高效液相色谱法测定海洋涂料中敌草隆和吡啶硫酮铜

高效液相色谱法测定海洋涂料中敌草隆和吡啶硫酮铜
薛秋红;陶琳;叶曦雯;王惠;许宏民
【摘要】提出了高效液相色谱法同时测定海洋涂料中的敌草隆和吡啶硫酮铜含量的方法。

海洋涂料样品（0．0200 g）用乙酸乙酯（10 mL）超声提取10 min。

分取1．0 mL 上清液，加入1 mL 乙腈混匀后进行色谱分离。

以 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱为固定相，用乙腈和水以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱，用二极管阵列检测器测定。

敌草隆和吡啶硫酮铜的线性范围分别为0．15～800，0．20～200 mg ·L-1，检出限（3S/N）为8．0
mg ·kg-1（敌草隆）和12．0 mg·kg-1（吡啶硫酮铜）。

以空白样品为基体在3个浓度水平上进行加标回收试验，所得回收率在90．0％～95．0％之间，测定值的相对标准偏差（n＝6）在1．7％～3．4％之间。

%A method of HPLC for the simultaneous determination of diuron and copper pyrithione in marine paint was proposed.The sample (0.020 0 g)was extracted ultrasonically for 10 min with ethyl acetate (10 mL). An aliquot of 1 mL of the supernatant was taken and after mixing with 1 mL of acetonitrile was separated on Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 chromatographic column with mixtures of acetonitile and water with different mixing ratios as mobile phase in the gradient elution.DAD was used in detection.Linearity ranges of diuron and copper pyrithione were found between 0.15-800,0.20-200 mg·L-1 respectively.Detection limits (3S/N)found were 8.0 mg·kg-1 for diuron and 12.0 mg·kg-1 for copper pyrithione.On the base of blank sample,test for recovery was made by standard addition method at 3 concentration
levels,values of recovery found were in the range of 90.0%-95.0%,with RSD′s (n=6)in the range of 1.7%-3.4%.
【期刊名称】《理化检验-化学分册》
【年(卷),期】2014(000)005
【总页数】3页(P558-560)
【关键词】高效液相色谱法;敌草隆;吡啶硫酮铜;海洋涂料
【作者】薛秋红;陶琳;叶曦雯;王惠;许宏民
【作者单位】山东出入境检验检疫局，青岛 266000;淄博出入境检验检疫局，淄
博 255031;山东出入境检验检疫局，青岛 266000;中国海洋大学化学化工学院，
青岛 266003;淄博出入境检验检疫局，淄博 255031
【正文语种】中文
【中图分类】O652.63
海洋涂料中使用防污剂会对海洋环境造成不好的影响，这一问题已越来越引起人们的关注，这些防污剂会造成生物变异，危及海洋食物链的稳定，破坏海洋生态平衡，进而对人类健康造成威胁［1］。

敌草隆和吡啶硫酮铜（CuPT）是海洋涂料中常用的防污剂。

敌草隆是一种取代脲
类除草剂，可有效防除禾本科杂草、阔叶杂草和藻类，其化学性质稳定，残留期长，可在环境中持久存在［2］。

敌草隆还具有生物蓄积作用，对哺乳动物、鸟类及水生无脊椎动物有毒性作用，且敌草隆及其代谢产物有一定的致癌性，现已在欧盟和英国被禁用［3］。

CuPT 是单纯作为海洋防污剂来开发的，因此在防污涂料中通
常与氧化铜配合使用，它对软污损海生物具有良好的防污活性，对鱼类的急性毒性较强［3］。

目前，敌草隆的测定主要有液相色谱法［4－6］、气相色谱法［7］和叶绿素荧光光谱法［2］等；CuPT 的测定常用液相色谱法［8－9］，主要用于食品、生物及环境等方面的研究。

迄今为止，应用高效液相色谱法同时测定海洋涂料中的敌草隆和CuPT，在国外研究得甚少，国内尚未见报道。

本工作通过对敌草隆和CuPT 在液相色谱柱上分离条件及紫外吸收光谱的研究，将样品前处理条件进行优化，建立了海洋涂料中敌草隆和CuPT 的高效液相色谱测定方法。

1 试验部分
1.1 仪器与试剂
Agilent 1100型高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器（DAD）；AE260 型电子分析天平；MS3 basic型涡旋混合器；KQ－100E 型超声波清洗器；Milli－Q Biocel A10型超纯水制备仪。

敌草隆和羟基吡啶硫酮铜混合标准溶液：100mg·L－1，分别称取0.010 0g CuPT 和敌草隆标准品于100mL棕色容量瓶中，用乙酸乙酯－乙腈（1＋1）混合溶液溶解，并稀释至刻度，避光保存。

敌草隆（纯度不小于98.0%）；羟基吡啶硫酮铜（纯度不小于97.0%）；乙酸乙酯、乙腈、甲醇、二氯甲烷为色谱纯，试验用水为超纯水。

1.2 液相色谱条件
Agilent ZORBAX Eclipse XDB－C18色谱柱（4.6mm×250mm，5.0μm），柱温35℃；流动相A为乙腈，B 为水，流量为1.0 mL·min－1，进样量10μL；检测波长为254nm。

梯度洗脱程序：0～8min，A 为52%，保持2 min；10～20 min，A 由52%升至85%，保持5min；25～30min，A 由85%降至52%。

1.3 试验方法
称取涂料试样0.020 0g置于10mL具塞比色管内，加入乙酸乙酯10mL，经涡旋混合器混匀后，超声提取10min。

移取1.00mL 上清液至进样小瓶中，加入1mL 乙腈，用0.22μm 有机滤膜过滤，按仪器工作条件进行测定。

标准溶液测定前加
入与样品溶液相同量的乙腈。

2 结果与讨论
2.1 色谱行为
按试验方法测定敌草隆和CuPT 的混合标准溶液，其色谱图见图1。

图1 敌草隆和CuPT 的混合标准溶液色谱图Fig.1 Chromatogram of mixed standard solution of diuron and CuPT
2.2 检测波长的选择
试验分别对两种防污剂标准品进行全波长扫描，其紫外吸收光谱见图2。

图2 紫外吸收光谱Fig.2 UV absorption spectra
敌草隆的最大吸收波长为210nm 和254nm，CuPT 的最大吸收波长为242 nm
和320 nm。

254nm和242nm 均可作为可选波长，根据实际色谱图发现，
242nm 基线较不平稳，且溶剂峰乙酸乙酯在240nm 附近吸收峰较大，综合考虑，试验选择检测波长为254nm。

2.3 标准曲线及检出限
分别配制CuPT 和敌草隆混合标准溶液系列，按试验方法进行测定，以质量浓度
为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

CuPT 和敌草隆的线性参数见表1。

以
3 倍信噪比计算方法的检出限（3S/N），以10倍信噪比计算方法的测定下限（10S/N），结果见表1。

表1 线性参数、检出限和测定下限Tab.1 Linearity parameters，detection limits and lower limits of determination
2.4 精密度和回收试验
向常用基质的空白涂料中添加低、中、高3个浓度水平的CuPT 和敌草隆混合标
准溶液，按试验方法处理后进行测定，平行测定6次，计算CuPT 和敌草隆的加
标回收率和相对标准偏差（RSD），结果见表2。

表2 精密度及回收试验结果（n＝6）Tab.2 Results of tests for precision and recovery
由表2 可知：样品的加标回收率在90.0%～95.0%之间，RSD 小于4.0%。

图3 阳性实样的色谱图Fig.3 Chromatogram of a positive substantial sample 2.5 样品分析
按试验方法对市售的海洋防污涂料进行测定，其中两种涂料样品中检出含有CuPT，测定值分别为2.14%，3.45%，敌草隆均未检出。

其中一个阳性样品的色谱图见
图3。

本工作采用高效液相色谱法测定敌草隆和吡啶硫酮铜2种防污剂，能有效地将待
测成分进行分离，重现性高，分离速度快，适合海洋涂料中敌草隆和吡啶硫酮铜的测定。

参考文献：
［1］王科，肖玲，于雪艳，等.防污剂对海洋环境的影响探讨［J］.海洋与重防腐
涂料与涂装，2010，25（8）：24－30.
［2］王丽，应波，鄂学礼.水中敌草隆的叶绿素荧光检测法［J］.环境和健康杂志，2008，25（6）：539－541.
［3］狄兰兰，蔺存国，郑继勇，等.HPLC在海洋涂料防污检测中的应用［J］.涂
料工业，2008，38（12）：56－59.
［4］平立凤，李振，赵华，等.超高效液相色谱法测定甘蔗和土壤中敌草隆残留［J］.分析科学学报，2011，27（2）：235－237.
［5］陈樱玉.敌草隆的液相色谱分析［J］.化工技术与开发，2006，35（6）：19
－20.
［6］郭永泽，张玉婷，刘磊，等.棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的测定方法［J］.天津农业科学，2010，16（3）：69－71.
［7］PENA F，CARDENAS S，GALLEGO M，et al.Analysis of phenylurea herbicides from plants by GC/MS［J］.Talanta，2002，56（4）：727－734. ［8］杨艳伟，朱英，苏晓庆.高效液相色谱法测定去屑香波中水杨酸、吡啶硫酮锌吡啶酮乙醇胺、甘宝素和酮康唑5种去屑剂［J］.卫生研究，2005，34（5）：626－628.
［9］蔡智鸣，曾盈，王枫华，等.高效液相色谱法测定血清中番茄红素［J］.理化检验－化学分册，2008，44（4）：322－325.。