抗体人源化思路

重组抗IL-1R人源化抗体制备思路：

1.制备生产高亲和力的抗IL-1R鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞株；→

2.杂交瘤细胞总RNA提取，用RT-PCR 技术克隆鼠源单抗可变区基因；→

3.IL-1R鼠源单克隆抗体可变区氨基酸序列的分析；→

4.IL-1R鼠源单克隆抗体相应可变区片段（Fv）的模型构建；→

5.人抗体接纳体构架氨基酸序列的分析和选择；→

6.人源化抗体的设计和实际构建；

（设计、构建策略：

①模板替换，使用与鼠对应部分有较大同源性的人FR替换鼠FR；

②表面重塑，对鼠CDR和FR表面残基进行镶饰或重塑，使类似于人抗体CDR

的轮廓或人FR的型式；

③补偿变换，对起关键作用的残基进行改变，以补偿完全的CDR移植；

④定位保留，人源化单抗以人FR保守序列为模板，但保留了鼠源单抗可变

区中参与抗原结合的氨基酸残基，包括CDR和FR中的一些关键残基；）→

7.将构建的抗体重轻链基因电转化到CHO细胞中，制备获得抗IL-1R重组抗体；

8.通过体外和/或体内测定方式证实制备抗体具有高亲和力及高特异性；

9.获得产生抗IL-1R人源化抗体的单克隆细胞株。