胰蛋白酶的活力的测定1

每分钟A253nm增加值 每分钟A253nm增加值 nm 样品胰蛋白酶BAEE活性单位 样品胰蛋白酶BAEE活性单位＝ BAEE 0.001
胰蛋白酶活力单位的定义规定为： 胰蛋白酶活力单位的定义规定为： 以 BAEE 为 底 物 反 应 液 pH8.0 ， 25℃ ， 反 应 体 积 3.0ml，光径1厘米的条件下，测定∆A253 ，每分钟使 ∆A253 增加0.001，反应液中所加入的酶量为一BAEE单 位。
酶活力与酶反ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ速度 初速度 研究酶反应的动力学以酶促反应的初速度为准
三、酶的活性中心
必需基团 酶分子中与催化作用直接相关、不可缺少的化学基团。 活性中心 酶分子中必需基团相对集中，构成一定空间结构区域， 与催化作用直接相关。
结合部位 （底物） 活性中心 催化部位（底物的键在此处被打断或形成新 的键）
四、酶的命名与分类
习惯命名法
按催化反应类型分类 脱氢酶、脱羧酶、连接酶、聚合酶等。 按组织来源及性质分类 胃蛋白酶/胰蛋白酶，酸性/碱性磷酸酶等。
五、酶的活力测定
酶活力（ activity） 酶活力（enzyme activity），是指酶催化一定化学反 应的能力。 酶活力单位（国际单位） 标准状态下，每分钟使一微克 酶活力单位 分子作用物发生转变的酶量。人们普遍 采用是习惯用法，如 a-淀粉酶，可用每小时催化1克可溶性淀粉所需要的酶量来表 示。
18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 0 5 10 时间 15 20
产物量
系列1
时间
以N-苯甲酰-L—精氨酸乙酯为底物，用紫外吸收法 进行测定的原理是：N－苯甲酰－L—精氨酸乙酯英 文缩写为BAEE）在波长253nm下的紫外吸收远远弱 于苯甲酰L—精氨酸（英文缩写为BA）。在胰蛋白 酶的催化下，随着酯键的水解，苯甲酰L—精氨酸 逐渐增多，反应体系的紫外吸收宜随之相应增加。
操作方法
取2个光程为1厘米的石英比色杯，分别加入25℃预热 过 的 2.8ml 底 物 溶 液 。 向 一 只 比 色 杯 中 加 入 0.2ml 0.001mol/L HCl，作为空白，校正仪器的253nm处光吸收 零点。再在另一比色杯中加入0.2ml待测酶液，立即混匀 并记时，每半分钟读数一次，共读3~4分钟。 绘制酶促反应动力学曲线，从曲线上求出反应起始点 吸光度随时间的变化率（即初速度）∆A253/min。
胰蛋白酶的活力的测定
一、酶的化学本质 是一类生物催化剂。 概念 是一类生物催化剂。 化学本质 绝大多数酶是蛋白质 ， 某些 RNA 或 绝大多数酶是蛋白质， 某些RNA RNA或 DNA也具有催化活性 也具有催化活性。 DNA也具有催化活性。
二、酶的化学组成
单纯蛋白质的酶 蛋白质的酶 全酶
酶蛋白
辅助因子 辅基/辅酶 小分子有机化合物、金属离子，直接参加反应。 辅助因子 辅基 辅酶 小分子有机化合物、金属离子，直接参加反应。直 接对电子、原子或某些化学集团起传递作用。 接对电子、原子或某些化学集团起传递作用。 决定反应特异性（专一性） 酶蛋白 决定反应特异性（专一性）。 一种辅助因子可与多种酶蛋白结合； 一种辅助因子可与多种酶蛋白结合；一种酶蛋白只能与一种辅助因子 结合。 结合。
国际系统命名法 分类 催化的反应性质不同 分为六大类
酶原与酶原激活 无活性的酶前身物称酶原。由无活性酶 原转变为有活性酶的过程称酶原激活。 同工酶 分子结构不同、理化性质也不同，但催化同一化 学反应的一组酶，如乳酸脱氢酶（LDH）。 别位酶 多亚基组成，其中有催化亚基、有调节亚基，小 分子化合物结合调节亚基后分子构象改变，引起催化活性 改变。
以baee为底物反应液ph8025反应体积30ml光径1厘米的条件下测定a253每分钟使253增加0001反应液中所加入的酶量为一baee单初速度研究酶反应的动力学以酶促反应的初速度为准酶活力与酶反应速度时间1012141618101520时间系列1以n苯甲酰l精氨酸乙酯为底物用紫外吸收法进行测定的原理是