牛肉膏蛋白胨培养基的制备

牛肉膏蛋白胨培养基的制备

一、目的要求

（1）明确培养基的配制原理。

（2）通过对培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。

二、基本原理

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛和最普通的细菌基础培养基，又称普通培养基。它含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，可供微生物生长繁殖之用。基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCI。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCI提提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量的琼脂作为凝固剂。

由于这种培养基多用于培养细菌，因此要用稀酸或稀碱将其PH调至碱性，以利于细菌的生长繁殖。

牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：

牛肉膏 3.0g

NaCI 5.og

蛋白胨10.0g

水1000ml

pH 7.4～7.6

三、操作器材

（1）溶液与试剂牛肉膏，蛋白胨，NaCI,琼脂，1mol/LNaOH,1mol/LHCI。

（2）仪器及其他用具试管，锥形瓶，烧杯，量筒，玻璃棒培养基分装器，，天平，高压蒸汽灭菌器，PH试纸，棉花，牛皮纸，麻绳，纱布等。

四、操作步骤

1、称量

按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCI放入烧杯中。

2、融化

在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻璃棒搅匀。然后加热使其溶解。各试剂完全溶解后，补充水到所需的总体积。配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。

3、调pH

用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸，用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌，并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之，用1mol/LHCI进行调节。

4、分装和加塞

将配制的培养基分装入试管内，在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。

5、包扎

加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

6、灭菌

将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。

7、搁置斜面

将灭菌的试管培养基冷却至500C左右，将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当，使斜面的长度约为管长 1/3。

8、无菌检查

将灭菌培养基放入370C的培养箱中培养24～28h，以检查灭菌是否彻底。

高氏一号培养基的制备

一、目的要求

1、了解高氏一号培养基的特点、作用。

2、熟练掌握配制