转录因子类型的国自然基金标书写作

3
Nrf2负调节NLRP3在脑 缺血再灌注损伤中的作用
3 标书写作讲解
案例（春暖花开）
解螺旋课堂
3 标书写作讲解
解螺旋课堂
案例（春暖花开）
1） 题目： 转录因子X诱导M2型小胶质细胞活化在脑出血后神经保护中的作用机制
2） 假设：
脑出血
神经损伤保护
转录因子X
NF-κB
M2型小胶质 细胞活化
3） 立项依据：
1
脑出血后神经保护的 分子机制及微环境调 控的重要影响
Mini-review
600-800 字
2
M2型小胶质细胞活
化在脑出血后神经保 护中的扮演关键角色
3
申请人前期发现转录
因子X具有调控M2型 小胶质细胞活化功能
4
转录因子X能够调控
NF-κB干预M2型小 胶质细胞活化过程
Mini-review
Mini-review
Mini-review
600-800 字
2
炎症反应在脑缺血再 灌注损伤中的作用
Mini-review
600-800 字
3
NLRP3炎性小体复合
物活化在脑缺血再灌 注损伤中的功能
4
申请人发现转录因子
Nrf2能够负向调节 NLRP3的转录水平
Mini-review
Mini-review
800-1000 字 600-800 字
5
本项目拟 开展工作
400 字
3 标书写作讲解
案例分析 4） 特色与创新
1
Nrf2负调控NLRP3炎 性复合体的活化
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2
Nrf2在脑缺血再灌注损 伤中调控炎症的作用
3
在体验证和临床相关性 研究提升学术价值
5） 拟解决关键科学问题
1
NLRP3启动子区调控元 件分析，转录因子鉴定
2
Nrf2调控NLRP3启动区的 结合位点
G. 确认RYBP启动子上转录调控位点（不同物种序列保守）
1 文献案例分析
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A. 过表达KLF4/Sp1肝癌Huh7细胞MTS存活实验 B. HepG2细胞再来一遍 C. Sp1过表达+SYBR沉默观察克隆形成表型
1 文献案例分析
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1 文献案例分析
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科学假设： 肝癌
生长 KLF4/Sp1 RYBP
NSFC案例精讲班(七)
2017
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酸菜
0 课程内容
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1
文献案例分析
科学假设模式
2
3
标书写作讲解
1 文献案例分析
解螺旋课堂
1 文献案例分析
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1 文献案例分析
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1 文献案例分析
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1 文献案例分析
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1 文献案例分析
解螺旋课堂
1 文献案例分析
Fig.1，3 Fig.1 Fig.1-5 Fig.3-5 Fig.2
细胞增殖
逻辑思路： A B C D E F
RYBP RYBP KLF4 Sp1 RYBP 表型
启动子 Fig.1
启动子
KLF4/Sp1 Fig.2
RYBP 正 Fig.3
RYBP 负 Fig.4
启动子
位点
KLF4/Sp1 Fig.5
Fig.6
临床
Fig.7
2 科学假设模式
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疾病
1
2
3
4
5
临床 科学 分子 机制 效应
1 文献案例分析
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A. RYBP启动子序列缺失突变及其转录活性检测 B. 分析候选转录因子对RYBP的转录活性调节作用（Ets-1，KLF4，Mzf-1，Nkx2-5，YY-1，Sp1） C. 检测Sp1，KLF4和RYBP在肝癌细胞株中的表达相关性
1 文献案例分析
解螺旋课堂
A. KLF4对RYBP启动子活性的调控 B. 过表达KLF4诱导RYBP mRNA上调
问题 热点 （X） （Y） （Z）
延伸 机制
临床/科学问题
转录因子
靶基因
通路
功能表型
3 标书写作讲解
பைடு நூலகம்
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案例分析
1） 题目： Nrf2通过负调控NLRP3炎性复合体的活化减轻脑缺血再灌注损伤的作用及机制研究
2） 假设：
脑缺血 再灌注损伤 Nrf2 NLRP3 炎性反应
3） 立项依据：
1
脑缺血再灌注损伤的 临床问题
1 文献案例分析
解螺旋课堂
A. ChIP实验证实KLF4和Sp1与RYBP启动子DNA结合 B. 位点突变验证KLF4/Sp1与RYBP启动子的结合位点的策略
C. 验证突变体KLF4与RYBP启动子的结合位点活性 D. 验证突变体Sp1与RYBP启动子的结合位点活性 E. 突变体+转染野生型KLF4 F. 突变体+转染野生型Sp1
Mini-review
600-800 字 800-1000 字 600-800 字
5
本项目拟 开展工作
400 字
3 标书写作讲解
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案例（hr）
1） 题目： HBV m12345 介导Th17/Treg免疫平衡在慢性乙型肝炎中的作用机制
2） 假设：
乙肝
免疫平衡
HBV m12345
通路/靶点
Th17/Treg
C. 过表达KLF4诱导RYBP 蛋白上调 D. siRNA沉默KLF4诱导RYBP mRNA下调 E. siRNA沉默KLF4诱导RYBP 蛋白下调
1 文献案例分析
解螺旋课堂
A. Sp1对RYBP启动子活性的调控 B. 过表达Sp1诱导RYBP mRNA下调
C. 过表达Sp1诱导RYBP 蛋白下调 D. siRNA沉默Sp1诱导RYBP mRNA上调 E. siRNA沉默Sp1诱导RYBP 蛋白上调
3） 立项依据：
1
乙肝的诊疗现状及临 床面临的瓶颈
Mini-review
600-800 字
2
免疫调节的平衡在病
毒的感染及肝纤维化、 肝硬化转归中的作用
3
申请人前期发现一个
功能性HBV病毒突变， 可调节Th17/Treg
肺转移灶数目 Fig.4
ZEB2
EMT
迁移表型/动物验证 Fig.5
1 文献案例分析
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1 文献案例分析
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A. RYBP mRNA表达水平 B. 预测RYBP基因启动子区域CpG岛
C. RYBP 5’非编码区及预测的转录调控元件 (ALGGEN, TFSEARCH，JASPAR ) D. 不同肝癌细胞的RYBP启动子区域多态性 E. 不同肝癌细胞的RYBP启动子区域CpG岛甲基化状态 F. 荧光素酶报告系统检测不同肝癌细胞中RYBP启动子活性
启动子荧光素活性 染色质免疫沉淀 免疫共沉淀
解螺旋课堂
Fig.4 Fig.4，5 Fig.5
1 文献案例分析
解螺旋课堂
科学假设： 肝癌
转移
FOXO1
ZEB2
EMT
逻辑思路：
A
FOXO1
B
FOXO1
C
TGF-β
D
FOXO1
E
FOXO1
迁移表型 Fig.1
EMT
迁移表型 Fig.2，3
迁移粘附 Fig.3