腹腔注射吗啡对神经病理痛大鼠镇痛效应的观察及其对

腹腔注射吗啡对神经病理痛大鼠镇痛效应的观察及其对
DRG P2X3受体表达的影响
中南大学湘雅医院410008
彭静鄢建勤
目的：本研究拟采用免疫组织化学方法，观察慢性神经病理性疼痛大鼠背根神经节（DRG）P2X3受体的表达，以及腹腔注射不同剂量的吗啡对慢性神经病理性疼痛大鼠镇痛效应的观察及其对DRG P2X3受体表达的影响。

方法：30只雄性SD大鼠，体重180～220g，随机分为假手术组（S组，n＝6）和手术组(n=24).测定大鼠右后足热痛敏阈基础值，然后腹腔注射10％水合氯醛300～350mg·kg-1麻醉后，手术组构建大鼠右侧坐骨神经慢性结扎损伤（chronic constriction injury，CCI）模型，假手术组只暴露坐骨神经但不结扎。

手术后第3天测定热痛敏阈值，选取热痛敏阈值下降，热痛敏稳定形成的24只大鼠又随机分为4个亚组：腹腔注射生理盐水组（NS组，n＝6），腹腔注射吗啡2.5mg ／kg组（M1组，n＝6），吗啡5.0 mg／kg组（M2组，n＝6）以及吗啡5.0mg／kg＋纳络酮1.0mg／kg组（M+N组，n＝6）。

第4天开始给药，M组每天上午10时分别予以腹腔注射吗啡2.5mg／kg、5.0 mg／kg（用生理盐水稀释至2.0ml），M+N组予以腹腔注射纳络酮
1.0mg／kg 10min后腹腔注射吗啡5.0mg／kg，NS组则腹腔注射等体积生理盐水至术后14天。

分别于术后7天、14天后测定各组大鼠右后足热痛敏阈值，术后14天测试完毕后深麻醉下将各组大鼠固定并取手术侧L4 DRG，用免疫组化法观察各组大鼠侧L4 DRG P2X3受体的表达。

结果：（1）术后三天各组均出现了不同程度的热痛敏阈值的下降，明显低于术前，差异有显著性意义（P＜0.05），提示坐骨神经结扎后大鼠患足出现了慢性神经性疼痛的特征之一－自发性疼痛；除S组外其余各组大鼠术后足部形态发生改变，表现为患足的足趾并拢，足呈轻度外翻，在安静状况下常出现突然舔拭术侧后足，患足常取保护姿势悬于空中，未观察到自噬现象。

（2）手术后7天，NS组和M组及M+N组大鼠右足热痛敏阈值明显低于假手术组（P＜0.05），假手术组大鼠右足热痛敏阈值较术前比较差异无显著性意义（P＞0.05）。

连续腹腔注射吗啡可剂量依赖性地减轻慢性神经性疼痛程度，表现为M 组大鼠右足热痛敏阈值明显高于NS组和M+N组（P＜0.05）；而M2组大鼠右足热痛敏阈值比M1组大鼠明显延长（P＜0.05）；（3）手术后14天，NS组和M组及M+N组大鼠右足热痛敏阈值继续下降，与假手术组比较均明显降低（P＜0.05），假手术组大鼠右足热痛敏阈值与术前相比差异无显著性意义（P＞0.05）。

M组大鼠右足热痛敏阈值
较NS组明显延长（P＜0.05），M组组间比较M2组较M1组延长（P ＜0.05）。

（4）NS组和M组大鼠背根神经节P2X3受体免疫反应阳性细胞数量较假手术组明显增加，而M组大鼠背根神经节P2X3受体免疫反应阳性细胞数量与NS组比较则明显降低，差异具有显著性意义（P＜0.05）；M组组间比较M2组的的阳性细胞数明显少于M1组（P ＜0.05）；NS组和M+N组之间无统计学差异；（5）NS组和M组大鼠背根神经节P2X3受体免疫反应平均积分光密度明显高于假手术组，而M组大鼠背根神经节P2X3受体免疫反应平均积分光密度（MOD）与NS组比较则明显降低，差异具有显著性意义（P＜0.05），M2组的MOD值比较M1组明显下降，差异有统计学差异（P＜0.05）。

结论：（1）慢性神经性疼痛大鼠背根神经节P2X3受体表达增加，表明P2X3受体在慢性神经性疼痛机制中可能发挥重要作用；（2）腹腔注射不同剂量吗啡可剂量依赖性地减轻慢性神经性疼痛大鼠的疼痛反应，同时抑制DRG P2X3受体表达的增加，表明吗啡减轻慢性神经病理性疼痛至少有部分是通过减少DRG P2X3受体表达而实现的。

关键词: 吗啡，神经病理性疼痛，背根神经节，P2X3。