玉屏风颗粒对变应性鼻炎大鼠模型外周血IL-10、IL-17 表达的影响

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玉屏风颗粒对变应性鼻炎大鼠模型外周血IL-10、IL-17 表达
的影响
摘要】目的:通过观察玉屏风颗粒对变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)大鼠模
型外周血IL-10、IL-17含量的变化,探讨玉屏风颗粒治疗AR可能作用机制及疗效,为临床使用提供的理论指导。

方法:60只SD大鼠随机分为空白组和模型组;模
型组采用Semi R[1]的造模方法制备变应性鼻炎(AR)大鼠模型,造模结束后,模
型组随机分为AR组、玉屏风颗粒组,进行为期10天的药物干预,随后采用双抗
夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠外周血白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)含量。

结果:与空白组相比,AR组大鼠模型外周血IL-10、IL-17含量升
高(P<0.01,P<0.05),玉屏风颗粒组无统计学差异;与AR组相比,玉屏风颗粒组大
鼠模型外周血IL-6、IL-10含量降低(P<0.01,P<0.05)。

结论:玉屏风颗粒可降低AR
大鼠模型的外周血致病炎性因子IL-10、IL-17的水平。

【关键词】玉屏风颗粒;变应性鼻炎大鼠;白介素-10;白介素-17【中图分
类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-7165(2015)02-0126-02 AR 是具有特异性的个体接触变应原后,IgE 介导的肥大细胞介质释放,从而
有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜炎症反应,与多基因相关,受环
境因素影响的鼻慢性疾病,严重的伤害着人类的健康和生活质量。

本研究通过观
察玉屏风颗粒对AR大鼠模型外周血IL-10、IL-17含量的变化,探讨玉屏风颗粒治
疗AR 可能作用机制及疗效,为临床使用提供的理论指导。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物清洁级SD 健康大鼠60 只,雌雄各半,
雌鼠体重180±20g,雄鼠体重,200±20g,购于中国人民解放军军事医学科学院实
验动物中心,许可证号:SCXK-(军)2012-0004。

分笼饲养于山西省人民医院动
物实验室,湿度40%-70%,室温(20±2)℃,普通饲料喂养,12 小时交替采光,自
由饮水进食。

1.1.2 药物玉屏风颗粒(广东环球制药有限公司,批号:国药准字Z10930036)1.1.3 实验试剂卵清蛋白(Ovalbumin,OVA,美国Sigma 公司);氢氧化铝(天津润泰生物科技有限公司提供,批号:F201310-28);白介素-10 试剂盒(批号为20140609),白介素-17试剂盒(批号为20140611),购于美国BD公司。

1.1.4 实验仪器AT-858 型自动酶标分析仪,上海安泰分析仪器有限公司;
KDC-2046低速冷冻离心机,科大创新股份有限公司中佳分公司。

1.2 方法1.
2.1 AR大鼠模型的制作大鼠适应性普通饲料喂养一周,在活动、进食、粪便均无异常后,将60只大鼠随机分为:正常组20 只(A 组),模型组40 只。

除正常组外,每只大鼠以卵清蛋白0.3mg作为抗原,氢氧化铝粉末30mg 作
为佐剂,加生理盐水1ml制成混悬液,腹腔内注射混悬液,每2 天1 次,共7 次;基础致敏完成后第二天,以5%的卵清蛋白溶液各20μl 滴于双侧前鼻孔,每日1次,共7次;维持致敏状态直至实验结束。

正常组以生理盐水代替卵清蛋白,其
余方法和步骤相同。

1.2.2 给药方法造模结束后将模型组随机分为AR组、玉屏风颗粒组,每组各
20只。

造模成功后第2天开始,玉屏风颗粒组给予玉屏风颗粒溶液灌胃,剂量
1g·kg-1·d-1。

每日1次,连续10天。

药物剂量按人鼠体表面积折算等效比率剂量
表[2]所给公式折算而定。

正常组及AR 组以生理盐水代替。

1.2.3 成模评价指标表1 大鼠症状计分标准表
每次鼻腔致敏后立即观察30分钟,记录大鼠鼻分泌量、喷嚏次数及搔鼻情况,采用叠加量化计分法计分,症状计分标准见表1,总积分>5分,鼻内分泌物
涂片见大量EOS者为造模成功[3]。

1.3 标本采集先将动物称重,腹腔内注入戊巴比妥钠(33mg/kg)麻醉,将大
鼠仰卧位固定,沿正中线切开皮肤和腹壁肌肉,暴露腹腔,腹主动脉取血6ml,3000r/min离心,取上清液,EP管分装,采用酶联免疫吸附实验测定血清中IL-10
及IL-17的含量。

1.4 数据处理采用SPSSl7.0 软件,计量资料均以X±S 表示,统计分析采用单因
素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 实验结果表1 各实验组大鼠血清中IL-10、IL-17含量变化比较(x±s,n=10)
注:与模型组比较*P<0.05,**P<0.01;与空白组比较:
△P<0.05,△△P<0.01,△△△P<0.001。

结果显示:与空白组相比,AR 组大鼠模型外周血IL-10 、IL-17含量升高
(P<0.01,P<0.05),C组无统计学差异;与AR 组相比,玉屏风颗粒组大鼠模型外周
血IL-10、IL-17含量降低(P<0.01,P<0.05)。

3 讨论实验结果中,与空白组相比,AR 组大鼠模型外周血IL-10、IL-17 含量
升高,提示AR 的发展过程中有炎症反应的发生。

与AR组相比,玉屏风颗粒组大
鼠模型外周血IL-10、IL-17 含量降低,指出玉屏风颗粒能降低大鼠模型外周血IL-10、IL-17 的水平,起到一定的抗炎效果。

AR属于中医鼻鼽的范畴。

首见于《素问·金匮真言论》[4],认为春季易发鼽衄,
春季由花粉传播而发病的特点。

其发病多由禀质特异, 邪犯鼻窍所致。

玉屏风颗
粒[5]由黄芪、白术、防风三味药组成,出自元·朱丹溪的《丹溪心法》,是益气固本的经典方,其所治病证“肺气虚证”就是AR的临床常见证型之一,也是临床各
型AR患者长期反复发作后形成的易感体质—肺气亏虚体质[6]。

就方中单味药药
理而言,张池美[7]研究发现黄芪含有多种微量元素,有利于炎症的控制,有学者[8]研究发现白术内酯减少IL-4、IL-6、IL-10、IL-17 的分泌和下调COX-2mRNA的表达,从而抑制炎症反应。

白术挥发油可提高巨噬细胞的活性,增强机体非特异性
免疫功能[9],防风水煎液有较好的抗I型变态反应作用[10]。

综上所述,玉屏风颗粒可以显著降低AR 大鼠模型的外周血IL-10、IL-17水平,减轻大鼠炎症反应,提高大鼠的免疫力,为今后临床的进一步研究和使用提供了
理论依据。

参考文献[1] Semi R,Wood LJ,Watson R,et al.Allergen induced increases in IL-5 receptoralpha-subunit expression on bone marrow-derived CD34+cellsfrom asthmatic subjects A novel marker of progenitor cell commitmenttowards eosinophilic differentiation. [J]Cline Invest,1997,100 (10):2466-2475.[2] 陈奇,王建华.中药药理研
究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2006:1168.[3] Szabo SJ. Kim ST, Costa CL, etal. A novel transcription factor, T-bet,directs Th1 lineage commitment [J].Cell, 2000,
100:655-696.[4] 程士德.素问注释汇粹(上册).北京:人民卫生出版社,1984.54[5] 国家
药典委员会.中华人民共和国药典:2010 年版一部[S].北京:中国医药科技出版
社,2010:616.[6] 张仲林.从“肺开窍于鼻”理论探讨玉屏风散对变应性鼻炎的治疗[J].
江苏中医药,2009,41(10):11-12.[7] 张池美.黄芪注射液治疗慢性阻塞性肺疾病急性
加重期的疗效观察[J].云南中医中药杂志,2014,35(10):54[8] 陈冰冰.白术内酯Ⅰ、Ⅱ
对TNF-α 所致炎症因子的影响[A].世界中医药学会联合会消化病专业委员会第三届国际学术大会暨广西中西医结合学会消化病年会论文集,2012:1-6[9] 关晓辉,曲娴,
杨志萍,等.白术挥发油对小鼠免疫功能的影响.北华大学学报(自然科学
版),2001,2(2):122.[10] 陈子君,李庆生,李云森,等.防风与刺蒺藜的药理实验研究.中成药,2003,25(9):737.山西中医学院2015 届硕士学位论文。

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