粪便基因组DNA提取试剂盒说明书
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磁珠法粪便基因组DNA提取试剂盒（常规版）MagBeads Faeces DNA Extraction Kit (Regular Version)
【目录号】FDE-5005、FDE-5030
【运输条件】2~25℃；
【保存条件】磁珠悬浮液、裂解液2 2~8℃，蛋白酶K-20℃，其它组分室温；
【试剂盒组成】
【注意事项】
1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心，以免磁珠受到损害，使用前务必充分混匀；
2. 使用前请检查裂解液1/2中是否出现结晶，如有结晶请将置于于37℃环境中重新溶解；
3. 蛋白酶K长期不使用，请置于-20℃保存，融化后4℃保存，并尽快使用；
4. 本操作指南经本公司反复验证，使用前请仔细阅读，并且按照操作指南建议操作。
磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案
【产品简介】
本试剂盒适用于从各种固态或液态粪便样本中分离纯化基因组DNA。
试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和缓冲液体系，特殊技术包埋的磁珠在特定条件下对核酸具有极强的富集能力，当条件改变时，磁珠会释放所吸附的核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。
方法简便、快捷、质量稳定。
提取所得基因组DNA产物，纯度优良，可应用于酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Sputhem杂交、芯片检测和高通量测序等各种下游分子生物学实验。
本试剂盒可手动法在EP管中进行操作，亦可配合核酸提取仪实现自动化操作。
【试剂盒说明】
【自备试剂】
异丙醇、80%乙醇、RNase A溶液(100mg/mL，分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH 值8.0)。
【自备仪器&耗材】
仪器自动版：涡旋混合仪、高速离心机、金属浴或水浴锅、96孔方孔圆底板、英芮诚ETP-300核酸提取仪、磁棒套。
手动版：涡旋混合仪、高速离心机、EP管、EP管用磁力架。
【仪器自动版操作步骤】
以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例，可同步完成32个样本的提取工作。
1． 96孔板加液
参照下表用量向96孔板中分别加入相应试剂。
2．样本裂解
1) 取约200mg固态粪便样本或约200μL液态粪便样本，置于EP管中，依次加入1mL
裂解液1和20μL蛋白酶K，涡旋振荡1min（须将管底粪便充分振荡起来），然后置
于58℃环境中裂解30min，每隔5min颠倒混匀一次；
磁珠法粪便基因组DNA提取试剂盒（常规版）注：如需去除RNA，请额外加入5μL RNase A溶液。
2) 裂解完毕，室温、12,000rpm离心5min，转移400μL上清液至新的EP管内；
3) 向新的EP管中加入250μL裂解液2，上下颠倒5次混合均匀，室温、12,000rpm
离心5min后待用。
3．上机提取
从步骤2裂解完毕样本中吸取450μL上清液至加液完毕的96孔板第2/8列孔位中，将96
孔板置于ETP-300型核酸提取仪中，并插入磁棒套，运行仪器操作软件，调用“粪便
核酸提取”程序并执行。
“粪便核酸提取”程序参数设置如下，如仪器程序参数与说明书不一致，请以说明书为准：
4．核酸转移
程序运行完毕，取下96孔板，将洗脱液转移至干净的EP管或者PCR板中，提取过程完
毕，此时可弃去96孔板。
磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案
【手动版操作步骤】
1．样本裂解
参照【仪器自动版操作步骤】中步骤2进行操作。
2．核酸结合
向裂解完毕的EP管中按照等体积加入异丙醇和75μL磁珠悬浮液，颠倒混匀后高速
涡旋振荡10min，然后静置2min。
3．磁性分离
将EP管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全，如果EP管内盖有液体，可保持EP
管在磁力架上，整体上下颠倒2~3次，使磁珠完全被磁力架吸附。
保持EP管固定于
磁力架上，用移液枪完全弃去上清液，期间避免接触磁珠。
4．清洗
1) 向EP管中加入600μL清洗液，将EP管从磁力架上取下，剧烈摇动使磁珠充分分
散，涡旋震荡1min后，参照步骤3进行磁性分离。
2) 使用600μL80%乙醇，参照上述步骤4(2)操作2次。
5．除醇
将除尽上清液后的EP管置于磁力架上，连同磁力架一起放入45℃真空干燥箱中，干燥
约10min至无明显乙醇味。
注：若无真空干燥箱，亦可在保持通风橱通风或电风扇的状态下静置约10min，具体时间根据气温
变化可能需要适当调整，以磁珠干燥完全为原则。
6．核酸洗脱
取出EP管，加入100μL洗脱液（或去离子水），移液枪吹打使磁珠与洗脱液充分混匀，
将EP管置于65℃环境中加热洗脱5min，然后涡旋洗脱2min。
7．核酸转移
将EP管置于磁力架上静置30s至磁珠吸附完全，用移液枪将洗脱液转移至另一干净EP
管中，操作过程完成，此时可以弃去磁珠。
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版本：V201703.051。