实验五土壤速效磷的测定
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实验五土壤速效磷的测定
一、目的和要求
掌握比色法测定土壤速效磷的方法,了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。
掌握土壤速效磷的浸提,浸提液的处理,标准曲线制作,显色,比色,计算。
二、内容与原理
酸性土壤中的磷主要是以Fe—P,A1—P 的形态存在,利用氟离子在酸性溶液中络合Fe3+和Al3+的能力,可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放,同时由于M的作用,
也能溶解出部分活性较大的Ca—P,然后用钼锑抗比色法进行测定。
三、主要仪器及试剂配制仪器:塑料杯,往复式振荡机,分光光度计或光电比色计试剂:
-1 -1
(1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl 浸提剂
称取1.11克NH4F溶于800毫升水中,加1.0molL-1HCI25毫升,然后稀释至1升,贮于塑料瓶中,其它试剂同前法。
(2)钼锑抗试剂
称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5 克,溶于100毫升水中,制成5%的溶液。
另称取钼酸铵20 克溶于450 毫升水中徐徐加入208.3 毫升浓硫酸,边加边搅动,再将0.5%的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中,最后加至1 升,充分摇匀,贮于棕色瓶中,此为钼锑混合液。
临用前(当天)称取1.5 克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中,混匀。
此即钼锑抗试剂。
(有效期24 小时,如贮于冰箱中,则有效期较长。
)
(3)磷标准溶液
称取0.439克KHPQ(105 C烘2小时)溶于200毫升水中,加入5毫升浓HSQ,转入1 升量瓶中,用水定容,此为100 mgkg-1磷标准液,可较长时间保存。
取此溶液稀释20倍即
为 5 mgkg-1磷标准液,此液不宜久存。
四、操作方法与实验步骤
1、称取通过1 毫米筛孔的风干土样品5克(精确到0.01 克)于150毫升塑料杯中,加入
0.03molL-1NHF—— 0.025 moIL -1 HCI浸提剂50毫升,在20- 30 C条件下振荡30分钟,取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中,同时作试剂空白试验。
2 、吸取滤液10-20毫升于50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M HBQ,再加入二硝基酚指示剂2滴,用稀HCI和Na0H液调节pH至待测液呈微黄,用钼锑抗试剂5毫升显色,并用蒸馏水定容,摇匀,在室温高于15C的条件下放置30分钟,用红色滤光片或660nm波长
的光进行比色,以空白溶液的透光率为100(即光密度为0),读出测定液的光密度,在标准曲线上查出显色液的磷浓度(mgkg-1)。
3、标准曲线制备:
吸取含磷(P)5mgkg-1的标准溶液0、1、2、3、4、5、6 毫升,分别加入50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BQ,再加入二硝基酚指示剂2滴,用稀HCI和Na0H液调节pH 至待测液呈微黄,再加入钼锑抗显色剂5毫升,摇匀,定容即得0、0.1 、0.2、0.3 、0.4、0.5 、0.6 mgkg -1磷标准系列溶液,与待测溶液同时比色,读取吸收值,在方格座标纸上以吸收值为纵座标,磷mgkg-1数为横座标,绘制成标准曲线。
五、作业
根据以下公式计算土壤中速效磷的含量
显色液磷mgkg1数x显色液体积x分取倍数
土壤中速效磷mgkg1= ------------------------------------------------
烘干土重(克)
显色液磷mgkg-1数:从工作曲线查得显色液的磷mgkg-1数
显色液体积:50 毫升
浸提液总体积(50 毫升)
分取倍数=—
吸取浸出液毫升数
六、参考指标
土壤速效磷
v 3 mgkg -1等级
3 —7
7 —20 很低低中等高。