土霉素生产工艺实训实验报告
土霉素生产车间提炼工段工艺设计
科研训练论文(文献综述)（题目：土霉素生产车间提炼工段工艺设计****：***学号：201220515013学院：化工学院班级：制药工程专业（2）班2015年12月土霉素生产车间提炼工段工艺设计宋世骏指导教师：陈秋月内蒙古工业大学化工学院，呼和浩特，010051摘要：土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Oxytetracycline），土霉素属四环素类抗生素，为广谱抑菌剂，许多立克次体属、支原体属、衣原体属、螺旋体对本品敏感。
肠球菌属对其耐药。
其他如放线菌属、炭疽杆菌、单核细胞增多性李斯特菌、梭状芽孢杆菌、奴卡菌属、弧菌、布鲁菌属、弯曲杆菌、耶尔森菌等对本品亦较敏感。
土霉素是一种广谱类抗生素，有一定副作用，多年来由于土霉素和四环素类的广泛应用,临床常见病原菌对土霉素素耐药现象严重，包括葡萄球菌等革兰阳性菌及多数革兰阴性杆菌。
目前，中国已成为世界上最大的土霉素生产国，尤其对畜用土霉素需求很大。
到目前为止，提纯土霉素的方法有很多，在生产工艺中通过酸化、脱色、结晶、重结晶以及应用超滤-纳滤技术都可得到纯度较高的土霉素产品。
本次设计为1600t/a土霉素提炼工段工艺设计；本文主要讲述土霉素在工厂车间里生产的过程，着重讲述提炼工段的土霉素工艺设计，以及对各类提炼方法的对比及应用。
关键词：抗生素；生产工艺；物料流程；提炼引言：（一）土霉素简介1、中文名称：土霉素[1]2、英文名称：Oxytetracycline3、分子式：C22H24N2O94、分子量：460.435、结构式：6、外观性状土霉素又名氧四环素，为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是180℃，在日光下颜色变暗在碱性溶液中易破坏失效。
土霉素盐酸盐为黄色结晶，味苦，熔点190～194℃，有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期保存不变质，不失效。
盐酸盐易溶于水，溶于甲醇，微溶于无水乙醇，不溶于三氯甲烷和乙醚，在酸性条件下不稳定。
（二）土霉素生产与提炼土霉素生产由发酵工段、酸化过滤、脱色结晶、离心干燥工段工艺组成，因为在土霉素发酵过程中产生大部分有机副产物，如色素、蛋白质等，所以需要对土霉素发酵液进行处理。
土霉素生产工艺
土霉素生产工艺摘要：目的：土霉素生产工艺的概述。
方法：土霉素提取工艺是通过黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品。
关键词：生产工艺；土霉素；黄血盐-硫酸锌1 土霉素概述土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Terramycin Oxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染﹑胃肠道感染﹑斑疹伤寒等，现今主要用于畜禽药及饲料添加剂。
土霉素是一个典型的利用生物工程技术生产的产品，生产工艺涉及种子培养、发酵、提取、过滤、脱色、结晶、离心和干燥等重要的单元操作和工程概念。
1.1 土霉素简介1.1.1 名称与化学结构式中文名：土霉素英文名：OXYtetracycline化学名：(4s,4аR，5S，5аR，6S，12аS）-N-4-二甲胺基-1，4，4а，5，5а，6，11，12а-八氢，5, 6，10，12，12а- 六羟基-6-甲基-1，11-二氧代并四苯-2-甲酰胺。
分子式：C22H24N2O9 相对分子质量：460.581.1.2 性状与理化性质[1]土霉素又名氧四环素，为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是180℃，在日光下颜色变暗在碱性溶液中易破坏失效。
土霉素盐酸盐为黄色结晶，味苦，熔点190～194℃，有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期保存不变质，不失效。
盐酸盐易溶于水，溶于甲醇，微溶于无水乙醇，不溶于三氯甲烷和乙醚，在酸性条件下不稳定。
添加到饲料中，在室温下保存四个月，效价下降4%～9%，制粒时效价下降5%～7%。
1.2土霉素生产菌种土霉素是由放线菌（龟裂链霉菌）所产生的抗生素。
土霉素钙盐是发酵培养液中入碳酸钙，经过滤，干燥而制得。
2 土霉素生产工艺2.1土霉素的生产工艺流程概述土霉素生产工艺主要分为：发酵、酸化过滤、脱色结晶、离心干燥四个阶段。
土霉素生产工艺
2.3.1.1酸化剂的选择酸化剂一般可采用盐酸、硫酸、草酸、磷酸等，但根据土霉素滤液质量的要求，若滤液中有钙离子存在，则对直接沉淀是否完全有一定的影响，通过生产实践认为采用草酸作酸化剂较好。
因为草酸去钙较完全，析出的草酸钙还能促进蛋白质的凝结，提高滤液质量。
草酸属于弱酸，比盐酸、硫酸等对设备腐蚀性较小，但其价格较贵，并可促使差向土霉素等异构物的产生。
在采用草酸作酸化剂时，必须降低温度，要求15℃以下，尽量缩短操作时间，避免或减少差向异构化。
在有条件的情况下，应进行草酸回收工作。
鉴于以上因素，酸化剂采用草酸和盐酸。
高纯度土霉素碱生产工艺研究
高纯度土霉素碱生产工艺研究土霉素是通过生物合成得到的广谱抗生素，目前国内土霉素提取工艺为用草酸(或磷酸)做酸化剂调节pH值，利用黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用122树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品［1］。
此工艺在生产中一直沿用至今，产品的收率偏低，纯度仅为96%～97%。
因此如何提高土霉素质量，是一些土霉素生产厂面临的新课题。
注射用土霉素碱对纯度和热原有一定的要求。
粗土霉素碱重结晶可提高其纯度，但幅度不大，加入净化剂K2Fe(CN)6-ZnSO4形成K2Zn3［Fe(CN)6］2胶状沉淀，可吸附土霉素溶液中的蛋白质等杂质［2］。
超滤是公认的去除热原比较理想的方法［3］，同时还可去除在滤液中呈分散状态的“溶解性”大分子杂质，进一步纯化滤液［4，5］。
因此，我们将粗土霉素碱酸溶，加净化剂净化，经超滤去除热原及杂质，然后重结晶的高纯度注射用土霉素生产工艺，结果令人满意。
1 材料和方法1.1 材料粗土霉素碱取自某土霉素生产厂，实验用试剂均为工业级，分析用试剂为分析纯。
超滤膜为HFPS10、HFPS20实验用中空纤维膜组件。
1.2 方法实验流程如图1所示。
用PHS-25型酸度计测量pH值；752紫外分光光度计测量345nm透光率，430、490nm杂质吸收度；用HPLC测定土霉素碱纯度；用动物实验法做产品热原实验。
超滤每次处理净化液约5000ml，并于浓缩5倍时开始渗滤，得约8000ml超滤液，超滤过程土霉素收率为98.2%。
2 结果与讨论2.1 粗土霉素碱的溶解与净化用稀盐酸调节pH值，使150g粗碱溶于5000ml水中，搅拌加入K 2Fe(CN)6-ZnSO4(1∶1，w/w)，溶液中出现大量兰绿色絮状物，抽滤得净化滤液。
将该滤液分为两部分：一部分直接调pH值4.8，结晶得土霉素成品(Ⅰ)；另一部分超滤后再调pH值4.8，结晶得土霉素成品(Ⅱ)。
土霉素的生产工艺土霉素的生产工艺
土霉素的生产工艺吴扬（湖南科技学院生命科学与化学工程系, 湖南永州 425100）摘要：目的：土霉素生产工艺的概述。
方法：土霉素提取工艺是通过黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用122-2树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品。
关键词：生产工艺，土霉素，黄血盐-硫酸锌Strain Of The Production CraftWU Yang(Life science and Chemical Engineering Department of Hunan University of Science and Engineering,Yongzhou Hunan 425100) Abstract:objective: to strain of production process. Methods: by huang extraction process strain as blood salt - zinc sulfate purification such as protein remove impurities in coordination with polymer and 122-2 resin decoloring further purification strain, adjustable pH filtrate to get around4.8 crystallization. Strain alkali.Keywords:production craft, Strain, Yellow prussiate - zinc sulfate1 土霉素概述土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Terramycin Oxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染﹑胃肠道感染﹑斑疹伤寒等，现今主要用于畜禽药及饲料添加剂。
综合实验2：土霉素的发酵
综合实验2：土霉素摇瓶发酵实验一、实验目的1、 熟悉放线菌的微生物学特性及培养方法2、 了解和掌握种子制备和摇瓶发酵技术和方法3、 了解抗生素发酵的一般规律和代谢调控理论4、 熟悉和掌握常用的比色分析方法的操作技术二、实验原理土霉素是四环类抗生素，其在结构上含有四并苯的基本母核，随环上取代基的不同或位置的不同而构成不同种类的四环素类抗生素。
其结构和命名如图。
R 1 R 2 R 3 R 4 R 5 土霉素 H OH CH 3 OH H 四环素 H OH CH 3 H H 金霉素 Cl OH CH 3 H H 去甲基金霉素 Cl OH H H H 多西环素 H H CH 3 OH H 米诺环素 N(CH 3)2 H H H H美他环素H =CH 2OHCH 2(NH)CH(COOH)(CH 2)4NH 2土霉素具有广谱抗菌性，能抑制多种细菌、较大的病毒及一部分原虫。
土霉素能抑制细菌的生长，在浓度高的时候也具有杀菌的作用。
它的作用机制是干扰蛋白质的合成。
由于它的毒副作用小，所以其在医疗上用途广泛，主要是应用于呼吸道和肠道感染。
土霉素是由龟裂链丝菌产生的，属于放线菌中的链霉菌属，它们具有发育良好的菌丝体，菌丝体分支，无隔膜，直径约0.4～1.0米，长短不一，多核。
菌丝体有营养菌丝、气生菌丝3N2H R 5C H 3 41和孢子丝之分，孢子丝再形成分生孢子。
而龟裂链丝菌的菌落灰白色，后期生褶皱，成龟裂状。
菌丝成树枝分支，白色，孢子灰白色，柱形。
龟裂链丝菌的菌落形态显微镜观察的菌丝特征土霉素是典型的次级代谢产物，其发酵的特点之一就是分批过程分为菌体的生长期、产物期和菌体期三个阶段。
龟裂链丝菌的生长和土霉素的生物合成受到许多发酵条件的影响：温度、发酵pH值、溶氧、接种量、泡沫等。
同时还受到一些代谢调控机制的控制：磷酸盐的调节作用、ATP的调节和产生菌生长速率的调节等。
三、仪器与材料（一）培养基1、斜面高氏一号培养基可溶性淀粉2% 氯化钠0.05% 硝酸钾0.1% 三水磷酸氢二钾0.05%七水硫酸镁0.05% 七水硫酸亚铁0.001% 琼脂1.5%-2.0% pH：7.4-7.62、种子培养基淀粉3% 黄豆饼粉0.3% 硫酸铵0.4% 碳酸钙0.5% 玉米浆0.4% 氯化钠0.5% 磷酸二氢钾0.015% pH：7.0-7.23、发酵培养基淀粉15% 黄豆饼粉2% 硫酸铵1.4% 碳酸钙1.4% 氯化钠0.4% 玉米浆0.4% 磷酸二氢钾0.01% 氯化钴10µg/ml 消沫剂0.01% 淀粉酶0.1%-0.2% pH：7.0-7.2（二）实验菌种：龟裂链丝菌（购于广东省微生物研究所）（三）仪器：玻璃试管、试管架、吸管（1ml，2ml，10ml）、吸耳球、离心管、容量瓶、烧杯、三角瓶（250 ml，500ml）、量筒（250ml，500ml，1000ml）、玻璃棒、试纸、塑料漏斗、电炉、接种铲（针）、振荡培养箱、恒温箱、台秤等四、实验步骤1．斜面孢子的制备无菌条件下，从冷藏的产生菌的斜面孢子中，刮取适量孢子涂在高氏斜面上，然后置36.5～37℃的恒温箱培养3天，再置30℃的恒温室培养1天。
毕业论文--土霉素的生产工艺
字夏职业技术修配毕业论文（设计）题目土霍素的生产工艺学生姓名 __________学号0701080221院系生物技术与制药专业生物制药指导教师赵晓红_______________二o—一年四月二十日土霉素的生产工艺赵刚宁夏职业技术学院制药专业宁夏银川750001摘要：目的：土霉素生产工艺的概述。
方法：土霉素提取工艺是通过黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用122-2树脂脱色进一步净化土篝素滤液，最后调pH 至4. 8左右结晶得到土雰素碱产品。
关键词：生产工艺；土霉素；黄血盐-硫酸锌1 土霉素概述土霉素乂称为地霉素或氧四环素，英文名称(TerramycinOxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染、胃肠道感染、斑疹伤寒等，现今主要用于畜禽药及饲料添加剂。
土霉素是一个典型的利用生物工程技术生产的产品，生产工艺涉及种子培养、发酵、提取、过滤、脱色、结晶、离心和干燥等重要的单元操作和工程概念，通过对联邦制药(内蒙古)有限责任公司土霉素的生产工艺的实习，可以提高理论联系实际与综合应用所学知识的能力。
1.1土霉素简介1.1.1名称与化学结构式中文名：土霉素英文名:OXYtetracycline化学名：(4s,4aR, 5S, 5aR, 6S, 12aS) -NT-二甲胺基-1, 4, 4a, 5, 5a, 6, 11, 12a- 八氢，5, 6, 10, 12, 12a-六羟基-6-屮基-1, 11-二氧代并四苯-2-甲酰胺。
分子式：C22H24N209相对分子质量:460.581.1. 2性状与理化性质土霉素乂名氧四环素，为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是180°C,在日光下颜色［结晶］ 结晶液［干燥］变暗在碱性溶液中易破坏失效。
土霉素盐酸盐为黃色结晶，味苦，熔点190〜194C, 有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期保存不变质，不失效。
土霉素提取工艺的研究
土霉素提取工艺的研究内蒙古工业大学化工学院，呼和浩特，010051摘要：土霉素是利用生物合成的一种广谱抗生素，对多种球菌、杆菌和立克次体也都有一定的抑制作用。
土霉素可以用来治疗痢疾、沙眼、结膜炎、肺炎、中耳炎、皮肤化脓感染等多种病发症。
土霉素的提取工艺有很多种，最常用的有：（1）传统的提取方法，包括鼓式过滤、离心过滤和板框过滤等；（2）液膜萃取技术，对脱除土霉素后的废水进行处理，可回收到有用的土霉素，降低了处理成本；（3）膜分离技术，其在提高产品质量、简化发酵生产工艺和开发新产品等方面显示出卓越的优越性；（4）微波提取技术，基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分因其吸收微波能力的差异而被选择性加热，因而导致物质内部产生一定的能量差或势能差，进而让萃取物质因得到足够的动力而从体系或基体中被分离出来。
关键词：土霉素、提取、萃取引言从上世纪八十年代开始，土霉素的市场占有率就开始逐渐下滑，许多的药企先后都放弃了对土霉素的生产，然而在上世纪六十至七十年代，土霉素在我国抗菌药市场上占据重要地位。
多年来，土霉素大量应用于畜禽药及饲料添加剂。
土霉素原料药之所以在市场竞争中占据优势地位的原因是其价格低廉，由于我国目前仍为发展中的国家，市场对产品的价格十分敏感，低价产品的市场销路较好，在众多抗生素品种中，价格低廉的土霉素将会长期在我国大量应用于畜禽用药及饲料添加剂中。
由于价格以及特殊的性质，我们可以通过优化生产工艺来进一步降低成本，提高市场份额。
因此，研究其生产工艺也势在必行。
一、传统的提取方法目前国内用生物合成的方法来制备土霉素的主要方法为，用草酸或磷酸做酸化剂来调节pH ，用黄血盐-硫酸锌作为净化剂协同其发挥，用122树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH 至4.8左右结晶得到土霉素碱产品[]1。
该工艺一直在生产中沿用至今，但是缺点却很多。
比如：产品的收率偏低，结晶过程流失较大，土霉素结晶母液中其浓度仅为μg/ml 1500~1000,其纯度仅为%97~%96，所含杂质较多。
土霉素的生产工艺土霉素的生产工艺
土霉素的生产工艺吴扬（湖南科技学院生命科学与化学工程系, 湖南永州 425100）摘要：目的：土霉素生产工艺的概述。
方法：土霉素提取工艺是通过黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用122-2树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品。
关键词：生产工艺，土霉素，黄血盐-硫酸锌Strain Of The Production CraftWU Yang(Life science and Chemical Engineering Department of Hunan University of Science and Engineering,Yongzhou Hunan 425100) Abstract:objective: to strain of production process. Methods: by huang extraction process strain as blood salt - zinc sulfate purification such as protein remove impurities in coordination with polymer and 122-2 resin decoloring further purification strain, adjustable pH filtrate to get around4.8 crystallization. Strain alkali.Keywords:production craft, Strain, Yellow prussiate - zinc sulfate1 土霉素概述土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Terramycin Oxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染﹑胃肠道感染﹑斑疹伤寒等，现今主要用于畜禽药及饲料添加剂。
土霉素作业
目录绪论：.................................. 错误！未定义书签。
1 产品简介........................................... - 3 -1.1、土霉素的简介................................. - 3 -1.2 土霉素生产工艺流程............................ - 4 -2 设备型号........................................... - 4 -3 实验过程........................................... -4 -3. 1斜面孢子的制备：.............................. - 4 -3.2 种子培养基的制备与灭菌：...................... - 5 -3.3 发酵培养基的配制与灭菌：...................... - 6 -3.4 发酵：........................................ - 6 -3.5 测定前发酵样品预处理：........................ - 6 -3.6 土霉素酸化液的发酵提取：...................... - 7 -3.7 122#树脂预处理方法：........................... - 7 -3.8 结晶、干燥及效价的测定：...................... - 8 -4 后续处理........................................... - 8 -5 小组讨论........................................... - 8 -6 实验数据........................................... - 8 -6.1 OD值的测量................................... - 9 -6.2 绘制图像..................................... - 9 -7 参考文献........................................... - 9 -土霉素生产工艺流程本次设计主要涉及到土霉素发酵生产的具体工艺流程，分为三级发酵、过滤、脱色、结晶、干燥等。
土霉素
（土霉素生产工艺实训实验报告姓 名： 徐泽波 班 级： 生物07-1 学 号： 200710513065 指导教师： 张欣学校代码： 10128专 业： 生物工程目录第一章绪论 (3)1.1 土霉素简介 (3)1.2 实验的目的、要求与过程 (3)第二章设备型号 (4)第三章实验过程 (5)3.1种子培养基的制备与灭菌 (5)3.2发酵培养基的制备与灭菌 (5)3.3发酵 (6)3.4测定前发酵样品预处理： (6)3.5土霉素发酵液的酸化提取 (6)3.6树脂预处理方法： (7)3.7结晶与干燥 (7)3.8标准曲线的绘制： (8)3.9．标准曲线的绘制： (9)第四章讨论 (10)4.1实验数据 (10)4.2实验心得 (10)参考文献 (11)第一章 绪论一、土霉素的简介土霉素是四环类抗生素，其在结构上含有四并苯的基本母核，随环上取代基的不同或位置的不同而构成不同种类的四环素类抗生素。
其结构和命名如图。
土霉素是由龟裂链丝菌产生的，属于放线菌中的链霉菌属，他们具有发育零号的菌丝体，菌丝体分枝捂隔膜，直径约为0.4~1.0米，长短不一，多核。
菌丝体有营养菌丝、气生菌丝和孢子丝之分，孢子丝分化成为分生孢子，而龟裂链丝菌的菌落为灰白色，后期生褶皱，成龟裂状。
土霉素是典型的次级代谢产物，其发酵的特点之一就是分批过程分为菌体的生长期、产物期和菌体期三个阶段。
龟裂链丝菌的生长和土霉素的生物合成受到许多发酵条件的影响：温度、发酵PH 值、溶氧、接种量、泡沫等。
同时还受到一些代谢调控机制的控制，磷酸盐的的调节作用、ATP 的调节和产生菌生长速率的调节等。
二、实验的目的、要求与过程通过专业实训的综合训练我们了解了一种生物产品从上游的菌种培养、发酵工段到下游的提取纯化等工段的完整的生产过程。
实训过程中锻炼了学生的动手与思考能力，同时让学生对土霉素这一生产过程有了充分的认识，为后续的课程设计以及毕业设计打下了良好的基础，减少不必要的错误，是实验更加完善。
土霉素的生产工艺
土霉素的生产工艺土霉素是一种广谱抗生素，也称为青霉素V，它由青霉菌产生。
土霉素具有抑制细菌细胞壁合成的作用，因此广泛应用于医药领域。
以下将介绍土霉素的生产工艺。
1. 发酵培养土霉素的生产始于培养土霉菌株。
首先，选取高产土霉素的菌株作为发酵菌株，经过预培养后，将其接种到大型发酵罐中。
发酵条件包括温度、pH值、氧气供应和搅拌速度等。
在适宜的条件下培养菌株，使其生长和产生土霉素。
2. 沉淀发酵培养物经过一段时间后，土霉菌会产生土霉素，并进入培养液中。
此时，需将土霉素与液态培养物分离，常用的分离方法是通过添加沉淀剂如三氯醋酸或硫酸铵等，使土霉素沉淀下来。
3. 分离与精制沉淀的土霉素与液态培养物分离后，可以通过离心或过滤等方法去除沉淀物和杂质。
接下来，采用溶剂萃取、结晶等方法进行进一步精制。
先用适当的有机溶剂（如醇、醚）萃取土霉素，去除溶液中的不纯物质。
然后，通过结晶方法进一步提纯土霉素，得到高纯度的产品。
4. 干燥经过精制的土霉素溶液需要进行干燥处理，以获得干燥的土霉素产品。
常用的干燥方法包括喷雾干燥、真空干燥和热风干燥等。
这些方法可以将土霉素溶液中的水分蒸发，使其形成颗粒状或块状产品。
5. 包装与贮存最后，将干燥的土霉素产品进行包装和贮存。
一般采用密封的塑料袋、铝箔袋或瓶装等方式进行包装，以避免土霉素的氧化和受到湿气的影响。
包装后的土霉素产品需要存放在干燥、阴凉的地方，避免阳光直射。
以上是土霉素的生产工艺。
这个工艺涉及到发酵、沉淀、分离与精制、干燥以及包装与贮存等多个步骤。
通过科学合理的操作，可以生产出高纯度的土霉素产品，以满足不同领域的应用需求。
0.125g土霉素片生产工艺验证报告
广东美好制药工艺再验证报告报告名称：土霉素片生产工艺验证报告报告编号：VM-PS-129-201验证项目：各个工序的关键工艺参数、质量及收率是不是稳固可控。
验证时刻：起草人：起草日期：审核人：审核日期：批准人：批准日期：土霉素片生产工艺验证报告1 概述：本报告所执行的验证方案是“土霉素片生产工艺验证方案（VM-PS-129-101）”。
验证的目的是验证本生产工艺进行稳固性和可控性，验证进程进展顺利，实施程序内容均按方案执行。
验证时刻：验证批号：2 验证进程及结果标准成品质量标准土霉素片查验项目及质量指标半成品质量标准土霉素片中间体查验项目及质量指标验证明施年月在口服固体制剂车间进行了三批土霉素片生产。
具体内容见土霉素片批生产记录（批号：、、共三批）3 验证方式及要求工艺流程图：见附录1（土霉素片生产工艺流程图）批量：＜550kg。
处方及工艺：物料名称处方土霉素折纯含量淀粉硬脂酸镁滑石粉干淀粉10％淀粉浆制粒原辅料重量40％左右制成 10000片验证实验数据记录验证项目制粒工序参数（表1）表1 制粒工序参数操作人：复核人：日期：结论：。
3. 总混3.5.2.1目的：验证按生产操作规程规定的转速和总混时刻是不是合理。
.2 实验条件：设定多项动运三维混合机转速5转/分钟。
3.3 评估项目：含量、均匀性。
3.4 取样方式：混合时刻为30分钟取样；取样方式：每批在多项动运三维混合机物料中，用采样器取不同深度的5个点， 1次取样共获5个样品，按法定标准方式检测含量。
3.5.2.5 同意标准：查验颗粒目测颗粒颜色均匀、水分≤%之间,颗粒含量%～%而且同一混合时刻含量的相对平均标准误差%之内那么混合时刻符合工艺要求。
3.6 验证实验数据记录混合时刻30分钟查验人：复核人：查验日期：复核日期：混合时刻30分钟查验人：复核人：查验日期：复核日期：混合时刻30分钟查验人：复核人：查验日期：复核日期：.7 结论：。
压片3 目的：验证按所设计的参数压片，压出的片子应符合质量标准要求。
30％土霉素注射液制备工艺的研究
30％土霉素注射液制备工艺的研究李双江;刘聚祥【摘要】为开发出优质的30％的土霉素注射液,通过在比较不同溶媒下制剂的性状,筛选最佳溶媒,利用正交试验确定注射液的最佳组方,同时对制剂的添加工艺进行探索.最终得出制备30％土霉素注射液最佳配方为:六水合氯化镁11％,甲醛合次硫酸氢钠0.8％,注射用水5％,二甲基甲酰胺60％,聚乙烯吡咯烷酮K175％.添加工艺为六水合氯化镁和甲醛合次硫酸氢钠溶解于注射用水中,体系中加入有机溶媒,并依次溶解聚乙烯吡咯烷酮K17和盐酸土霉素,最后调pH,灭菌灌装.结果表明,在本试验条件下所得30％土霉素注射液,符合国家兽药标准,性状稳定,价格经济,工艺简单,适合工业化生产.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2018(039)010【总页数】5页(P60-64)【关键词】土霉素;注射液;正交试验;有机溶媒;液相色谱【作者】李双江;刘聚祥【作者单位】河北农业大学动物医学院,河北保定 071000;河北农业大学动物医学院,河北保定 071000【正文语种】中文【中图分类】S852.796土霉素(oxytetracycline，OTC)属于四环素类广谱抗生素，通过抑制细菌肽链的增长，影响蛋白质的合成而达到抑菌杀菌效果[1]，同时也对附红细胞体、支原体立克次氏体及血液原虫和梨形虫等感染有特殊功效[2]。
临床上一般使用土霉素的盐酸盐，即盐酸土霉素，盐酸土霉素呈淡黄色粉末状，按照土霉素的传统用法口服给药，不仅给药剂量大，扰乱正常的肠道菌群，造成各种副作用，而且由于病畜的吸收不完全、排泄物等造成严重的环境污染[3-4]。
土霉素注射液最早是由美国辉瑞制药公司开发研制。
近年来，农业部也审批了10%和20%两种规格的土霉素注射液，但在考察实际应用中，还存在诸多问题[5]。
在低温环境下，土霉素注射液的黏稠度高，使实际生产环节中过滤灭菌工艺无法顺利进行，并且在临床使用时不宜注射。
而在高温条件下，注射液中有效成分不稳定，盐酸土霉素容易发生开环裂解，活性成分遭到不可逆的破坏。
土霉素 制备
土霉素制备
土霉素是一种广谱抗生素，其制备方法如下：
1. 纯化土霉菌。
首先，从土壤样品中分离出土霉菌，然后通过培养和筛选的方法，选择出高产土霉素的菌株。
随后，通过传代培养和保藏，制备大量的土霉菌菌种。
2. 发酵培养。
将所选的土霉菌菌种接种到发酵培养基中，进行液体发酵。
发酵培养基的配方通常包括碳源、氮源、矿物盐和一些辅助添加剂，以促进土霉菌的生长和土霉素的合成。
3. 提取土霉素。
在发酵结束后，通过离心等方法将菌体与发酵液分离。
然后，使用有机溶剂如乙酸乙酯或甲醇来提取土霉素。
提取液经过过滤和浓缩后，得到土霉素的混合物。
4. 纯化土霉素。
通过色谱技术如薄层层析、柱层析和高效液相色谱等，对土霉素混合物进行分离和纯化。
从中得到纯度较高的土霉素。
5. 结晶和干燥。
将纯化的土霉素溶解在适当的溶剂中，然后通过结晶和干燥的方式得到土霉素的晶体。
6. 包装和储存。
将土霉素晶体进行包装并密封，然后存放在干燥、阴凉的地方，避免光照和高温，以保持其稳定性和活性。
这是一种常见的土霉素制备方法，具体的配方和步骤可以根据实验需求进行调整和优化。
模版0
（二 零 一 二 年 六 月本科毕业设计说明书 题 目：800 t/a 土霉素生产车间脱色结晶（间歇）干燥工段工艺设计 学生姓名：赵 东 辉 学 院：化工学院 系 别：化学工程系 专 业：制药工程 班 级：制药工程08-1班 指导教师：竺宁 讲师摘要土霉素生产过程包括发酵、酸化、过滤、脱色、结晶、干燥几个主要工段。
本次设计为800 t/a土霉素生产车间脱色、结晶（间歇）、干燥工段的设计。
对土霉素的生产工艺过程进行了物料衡算和热量衡算，进而进行了设备选型，最终绘制了物料流程图，工艺管道及仪表流程图，设备的平、立面布置。
发酵工段需要一级发酵、二级发酵和三级发酵得到发酵液，然后经过盐酸的酸化后再经过板框过滤机过滤进行脱色、结晶、干燥制成成品。
本次设计任务的主要工段是脱色、结晶和干燥。
脱色装置采用大孔交换树脂进行三组3罐脱色；结晶过程可采用间歇和连续结晶两种，结晶关系到产品的分离和提纯，本次设计选择间歇结晶的方法。
结晶后将结晶液通入离心机中进行离心处理，最后将离心处理后所得的湿物料通入到干燥车间进行干燥，生产出合格的产品。
关键词：土霉素；脱色；结晶；干燥AbstractThe several major public paragraphs including fermentation, acidification, filters, discoloring, the crystallization and dry in oxytetracycline production process. This design is that the public paragraph of discoloring and crystallization of oxytetracycline production workshop of 350t/a. Doing material accountancy and heat balance and for the production process of oxytetracycline. We determine the site selection and equipment selection and so on by calculating. Finally we draw the material flow chart, process piping and flow chart meters, equipment list and the level, facade layout of the workshop equipment.After the first fermentation, secondary fermentation and third fermentation develop cracks fermentation liquor, then after the acidification hydrochloric acid it is filter into the frame, and decolorization conducted, crystal, dry and the finally manufacturing the finished products. The main section is decolorization and crystallization in this design. Used the decolorization devices of large-exchange resins to group 3 . There are two kind of crystal ways, the first one is crystal intermittent and the second one is continuous crystallization. Crystallization related to separation and purification of products, we used the continuous crystallization in this design. Put the liquid crystal centrifugalde into the centrifuge after the crystal. Finally we will obtain the wet materials after centrifugalde dryde into the drying workshop, and finally we product the qualified products.Keywords: oxytetracycline, decoloring, crystallization目录引言 (1)第一章产品概述 (2)1.1产品名称、结构及性质 (2)1.2药理作用 (2)1.3主要用途 (3)第二章土霉素生产工艺流程 (4)2.1设计依据 (4)2.2设计的指导思想和设计基本原则 (4)2.2.1指导思想 (4)2.2.2基本原则 (4)2.3工艺流程图 (4)2.4土霉素主要工艺流程及要求 (5)2.4.1土霉素发酵工段 (5)2.4.2提炼工段 (6)2.4.3脱色、结晶、干燥工段 (6)第三章物料衡算 (7)3.1 物料衡算依据 (7)3.2发酵工段 (7)3.2.1一级种子培养 (7)3.2.2二级种子培养 (8)3.2.3三级发酵 (9)3.3酸化工段 (11)3.4过滤工段 (12)3.5脱色工段 (14)3.6结晶工段 (15)3.7干燥工段 (17)第四章热量衡算 (18)4.1热量衡算的目的 (18)4.2热量衡算的依据及必要条件 (19)4.3热量衡算主要的计算公式 (19)4.3.1设备的热量平衡方程式 (19)4.3.2比热容的计算 (20)4.3.3化合物比热容 (21)4.3.4其它各温度下化合物的比热容 (21)4.4基本数据的计算 (22)4.5热量计算 (24)4.5.1一级种子罐 (24)4.5.2二级种子罐 (28)4.5.3三级发酵罐 (32)4.5.4补料罐 (35)4.5.5干燥工段 (39)第五章设备选型及计算 (41)5.1 发酵罐的选型 (41)5.1.1一级种子罐的选型 (41)5.1.2 二级种子罐的选型 (42)5.1.3 三级种子罐的选型 (43)5.2补料罐的选型 (46)5.3 酸化罐的选型 (48)5.4 树脂罐的选型 (49)5.5 结晶罐的选型 (50)6.6离心机的选型 (50)5.6干燥器的选型 (51)第 6 章车间布置设计 (57)6.1车间布置概述 (57)6.2车间组成 (57)6.3车间区域和工艺设备布置原则 (57)6.4厂房平面布置 (57)6.4厂房垂直布置 (57)第七章三废处理 (58)7.1三废的概述 (58)7.2三废的处理原则 (58)7.3土霉素废水处理 (58)7.4土霉素废气处理 (58)7.5土霉素废渣处理 (59)结论 (60)参考文献 (61)谢辞 (62)引言土霉素为抗生素类药物，广谱抑菌剂，用于痢疾、斑疹伤寒、沙眼、结膜炎、肺炎、中耳炎、疖疮及皮肤化脓感染等。
土霉素生产工艺实训实验报告
土霉素生产工艺（实训实验报告姓名：班级：生物学号：指导教师：目录第一章绪论 (2)1.1土霉素的简介 (2)1.2实验的目的、要求与过程 (2)第二章设备型号 (4)第三章操作步骤 (5)3. 1斜面孢子的制备 (5)3.2 种子培养基的制备与灭菌 (5)3.3 发酵培养基的配制与灭菌 (6)3.4 发酵 (6)3.5 测定前发酵样品预处理 (6)3.6 土霉素酸化液的发酵提取 (6)3.6.1原理 (7)3.6.2酸化提取方法 (7)3.7 122#树脂预处理方法 (7)3.8结晶与干燥 (8)3.9 相关数据的测定 (9)3.9.1 pH的测定 (9)3.9.2发酵液效价的测定 (9)3.10 标准曲线的绘制 (10)第四章讨论 (11)参考文献 (12)第一章 绪论1.1土霉素的简介土霉素是四环类抗生素，其在结构上含有四并苯的基本母核，随环上取代基的不同或位置的不同而构成不同种类的四环素类抗生素。
其结构和命名如图。
土霉素是由龟裂链丝菌（S. rimosus ）产生的，属于放线菌中的链霉菌属，他们具有发育零号的菌丝体，菌丝体分枝捂隔膜，直径约为0.4~1.0米，长短不一，多核。
菌丝体有营养菌丝、气生菌丝和孢子丝之分，孢子丝分化成为分生孢子，而龟裂链丝菌的菌落为灰白色，后期生褶皱，成龟裂状。
土霉素是典型的次级代谢产物，其发酵的特点之一就是分批过程分为菌体的生长期、产物期和菌体期三个阶段。
龟裂链丝菌的生长和土霉素的生物合成受到许多发酵条件的影响：温度、发酵PH 值、溶氧、接种量、泡沫等。
同时还受到一些代谢调控机制的控制，磷酸盐的调节作用、ATP 的调节和产生菌生长速率的调节等。
1.2实验的目的、要求与过程通过专业综合训练我们了解了一种生物产品从上游的菌种培养、发酵工段到下游的提取纯化等工段的完整的生产过程。
让学生们理论联系实际，实训过程中锻炼了学生的动手与思考能力，在实践操作中发现问题并利用自己的专业知识解决问题。
土霉素生产工艺
土霉素生产工艺土霉素是一种应用广泛的抗生素，广泛用于动物养殖和人类医药领域。
下面我们来介绍一下土霉素的生产工艺。
土霉素的生产主要分为三个步骤：菌种培养、发酵和提取纯化。
首先是菌种培养。
土霉素的生产菌种主要是放线菌属中的遵义土霉菌Streptomyces rimosus，该菌种可以在适宜的环境下生长繁殖，并产生土霉素。
菌种的培养通常是利用一种培养基，包含碳源、氮源、无机盐和其他必需的营养物质。
培养基的制备要根据土霉素菌株的特点进行优化，以提高土霉素的产量。
培养基的酸碱度、温度、通气和搅拌等条件也需要进行控制。
接下来是发酵过程。
菌种培养好后，将其接种到大型发酵罐中进行扩大培养。
发酵罐通常具有一定规模和容积，可以提供充足的氧气和营养物质供菌体生长。
发酵过程需要控制温度、pH值、通气速率和搅拌速度等条件，以促进土霉素菌株的生长和土霉素的产生。
发酵通常持续数天或数周，直到土霉素的产量达到最高峰。
最后是提取纯化。
发酵结束后，需要将土霉素从发酵液中提取出来，并进行纯化。
提取通常是利用溶剂萃取、蒸发浓缩和结晶等方法进行。
首先，用适当的溶剂将土霉素从菌体和其他杂质中提取出来。
然后，通过蒸发浓缩和结晶过程，将土霉素纯化至一定程度。
纯化步骤可以通过多次洗涤、结晶、过滤和干燥等操作进行，以去除杂质和提高土霉素的纯度。
最后得到的土霉素产品可以用于动物养殖或医药领域。
总之，土霉素的生产工艺包括菌种培养、发酵和提取纯化三个步骤。
这个工艺需要控制各种条件，以提高土霉素的产量和纯度。
随着科技的进步，土霉素的生产工艺也在不断改进，以适应市场需求和提高生产效率。
长效土霉素注射液的工艺研究
１．１ 仪器与试剂 仪器 ＬＣ－ １０ＡＴ 高效液相色谱仪 （ 日本岛津公司） ， ＣＬＡＳＳ－ ＶＰ 色谱工作站 （ 日本岛津公司） ， ｐＨＳ－ ３Ｂ 型
ｐＨ 计（ 上海雷磁仪器厂） ． 土霉素对照品（ 威远动物药业提供， 纯度 ９９．２％） ， 土霉素注射液（ 本实验自制， 规格为 １００ｍｌ：２０ｇ） ， 注射
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： Ｌｏｎ－ Ａｃｔｉｎ Ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ；ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ； ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
（ 上接第 ８ 页） 参考文献：
［１］ 孙利霞． Ｍａｐｌｅ 在线性代数中的可视化教学［Ｊ］． 长春师范学院学报， ２００５， ２４（ ５） ： ２８－ ３２． ［２］ 王蕾， 赵燕清， 孙培安， 等． Ｍａｐｌｅ 在级数和广义积分的应用［Ｊ］． 山东科学， ２００７， ２０（ １） ： ６５－ ６８． ［３］ 程瑶， 李扬， 李世奇． 基于 Ｍａｐｌｅ 的原根及本原多项式的计算［Ｊ］． 重庆师范学院学报， ２００５， ２２（ ２） ： ２７－ ２９． ［４］ 同济大学应用数学系． 高等数学（ 上册） （ 第五版） ［Ｍ］． 北京： 高等教育出版社， ２００２． ［５］ 洪维恩． 数学魔法师 Ｍａｐｌｅ ６［Ｍ］． 北京： 人民邮电出版社， ２００１．
石家庄学院学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ｖｏｌ．９， Ｎｏ．６ Ｎｏｖ．２００７
长效土霉素注射液的工艺研究
李 晶， 常 明， 常永芳， 牟 薇， 任 蕾
（ 石家庄学院 化工学院， 河北 石家庄 ０５００３５）
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
土霉素生产工艺（实训实验报告姓名：班级：生物学号：指导教师：目录第一章绪论 (2)1.1土霉素的简介 (2)1.2实验的目的、要求与过程 (2)第二章设备型号 (4)第三章操作步骤 (5)3. 1斜面孢子的制备 (5)3.2 种子培养基的制备与灭菌 (5)3.3 发酵培养基的配制与灭菌 (6)3.4 发酵 (6)3.5 测定前发酵样品预处理 (6)3.6 土霉素酸化液的发酵提取 (6)3.6.1原理 (7)3.6.2酸化提取方法 (7)3.7 122#树脂预处理方法 (7)3.8结晶与干燥 (8)3.9 相关数据的测定 (9)3.9.1 pH的测定 (9)3.9.2发酵液效价的测定 (9)3.10 标准曲线的绘制 (10)第四章讨论 (11)参考文献 (12)第一章 绪论1.1土霉素的简介土霉素是四环类抗生素，其在结构上含有四并苯的基本母核，随环上取代基的不同或位置的不同而构成不同种类的四环素类抗生素。
其结构和命名如图。
土霉素是由龟裂链丝菌（S. rimosus ）产生的，属于放线菌中的链霉菌属，他们具有发育零号的菌丝体，菌丝体分枝捂隔膜，直径约为0.4~1.0米，长短不一，多核。
菌丝体有营养菌丝、气生菌丝和孢子丝之分，孢子丝分化成为分生孢子，而龟裂链丝菌的菌落为灰白色，后期生褶皱，成龟裂状。
土霉素是典型的次级代谢产物，其发酵的特点之一就是分批过程分为菌体的生长期、产物期和菌体期三个阶段。
龟裂链丝菌的生长和土霉素的生物合成受到许多发酵条件的影响：温度、发酵PH 值、溶氧、接种量、泡沫等。
同时还受到一些代谢调控机制的控制，磷酸盐的调节作用、ATP 的调节和产生菌生长速率的调节等。
1.2实验的目的、要求与过程通过专业综合训练我们了解了一种生物产品从上游的菌种培养、发酵工段到下游的提取纯化等工段的完整的生产过程。
让学生们理论联系实际，实训过程中锻炼了学生的动手与思考能力，在实践操作中发现问题并利用自己的专业知识解决问题。
同时让学生对土霉素这一生产过程有了充分的认识，为后续的课程设计以及毕业设计打下了良好的基础，减少不必要的错误，使实验更加完善。
实训要求我们掌握土霉素生产的工艺流程，掌握分批发酵的原理，熟悉发酵罐的灭菌与使用方法；观察并记录上罐发酵过程中菌体的生长变化；掌握土霉素提取结晶等工艺的原理及操作步骤；掌握土霉素效价的测定原理及方法。
实训按照土霉素的生产工艺流程进行，首先进行培养基的配制及灭菌，然3N2H R 5C H 3 41后菌种培养并开始发酵，最后对发酵液处理以及测定产品的效价。
由于实训时间要进行一周左右，并且实验设备有限，所以我们分组进行实验，彼此间分工合作，相互协调。
发酵过程中需要在一定时间内进行OD值的测定以及观察发酵罐的工作情况，我们小组每个人都积极参与，以保证实训顺利地完成。
第二章设备型号第三章操作步骤3. 1斜面孢子的制备无菌条件下，从冷藏的龟裂链丝菌（S. rimosus）的斜面孢子中，刮取适量孢子涂在PD（马铃薯培养基）斜面上，然后置30℃的恒温培养3天。
我们采用马铃薯葡萄糖（PD）培养基制作固体试管斜面，它是一种常用培养基，其做法是称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试验，每试管约5-10ml（视试管大小而定）马铃薯葡萄糖琼脂（PD）培养基配方表PD培养基的灭菌条件：在高压蒸汽灭菌锅内保持121℃,0.14MPa下，20分钟即可。
种子斜面：无菌条件下，从冷藏的产生菌的斜面孢子中刮取适量孢子涂在试管斜面上，然后置28-30℃的恒温箱培养3天。
传代两次，每次接种前挑选长势较好的孢子进行后面的接种，就可以得到较为强壮、优秀的孢子。
3.2 种子培养基的制备与灭菌种子培养基配方表后在加入一定量的培养基液体，待其不变成紫色，这时液化完全）再加入CaCO3,冷却后调pH值7.0—7.2，分装，包装灭菌。
灭菌条件：在高压蒸汽灭菌锅内保持121℃，0.14Mpa下，20分钟即可。
3.3 发酵培养基的配制与灭菌发酵培养基配方表加稀碘液后在加入一定量的培养基液体，待其不变成紫色，这时液化完全）再加入CaCO3，冷却后调pH值7.0—7.2，分装，包装灭菌。
灭菌条件：在高压蒸汽灭菌锅内保持121℃，0.14Mpa下，20分钟即可。
3.4 发酵发酵液2.5升装入发酵罐，离座灭菌。
接入电源，将已灭菌的发酵培养基通入无菌空气，调整好发酵罐的各类初始参数：温度为30℃、pH6.5、搅拌100r/min、泡沫和消泡剂（豆油）自动调节等。
12小时后观察是否生长杂菌，再将无水乙醇倒入接种口的环槽内，点燃后，进行无菌接种操作，接种量一般为10%。
通气量为1:0.5～1.0vvm,全程用消泡剂消泡，发酵过程通氨，当接种后发酵pH低于6.5时就可以开始通氨，通氨量的多少参考pH值。
要求73小时前pH在6.3～6.6,72～120小时pH在6.2～6.4,120～140小时pH在6.0～6.2。
土霉素的发酵周期约7天，每隔24小时测一次龟裂链丝菌的菌丝浓度，采用721分光光度计在620nm下测发酵液OD值，同时测定土霉素效价。
在菌丝接近自溶期前放罐，得到土霉素发酵液。
3.5 测定前发酵样品预处理发酵瓶摇匀，将少量倒入小烧杯，测pH。
用9mol/L的盐酸溶液酸化pH至1.7～2.0搅拌10分钟，取5ml酸化液至7ml离心管，6000转离心4分钟，取上清液，备测。
3.6 土霉素酸化液的发酵提取3.6.1原理土霉素在发酵过程中，所产生的土霉素积聚在菌丝中的浓度并不高。
因此，对于土霉素发酵液进行处理的主要目的就是让土霉素从菌丝中释放出来，有利于发酵液中，有利于从发酵液中提取土霉素，更能提高土霉素的收率和质量。
土霉素发酵液中预处理首先要进行的操作是酸化，一般用草酸进行酸化。
加入草酸的目的是释放菌丝中的土霉素，同时要保证土霉素的稳定性、成品的质量和提炼成本。
另外，草酸属于弱酸，其对设备的腐蚀性要比盐酸、硫酸小。
采用草酸不仅能使土霉素释放出来并生成溶于水的盐，并且能析出草酸钙沉淀，从而去除发酵液中的钙离子，同时草酸钙能促进蛋白质的凝结，从而提高滤液的质量。
目前，工业提炼的pH值控制在1.6~2.0范围内，pH值过高对单位的释放不利，pH值过低会影响产品的质量，同时会增加产品的成本。
去杂过程采用的净化剂是黄血盐和硫酸锌，前者有利于提取出铁离子，后者有利于凝固蛋白质。
此外，两者的协同可以产生复盐，对蛋白质有效应除去蛋白质，同时除去铁离子。
3.6.2酸化提取方法取200ml发酵液，边搅拌，边加入黄血盐、硫酸锌，并加入草酸酸化发酵液，草酸的量通过用酸度计测其pH值来确定，调到所需pH=1.75后，搅拌30分钟。
（黄血盐的加入量约为酸化前发酵液的0.35%）酸化后要将酸化液进行适当的稀释，一般稀释2-3倍，有利于过滤脱色过程（本实验中为两倍）。
本实验中由于酸化液的粘度较大，用简单的过滤方法无法得到效果较好的固液分离，所以采用离心（6000r/min、5min）方法实现固液分离，取其上清液(129ml)。
3.7 122#树脂预处理方法122#树脂系弱酸性阳离子酚醛缩聚型，把122#树脂生产的质量提高到应有的水平,以交换树脂。
自1965年试制成功并投产以来,在便适应抗生素生产发展之。
提取方面广为应用,并需。
链霉素脱色,土霉素脱色,四环素脱色以及维生素B1已在全国推广。
[1]将准备装柱使用的新树脂，先用热水（清洁的自来水即可）反复清洗，阳离子交换树脂可用70-80℃的热水。
开始浸洗时，每隔约15分钟换水一次，浸洗时不要搅动，换水4-5次后，可隔约30分钟换水一次，总换水7-8次，浸洗至浸洗水不带褐色，泡沫很少时为止。
水洗后，再经酸碱处理，阳离子交换树脂可按下述步骤处理：（1）用1N盐酸浸泡树脂，盐酸用量为树脂自身体积的3-5倍，浸泡2-3.5小时。
（2）用自来水冲洗至出水pH为5左右，用3倍树脂体积5%的NaCl溶液浸泡2小时。
（3）用1N氢氧化钠浸泡树脂，用量约为树脂本身体积的3-5倍，浸泡2-3.5小时。
（4）用水冲洗至出水pH为9左右。
（5）用1N盐酸浸泡树脂，用量约为树脂本身体积的3-5倍，浸泡2-3.5小时，将树脂转成H型。
（6）用酸浸泡完后用去离子水冲洗至出水pH为6以上即可投入使用。
（7）对于阴离子交换树脂水洗后的酸碱处理次序，可采用碱-酸-碱的次序。
树脂预处理过程中，用碱浸泡树脂，颜色由本身向橘黄色变为棕黑色，再用酸浸泡，树脂颜色又由棕黑色变为橘黄色。
将处理后的树脂填装入树脂柱，进行酸化液脱色，脱色时流速不能太大，以免造成脱色不充分。
3.8结晶与干燥将一定量脱色液放入烧杯，用碱化剂调pH值到土霉素等电点附近（pH-4.76）。
恒温28℃-30℃用磁力搅拌器搅拌结晶，搅拌转数为70rpm。
将一定量结晶母液倒入培养皿放入ZK-82BB型电热真空干燥箱中进行干燥，干燥后测定干粉的质量，然后将干粉稀释10倍，测定其效价。
目前生产工艺一般采用pH值4.5-4.7，此工艺去除蛋白比较彻底，可达到短结晶时间内改善晶体粒度和提高结晶收率的目的。
在结晶时间47min后试验所得湿晶体与原工艺生产(pH值1.75-1.85，黄血盐钠2.49g／ml，硫酸锌1.59g／ml，结晶温度30℃，结晶pH值4.6、结晶时间47min)相比，在结晶时间不变的前提下，晶体存在明显差异，原工艺得到的晶体粒度细小，分布宽泛，晶型主要是针状和薄片状；新工艺得到晶体粒度粗壮、均一，晶型主要是四棱柱状，试验证实其在制取高纯度土霉素过程中溶解度提高。
新工艺因结晶过程杂质干扰较小， pH 值控制更接近土霉素等电点，所得结晶母液低于原工艺，是提高结晶收率的有效措施。
[2]3.9 相关数据的测定3.9.1 pH的测定（1）测样品不宜在室温下放置时间过长，应当在取样2分钟之内测定完，不能直接测定的样品应收样放入冰箱，如需测定时提前从冰箱中取出放至室温测定。
（2）打开酸度计，调节温度补偿旋钮至室温。
（3）用pH=6.86和pH=4.0的缓冲液校准pH计。
（4）校准后，纯净水冲洗电极，将电极放入被测样中，待读数稳定后读数。
（5）测定样品后应该用纯净水冲洗电极，不用时应将电极放置在饱和氯化钾溶液中。
3.9.2发酵液效价的测定（1）取样品加9mol/L的盐酸溶液，先酸化至pH=1.5-1.7, 用酸度计测量，放置5分钟，过滤至5ml以上，吸取滤液稀释适宜倍数（使稀释后效价在标准曲线范围内），用移液管取1ml稀释液于试管中，准确加入0.01mol/L的盐酸，使全量为20ml，再加入0.05%g/ml的三氯化铁溶液10ml，使全量为20ml，摇匀，放置20分钟，另取1ml稀释液，加入0.01mol/L的盐酸19ml，使全量为20ml，摇匀，放置20分钟，作为空白，在480nm的波长下测两种液体的吸光度。