移液器使用与校正

移液器使用与校正

移液器使用【操作步骤】

1．设定容量值：转动加样器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可提高设定移液量。顺时针方向转动旋钮，可降低设定移液量。在调整设定移液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意使移液器显示的数值不超过其可调范围。

2．预洗：当装上一个新吸头时应预洗吸头，先吸入一次液体并将之排回原容器中。

3．吸液：

[1] 选择合适的吸头安放在移液套筒上，稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙。

[2] 取液之前，所取液体应在室温（15℃－25℃）平衡。

[3] 把按钮压至第一停点，垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3毫米处,然后缓慢平稳地松开按钮,吸入液体，等一秒钟，然后将吸头提离液面，贴壁停留2-3秒，使管尖外侧的液滴滑落。

4．放液:

[1] 将吸头口贴到容器内壁底部并保持100~40°倾斜。

[2] 平稳地把按钮压到第一停点,等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体。

[3] 压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。

[4] 松开按钮。

[5] 按吸头弹射器除去吸头。

5．加样器吸嘴为一次性使用。

移液器详细使用步骤

在进行分析测试方面的研究时，一般采用移液枪（pipette）量取少量或微量的液体。对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作，是很多人都会忽略的。现在分几个方面详细叙述。

1、量程的调节

正确的容量设定分为两个步骤，一是粗调，即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值；二是细调，当容量值接近自己的预想值以后，应将移液器横置，水平放至自己的眼前，通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响。

在容量设定时，还有一个需要特别注意的地方。当我们从大值调整到小值时，刚好就行；但从小值调整到大值时，就需要调超三分之一圈后再返回，这是因为计数器里面有一定的空隙，需要弥补。

在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。

2、枪头（吸液嘴）的装配

在将枪头（pipette tips）套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即

可使其紧密结合。如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。

3、移液的方法

1）.预洗吸头：

在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使整个移液过程具有极高的重现性。其次，在吸取有机溶剂或高挥发液体时，挥发性气体会在白套筒室内形成负压，从而产生漏液的情况，这时就需要我们预洗四到六次，让白套筒室内的气体达到饱和，负压就会自动消失。2）吸液：

先将移液器排放按钮按至第一停点，再将吸头垂直浸入液面，浸入的深度为：P2、P10小于或等于1毫米，P20、P100、P200小于或等于2毫米，P1000小于或等于3毫米，P5ML、P10ML小于或等于4毫米（浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响，当然，具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握），平稳松开按钮，切记不能过快。

移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，这时可以采取两种移液方法。

一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。

二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。

3）放液：

放液时，吸头紧贴容器壁，先将排放按钮按至第一停点，略作停顿以后，再按至第二停点，这样做可以确保吸头内无残留液体。如果这样操作还有残留液体存在的话，您就应该考虑更换吸头了。4）卸掉吸头：

卸掉的吸头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。

4、移液器的正确放置

使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

5、维护保养

1）校准：

校准是可以在20-25度环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。两分钟检查法：

这是可以对手中移液器进行快速检查的一种简单方法，通过检查，来判断我们手中的移液器是否处于一种正常的工作状态。

移液器校正

1、准备超纯水、万分之一天平（假如校正0.5~2.5ul量程的，至少要十万分之一的天平）、温湿度计、恒温室，还需准备一个小口容器，避免水分挥发。

2、按移液器总量程的100%、50%、10%分别停止第三和第四步。

3、吸头要重复汲取超纯水三次后，汲取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复10次。

4、将丈量的数据用iso8655中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取均匀值。

5、依据三个丈量点的偏向，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗停止调整。

6、重复3、4步，直至偏向在ISO8655的要求内为止。

另外，不同的移液器的校正窗和扳手的形式是不同的：

1、Gilson的是在顶端的那个带有小孔的旋钮，标配是不带扳手的，因为Gilson是定期免费校正的。

2、Eppendorf的是在把手的侧边，有的型号是用一个铝箔掩盖，有的是用校正纸片贴住的，标配带有扳手，与拆卸套筒的工具公用。

3、BioHit的与Gilson类似。

假如是电动移液器，那校正就简单多了，一般丈量完三个校正点的数据后，直接进入校正界面，将误差数据输入就可以自动校正了。

一般还是交给厂家或者代理商停止校正比较放心，一般地域总代都是置办了自动校正平台的，将移液器放在上面，机器自动停止丈量和校正工作的。

维护方法

维护保养时的注意事项

如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。

最好定期清洗移液枪，可以用肥皂水或60 ％的异丙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干。

高温消毒之前，要确保移液器能适应高温。

校准是可以在20-25度环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。

使用时要检查是否有漏液现象。方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下降。

如果漏液，原因大致有一下几方面：

1、枪头是否匹配；

2、弹簧活塞是否正常；

3、如果是易挥发的液体（许多有机溶剂都如此），则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体，然后再移液。