PB实验总结讲课稿

PB实验设计及结果
因素编码水平
－1 +1酵母浸粉(g/l) A 8 12 烘培豆粉(g/l) B 8 12酵母粉(g/l) C 5 7.5 MgSO4 (g/l) D 0.1 0.3 ZnSO4 (g/l) E 0.1 0.15
NH4Cl (g/l) CaCl2 (g/l) F 1
G 0.05
1.5
0.1
K2HPO4 (g/l)吐温-80 (ml/l) 2个虚拟项H 1
I 5
3
10
根据单因素试验结果以及前人试验成果，选取酵母浸粉、烘培豆粉、酵母粉、MgSO4、ZnSO4、NH4Cl、CaCl2、K2HPO4、吐温-80，9个因素作为筛选因素，从中筛选影响D-对羟基苯甘氨酸发酵的显著因素。

以发酵液中酶活性作为响应值，9个因素各选高低两个水平，并设置2个虚拟值估量误差。

表3-11 Plackett-Burman试验设计参数和水平
代码因素低水平（-1）高水平（+1）
A 酵母浸粉(g/l)8 12
B 烘培豆粉(g/l)8 12
C 酵母粉(g/l) 5 7.5
D MgSO4 (g/l)0.1 0.3
E ZnSO4 (g/l)0.1 0.15
F NH4Cl (g/l) 1 1.5
G CaCl2 (g/l)0.05 0.1
H K2HPO4 (g/l) 1 3
I 吐温-80 (ml/l) 5 10
J Dummy1 0 0
K Dummy2 0 0
表3-12 Plackett-Burman 试验设计与结果
序号 A B C D E F G H I J K11 酶活
U/mL
1 +1 +1 -1 +1 +1 +1 -1 -1 -1 +1 -1 0.203
2 -1 +1 +1 -1 +1 +1 +1 -1 -1 -1 +1 0.251
3 +1 -1 +1 +1 -1 +1 +1 +1 -1 -1 -1 0.212
4 -1 +1 -1 +1 +1 -1 +1 +1 +1 -1 -1 0.142
5 -1 -1 +1 -1 +1 +1 -1 +1 +1 +1 -1 0.137
6 -1 -1 -1 +1 -1 +1 +1 -1 +1 +1 +1 0.158
7 +1 -1 -1 -1 +1 -1 +1 +1 -1 +1 +1 0.124
8 +1 +1 -1 -1 -1 +1 -1 +1 +1 -1 +1 0.164
9 +1 +1 +1 -1 -1 -1 +1 -1 +1 +1 -1 0.188
10 -1 +1 +1 +1 -1 -1 -1 +1 -1 +1 +1 0.144
11 +1 -1 +1 +1 +1 -1 -1 -1 +1 -1 +1 0.168
12 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 0.134
根据Plackett-Burman试验设计的结果可以看出，所筛选的9个因素对响应值的影响。

如下表：
表3-13 Plackett-Burman试验方差分析结果
Model 0.015 9 1.635 3
10-⨯ 2.86 0.2861 酵母浸粉 7.2084
10-⨯ 1 7.2084
10-⨯ 1.26 0.3784 烘培豆粉 2.107 310-⨯ 1 2.107 310-⨯ 3.68 0.1951 酵母粉 2.552 310-⨯ 1 2.552 310-⨯ 4.46 0.1691 MgSO 4 7.008 510-⨯ 1 7.008 510-⨯ 0.12 0.7598 ZnSO 4 5.208 510-⨯ 1 5.208 510-⨯ 0.091 0.7914 NH 4Cl 4.219 310-⨯ 1 4.219 310-⨯ 7.37 0.1131 CaCl 2 1.302 310-⨯ 1 1.302 310-⨯ 2.27 0.2705 K 2HPO 4 2.670 310-⨯ 1 2.670 310-⨯ 4.66 0.1634 吐温-80 1.027 310-⨯ 1 1.027 310-⨯ 1.79 0.3124 校正总和
1.135 310-⨯
2
5.724410-⨯
根据软件Design-Expert 对数据的分析，显示以上9个因素对D-对羟基苯海因的发酵生产并没有显著影响。

初步分析是由于实验体系偏小，在实验过程中，培养基的配制，诱导剂的添加以及酶活的测定等步骤中的一些小小操作误差会对实验产生很大的影响，进而影响实验结果。