注射用氨苄西林钠舒巴坦钠中残留溶剂测定方法研究

注射用氨苄西林钠舒巴坦钠中残留溶剂测定方法研究
【摘要】目的:建立一种气相色谱法[1]同时测定注射用氨苄西林钠舒巴坦钠中有机溶剂乙醇、丙酮、异丙醇、二氯甲烷、乙酸丁酯残留量的方法。

方法:采用标准加入法顶空自动进样，在中极性弹性毛细管柱上进行分离，效果良好。

结论:方法重现性好，定量准确，便于操作。

结果:平均回收率,乙醇99.2%-103.2%；丙酮100.8%-105.7%；异丙醇96.2%-104.2%；二氯甲烷103.8%-105.0%；乙酸丁酯102.9%-104.3%。

变异系数：乙醇1.28%；丙酮3.21%；异丙醇2.65%；二氯甲烷3.12%；乙酸丁酯3.47%。

【关键词】顶空气相色谱法；标准加入法；注射用氨苄西林钠舒巴坦钠；残留溶剂
0.前言
氨苄西林钠为青霉素类抗生素，舒巴坦钠为半合成?覻内酰胺酶抑制药。

在生产氨苄西林钠和舒巴坦钠过程中使用了上述溶剂，是药品中对人体有害的杂质，为了控制残留溶剂[2]的含量通常采用气相色谱法分析。

而顶空气相色谱法因其灵敏度高、重现性好、定量准确，对进样口污染小，在分析中更具有优势。

作者采用顶空分析上述残留溶剂，并比较了外标法和标准加入法。

作者建立顶空气相色谱标准加入法[2]检测上述残留溶剂，优于外标法，能更准确控制药品中残留溶剂的含量。

实验部分:
1.实验仪器及条件
1.1仪器及试剂
Agilent7890 气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（FID），GH—500B型氢气发生器（北京中兴汇利科技发展有限公司），GA500A 型低噪音空气泵（北京中兴汇利科技发展有限公司），G1888A型顶空自动进样器。

乙醇、丙酮、异丙醇、二氯甲烷、乙酸丁酯均为色谱标准物，色谱柱：DB-624(30m×0.32mm×1.8μm)毛细管柱。

1.2 气相色谱条件
柱温度40℃，维持6.5分钟,再以30℃/min升到180℃，维持3分钟；柱流速：1.0ml/min；检测器（FID）温度为250℃；进样口温度为200℃；顶空平衡温度为80℃，平衡时间为30min。

2.样品的测定
取本品约0.2g，置10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品贮备液。

精密量取1ml，置顶空瓶中，精密加水1ml，摇匀，密封，作为供试品溶液；另精密称取乙醇、丙酮、异丙醇、乙酸丁酯各约0.1g、二氯甲烷约0.012g，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置顶空瓶中，精密加供试品贮备液1ml，摇匀，密封，作为对照品溶液。

取供试品溶液与对照品溶液顶空进样，记录色谱图（如下图），按标准加入法以峰面积计算各溶剂的含量。

图1 为对照品色谱图
其中6.038min为乙醇，6.895min为丙酮，7.206min为异丙醇，7.652min为二氯甲烷，11.662min为乙酸丁酯
图2为供试品色谱图
其中6.050min为乙醇，6.910min为丙酮，7.216min为异丙醇，11.663min为乙酸丁酯
3.结果与讨论
3.1色谱条件的选择
3.1.1毛细管柱的选择
作者分别在极性毛细管柱DB-WAX、中极性毛细管柱DB-624及非极性毛细管柱DB-1上进行了试验，在非极性毛细管柱DB-1上，丙酮和异丙醇的分离度不理想，在极性毛细管柱PEG-20M上，异丙醇和二氯甲烷的分离度不理想，而在中极性毛细管柱分离上述组分，丙酮和异丙醇难分离组分的分离度为4.1，大于1.5，分离度符合规定。

且分析时间短。

最终采用DB-624色谱柱进行分析。

3.1.2顶空条件选择
作者对顶空平衡温度和平衡时间[3]作了试验，平衡温度在80℃、平衡时间30分钟效果较好。

当平衡时间短时，气液两相达不到平衡。

当平衡时间大于60分钟时，由于顶空瓶的气密性变差，色谱峰的峰面积会降低。

3.2线形范围的测定
精密称取乙醇、丙酮、异丙醇、乙酸丁酯各约0.1g、二氯甲烷约0.012g，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，再分别取2.0 ml，4.0 ml，5.0 ml，6.0 ml，8.0 ml，10.0 ml，12.0 ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，作为对照品贮备液，在分别量取各个浓度的对照品贮备液1ml置顶空瓶中，加水1ml，密封，按照上述色谱条件测定，以各组分的峰面积对浓度作线性回归并计算相关系数。

如
下表所示：
表1 线性回归测量结果
3.3精密度及回收率试验
在已知残留溶剂浓度的样品中，分别加入高、中、低浓度的上述溶剂进行6次重复测定，其中乙醇回收率为99.2%-103.2% ；丙酮回收率为100.8%-105.7% ；异丙醇回收率为96.2%-104.2% ；二氯甲烷回收率为103.8%-105.0%；乙酸丁酯回收率为102.9%-104.3%。

4.结论
经实验表明乙醇、丙酮、异丙醇、二氯甲烷及乙酸丁酯五种组分在中极性毛细管柱[4]DB-624上分离良好。

采用顶空进样精密度高，对进样口污染小且便于实现自动化。

本方法采用标准加入法克服了基体效应的影响，重现性好，定量准确可靠，非常符合药品中残留溶剂的测定。

【参考文献】
［１］气相色谱分析．分析化学手册．第五分册．
［２］中国华人民共和国药典．2010版二部．
［３］陈海群,周亚红,朱俊武,杨绪杰.利用气相色谱顶空装置测定红磷储存过程中生成的磷化氢.色谱.2004，22(4):442.
［４］王玉杰,常淼,马春玲,李运玲.气相色谱法测定亚油酸维生素E胶丸中维生素E的含量.色谱,2004，22(4):461.。