miR-17-5p通过靶向作用AKT3抑制肝癌侵袭和迁移
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【Abstract】 Objective To explore the effect and mechanism of microRNA (miR)-17-5p on the invasion and metastasis of hepatocellular carcinoma (HCC) cells. Methods Expression of miR-17-5p in the normal human L-02 hepatocyte and QGY-7703 HCC cells was detected by RT-PCR. QGY-7703 HCC cells were transfected by miR-17-5p mimic and mimic control respectively. Influence of miR-17-5p on the invasion and metastasis ability of HCC cells was detected using Transwell assay and scratch test. Target gene of miR-17-5p was confirmed by bioinformatic analysis, and its expression in HCC cells was detected by Western blot. After siRNA silenced by target gene, the invasion and metastasis ability of HCC cells were observed. Comparison of microRNA in the two kinds of cells was conducted by t test. Results Expression level of miR-17-5p in HCC cells was 0.16±0.04, significantly lower than 1.01±0.19 in normal L-02 hepatocytes (t=-9.67, P<0.05). Number of trans-membrane cells and metastasis rate of HCC cells transfected by miR-17-5p mimic were respectively 36±4 and (5.37±0.15) mm/d, significantly lower than
152Biblioteka 中华肝脏外科手术学电子杂志 2018 年 4 月第 7 卷第 2 期 Chin J Hepat Surg(Electronic Edition), April 2018, Vol. 7, No. 2
基础研究
miR-17-5p通过靶向作用AKT3抑制 肝癌侵袭和迁移
孔伟浩1 李坤1 肖翠翠1 胡竞雄2 黄泽楠3 陈强星1 张剑1
【关键词】 癌，肝细胞； miR-17-5p； AKT3； 肿瘤侵润； 细胞迁移
miR-17-5p inhibits invasion and metastasis of hepatocellular carcinoma through targeting effect on AKT3 Kong Weihao1, Li Kun1, Xiao Cuicui1, Hu Jingxiong2, Huang Zenan3, Chen Qiangxing1, Zhang Jian1. 1Department of Liver Transplantation, 2Department of Hepatobilliary Surgery, 3Department of Thyroid and Breast Surgery, the Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510630, China Corresponding author: Zhang Jian, Email: zhangjian629@
【摘要】 目的 探讨 microRNA（miR）-17-5p 对肝细胞癌（肝癌）细胞侵袭和迁移的影响及机 制。方法 采用 RT-PCR 检测 L-02 人正常肝细胞及 QGY-7703 肝癌细胞中 miR-17-5p 的表达。miR-175p 模拟物和模拟物对照分别转染 QGY-7703 肝癌细胞。Transwell 和划痕试验检测 miR-17-5p 对肝癌细 胞侵袭和迁移能力的影响。生物信息学分析确定 miR-17-5p 的靶基因，Western blot 检测其在肝癌细胞 中表达。对靶基因行 siRNA 沉默后，观察肝癌细胞的侵袭和迁移能力。两种细胞中 microRNA 比较采 用 t 检验。结果 miR-17-5p 在肝癌细胞中表达量为 0.16±0.04，较 L-02 正常肝细胞的 1.01±0.19 明显 下调（t=-9.67，P<0.05）。转染 miR-17-5p 模拟物的肝癌细胞穿膜细胞数、迁移速度分别为（36±4）个、 （5.37±0.15）mm/d，明显低于对照组的（62±7）个、（7.50±0.01）mm/d（t=-15.40，-32.00；P<0.05）。 生物信息学分析显示 AKT3 是 miR-17-5p 的关键靶基因，AKT3 在肝癌细胞中表达明显低于正常肝细 胞。转染 siRNA-AKT3 的肝癌细胞穿膜细胞数、迁移速度分别为（13±3）个、（4.13±0.15）mm/d， 明显低于对照组的（58±3）个、（7.23±0.25）mm/d（t=-17.88，-53.69；P<0.05）。结论 miR-17-5p 通过靶向作用于 AKT3 抑制肝癌细胞的侵袭和转移能力。
DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2018.02.016 基金项目：广东省科技计划项目（2014A020212159）；广州市科技计划项目（201707010112） 作者单位：510630 广州，中山大学附属第三医院肝移植科 1，肝胆外科 2，甲乳外科 3 通信作者：张剑，Email: zhangjian629@
152Biblioteka 中华肝脏外科手术学电子杂志 2018 年 4 月第 7 卷第 2 期 Chin J Hepat Surg(Electronic Edition), April 2018, Vol. 7, No. 2
基础研究
miR-17-5p通过靶向作用AKT3抑制 肝癌侵袭和迁移
孔伟浩1 李坤1 肖翠翠1 胡竞雄2 黄泽楠3 陈强星1 张剑1
【关键词】 癌，肝细胞； miR-17-5p； AKT3； 肿瘤侵润； 细胞迁移
miR-17-5p inhibits invasion and metastasis of hepatocellular carcinoma through targeting effect on AKT3 Kong Weihao1, Li Kun1, Xiao Cuicui1, Hu Jingxiong2, Huang Zenan3, Chen Qiangxing1, Zhang Jian1. 1Department of Liver Transplantation, 2Department of Hepatobilliary Surgery, 3Department of Thyroid and Breast Surgery, the Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510630, China Corresponding author: Zhang Jian, Email: zhangjian629@
【摘要】 目的 探讨 microRNA（miR）-17-5p 对肝细胞癌（肝癌）细胞侵袭和迁移的影响及机 制。方法 采用 RT-PCR 检测 L-02 人正常肝细胞及 QGY-7703 肝癌细胞中 miR-17-5p 的表达。miR-175p 模拟物和模拟物对照分别转染 QGY-7703 肝癌细胞。Transwell 和划痕试验检测 miR-17-5p 对肝癌细 胞侵袭和迁移能力的影响。生物信息学分析确定 miR-17-5p 的靶基因，Western blot 检测其在肝癌细胞 中表达。对靶基因行 siRNA 沉默后，观察肝癌细胞的侵袭和迁移能力。两种细胞中 microRNA 比较采 用 t 检验。结果 miR-17-5p 在肝癌细胞中表达量为 0.16±0.04，较 L-02 正常肝细胞的 1.01±0.19 明显 下调（t=-9.67，P<0.05）。转染 miR-17-5p 模拟物的肝癌细胞穿膜细胞数、迁移速度分别为（36±4）个、 （5.37±0.15）mm/d，明显低于对照组的（62±7）个、（7.50±0.01）mm/d（t=-15.40，-32.00；P<0.05）。 生物信息学分析显示 AKT3 是 miR-17-5p 的关键靶基因，AKT3 在肝癌细胞中表达明显低于正常肝细 胞。转染 siRNA-AKT3 的肝癌细胞穿膜细胞数、迁移速度分别为（13±3）个、（4.13±0.15）mm/d， 明显低于对照组的（58±3）个、（7.23±0.25）mm/d（t=-17.88，-53.69；P<0.05）。结论 miR-17-5p 通过靶向作用于 AKT3 抑制肝癌细胞的侵袭和转移能力。
DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2018.02.016 基金项目：广东省科技计划项目（2014A020212159）；广州市科技计划项目（201707010112） 作者单位：510630 广州，中山大学附属第三医院肝移植科 1，肝胆外科 2，甲乳外科 3 通信作者：张剑，Email: zhangjian629@