医学微生物学4、消毒与生物安全(人卫)
医学微生物学教学大纲(第八版)
《医学微生物学》教学大纲课程编码：05280040课程名称：医学微生物学（Medical Microbiology）学分：3总学时：60学时理论学时：36学时实验学时：24学时先修课程要求：细胞生物学生物化学适应专业：医学检验专业教材：1、医学微生物学，李凡、徐志凯主编，第八版，人民卫生出版社参考教材：2、《现代医学微生物学》闻玉梅主编，第一版，上海医科大学出版社3、Medical Microbiology, David Greenwood, (15th Edition), 北京科学出版社一、课程在培养方案中的地位、目的和任务医学微生物学是一门医学的基础学科，主要研究与医学有关的病原微生物的生物学性状、致病性、免疫性、微生物学检查法、特异性预防和治疗原则等的科学。
它与临床内科学、传染病学、妇产科学、儿科学及外科学等学科感染性疾病高度相关。
学习医学微生物学的目的，在于掌握和运用这门学科的基本理论、基本知识和基本技术，为学习以后的临床微生物学与检验课程打下必要的基础。
二、课程基本要求1、基本理论和基本知识医学微生物学分为基本原理、细菌学、病毒学和真菌学四篇。
在基本原理中主要叙述微生物的形态结构、新陈代谢、生长繁殖等生物学特征、感染与抗感染免疫的机理、遗传变异的规律、微生物与人体的相互关系，以及微生物学检查法和防治原则等内容。
在细菌学、病毒学和真菌学中主要介绍几种引起较为常见感染性疾病的微生物的基本生物学性状、致病因子、抗感染免疫机理以及所致疾病诊断、预防与治疗原则。
2、基本技能：通过本课程的学习，主要要求学生掌握与医学相关的微生物（细菌、病毒为主）的基本生物学性状、感染与抗感染免疫的机理、感染性疾病的诊断、预防与治疗原则。
四．考核（小四号宋体加粗，内容必须包括如下2项）考核方式：理论考试笔试，实验课采用考核及评估方式评定成绩。
成绩构成：理论考试70%，实验和平时成绩30%。
五、课程基本内容绪论[目的要求]1.掌握微生物的概念与分类、医学微生物学的定义;2.了解对医学微生物学发展作出过重大贡献的科学家;3.了解微生物与人类的关系，医学微生物学的发展史。
医学微生物学-消毒与灭菌精品PPT教学课件
3. 抑菌 (bacteriostasis ) 抑制人体内部或外部细菌生长繁殖的方法。 常用的抑菌剂为各种抗生素。
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4. 防腐 (antisepsis) 体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法。 用以防腐的药品称为防腐剂。 5. 无菌 (asepsis) 不存在任何活菌、多是灭菌的结果。 无菌操作 (antisepsis technique) 防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
103.4kPa（1.05kg/cm2）温度可达121.3ºC， 15~20min，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有 微生物。
常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐 高温、耐湿物品的灭菌。
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二、辐射杀菌法
1. 紫外线
（1）波长240~300nm的紫外线具有杀菌作用， 其中以260~266nm最强。
第七章 消毒与灭菌
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医.学全.在.线
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常用术语： 1. 消毒(disinfection) 杀灭物体或环境中的病原微生物。
但不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物 的方法。
用以消毒的药品称为消毒剂。
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2. 灭菌 (sterilization) 杀灭物体上所有微生物的方法。
管口等的灭菌。
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3. 干烤 利用干烤箱灭菌（160~170ºC，2h） 适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品 4. 红外线 是 一 种 0.7~1000μm 波 长 的 电 磁 波 ， 尤 以
1~10μm波长的热效应最强。 热效应只能在照射到的表面产生。多用于医疗
医学微生物学（详细）
医学微生物学（详细）医学微生物学1.绪论1．微生物：存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍。
甚至数万倍才能观察到的微小生物。
2．微生物的分类：种类细胞结构核酸特点代表非细胞型微物无典型细胞结构构DNA或RNA,两者不同时存在无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长增值病毒原核细胞型微生物无核膜、核仁，仅有核糖体DNA和RNA 古生菌、细菌（细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌）真核细胞型微生物细胞核分化程度很高，有核膜核仁，细胞器完整DNA和RNA 真菌3.病原微生物：少数具有致病性，能引起人类、植物病害的微生物。
机会致病性微生物：在正常情况下不致病，只有在特定情况下导致疾病的微生物。
4，郭霍法则：①特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康人中不存在；②该特殊病原菌能被分离培养得纯种；③该纯培养物接种至易感动物，能产生同样病症；④自人工感染的实验动物体内能重新分离得到该病原菌纯培养。
郭霍法则的特殊情况5.免疫学：㈠主动免疫；㈡被动免疫。
第一篇细菌学第1章细菌的形态与结构第一节细菌的大小与形态1观察细菌常采用光学显微镜，一般以微米为单位。
2按细菌外形可分为：①、球菌（双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌）②、杆菌（链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌）③、螺形菌（弧菌、螺菌、螺杆菌）第二节细菌的结构3基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞2.革兰阳性菌（G+）：显紫色; 革兰阴性菌（G-）：显红色。
3.细胞壁格兰阳性菌G+格兰阴性菌G-肽聚糖聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥（三维立体结构）聚糖骨架、四肽侧链（二维结构）磷壁酸（重要的菌体表面抗原）外膜（脂多糖、脂质双层、脂蛋白）4.G-菌的外膜｛脂蛋白LPS（脂质A，核心多糖，特异多糖）脂质双层脂多糖｝脂多糖即G-菌的内毒素。
LPS是G-菌的重要致病物质，使白细胞增多，直至休克死亡；另一方面，LPS也可增强机体非特异性抵抗力，并有抗肿瘤等有益作用。
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案【知识要点】1.掌握：（1）消毒、灭菌、清洁、防腐、无菌及无菌操作的概念。
（2）消毒灭菌的运用（3）病原微生物实验室的分级2.熟悉：常用的高压蒸气灭菌法、巴氏消毒法等热力杀菌法日光与紫外线杀菌机理及其应用；常用的化学消毒剂的种类及其应用。
实验室感染的控制以及监督和法律责任。
3.了解：热力灭菌法的种类和应用范围；常用化学消毒剂的作用机制及影响作用的因素。
【课程内容】第一节消毒灭菌常用术语第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒与灭菌（一）热力灭菌法（二）辐射杀菌法（三）滤过除菌法（四）超声波消毒法（五）干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒灭菌法的原理（二）消毒剂的主要种类第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌二、室内空气消毒灭菌三、手和皮肤的消毒四、黏膜消毒五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌六、病人污染物品的消毒七、饮水的消毒八、环境的消毒第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂的性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类二、病原微生物实验室的分级实验室感染的控制以及监督和法律责任【应试习题】一、名词解释1．防腐2．高压蒸气灭菌法3．灭菌4．无菌5．消毒6．抑菌7．巴氏消毒法8. 清洁二、填空题1．化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是_______、_______和。
2．高压蒸气灭菌法的蒸气压力为_______kg／C㎡，温度达_______℃，维持时间是_______min。
3．紫外线杀菌力最强的波长为_______，常用于无菌室的_______消毒。
4．预防新生儿淋病奈瑟菌感染常用的滴眼剂是_______。
5．消毒手术包常采用的方法是______________________，其温度达到______________，维持时间是_____________________，可去除细菌及___________________。
医学微生物学消毒与灭菌-2023年学习资料
4氧化剂：-机制：-1靠氧化作用，-灭活酶类-2使蛋白质变性-种类和用途：-0.1%高锰酸钾，皮肤、尿道、 水果等-2》-3%过氧化氢，创伤、皮肤粘膜消毒-2%-2.5%典酒，皮肤消毒-4》-0.2ppm-0.5p m氯，饮水和游泳池消毒-10%-20%票白粉，地面、厕所与排泄物
5表面活性剂·-机制：-1损伤细胞-2-灭活酶类-3蛋白质沉淀-种类和用途：-10.05%-0.1%新洁尔 ，皮肤粘膜消毒、-浸泡手术器械-20.05%-0.1%杜灭芬，伤口冲洗，金属-器械、塑料、橡皮类消毒
化学消毒灭菌法医学微生物学消毒与灭菌
化学消毒灭菌法：-定义：是用化学药品进行消毒的方法。-作用机制☆；-①使菌体蛋白质变性或疑固，-②-破坏细 的晦系统-③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通-透性，导致细菌死亡。
消毒剂的主要种类、浓度及用途-1酚类：-作用：高浓度使菌体蛋白凝固。低农度玻坏-细菌的细胞膜，使胞质内容物 出-浓度：石炭酸为2%-5%、来苏为2%-用途：地面、器具表面和皮肤的消毒
消毒、灭菌的方法一般可分为：-热力灭菌法-福射杀菌法-物理学方法-滤过除菌法-超声波杀菌法-干燥和低温抑菌 等-化学方法
物理消毒灭菌法医学微生物学消毒与灭菌
热力灭菌法-分类：干热和湿热灭菌法两类-烧灼灭菌法-1-干热灭菌法：是通过脱水干燥和大分子变性-A焚烧：用 废弃物品或动物尸体等-B烧灼：微生物学实验室的接种环、试管口等-C干烤：高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品 D红外线：电滋波：热效应只能在照射到的表面产-生。多用于医疗器械的灭菌。
2.湿热灭菌法-A巴氏消毒法：61.1-62.8℃经30min,或-71.7℃经15-30秒钟，常用于-消 牛乳和酒类等-B煮沸法·水温100C经5min能杀死一般细菌-的繁殖体。芽胞要煮沸1-2h。-C流通蒸气法 100C,蒸15-30min,可杀死-细菌的繁殖体，但不能杀死芽胞
医学微生物学
医学微生物学微生物学是生物学的一个重要分支领域，主要研究微生物（包括细菌、真菌、病毒、原生生物等）的形态、结构、生理、遗传、生态、分类、系统演化以及与环境和宿主的相互作用等方面。
而医学微生物学则是将微生物学的理论和方法应用于医学领域，研究微生物在人类疾病的发生、传播、诊断和治疗中的作用和机制，并以此为基础开展相应的临床和公共卫生工作。
1. 微生物和人体的关系微生物存在于人体的各个部位，包括口腔、鼻腔、肠道、皮肤、泌尿系统等，其数量和种类与人体的生理状态、生活环境和免疫功能等有关。
正常情况下，微生物与人体形成平衡共生关系，可以参与人体的代谢、免疫、保护等功能，同时也为中医药疗法提供了重要的资源。
然而，某些微生物也会在一定的条件下引起人类疾病，例如病原细菌在人体内繁殖并产生毒素，导致感染和中毒；病毒或真菌在人体内感染并破坏细胞或组织，引起相应的疾病；寄生虫在人体内寄生并消耗机体营养和能量，引起寄生虫病等。
此外，微生物还可以直接或间接地诱发和加重一些非传染性疾病（如肿瘤、心脑血管疾病等），与人类健康息息相关。
2. 微生物的分类和特征微生物根据其形态、代谢、遗传和生态特征等可以分为不同的类群，最常见的有细菌、真菌、病毒和原生生物等。
细菌是单细胞原核生物，其特征包括有细胞壁、质体、核糖体等，可以通过受体、耐药等多种机制适应不同的环境，代谢多样化，包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、放线菌等；真菌是多细胞或单细胞真核生物，其特征包括有真菌壁、细胞质、菌丝等，可以产生孢子进行繁殖，其分类主要包括酵母菌、菌丝菌、霉菌等；病毒是非细胞性微小粒子，无自身代谢和繁殖能力，需要寄主细胞提供支持，其结构包括有核酸、蛋白质和外壳等，对免疫系统的免疫逃逸特别明显；原生生物是单细胞原核生物或真核生物，包括原生动物和原生植物，可以通过原生胞垂体、假足等特化结构进行移动和摄取营养，有些种类可能会引起人类感染。
3. 微生物的繁殖和传播微生物的繁殖和传播是其引起人类疾病的重要机制之一。
医学微生物学 第四章噬菌体
第二节 消毒灭菌的方法
物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
高温对细菌有明显的致死作用--蛋白质变性；核酸断裂。 有干热灭菌和湿热灭菌两大类，在同一 温度下，后者比前者的效力大。 *湿热中菌体蛋白较易凝固。 *湿热的穿透力比干热大。 *湿热的蒸汽有潜热存在。
干热灭菌 干热的杀菌作用是通过脱水、干燥
和大分子变性。
二级
三级
四级
一、二级实验室不得从事高致病性病原 微生物实验活动。三级、四级实验室从事高 致病性病原微生物实验活动。
从事高致病性病原微生物相关实验活动 应当有２名以上的工作人员共同进行。在同 一个实验室的同一个独立安全区域内，只能 同时从事一种高致病性病原微生物的相关实 验活动。应有健全安全保卫制度 。
对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植 物致病的致病因子。 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病 因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具有 有效的预防和治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使 人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具 有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传 播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗 措施。
第三节 消毒灭菌的运用
一、医疗器械物品的消毒灭菌
（一）高危器械物品
用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。。
（二）中危器械物品
用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。
（三）低危器械物品
只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即可。
（四）快速周转的医疗器械
1.焚烧法：直接点燃或在焚烧炉内焚烧。是一种彻底的灭 菌方法。 适用于废弃物品或动物尸体。 2.烧灼法：直接用火焰灭菌。 适用于接种环，试管口等的灭菌。 3.干烤法：将物品置干烤箱内，加热至160~170℃ ，2h。 适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。 4.红外线：利用电磁波的热效应灭菌。1~10m波长的热 效应最强。适用于医疗器械的灭菌。
4.消毒灭菌与噬菌体(人卫8版)
一）热力灭菌法
有干热和湿热两大类灭菌法
1. 杀菌机制
损伤机制复杂 菌体蛋白凝固变性
2. 灭菌效果
同一温度下湿热比干热灭菌效果好
湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 湿热的穿透力比干热大 湿热的蒸汽有潜热
3.干热灭菌法 焚烧：直接点燃物品或将其置于焚烧炉内，最彻
底的灭菌法，适用于废弃物品或动物尸体灭菌
物质转移中的意义 3.掌握毒性噬菌体的生活周期 4.熟悉噬菌体的生物学特性及噬菌体的应用
第一节 噬菌体的生物学性状
形态结构 化学组成 抗原性 抵抗力
1、形态与结构
个体微小，nm为测量单位，EM下可见 有蝌蚪形、微球形和细杆形
头部——六棱柱体 尾部——管状器官
2、化学组成
核酸
生物洁净室装有高效或亚高效过滤系统，如无菌 护理室，无菌手术间等
四）干燥与低温抑菌法
冷冻真空干燥法
低温状态下真空抽去水分 主要用于菌种保藏 可存数年到数十年
三、化学消毒灭菌法
一）杀菌机制
使菌体蛋白凝固变性
如酚类、醇类、酸碱类等
改变细胞膜通透性，使胞内含物逸出
如表面活性剂、脂溶剂等
3. 手和皮肤消毒
肥皂和流动水正确洗手 75%乙醇，0.05%氯已定、过氧乙酸水溶液等
4. 粘膜消毒
口腔黏膜可用3%过氧化氢 尿道、阴道冲洗可用0.05%氯已定，1g/L高锰酸钾
5. 排泄物及分泌物消毒
50g/L有效氯的次氯酸钠、漂白粉等作用1h 等量200g/L漂白粉搅拌混匀作用2h
能在敏感宿主菌内大量增殖并使之裂解的噬菌体
二、溶菌周期 吸附— 穿入—生物合成—成熟与释放
基因的复制 蛋白质的合成
医学微生物学4
病原学检查的目的
病因学诊断 指导感染性疾病的防治（合理用药） 传染病的流行病学分析 病原学研究
第一节 细菌感染的微生物学检查法
第一步： 标本（specimens）采集与运送 原则和注意事项：
操作： ①严格无菌操作，避免污染，贴好标签； 取样部位： ②应选择感染部位或病变明显的部位采集；
③根据不同疾病及其不同时期采集不同标本；
取样时间： ④尽可能在疾病早期及使用抗菌药物之前采集标本；
抗体：
⑤检查病原体的特异性IgG抗体时，应采集双份血 清：急性期和恢复期
运送： ⑥标本尽快送检，多数菌可冷藏送运。
细菌感染的微生物学检查法
第二步：检测
➢ 病原检测 •检测病原菌 •检测病原菌的成分
➢ 血清学检测 •检测患者血清中特异抗体
一、病原检测
普通光学显微镜 (LM) :
普通染色葡萄球菌 荧光染色鼠疫耶尔森菌
2、醇类 ：
作用机制：使菌体蛋白变性与凝固；干扰细菌代谢 浓度：乙醇70%-75% 用途：用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡
3、重金属盐类：
作用：使细菌发生变性和沉淀；酶活性丧失 浓度及用途： （1）2%红汞：皮肤、粘膜和小创伤 （2）0.05-0.1%升汞：非金属器皿
4、氧化剂：
作用：氧化作用；使蛋白质变性 浓度及用途： （1）0.1%高锰酸钾：皮肤、尿道 （2）3%过氧化氢：创伤、皮肤粘膜 （3）2%-2.5%碘酒：皮肤消毒
影响消毒剂作用的因素
消毒剂浓度和作用时间
➢ 75%酒精
温度：温度升高效率增强
➢ 炭疽杆菌芽胞—2% 戊二醛 ✓ 20oC: 104/ml 15 min
✓56oC: 104/ml 1 min
病原种类和数量
医学微生物学课件第4章细菌的感染与免疫
2020/10/13
医学微生物学
三 微生态平衡与失调
微生态平衡: 指正常微生物群、宿主与外 部环境处于动态平衡。
影响因素：
宿主因素（年龄、饮食、激素水平等） 正常微生物群（定位、定性、定量） 外界环境
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➢ 致病性(pathogenicity) ：病原微生物能引起感染的能力或性 质。
➢ 毒力(virulence)：致病菌的可量化的致病性,反映了致病性的 强弱。
➢ 毒力常用半数致死量(median lethal dose,LD50)或半数感染 量(median infective dose,ID50)表示。在一定条件下能引起 50%动物死亡或感染需要的最小微生物数或毒素量。
医学微生物学
微生态失调：指正常微生物群之间及正常 微生物群与宿主之间的平衡，在外界环境 影响下被破坏，由生理性组合转变为病理 性组合。
诱发因素
使用抗生素
正常菌群寄居部位转移（外科手术、腔 镜检查等）
机体免疫功能下降
第二节 细菌的致病机制
➢ 致病菌微生物, 病原微生物, 病原体（pathogen）：能引起感 染或宿主疾病的微生物。
单个散在的吸附
生物膜 的形成
形成微菌落：同一种细菌繁殖后形成肉眼不可见的 细菌集团，通过菌体表面黏附性物质 将菌细胞粘连在一起的“家族”
形成细菌的生物膜：以微菌落为基本单位，由不同 种属的细菌共同形成“社区”:
如:龋齿, 人工关节表面. 对膜内细菌起保护作用.
细菌的毒素
包括: 外毒素, 内毒素
1 外毒素（exotoxin）
第四章
细菌的感染与免疫
【考点整理】2017年12月公共卫生《医学微生物学》解析：消毒与灭菌
【考点整理】2017年12月公共卫生《医学微生物学》解析：消毒与灭菌2017年执业医师考试时间在12月9日，离考试时间已经不多了！考生要好好报考，争取一次性通过考试！小编整理了一些执业医师的重要考点，希望对备考的小伙伴会有所帮助！最后祝愿所有考生都能顺利通过考试！更多精彩资料关注医学考试之家！第四章灭菌与消毒清洁、消毒、灭菌是预防和控制医院感染的一个重要环节。
它包括医院病室内外环境的清洁、消毒、诊疗用具、器械、药物的消毒、灭菌，以及接触传染病患者的消毒隔离和终末消毒等措施。
一、概念(一)消毒是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化的处理。
根据有无已知的传染源可分预防性消毒和疫源性消毒;根据消毒的时间可分为随时消毒和终末消毒。
(二)灭菌是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物(包括芽胞)，使之达到无菌程度。
经过灭菌的物品称“无菌物品”。
用于需进入人体内部，包括进入血液、组织、体腔的医用器材，如手术器械、注射用具、一切置入体腔的引流管等，要求绝对无菌。
消毒与灭菌是两个不同的要领。
灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌。
消毒多用于卫生防疫方面，灭菌则主要用于医疗护理。
二、消毒、灭菌的原则(一)明确消毒的主要对象应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。
(二)采取适当的消毒方法根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。
医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类：1.高度危险的器材穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部，或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材，如手术器械、注射器、心脏起搏器等。
必须选用高效消毒法(灭菌)。
2.中度危险的器材仅与皮肤、粘膜密切接触，而不进入无菌组织内，如内窥镜、体温计、氧气管、呼吸机及所属器械、麻醉器械等。
应选用中效消毒法，杀灭除芽胞以外的各种微生物。
3.低度危险器材和物品不进入人体组织，不接触粘膜，仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触，如果没有足够数量的病原微生物污染，一般并无危害，如口罩、衣被、药杯等，应选用低效消毒法或只作一般卫生处理。
医学微生物学细菌感染与免疫人卫
尿道 白色葡萄球菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
肠道 大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌 绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细菌 真菌、乳杆菌，双歧杆菌等
2、正常菌群的生理作用: 1）生物拮抗：
机制
生物屏障 － 微菌落及生物膜的屏障及 占位性保护，产生了定植抗力
二、分类
➢ 内源性感染 ➢ 外源性感染
交叉感染与环境感染 ➢ 医源性感染
三、基本特点
➢ 明确规定感染对象、感染地点及时间界限 ➢ 感染的病原体主要为机会致病性微生物 ➢ 感染的来源以内源性感染为主 ➢ 传播方式与途径以接触为主 ➢ 病原体常为耐药菌株，治疗比较麻烦
四、危险因素 1、易感对象
➢老年人、婴幼儿及有基础疾患的个体
➢不全吞噬 结核杆菌、嗜肺军团菌等胞内寄生菌
➢损伤组织细胞 多种蛋白水解酶的作用
正常体液与组织中的抗菌物质
抗菌物质 补体 溶菌酶
乙型溶素 吞噬细胞杀菌素 组蛋白 白细胞素 血小板素 正铁血红素 转铁蛋白 精素、精胶碱 乳素 正常调理素 内毒素解毒因子
主要来源 血清 吞噬细胞溶酶体、唾 液、泪液、乳汁等
一、固有/非特异性免疫
屏障机构
血脑屏障 皮肤与粘膜屏障
胎盘屏障
吞噬细胞 中性粒细胞，单核吞噬细胞系统
体液因素
补体 防御素
溶菌酶
细胞核
Macrophage Attacking E.coli (SEM x8,800)
1、吞噬过程
趋化 接触
吞噬 杀灭与消化
2、吞噬结果
➢完全吞噬 5-10分死亡，30-60分彻底破坏
毒素、葡萄球菌杀白细胞素等
《医学免疫学与医学微生物学》课件第十一章-消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
（2）湿热的穿透力比干热大； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。
1. 干热灭菌法 ➢ 焚烧 ➢ 烧灼
烧灼灭菌法
➢ 干烤
(160 ℃ 2h或 171℃ 1h或121 ℃ 16h)
➢ 红外线
干烤箱
2. 湿热灭菌法
第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在 人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。
第三类是指能够引起人或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不 构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并 且具备有效治疗和预防措施的微生物。
第四类是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。如小鼠白血 病病毒等。
➢ 煮沸法
➢ 巴氏消毒法 (牛乳、酒类）
① 低温维持巴氏消毒法 61.1～62.8℃30min ② 高温瞬时巴氏消毒法 71.7℃15s ③ 超高温巴氏消毒法 132℃1～2s
➢
流动蒸汽消毒法
➢
间歇蒸汽灭菌法（反复多次流动蒸汽）
100℃维持30min→37℃温箱过夜→100℃维持30min→37℃温箱过夜 → 100℃维持30min→ 37℃温箱过夜→100℃维持30min。
第十一章
消毒灭菌与病原微生物毒(disinfection)：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。 灭菌(sterilization)：杀灭物体上所有微生物的方法。 防腐(antisepsis)：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 清洁(cleaning)：是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的
常用的消毒剂有哪些种类? 简述化学消毒剂的杀菌机制。 湿热灭菌有哪些方法? 各有何用途? 简述紫外线杀菌的作用机制和注意事项。 在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比
医学微生物学消毒与灭菌和生物安全
净台（层流工作柜）、无菌病房。
特点 仅能除去细菌，不能去除病毒、支原体、 衣原体和有些L型细菌等。
滤菌器的种类
➢ 薄膜滤菌器：孔径0.22～0.45m时，可 除去细菌；20～100nm时可除去病毒
➢ 玻璃滤菌器 ➢ 石棉滤菌器 ➢ 素陶瓷滤菌器
滤过除菌法的常用器具
滤菌器
六. 渗透压
主要用于防腐
➢ 利用密封的耐受高压的蒸汽灭菌器，在蒸汽不外 溢的情况下，使锅内压力升高，容器内的温度随 着水水蒸汽压力的增加而上升
6.超高温杀菌（UHT）：
❖ 135～150℃和 2～8s 对牛乳或其他液态食品 果汁、及果汁饮料、豆乳、茶、酒、矿泉水等 最大优点是既能杀死产品中的微生物，又能较好
地保持食品品质与营养价值。
一. 热力灭菌法
多数无芽胞细菌经55-60℃作用30-60min后死亡 湿热80℃经5-10min可杀死所有细菌繁殖体和真菌
干热灭菌法、 湿热灭菌法
热力灭菌法二
干热灭菌法
焚烧：尸体。 烧灼：接种环。 干烤：耐高温物品。 红外线：同干烤。
湿热灭菌法
巴氏消毒法：牛奶、酒类等。 煮沸法：消毒食具等。 流动蒸气消毒法： 间歇蒸气灭菌法：不耐高温的培养基。 高压蒸气灭菌法：最有效的灭菌方法。 预真空压力蒸汽灭菌器：灭菌速率快。
❖ 4、间歇蒸汽灭菌法：用于含糖、牛奶等培养基。
100℃、15-30min，37℃过夜（3次） 不耐受高温的物品如：鸡蛋培养基、血清培养基等，将被灭菌物品置于血清凝固器
内， 75℃～80 ℃，延长灭菌时间至60min,连续三次也达到灭菌的目的。
5. 高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法
➢ 压力103.4kPa（1.05kg/cm2)，121.3℃，1530min ， 杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。 一般普通培养基、耐高温的玻璃制品、生理盐水、 外科手术敷料与器械等物品。
卫生微生物学-人民卫生出版社版复习小结
●卫生微生物学：微生物与其环境相互作用的规律、对人类健康的影响以及应对方略的科学。
●微生物生态学：研究微生物与其生存环境、微生物群体之间相互关系的科学，即微生物群体与周围环境的生物和非生物因素的相互关系的科学。
●微生物与环境之间相互作用的基本规律1.限定因子定律：任何生物的生物量决定于所存在环境中该生物生长所需的最低浓度营养。
2.耐受性定律：指生物对环境中生态因子能耐受的范围。
3.综合作用定律：一个生物或一群生物的生存和繁殖取决于综合环境。
●微生物生态演化的自然选择与适应1.变异性；2.选择性；3.适应性●微生物之间相互作用的基本生态规律1.互生关系：互生是指两种可以单独生活的生物在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方，或偏利于一方的生活方式1）偏利共生：一种微生物能长生某种物质或改变环境促使另一种微生物生长，而对前者无影响。
2）互利共生：同一生境的两种微生物互换产物，相互依赖，共同有利，生活在生理上形成整体。
3）互惠共生：两个种群的共同生存可以相互受益，但不是一种固定的关系，解除关系后双方都能独立生存。
2.寄生关系：一种生物侵入到另一种生物体，从宿主体内获得自己所需要的营养物质并生长繁殖，使后者蒙受损害甚至被杀死的一种相互关系3.拮抗关系：两个种群共同生长，由某种生物所产生的特定代谢产物可干扰他种生物的带些活动，抑制其生长和繁殖甚至杀死他们的一种相互关系4.捕食关系：一种大型的生物直接捕捉、吞食另一种小型生物以满足其营养需要的相互关系5.竞争关系：两个种群共同生活于同一环境中，因需要相同的生长因子或其它环境条件而发生的争夺现象6.种间共处：两种微生物生活在一起，但两者之间互无伤害，也互不补益，各自互无影响●环境中微生物的主要类群1.原核细胞型微生物：1）细菌：环境中常见致病菌与条件致病菌：葡萄球菌属，链球菌属，埃希菌属，沙门菌属，志贺菌属，霍乱弧菌，副溶血性弧菌，破伤风梭菌，肉毒梭菌，白喉杆菌，结核分枝杆菌，耶尔森菌属。
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5. 干热法与湿热法的灭菌效果
同一温度下，湿热比干热灭菌效果好
原 因
湿热中细菌菌体蛋白较易凝固
湿热的穿透力比干热大
湿热的蒸汽有潜热
二、辐射杀菌法
紫外线：波长200-300nm的紫外线能干扰细菌DNA的
复制与转录而杀菌。但紫外线穿透力较
弱，可损伤人体皮肤黏膜，常用于空气及
物品的表面消毒。
电离辐射：包括高速电子、X射线、γ射线等。可 产生游离基，破坏细菌DNA而杀菌。常
二、病原微生物实验室的分级
根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平 （BSL）及国家标准分为四级：
BSL－1实验室 BSL－2实验室
－－ －－
BSL－3实验室
BSL－4实验室
－－
－－
思考题
1、试述常用物理灭菌法的作用机制及适用范围
2、试分析影响化学消毒剂作用效果的因素。
3、依据病原微生物感染的危害程度，如何选择相
括结核分枝杆菌）、真菌、多数病毒
适用于纤维内窥镜、喉镜、麻醉器材等 包括含碘消毒剂、醇类消毒剂等
低效消毒剂
可杀死多数细菌繁殖体，不能杀死芽胞、
结核分枝杆菌、某些抵抗力强的真菌和病毒
适用于皮肤、粘膜、物体表面和地面等
包括季胺盐类消毒剂、氯乙定、高锰酸钾等
四、消毒剂的应用
消毒剂
含氯消毒 剂 过氧乙酸 戊二醛 碘酒 碘伏 乙醇 新洁尔灭 高锰酸钾
细菌
浓度
种类
作用时间
环境
有机物 温度 酸硷度
第三节
病原微生物实验室生物安全
指防范、处理微生物及其毒 素对人体危害的综合性措施 病原微生物实验室生物安全
的核心是防扩散和防感染
一、病原微生物的分类
根据病原微生物的传染性、感染后对个体及群体 的危害性将其分为四类：
I类（29种）－引起严重疾病，我国尚未发现或已消灭 II类（70种）－引起严重疾病，易直接或间接在个体间传播 III类（275种）－ 传播有限，所致感染可预防或治疗 IV类－ 通常对人或动物无致病性
滤菌器
含有微细小孔<0.22微米,只允许液体或气体 通过, 而大于孔径的细菌等颗粒不能通过
生物洁净技术（HEPA）
初、中、高三级高效分子空气过滤器，除去0.55μm的尘埃，并采用合理气流方式以洁净空气 生物洁净室装有高效或亚高效过滤系统，如无 菌护理室，无菌手术间等
四、超声波杀菌法
频率高于20kHz/s而不被人耳感觉到的声波。
机制：通过其过水时的空化作用在液体中造成压力 改变，应力薄弱区可形成小空腔，空腔逐渐
增大，最终崩破而裂解细菌，对G-菌较敏感。
用途：主要用于粉碎细胞，提取细胞组分或制备抗原。
五、低温与干燥
冷冻真空干燥法： 在低温状态下真空抽去水分
用途：保存菌种
第二节
化学消毒灭菌法
一、杀菌机理
使菌体蛋白凝固变性。如酚类、醇类、酸碱类等
烷化剂：甲烷、戊二醛、环氧乙烷等 含碘消毒剂：碘酊、碘伏等 含氯消毒剂：次氯酸钠、漂白粉等
Hale Waihona Puke 三、按杀菌能力分类
高效消毒剂
可杀死包括芽胞在内的所有微生物
适用于不耐热力，但要进入体内的物品
包括含氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛
类消毒剂、环氧乙烷等
中效消毒剂
不能杀死包括芽胞，可杀死繁殖体（包
防止或抑制体外细菌生长繁殖
第一节
物理消毒灭菌法
热力灭菌法 辐射灭菌法 滤过除菌法
一、热力灭菌法
1. 杀菌机理
高温使菌体蛋白凝固变性
2. 分类
有干热灭菌法和湿热灭菌法
3.干热灭菌法
焚烧：直接点燃物品或将其置于焚烧炉内，是最彻
底的灭菌方法，用于废弃物品或动物尸体
烧灼：直接用火焰灭菌方法，适用于接种环或试管 的口灭菌
改变细胞膜的通透性，使胞内含物逸出。如表面活
性剂、脂溶剂等
干扰细菌的酶系统及代谢。如重金属类、某些氧化
剂等
二、常用消毒剂种类
醇类：乙醇、异丙醇等，75%的乙醇最常用。 酚类：石碳酸、来苏、氯已定等
重金属类：红汞、硫柳汞、硝酸银等
氧化剂：过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾等
表面活性剂：苯扎溴安、度米芬等
灭菌温度取决于蒸汽压力。
利用高压蒸锅，在103.4kPa蒸汽
下，温度达121.3℃维持15-20分，
可杀死包括芽胞在内的所有微生物。
用于耐高温、耐潮湿物品的消毒。
流通蒸汽消毒法： 利用100 ℃水蒸汽消毒，经15-30
分钟可杀死细菌繁殖体，不能将
芽孢全杀死
间歇蒸汽灭菌法： 反复多次流通蒸汽间歇加热以达 到灭菌目的
用于一次性医用塑料制品或食品的消毒。
微波：利用高频电磁波的热效应灭菌，其热效应具 有一定的穿透性，但不能穿透金属表面。常 用于食品、药品、非金属器械及其他物品的
消毒。
三、滤过除菌法
利用滤菌器的机械性阻挡，除去液体或空气中 的细菌。 主要用于血清、毒素、抗生素、酶制剂等不耐 热的液体及空气等的除菌。
细菌为单细胞生物，其生长极易受外界环境 因素的影响。采用物理、化学或生物学方法可抑 制或杀死环境中的病原微生物。
消毒
disinfection
杀死物体上病原微生物的方法,并不一定
能杀死芽胞或非病原微生物
杀死物体上的所有微生物
灭菌
sterilization
无菌
asepsis
不含活菌
无菌操作
防腐
antisepsis
干烤：利用干烤箱，加热160-180℃ 2小时，用于
高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。
4. 湿热灭菌法
巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的特定 微生物。用于牛奶、啤酒等消毒
煮沸消毒法：100℃水煮5分钟(繁殖体)-2小时(芽胞) 用于餐具和小手术刀剪的消毒
高压蒸汽灭菌法
医学上最常用最有效的灭菌方法。
常用浓度
有效氯量25mg/L 0.2%-0.5% 2% 2.5% 2% 75% 0.4%-1.6% 0.1% 饮水
适用范围
皮肤、物体表面、空气 医疗器械 皮肤、黏膜、物体表面 皮肤、黏膜、物体表面 医疗器械、皮肤 皮肤、黏膜、物体表面 皮肤、黏膜、食具、蔬菜等
五、影响消毒剂作用的因素
种类
数量
消毒剂
应的操作实验室？
预习：
噬 菌 体