分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法

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分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法:(1)磷酸盐缓冲液(PBS)的配制方法:-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。

-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液,然后稀释为需要的浓度。

-例如,1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。

(2) 神经元无血清培养基(Neurobasal Medium)的配制方法:- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。

-根据制造商提供的配方,按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。

-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。

(3) 洗涤缓冲液(Washing Buffer)的配制方法:-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液(PBS)及其他添加剂。

- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。

-根据实验需求,可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。

(4) 乙醇(Ethanol)溶液的配制方法:-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。

- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。

-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。

2.常见缓冲液配制方法:(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris(三羟甲基氨基甲烷)和Tricine(三甘胺酸)等化学品。

- 根据实验要求,在一定PH范围内,按照不同比例混合Tris和Tricine,溶解于适量的蒸馏水中。

(2) 氯化钾缓冲液(KCl Buffer)的配制方法:- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。

-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。

-根据实验要求,调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。

(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓盐酸调pH值至8.8。

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl,10mMEDTA(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1MTri-HClBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500mMEDTA(pH8.0)20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3.将溶液定至1L 后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3.加入去离子水将溶液定容至100mL。

4.高温高压灭菌后,室温保存。

5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。

pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。

以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。

1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。

常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。

可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。

3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。

一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。

4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。

常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。

5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。

常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。

常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。

7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。

实验常用试剂,缓冲液的配制方法

实验常用试剂,缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。

2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

Kan(卡那霉素)50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。

2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。

2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。

2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解,定容至50mL。

3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。

LB培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中Tryptone(胰化蛋白胨)10gYeast Extract(酵母提取物)5gNaCl(氯化钠)10g2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。

3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。

4.加去离子水定容至1L。

5.高温高压灭菌后,4℃保存。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

分子生物学实验常用试剂配制

分子生物学实验常用试剂配制

分子生物学实验常用试剂配制分子生物学实验常用试剂配制(1) 0.01M PBS缓冲液:一袋粉制PBS缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。

0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

(2) 0.01M枸橼酸盐缓冲液:一袋粉制枸橼酸盐缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。

0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠3g,柠檬酸0.4g。

(3)1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl 调至pH8.0,加水至1000ml。

(4) 1‰DEPC水:1mlDEPC加入1000ml新鲜三蒸水中,剧烈震荡20分钟使充分混匀,37o C至少放置2h或过夜,HIRAYAMA HV-50高压灭菌器高温高压30分钟降解DEPC,4℃保存。

(5) 1%琼脂糖凝胶:取琼脂糖0.2g置烧杯中,加入20ml的1×TAE缓冲液,封闭锥形瓶口,放入微波炉内加热,不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液,待琼脂糖全部熔化后取出摇匀,冷却至60℃左右,加入10mg/ml溴化乙锭(EB)1μl,EB的终浓度为0.5μg/ ml,充分混匀。

将温热的凝胶倒入已经放好梳子的凝胶槽中,厚度约为3-5mm,注意不要有气泡,将凝胶放置室温待其自然凝固。

凝固后从胶槽中轻轻取出梳子。

(6)0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。

(7) 50×TAE缓冲液:Tris碱242g,17.4mol/L冰乙酸57.1ml,0.5mol/L EDTA (PH8.0)100ml加蒸馏水至1000ml。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。

配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。

下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方:PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)、PBST(含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液)和TBS(三氯甲烷缓冲盐溶液)。

配制PBS缓冲液:-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。

-调整pH值至7.4,采用10M氢氧化钠(NaOH)或者盐酸(HCl)。

-用去离子水稀释至1xPBS。

配制PBST缓冲液:-配制1xPBS。

- 加入0.1%(v/v)Tween-20。

-混合均匀。

配制TBS缓冲液:-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。

-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。

-调整pH值至8.0,采用盐酸(HCl)。

-用去离子水稀释至1xTBS。

2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型,一般包括凝胶和毛细管电泳。

配制凝胶电泳缓冲液:-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。

-用热板搅拌器加热,搅拌至溶解。

-冷却至室温后,调整pH值至8.3,采用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)。

-用去离子水稀释至所需浓度。

配制毛细管电泳缓冲液:-加入10mM氢氧化钠(NaOH)和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。

-调整pH值至9.2,采用盐酸(HCl)。

-加入1mM十二烷基硫酸钠。

-用去离子水稀释至所需浓度。

3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。

BCA法配制试剂:-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂(提取液A)。

-加入0.1M硫酸(提取液B)。

-混合提取液A和提取液B,即得到试剂。

Lowry法配制试剂:-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液(A液)到250mL锥形瓶中。

-混合硫酸/磷酸/酒精试剂(B液)。

-将A液倒入B液中混合,待用。

Bradford法配制试剂:-加入试剂A到450mL去离子水中。

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.离心管清洗液配制方法:将500mL蒸馏水加入500mL乙醇中配制而成。

2.TE缓冲液配制方法:将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

最终pH值约为8.0。

3.LB培养基配制方法:将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨加入1L蒸馏水中,调整pH至7.0-7.5、将溶液加热,搅拌溶解,然后使用纸滤器滤过,装入含有取10g搅拌均匀的琼脂糖的培养皿中。

灭菌后冷却到45°C左右,然后再倒入培养皿中。

4. 蒸馏水(Milli-Q水)配制方法:使用商用蒸馏水设备如 Milli-Q等,生成去离子水,再通过0.22 μm的滤器进行过滤,获得蒸馏水。

5. LB/Agar培养基配制方法:将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨、15g/L 琼脂加入1L蒸馏水中,调整pH至7.0-7.5、将溶液加热,搅拌溶解,然后使用纸滤器滤过。

将过滤后的溶液倒入培养皿中,灭菌后冷却到45°C 左右。

1.TBE缓冲液配制方法:将1 M Tris-Borate 溶液、0.1 M EDTA 溶液、10% (w/v) Boric acid 溶液按5:19:75的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

最终pH值约为8.0。

2.TAE缓冲液配制方法:将40 mM Tris、20 mM 醋酸和1 mM EDTA 按1:0.5:0.1的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

最终pH值约为8.0。

3. Tris-HCl缓冲液配制方法:将1 M Tris-HCl 溶液加入蒸馏水,调整pH值至所需范围。

4.PBS缓冲液配制方法:将0.2g/LKH2PO4、0.2g/LNa2HPO4、8.5g/LNaCl和0.2g/LKCl加入1L蒸馏水中,调整pH值至7.45. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液)配制方法:将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。

配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

分子生物学实验常用缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。

2柠檬酸. H2O,分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O,分子量=294.12;0.1mol/L溶液含29.4 g/L2(1)醋酸盐溶液的配制:醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。

用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)](在此,C(HAc)指醋酸的浓度,C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5(1.8乘10的-5次方),PKa=-lgKa=4.75,将PH=5.5代入,可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L,或是C(HAc)=0.2mol/L等。

若是配制C(HAc)=0.1mol/L,则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。

将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。

2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

Kan(卡那霉素)50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。

2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。

2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。

2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解,定容至50mL。

3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。

LB培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中Tryptone(胰化蛋白胨)10gYeast Extract(酵母提取物)5gNaCl(氯化钠)10g2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。

3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。

4.加去离子水定容至1L。

5.高温高压灭菌后,4℃保存。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法试剂是进行科学实验和研究所必需的物质。

常用试剂包括化学品、酶、抗体等。

缓冲液则是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液。

下面将介绍几种常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.硫酸铜溶液硫酸铜溶液常用于定量分析和化学反应。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取1.27g的硫酸铜并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

2.盐酸盐酸常用于酸碱中和实验及有机合成。

其配制方法如下:(1) 准备500ml容量瓶,称取36.5-37.5%的盐酸浓缩液25ml。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

3.硝酸银溶液硝酸银溶液常用于检测氯离子的存在。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取2.91g的硝酸银固体并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

4.碘液碘液常用于检测淀粉的存在。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取0.25g的碘固体,并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

缓冲液是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液,常用于生物化学、细胞生物学和分子生物学实验中。

以下是几种常用缓冲液的配制方法:1. Tris缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

(2)打开pH计,将电极插入去离子水中进行校准。

(3) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(4) 将7.94g Tris酸加入加热的去离子水中,搅拌溶解。

(5) 加入约5ml盐酸,搅拌均匀,并用盐酸调节溶液至所需pH值。

2.PBS缓冲液(1)准备所需的磷酸二氢盐、氯化钠和氯化钾。

(2) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(3)将0.2g磷酸二氢盐、8g氯化钠和0.2g氯化钾加入加热的去离子水中,搅拌溶解。

(4)用盐酸或氢氧化钠调节溶液至所需pH值。

3. Tris-HCl缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制1、6*Loading Buffer(DNA电泳用,50ml配方)组分浓度:100mM EDTA, 40%(V/V) 蔗糖, 0.05%(W/V)xylene cyanol FF, 0.05%(W/V)溴酚蓝配制方法:称取25mg溴酚蓝,25mg xylene cyanol FF,5ml 0.5MEDTA,加入约20ml去离子水,加热搅拌,充分溶解,加入20g蔗糖,去离子水定容至50ml。

2、10*PBS(pH7.2~7.4,分子克隆推荐配方)组分浓度:NaCl 137 mmol/L,KCl 27 mmol/L,Na2HPO4 100 mmol/L,KH2PO4 20 mmol/L配置方法:用800ml去离子水溶解80 g NaCl, 2 g KCl,14.4 g Na2HPO4和2.4 g KH2PO4。

用盐酸调节pH 至7.4,加水定容至1 L,高温高压灭菌,室温保存。

3、20*SSC (pH约7.0)组分浓度:300 mmol/L 柠檬酸三钠,3 mol/L 氯化钠配制方法:称取柠檬酸三钠·2H2O 88.23 g,氯化钠175.3 g,加入800 ml去离子水充分溶解,用14 N HCl 调pH为7.0,去离子水定容至1 L,高温高压灭菌后室温保存。

4、10*Tris-甘氨酸转膜液(pH约8.3)1 L组分浓度:0.25 M Tris,1.92 M 甘氨酸配制方法:甘氨酸144.13 g,Tris 30.29 g,去离子水溶解定容至1 L。

使用前,100 ml 10*转膜液,加入200 ml甲醇,700 ml去离子水成为1*转膜液5、10*Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液(SDS-PAGE电泳缓冲液,pH约8.6)组分浓度:0.25 M Tris,1.92 M 甘氨酸,1%(W/V)SDS配制方法:称取30.29 g Tris,,144.13 g甘氨酸,5 g SDS,加入800 ml去离子水搅拌溶解,定容至1 L,常温保存。

超级实用的实验室常用试剂缓冲液的配制方法

超级实用的实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1.5 M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。

2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓HCl调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1 L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高l℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6,8.0)组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中,加入约40 ml 的去离子水搅拌溶解。

2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。

3.加去离子水将溶液定容至100 ml。

4.高温高压灭菌后,室温保存。

PBS Buffer组份浓度137 mM NaCl,2.7 mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 配制量 1 L配制方法3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。

4.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

分子生物学实验常用实验试剂配制(2019.4.7)

分子生物学实验常用实验试剂配制(2019.4.7)

分子生物学实验常用实验试剂配制(一)溶液I(TEG缓冲液):使用浓度为(25mmol/L Tris-HCl, 10mmol/L EDTA, 50mmol/L葡萄糖,pH8.0)。

1、先称取0.3g Tris加入0.1mol/L HCl溶液14.6mL,配制成pH8.0 Tris-HCl 缓冲液100mL;(1mol/L HCl溶液:即取8.6毫升36%的盐酸加水、搅拌、定容至100毫升即可;或37% 的HCL相当于约12mol/L,即稀释12倍)2、再加入0.37g EDTA·Na2·2H2O和[0.99g(Glucose.H2O,分子量198.17)或0.9g Glucose,分子量180.1572]葡萄糖,灭菌后4℃保存备用。

(二)溶液II (碱裂解液):使用浓度为(0.2 mmol/L NaOH, 1% SDS)。

配制母液:0.4M NaOH 称1.6g NaOH 定溶于100 mL蒸馏水;2% SDS 称2 g定溶于100 mL蒸馏水。

常温保存,使用时等体积混合。

(三)溶液III(乙酸钾溶液):使用浓度(pH8.0, [K +]=3mol/L, [Ac -]=5mol/L)。

1、先配制60mL 5 mol/L KAc;称g KAc 定容至60 mL。

2、再加入11.5mL冰乙酸和28.5mL蒸馏水。

4℃保存备用。

(四)LB培养基配制:LB(液体):称取0.5g 氯化钠,0.5g腋蛋白胨,0.25g酵母提取粉,加水50ml。

LB(固体):称取0.5g 氯化钠,0.5g腋蛋白胨,0.25g酵母提取粉,0.75g琼脂粉,加水50ml。

(五)琼脂糖凝胶:琼脂糖凝胶的配制是分子实验室比较基本的操作,大体流程如下:称量、熔胶、倒胶、拔梳。

1.称量:我们通常所说的0.8%、1%的胶都是指的质量体积分数,即所称取的琼脂糖粉的质量(g)比所加的TBE缓冲液的体积(mL)即胶的浓度。

缓冲液的体积根据胶板的大小而定。

常用试剂、溶液及缓冲液的配制

常用试剂、溶液及缓冲液的配制

常用试剂、溶液及缓冲液的配制1常用试剂、溶液及缓冲液的配制1.基本要求分子生物学所用试剂必须是分析纯或分子生物学试剂级。

溶液配制水尽可能使用灭菌、蒸馏、去离子水(建议用Milli-Q过滤系统或类似系统进行过滤)。

除非有特殊的说明,大部分配制的溶液需用0.22um孔径滤膜过滤除菌或者高压灭菌(15psi,121℃,20~30min)。

使用高压灭菌的水、灭过菌的容器以及灭过菌的贮液来配制溶液,会延长所配制溶液的使用时间。

用干燥的化学试剂和无菌水配置的溶液一般都不需要在灭菌;有些酸、碱和一些有机化合物溶液也不需要灭菌,因为微生物不能在这些溶液中生长。

制备的溶液应该分成小分保存。

如果没有特别说明,则所有贮液和缓冲液至少能在室温下贮存六个月。

作为贮液应贮存在4℃或-20℃,使用时取出到达到室温后再开启,以防止试剂内的缩合作用,以确保度数精确。

以质量浓度表示的溶液浓度是指在100ml溶液中溶质的质量,质量单位为g;以体积分数表示的溶液浓度是指总体积为100ml溶液中各组分成分的体积,体积单位为ml。

缓冲液的ph为25℃是溶液的ph。

2.浓酸及碱的摩尔浓度溶液质量分数/% 浓度/mol/L冰乙酸甲酸盐酸硝酸磷酸硫酸氢氧化铵氢氧化钾氢氧化钠 90~100903670859528(NH3)505017.423.411.615.714.61814.813.519.13.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(spermidine)溶解2.55g亚精胺(相对分子质量为254.6)于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份。

贮存于-20℃.不须将溶液灭菌1mol/L精胺(spermine)溶解3.48g精胺(相对分子质量为348.2)于足量水中,使终体积为10ml,分装为小份贮存于-20℃.不须将溶液灭菌。

10mol/L乙酸铵(ammonium acetate)将77.1g乙酸铵(相对分子质量为77.1)溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。

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(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配制方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配制方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA(pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配制方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

(pH5.2)□配制量100mL□配制方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4□配制量1L□配制方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。

NaCl 8 gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42 gKH2PO4 0.27g2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵□配制量100mL□配制方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。

2.加去离子水将溶液定容至100mL。

3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。

4.密封瓶口于室温保存。

注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。

7、Tris- HCl平衡苯酚□配制方法1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。

但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。

同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。

因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。

2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。

所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。

3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。

从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。

②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。

该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。

有助于方便识别有机相。

③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。

④重复操作步骤③。

⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。

⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。

⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。

⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。

8、苯酚/氯仿/异戊醇□配制方法1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)。

氯仿可使蛋白(25 :24 :1)质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。

2. 配制方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。

9、10%(W/V)SDS□组份浓度10%(W/V)SDS□配制量100mL□配制方法1.称量10g高纯度的SDS置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水,68℃加热溶解。

2. 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。

3. 将溶液定容至100mL后,室温保存。

10、2 N NaOH□组份浓度2N NaOH□配制量100mL□配制方法1.量取80mL去离子水置于100~200mL塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。

2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。

3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。

4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。

11、2.5 N HCl□组份浓度2.5 N HCl□配制量100mL□配制方法1. 在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸(11.6N),均匀混合。

2. 室温保存。

12、5 M NaCl □组份浓度5 M NaCl□配制量1L□配制方法1. 称取292.2g NaCl置于1L烧杯中,加入约800mL的去离子水后搅拌溶解。

2. 加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。

3. 高温高压灭菌后,4℃保存。

13、20%(W/V)Glucose □组份浓度20%(W/V)Glucose□配制量100mL□配制方法1. 称取20g Glucose置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水后,搅拌溶解。

2. 加去离子水将溶液定容至100mL。

3. 高温高压灭菌后,4℃保存。

LB培养基:NaCl l%Yeast Extract 0.5%Tryptone l%琼脂1.5%(固体培养基)STET缓冲液:蔗糖8%(W/V)Tritonx-100 0.5%EDTA 50nmol/lTrisCL(pH8.0)50nmol/lTAE(50×)缓冲液:Tris-HAc 2 mol/LCTAB 50mmol/LEDTA(pH8.0)20mmol/LTE缓冲液:Tris-HCI 10mmol/LEDTA 50mmol/L蔗糖40%氨苄青霉素溶液:将1g粉末状的氨苄青霉素溶于100mL超纯水中,配成10mg/mL,分装1.5mL的管内,-20℃保存备用。

X-gal贮液:将X-gal溶解于二甲基酰氨(DMS)或DMSO中,配成20 mg/mL的贮液分装后避光保存于-20℃,无须过滤或灭菌。

IPTG贮液:将IPTG溶解于DDW中,配成20%贮液,用0.22μm的滤膜过滤除菌分装后保存于-20℃。

Phosphate Buffered Saline (PBS)10X PBS (0.1M PBS, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) -------------------------- 10.9 gNaH2PO4 (anhydrous) -------------------------- 3.2 gNaCl ------------------------------------------- 90 gDistilled water --------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2Store this solution at room temperature. Dilute 1:10 with distilled water before use and adjust pH if necessary.20X PBS (0.2M PBS, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) --------------------------- 21.8 gNaH2PO4 (anhydrous) --------------------------- 6.4 gNaCl ------------------------------------------- 180 gDistilled water ---------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2Store this solution at room temperature. Dilute 1:20 with distilled water before use and adjust pH if necessary.10X PBS-Tween 20 (0.1M PBS, 0.5% Tween 20, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) -------------------------- 10.9 gNaH2PO4 (anhydrous) --------------------------- 3.2 gNaCl ------------------------------------------- 90 gDistilled water ---------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2 and then add 5 ml of Tween 20Store this solution at room temperature. Dilute 1:10 with distilled water before use and adjust pH if necessary.20X PBS-Tween 20 (0.2M PBS, 1% Tween 20, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) -------------------------- 21.8 gNaH2PO4 (anhydrous) -------------------------- 6.4 gNaCl ------------------------------------------ 180 gDistilled water --------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2 and then add 5 ml of Tween 20Store this solution at room temperature. Dilute 1:20 with distilled water before use and adjust pH if necessary.。

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