标准缓冲液的配制

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常见缓冲液配制方法

常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。

缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。

下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。

二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。

比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。

同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。

2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。

比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。

同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。

3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。

PH标准缓冲液配置

标准缓冲溶液(均用pH标准缓冲物质配制)1.1 苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液：c(KHC8H4O4)=0.05 mol/L(25℃时，pHs=4.003)。

苯二甲酸氢钾的pH标准缓冲物质，有小塑料袋和瓶装两种，配制方法如下：a)袋装配制法：在250 mL(或500 mL)量瓶中(根据袋中标准缓冲物质量，选择量瓶大小)，按袋上的说明配制成所需的浓度。

保存于聚乙烯瓶中。

b)瓶装配制法：称取5.10 g苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4预先在115℃±5℃，烘2～3 h，于干燥器中冷却)，溶于水并稀释至500 mL，混匀。

保存于聚乙烯瓶中。

1.2 0.025 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.025 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)混合标准缓冲溶液(25℃时，pHs=6.864)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠的pH标准缓冲物质，有小塑料袋装(混合磷酸盐)和瓶装(两种pH标准缓冲物质分别包装)两种。

配制方法如下：a)袋装配制法：在量瓶(根据袋上说明确定量瓶大小)中按袋上说明配制成所需浓度后，保存于聚乙烯瓶中。

b)瓶装配制法：迅速称取3.40 g磷酸二氢钾(KH2PO4)和3.55 g磷酸氢二钠(Na2HPO4)(均预先在115±5℃烘2～3 h，于干燥器中冷却)溶于蒸馏水，转入1 000 mL量瓶中，加水至标线，混匀。

1.3 0.008 695 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.030 43 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)标准混合缓冲溶液(25℃时，pH=7.413)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠两种pH标准缓冲物质分别用瓶包装，配制方法如下：迅速称取1.18 g磷酸二氢钾和4.31 g磷酸氢二钠(均预先在115℃±5℃烘2～3 h，于干燥器中冷却)，溶于水，全量移入1 000 mL量瓶中，加水至标线，混匀。

保存于聚乙烯瓶中。

1.4 硼砂标准缓中溶液：c(Na2B4O7·10H2O)=0.010 mol/L(25℃时，pHs=9.182)。

常见缓冲液配制大全

常见缓冲液配制大全缓冲液乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。

乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L 氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。

ph4.01标准缓冲液的配制

在化学实验中，pH值是一个非常重要的参数，它可以反映溶液的酸碱性。

而在进行酸碱试剂的配制和实验过程中，我们经常会用到缓冲液，用来维持溶液的酸碱度。

ph4.01标准缓冲液就是其中一种常用的缓冲液之一。

那么，ph4.01标准缓冲液的配制是怎样的呢？接下来，我们将从深度和广度两个方面来对ph4.01标准缓冲液的配制进行全面评估和探讨。

一、深度探讨1. 相关概念的介绍我们需要了解什么是ph4.01标准缓冲液。

ph4.01标准缓冲液是一种用于校准酸碱度计的标准溶液，其pH值被准确地设定为4.01。

这种缓冲液在酸碱实验中具有重要的应用价值。

2. 缓冲液的配制原理在深入探讨ph4.01标准缓冲液的配制之前，我们需要了解缓冲液的配制原理。

缓冲液的配制是通过选择适当的酸和盐（或碱）以及确定它们的摩尔比来实现的。

在配制ph4.01标准缓冲液时，我们需要选择合适的酸和碱来控制溶液的pH值。

3. ph4.01标准缓冲液的配制方法接下来，让我们详细介绍ph4.01标准缓冲液的配制方法。

我们需要准备一定量的特定酸和盐，按照一定的摩尔比进行混合并加入适量的溶剂，然后进行搅拌和调节pH值，最终得到所需的标准缓冲液。

4. 实验注意事项和应用范围我们需要总结ph4.01标准缓冲液配制过程中需要注意的事项和该缓冲液的应用范围。

这些内容对于我们在实际操作中避免错误并且更好地应用缓冲液具有重要意义。

二、广度探讨在广度方面，我们还可以从ph4.01标准缓冲液的配制过程中可能遇到的问题、缓冲液保存方法和其他相关缓冲液的比较等方面展开讨论，以达到对这一主题全面理解的目的。

ph4.01标准缓冲液的配制是一个涉及化学知识和实验操作的复杂过程，需要我们全面深入地掌握和理解。

只有通过对该主题的深度和广度全面探讨，我们才能更好地掌握ph4.01标准缓冲液的配制方法和实验应用，从而更好地开展化学实验工作。

在我看来，ph4.01标准缓冲液作为酸碱度计的校准标准溶液，在化学实验中具有非常重要的作用。

常见缓冲液的配制

常见缓冲液的配制附溶液配制方法：pH7.2 0.01mol/L PBSKH2PO40.38gNa2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g蒸馏水加至1000mLpH7.4 PBS/TNaCl8.0gKH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）KCl0.2g吐温200.5mL蒸馏水加至1000mLpH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原液1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g蒸馏水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1% 醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸馏水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）四氢呋喃10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS 100mlM-缓冲液（pH7.2）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mgEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇1mmol 0.07ml4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1mlM-缓冲液99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（pH7.2）97ml0.2% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml冰醋（乙）酸7ml蒸馏水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸馏水1000ml0.17mol/L氯化铵液氯化铵4.574g蒸馏水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g 蒸馏水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O）19.333g蒸馏水500ml0.12mol/L草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O）8.527g蒸馏水500ml0.17mol/L醋酸铵液醋酸铵6.552g蒸馏水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸馏水500ml0.32mol/L甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸馏水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇（比重0.803）11.976ml蒸馏水500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。

【标准】常用缓冲溶液的配制和PH计校正溶液配置方法

【关键字】标准常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

Na2Ac·3H2O分子量= 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。

Na2HPO4·12H2O分子量= 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。

KH2PO4分子量= 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。

8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100CHOCH2 NH2分子量=121.14;0. 1M溶液为12.114克/升。

缓冲液配制方法

5.1
25.5
5.8
42.3
4.5
8.7
5.2
28.8
5.9
43.7
4.6
11.1
5.3
31.6
4.7
13.6
5.4
34.1
邻苯二甲酸氢钾Mr = 204.23，0.1mol/L溶液为20.42g/L
9．磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4/ml
pH
Na＋浓度
/mol/L
柠檬酸/g
C6H8O7·H2O
氢氧化钠/g
NaOH(97%)
盐酸/ml
HCl(浓)
最终体积/L*
2.2
0.20
210
84
160
10
3.1
0.20
210
83
116
10
3.3
0.20
210
83
106
10
4.3
0.20
210
83
45
10
5.3
0.35
245
144
68
10
5.8
0.45
50
11.0
10.0
50
43.0
9.6
50
23.0
10.1
50
46.0
硼砂Na2B4O7·10H2O，Mr = 381.43，0.05mol/L溶液为19.07g/L
硼砂/ml
0.2mol/L
硼酸/ml
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5

常用缓冲溶液的配置

附表2常用缓冲溶液的配置
缓冲液组成
pKa
缓冲液pH
缓冲液配制方法
氨基乙酸—HCl
2.35
pKa1
2.3
取氨基乙酸150g溶于500mL水中后，加浓HCl 80mL,水稀释至1L
H3PO4—枸橼酸盐
2.5
取Na2HPO4·12H2O113g溶于200mL水后，加枸橼酸387g,溶解，过滤后，稀释至1L
一氯乙酸—NaOH
2.86
2.8
取200g一氯乙酸溶于200mL水中，加NaOH40g溶解后，稀释至1L
邻苯二甲酸氢钾—HCl
2.95
pKa1
2.9
取500g邻苯二甲酸氢钾溶于500mL水中，加浓HCl 80mL，稀释至1L
NH4Ac—HAc
4.5
取NH4Ac77g溶于200mL水中，加冰HAc 59mL，稀释至1L
NaAc—HAc
4.74
4.7
取无水NaAc83g溶于水中，加冰HAc 60mL，稀释至1L
NaAc—MAc
4.74
5.0
取无水NaAc160g溶于水中，加冰HAc 60mL，稀释至1L
NH4Ac—HAc
5.0
取NH4Ac250g溶于水中，加冰HAc 25mL，稀释至1L
六次甲基四胺—HAc
5.15
8.21
8.2
取25gTris试剂溶于水中，加浓HCl 8mL，稀释至1L
NH3—NH4Cl
9.26
9.2
取NH4Cl54g溶于水中，加浓氨水63mL,稀释至1L
NH3—NH4Cl
9.26
9.5
取NH4Cl54g溶于水中，加浓氨水126mL,稀释至1L
NH3—NH4Cl

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。

下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。

一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。

二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。

三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。

以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。

在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。

以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。

而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。

最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。

对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。

以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。

标准缓冲液的配制方法

13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）
o X 毫升 0.05M 硼砂+Y 毫升 0.2NNaOH 加水稀释至 200 毫升
-专 io pH
X
9.3
50
9.4
50
b 9.6
50
Y
pH
X
6.0
9.8
50
11.0
10.0
0.2V 盐酸 pH
pH(20℃) 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0
X (毫升) 5 5 5 5 5 5
Y（毫升） 2.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680
0.04M 巴比妥钠溶液(毫升)
0.2N 盐酸(毫升)
o 6.8
100
18.4
8.4 100
5.21
0.3 mol/L HAc(毫升)
9.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.10
0.2 mol/L
pH(18℃) NaAc(毫升)
4.8
5.90
5.0
7.00
5.2
7.90
5.4
8.60
5.6
9.10
5.8
9.40
Na2Ac·3H2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升。
Na2HPO4 分子量 = 14.98，0.2 mol/L 溶液为 28.40 克/升。 Na2HPO4-2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/升。
Y 11.4 8.2 6.4 5.0
Y 1.470 0.990 0.597 0.263
0.1mol/L 柠檬酸（毫升） 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55

最全常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。

常见缓冲溶液配制

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

值。

4.将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。

2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。

3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调节pH值至。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。

4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O〔或者NaAc〕置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。

5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

PH计校准及缓冲液配置

标准缓冲溶液(均用pH标准缓冲物质配制)1.1 苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液：c(KHC8H4O4)=0.05 mol/L(25℃时，pH=4.003)。

苯二甲酸氢钾的pH标准缓冲物质，有小塑料袋和瓶装两种，配制方式如下：a)袋装配制法：在250 mL(或500 mL)量瓶中(按照袋中标准缓冲物质量，选择量瓶大小)，按袋上的说明配制成所需的浓度。

保留于聚乙烯瓶中。

b)瓶装配制法：称取5.10 g苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4预先在115℃±5℃，烘2～3 h，于干燥器中冷却)，溶于水并稀释至500 mL，混匀。

保留于聚乙烯瓶中。

1.2 0.025 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.025 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)混合标准缓冲溶液(25℃时，pH=6.864)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠的pH标准缓冲物质，有小塑料袋装(混合磷酸盐)和瓶装(两种pH标准缓冲物质别离包装)两种。

配制方式如下：a)袋装配制法：在量瓶(按照袋上说明肯定量瓶大小)中按袋上说明配制成所需浓度后，保留于聚乙烯瓶中。

1.3 0.008 695 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.030 43 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)标准混合缓冲溶液(25℃时，pH=7.413)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠两种pH标准缓冲物质别离用瓶包装，配制方式如下：迅速称取1.18 g磷酸二氢钾和4.31 g磷酸氢二钠(均预先在115℃±5℃烘2～3 h，于干燥器中冷却)，溶于水，全量移入1 000 mL量瓶中，加水至标线，混匀。

保留于聚乙烯瓶中。

1.4 硼砂标准缓中溶液：c(Na2B4O7·10H2O)=0.010 mol/L(25℃时，pHs=9.182)。

标准缓冲液的配制

不同温度时的pH值（pH in different temperatures）
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
9.46
9。40
9.33
9。27
9.22
9.18
9.14
9。10
9.06
不同温度时的pH值（pH in different temperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
-
磷酸盐标准缓冲溶液
分别称取在（115.0±5.0）℃干燥2～3h的磷酸氢二钠(Na2HPO4）(3．53±0．01）g和磷酸二氢钾（KH2PO4） (3．39±0．01)g，溶于预先煮沸过15～30min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml（注:可用于酸度计校准)
不同温度时的pH值(pH in different temperatures）
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
—
-
-
-
—
3。56
3。55
3。55
3.55
不同温度时的pH值(pH in different temperatures）
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
3.55
3.55
3.55
3.56
3.58
3.61
3。65
3.67
—
苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液
25℃
30℃
35℃
40℃
草酸盐标准缓冲溶液

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。

因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。

以下是各种缓冲液的配制方法。

一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。

用蒸馏水调节至1 L。

2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。

二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。

Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。

MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。

七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。

HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。

(最全)常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法乙醇一醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0):取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1):?取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至&1,加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0):?取三羟甲基氨基甲烷 6.06g，加盐酸赖氨酸 3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液:取乌洛托品75g,加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4):取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥一氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3):取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25〜3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6):?取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

常用标准缓冲溶液的配制

常用标准缓冲溶液在化学分析、仪器分析、生物化学等领域有广泛的应用。

它们通常用于标定传感器、校准仪器、测定物质特性等。

下面将详细介绍如何配制常用标准缓冲溶液。

一、磷酸盐标准缓冲溶液磷酸盐标准缓冲溶液通常用于pH测量。

具体配制方法如下：1. 称取约2克磷酸二氢钾，用纯水溶解。

2. 加入约700ml纯水。

3. 用氢氧化钠溶液调整溶液pH至7.0。

可以使用0.1N氢氧化钠溶液进行调pH。

4. 稀释至总容量为1000ml，这样就得到了磷酸盐标准缓冲溶液。

二、乙酸-乙酸钠缓冲液乙酸-乙酸钠缓冲液常用于PH计的校准。

其配制方法如下：1. 称取无水乙酸钠（28.85g）及乙酸（3mL，约27ml）溶于约500mL纯水中。

2. 用盐酸（1+1）溶液调整溶液pH至3.6～3.8。

3. 稀释至总容量约700mL。

三、纳氏试剂缓冲溶液纳氏试剂是一种常用的显色剂，常用于水质分析等工作中。

缓冲溶液的配制如下：1. 称取三乙醇胺9～15g，加少量纯水溶解，再加入氢氧化钠溶液至pH值约10，即得基本缓冲液。

2. 称取酒石酸钾钠20g及碘化钾2g溶于纯水，稀释至基本缓冲液总容量约50ml，然后慢慢加入碘化汞钾溶液（4%w/v）4～5滴，即得纳氏试剂缓冲溶液。

四、磺基水杨酸标准缓冲溶液磺基水杨酸标准缓冲溶液常用于电位滴定分析，其配制方法如下：1. 称取24克磺基水杨酸，加入约600毫升蒸馏水，完全溶解。

2. 用氢氧化钠溶液调整溶液pH至5.4，使其符合滴定分析要求。

可以使用0.1N氢氧化钠溶液进行调pH。

3. 稀释至总容量约1000ml，这样就得到了磺基水杨酸标准缓冲溶液。

需要注意的是，在配制标准缓冲溶液时，必须严格遵守实验室安全规范，包括正确处理化学药品、避免交叉污染、避免蒸发皿破裂等。

同时，也应注意保护实验环境的卫生和安全，如保持实验台整洁、避免有毒废料的排放等。

此外，对于不同类型和浓度的标准缓冲溶液，可能需要不同的配制步骤和注意事项。