茶多酚提取精制工艺及含量测定-溶剂萃取法

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综合实训绿茶茶多酚的提取精制工艺及含量测定
[实验目的]
了解茶多酚性质、用途及植物天然产物常规提取和精制方法;掌握茶多酚提取和精制的原理和方法;讨论方法的影响因素和改进条件;
主要试剂
乙醇溶液、乙酸乙酯三氯甲烷、无水硫酸钠、茶叶
硫酸亚铁(FeSO4 ·7H2O)、酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)、磷酸氢钠
(Na2HPO4 ·12H2O) 、磷酸二氢钾(KH2PO4)
材料与设备
烧杯、滤纸、量筒、玻璃棒、水浴锅、冰箱、真空旋转蒸发器、抽滤仪器、蒸馏萃取仪、干燥箱、恒温水浴锅、紫外-可见分光光度计
Ⅰ工艺过程及操作方法
[实验原理]
茶多酚(Tea polyphones,简称TP)是从天然植物茶叶中分离提纯的多酚类化合物总称。

其抗氧化活性高于一般非酚性或单酚羟基类抗氧化剂。

茶多酚由表儿茶素、表没食子儿茶素及它们的没食子酸酯类等组成,在干茶叶中的含量一般在20%一30%左右。

研究表明,茶多酚具有许多生理活性和药理作用,如抗氧化、抗衰老、清除自由基、降血脂血糖、降血压、抗辐射、抗癌防癌等。

食品中的很多添加剂如柠檬酸、苹果酸等,对其抗氧活性存在协同效应,因而茶多酚作为食品抗化等领域也具有广阔的应用前景;
溶剂提取法来制备茶多酚,利用茶多酚及其杂质在不同溶剂中溶解度的不同,分别用溶剂去杂或抽提而得到茶多酚粗制品。

[实验步骤]
1.浸提:称取一定量过10g的茶叶,加入其重量15-25倍70-90℃的热水,搅
拌下恒温浸提20-60min,过滤得到茶叶浸提液。

取样分析浸提液中茶多
酚的含量,计算浸提液中茶多酚总量、茶多酚浸提率。

2.过滤:
3.萃取:
4.干燥:
5.蒸馏:
Ⅱ茶多酚含量的分析检测方法
[实验原理]
在一定pH下,酒石酸铁能与多酚类物质反应形成蓝紫色络合物,该络合物在540nm波长下具有最大的吸光度。

在适当的浓度范围内,茶多酚含量与络合物的吸光度成正比,因此可用分光光度法对茶多酚定量分析。

[实验材料]
1.酒石酸亚铁溶液:称取1 g(准确至0.0001g)硫酸亚铁和5 g(准确至
0.0001g)酒石酸钾钠,用水溶解并定容至1 L(次溶液放置过夜后使
用,可稳定1周);
2.pH=7.5的磷酸盐缓冲液:a液(1/15 mol/L的硫酸氢二钠溶液):称取
磷酸氢二钠23.877 g,加水溶解并稀释至1 L;b液(1/15 mol/L的磷酸
二氢钾溶液):称取经110 ℃烘干2h的磷酸氢二钾9.087 g,加水溶解
并稀释至1 L;取a液85 mL和b液15 mL混匀,即得pH=7.5的磷酸盐缓
冲液;
3.供试液的制备与测定:准确吸取待测溶液1 mL,稀释1-25倍,再从稀
释液中准确吸取1 mL,注入25 mL容量瓶中,加水4 mL和酒石酸亚铁
溶液5 mL,充分混合,再加pH=7.5的磷酸盐缓冲液至刻度,用1 cm
比色皿,在波长540 nm处,以试剂空白溶液作对照,测定吸光度;[实验结果]
待测溶液中茶多酚含量用下式计算:
茶多酚(g/mL)=1.957AX/500
式中:1.957-用1 cm比色皿,当吸光度等于0.50时,每毫升溶液中茶多酚含量相当于1.957 mg;
A-试样的吸光度;
X-待测溶液的稀释倍数;。

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