广东土牛膝与土牛膝的鉴别方法

图1 广东土牛膝粉末显微图
木纤维; 2.厚壁细胞; 3.石细胞; 4.具缘纹孔导管; 5.棕色块; 6.分泌道碎片
图2 土牛膝粉末显微图
1.木纤维;
2.导管;
3.草酸钙簇晶;
4.方晶
土牛膝
石细胞众多,成群或散在无
厚壁细胞单个散在或数个成群偶见
导管多为具缘纹孔导管具缘纹孔、梯纹及螺纹导管
结晶簇晶、方晶
棕色块无
分泌道碎片无
表1 广东土牛膝与土牛膝粉末特征主要区别
图3 广东土牛膝横切面简图
①作者简介:张德培:副总经理、主管中药师、执业药师。

通讯作者:黄海波:Tel:186********,Email:bobhwang@。

中国卫生产业
型电热恒温干燥箱(沪南实验仪器厂);GSK-11型恒温水浴锅;RE-52AA 旋转式蒸发器(金坛市晶玻实验仪器厂);DWF100型粉碎机。

实验所用试剂均为分析纯。

2 实验方法
2.1 粉末
分别取广东土牛膝和土牛膝,粉碎,过筛,分别做水装片、水合氯醛装片和水合氯醛加热透化片观察,绘图。

2.2 横切面
分别取广东土牛膝和土牛膝的根鲜品适量,用蒸馏水浸润,采用徒手切片法,水合氯醛透化后观察,绘图。

2.3 薄层鉴别
2.3.1 供试品液制备 分别取广东
土牛膝和土牛膝干品粉末各2g,加75％乙
醇20mL,超声提取30min,滤过,滤液加稀
盐酸2mL,超声20min,放冷,加氢氧化钠
试液调节pH至7,用三氯甲烷20mL提取,
提取液蒸干,残渣加三氯甲烷1mL使溶
解,作为供试品溶液。

2.3.2 色谱条件 照薄层色谱法[4]
(中国药典一部附录ⅥB)试验。

吸取上述
2种溶液各10、20ul,分别点于同一硅胶G
薄层板上,以乙醚—正己烷(2:1)为展开
剂,展开,取出,晾干,喷以磷钼酸试液,
在105℃加热至斑点显色清晰,置紫外灯
(365nm)下检视[5]。

3 结果
3.1 粉末
3.1.1 广东土牛膝 (1)粉末颜色为
棕黄色。

(2)厚壁细胞多,淡黄绿色。

(3)石
细胞多见,多呈长条形、类方形、类圆形,
壁厚木化,层纹、孔沟及纹孔明显。

(4)导
管多具缘纹孔。

(5)存在分泌道碎片和棕色
块。

(6)木纤维多,壁厚,木化(图1)。

3.1.2 土牛膝 (1)粉末颜色为棕灰
色。

(2)导管除具缘纹孔导管外,还有梯纹
导管和螺纹导管。

(3)薄壁细胞中有草酸钙
簇晶、方晶。

(4)纤维长梭形,壁木化(图2)。

结果:广东土牛膝和土牛膝都有具缘
纹孔导管,纤维长梭形,壁木化。

但广东土
牛膝可观察到明显的石细胞、厚壁细胞、棕图4 土牛膝横切面简图
广东土牛膝土牛膝
木栓层表皮细胞木栓化,壁稍厚,有的细胞内含棕色物最外层细胞类方形或椭圆形,外壁有略厚突起的角质增厚皮层较宽,石细胞散在,近内皮层处有分泌道排列成环较窄,薄壁细胞含草酸钙簇晶
内皮层明显不明显
维管束外韧形异常维管束外韧型,排成3～4轮
髓部宽广无
表2 广东土牛膝、土牛膝根横切面显微特征鉴别
100 中国卫生产业
色块和分泌道碎片,而土牛膝中除具缘纹孔导管外还存在梯纹导管、螺纹导管,草酸方晶。

总的来说,广东土牛膝和土牛膝粉末显微是有很大区别的,两者可通过观察粉末进行鉴别。

具体区别见表1。

3.2 根横切面
3.2.1 广东土牛膝 (1)表皮细胞木栓化,壁稍厚,有的细胞内含棕色物。

(2)皮层较宽,细胞类圆形或多角形,有石细
(3)紧靠内皮层处有分泌道排列成
(4)内皮层明显,韧皮部较窄,形成层断
(5)木质部导管放射状排列,射线
(6)髓部细胞多角形,壁薄(图3)。

3.2.2 土牛膝 (1)最外层为木栓层,细胞类方形或椭圆形,外壁有略突起的角质增厚。

(2)皮层细胞椭圆形,茎棱处为厚角细胞,皮层薄壁细胞含草酸钙簇
(3)同心环状异常维管束连续排列成3～4轮,维管束外韧型。

(4)韧皮部狭窄,木质部较宽。

(5)薄壁细胞中可见砂晶和方晶,砂晶较少。

(6)正常维管束位于中央,初生木质部二原型(图4)。

3.3 薄层色谱
结果:土牛膝在Rf=0.40附近有2个蓝紫色特征斑点;广东土牛膝在Rf=0.5处有粉红色斑点,Rf=0.6处有黄色斑点和Rf=0.8处有紫色斑点(图5)。

4 讨论
(1)广东土牛膝粉末中厚壁细胞和石细胞明显,土牛膝则存在草酸钙簇晶、晶;广东土牛膝横切面近内皮层处有分泌道排列成环,而土牛膝具同心环状排列的异常维管束。

此两点可作为其显微鉴别的主要区别点。

(2)在薄层色谱上,可
Rf=0.40附近是否有两个蓝紫色斑点以鉴别土牛膝与广东土牛膝;亦可由在Rf=0.5处是否有红色斑点以鉴别广东土牛膝与土牛膝。

(3)由于未能购买到广东土牛膝、
膝对照药材和齐墩果酸对照品,故本实验薄层色谱中未能用对照药材和对照品作对照。

图5 薄层色谱图
A.广东土牛膝;
B.土牛膝; D.广东土牛膝; E.土牛膝。