实验六直接胆红素和总胆红素的测定
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山东医学高等专科学校《生物化学》实验教案
教研室 生物化学 课程 内容 生物化学检验 实验六 专业 08 检验 指导教师 徐燕 学时 3
教材 生物化学检验实验
血清直胆和总胆的测定
教 学 要 求
教 学 目 的 掌握重氮法测定直胆和总胆的原理和方法 和 要 求 重点 重氮法测定直胆和总胆的原理和方法 难点 教学 媒体 复习 旧课 学生动手操作为主，课堂演示为辅 测定直胆和总胆的临床意义 （一）原理 葡萄糖氧化酶 直接胆红素 + 无水对氨基苯磺酸 亚硝酸钠 间接胆红素 + 无水对氨基苯磺酸 二甲基亚砜 （二）仪器 分光光度计、吸量管、移液器、水浴锅 （三）操作步骤 取一次性试管做好标记，按下表操作： 蓝色偶氮胆红素 蓝色偶氮胆红素
山东医学高等专科学校生物化学实验教案教研室生物化学课程生物化学检验专业08检验指导教师教材生物化学检验实验内容实验六血清直胆和总胆的测定学时掌握重氮法测定直胆和总胆的原理和方法重点难点重氮法测定直胆和总胆的原理和方法教学媒体学生动手操作为主课堂演示为辅复习一原理直接胆红素无水对氨基苯磺酸蓝色偶氮胆红素间接胆红素无水对氨基苯磺酸蓝色偶氮胆红素二仪器分光光度计吸量管移液器水浴锅三操作步骤取一次性试管做好标记按下表操作
教 学 过 程
讲 授 新 课
加入物 工作试剂（ml） 标准液（ul1.5 100
样品管 1.5
100
混匀，37 水浴 6min，用试剂空白调零，分光光度计 578nm 处，读取标准 管和样品管的吸光度。 （四）结果与分析
CT
AT CS AS
其中 CS=20umol/L
（五）注意事项 1.胆红素特别是直接胆红素在血清中含量甚微，操作中稍许误差便使得结 果有较大出入，所以此实验要求取液准确，操作规范。 2.胆红素大于 342umol/L 的标本可减少标本用量，或用 0.154mmol/L NaCl 溶液稀释血清后重测。 讲 授 新 课 3.胆红素对光敏感，标准液及标本均应尽量避光保存。
课堂 直接胆红素和间接胆红素的命名原则 提问 课堂 直接胆红素和总胆红素的测定原理 小节 布置 用理论知识分析实验结果；了解黄疸的分类 作业 参考 钱士匀主编．临床生物化学和生物化学检验实验指导．第 2 版，北京：人民卫生
书目
出版社，2003
教研室 生物化学 课程 内容 生物化学检验 实验六 专业 08 检验 指导教师 徐燕 学时 3
教材 生物化学检验实验
血清直胆和总胆的测定
教 学 要 求
教 学 目 的 掌握重氮法测定直胆和总胆的原理和方法 和 要 求 重点 重氮法测定直胆和总胆的原理和方法 难点 教学 媒体 复习 旧课 学生动手操作为主，课堂演示为辅 测定直胆和总胆的临床意义 （一）原理 葡萄糖氧化酶 直接胆红素 + 无水对氨基苯磺酸 亚硝酸钠 间接胆红素 + 无水对氨基苯磺酸 二甲基亚砜 （二）仪器 分光光度计、吸量管、移液器、水浴锅 （三）操作步骤 取一次性试管做好标记，按下表操作： 蓝色偶氮胆红素 蓝色偶氮胆红素
山东医学高等专科学校生物化学实验教案教研室生物化学课程生物化学检验专业08检验指导教师教材生物化学检验实验内容实验六血清直胆和总胆的测定学时掌握重氮法测定直胆和总胆的原理和方法重点难点重氮法测定直胆和总胆的原理和方法教学媒体学生动手操作为主课堂演示为辅复习一原理直接胆红素无水对氨基苯磺酸蓝色偶氮胆红素间接胆红素无水对氨基苯磺酸蓝色偶氮胆红素二仪器分光光度计吸量管移液器水浴锅三操作步骤取一次性试管做好标记按下表操作
教 学 过 程
讲 授 新 课
加入物 工作试剂（ml） 标准液（ul1.5 100
样品管 1.5
100
混匀，37 水浴 6min，用试剂空白调零，分光光度计 578nm 处，读取标准 管和样品管的吸光度。 （四）结果与分析
CT
AT CS AS
其中 CS=20umol/L
（五）注意事项 1.胆红素特别是直接胆红素在血清中含量甚微，操作中稍许误差便使得结 果有较大出入，所以此实验要求取液准确，操作规范。 2.胆红素大于 342umol/L 的标本可减少标本用量，或用 0.154mmol/L NaCl 溶液稀释血清后重测。 讲 授 新 课 3.胆红素对光敏感，标准液及标本均应尽量避光保存。
课堂 直接胆红素和间接胆红素的命名原则 提问 课堂 直接胆红素和总胆红素的测定原理 小节 布置 用理论知识分析实验结果；了解黄疸的分类 作业 参考 钱士匀主编．临床生物化学和生物化学检验实验指导．第 2 版，北京：人民卫生
书目
出版社，2003