千金要方》、《外台秘要》都有用虫类药治疗痹证的记载。

宋代治疗痹证的医方中较前人更多使用了虫类药,如:蜈蚣、地龙、乌蛇、白花蛇、全蝎之类,代表方如《圣惠方》的原蚕蛾散(地龙、原蚕蛾、僵蚕、蝉蜕),蛜螂丸(蛜螂即全蝎)。

目前,虫类药亦广泛用于治疗风湿痹病,如益肾蠲痹丸(含蜈蚣、地龙等)有搜风剔邪,蠲痹通络之功,临床用于治疗类风湿关节炎、强直性脊柱炎等风湿痹症具有较好的疗效[1]。

腰痛宁胶囊(含土鳖虫等)具有消肿止痛,疏散寒邪,温经通络作用,常用于治疗腰腿痛、风湿性关节痛等[2]。

蚁参蠲痹胶囊(复方蚂蚁丸)(含蜈蚣等)临床上用于治疗类风湿性关节炎[3]。

蜈蚣功能息风镇痉,通络止痛,攻毒散结,可用于治疗风湿顽痹等;地龙功能清热定惊,通络,平喘,利尿,可用于关节痹痛,肢体麻木,半身不遂等;地鳖虫功能破瘀血,续筋骨,可用于筋骨折伤,瘀血经闭,癓瘕痞块。

研究表明,蜈蚣醇提物、水提物均有明显的镇静、镇痛、解痉和抗炎作用[4],对热板法刺激引起的疼痛有显著镇痛作用,且小剂量优于大剂量;对二甲苯引起的小鼠耳廊炎症也有显著的抑制作用[5];地龙具有溶栓、降压、镇静、镇痛、杀精子等作用[6-7];杨
耀芳研究发现土鳖虫呈现较强的镇痛作用[8]。

本研究表明,蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物对热板、醋酸导致的疼痛有明显的缓解作
用;其中,蜈蚣在热板、醋酸导致的疼痛实验中表现出最强的镇痛作用,在热板法疼痛实验中地龙的镇痛作用强于地鳖虫,但是在醋酸致小鼠扭体反应实验中结果相反,表明地鳖虫短效镇痛作用较好,而地龙有长效的镇痛作用。

本文仅比较了蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物的镇痛作用,对于其醇提物及其他虫类药的镇痛作用比较还有待深入研究。

参考文献
[1]畅金剑,王增慰,黄巧智.强督通痹汤联合益肾蠲痹丸治疗强直性脊柱炎 35 例[J].中医研究,2011,24(3):29-31.
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技
出版社,2010:1191-1192.
[3]刘书堂,刘井利,郭金甲,等.动物药治疗风湿病的作用和应用[J].中国中
医骨伤科杂志,2007,15(7):83-84.
[4]杨永华,张永寒,徐琳本,等.僵蚕、蜈蚣提取工艺的研究[J].中国中药杂志,2001,26(9):599-601.
[5]陈红琳,李小莉,甘明.墨江蜈蚣的药理作用[J].湖北中医杂志,2003,25(1):50-51.
[6]朱久群.地龙的临床应用进展[J].现代中西医结合杂志,2000,9(3):205-206.
[7]吕金胜,吴畏,孟德胜,等.地龙醇提物抗炎及镇痛作用的研究[J].中国药师,2003,6(1):16-18.
[8]杨耀芳,杨翊雯,王赛前,等.土鳖虫口服液镇痛、活血化瘀与红细胞免疫研究[J].中成药,2003,6(25):496-498.。

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