各种缓冲液配制方法
各种缓冲液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）24Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
②687·H2柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
7．磷酸盐缓冲液24·2H 2Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
24·2H 2KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）C HOCH2NH2 分子量=121.14;0. 1M 溶液为12.114克/升。
Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
247·H 2硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
247·10H 2硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）247·10H 214．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+22·10H 2。
常见缓冲液配制方法
常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌，使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。
常见缓冲液的配制
常见缓冲液的配制附溶液配制方法：pH7.2 0.01mol/L PBSKH2PO40.38gNa2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g蒸馏水加至1000mLpH7.4 PBS/TNaCl8.0gKH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）KCl0.2g吐温200.5mL蒸馏水加至1000mLpH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原液1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g蒸馏水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1% 醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸馏水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）四氢呋喃10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS 100mlM-缓冲液（pH7.2）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mgEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇1mmol 0.07ml4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1mlM-缓冲液99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（pH7.2）97ml0.2% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml冰醋（乙）酸7ml蒸馏水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸馏水1000ml0.17mol/L氯化铵液氯化铵4.574g蒸馏水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g 蒸馏水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O）19.333g蒸馏水500ml0.12mol/L草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O）8.527g蒸馏水500ml0.17mol/L醋酸铵液醋酸铵6.552g蒸馏水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸馏水500ml0.32mol/L甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸馏水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇（比重0.803）11.976ml蒸馏水500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。
46种缓冲液配制
46种缓冲液配制1.乙醇－醋酸铵缓冲液取5mol/L醋酸溶液，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调剂pH值至，用水稀释至1000ml，即得。
2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取三羟甲基氨基甲烷,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调剂pH值至,即得。
3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取氯化钙,加L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调剂pH值至，加水稀释至100m l，即得。
4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取三羟甲基氨基甲烷,加盐酸赖氨酸、氯化钠、乙二胺四醋酸二钠，再加水溶解使成1000ml，调剂pH值至，即得。
5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液，再用水稀释至250ml,即得。
6.巴比妥缓冲液取巴比妥钠,加水使溶解并稀释至400ml，用2mo l/L盐酸溶液调剂pH值至，滤过，即得。
7.巴比妥缓冲液取巴比妥与巴比妥钠,加水使溶解成2000ml，即得。
8.巴比妥－氯化钠缓冲液取巴比妥钠,加氯化钠及水适量使溶解,另取明胶加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用L盐酸溶液调剂pH值至，再用水稀释至500ml，即得。
9.甲酸钠缓冲液取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调剂pH值至～,即得。
10.邻苯二甲酸盐缓冲液取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调剂pH值至,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
11.枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。
12.枸橼酸盐缓冲液取％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调剂pH值至，即得。
13.枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保留。
各种缓冲液配制方法
各种缓冲液配制方法缓冲液是一种用于调节溶液的pH值的溶液，常用于实验室中的生物化学和分子生物学实验中。
根据所需的pH范围和实验目的，可以使用不同的缓冲液配制方法。
以下是一些常见的缓冲液配制方法：1.磷酸盐缓冲液（PBS）磷酸盐缓冲液是一种常见的生物学实验中使用的缓冲液。
它的制备方法如下：-取一个容器，加入8克氯化钠（NaCl），0.2克磷酸二氢钠（NaH2PO4），和1.44克磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液适用于pH 7-9范围内的实验。
制备方法如下：- 取一个容器，加入121.14克Tris（羟甲基氨基甲烷）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
3.醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液适用于pH3-5范围内的实验。
制备方法如下：-取一个容器，加入20毫升醋酸钠三水合物（NaC2H3O2·3H2O）。
-加入6毫升醋酸。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
4.磷酸缓冲液磷酸缓冲液适用于pH2-8范围内的实验。
制备方法如下：-取一个容器，加入0.126克磷酸二氢钾（KH2PO4）。
-加入0.680克磷酸二氢钠（Na2HPO4）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
5.碳酸氢盐缓冲液（HEPES缓冲液）HEPES缓冲液适用于pH6-8范围内的实验。
-取一个容器，加入10克HEPES。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法_
一、磷酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、磷酸二铵，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需磷酸二铵的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将磷酸二铵加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的磷酸二铵，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的磷酸二铵（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值，调整到与实验要求相符的值；
6.搅拌均匀，过滤，储存，可使用或直接投放使用；
二、碳酸缓冲液的配制方法
1.准备：蒸馏水或纯净水、碳酸氢钠，滴定级别不低于AR级；
2.计算配制用量：根据实验要求，计算出所需碳酸氢钠的总量，用m1表示（单位：克）；
3.将碳酸氢钠加入蒸馏水或纯净水中，用称取出适量的碳酸氢钠，用m2表示（单位：克），加入搅拌槽中，充分搅拌均匀，然后加入剩余的碳酸氢钠（m3=m1-m2，单位：克），继续搅拌；
4.检查温度：温度应大于室温；
5.检查pH值：用pH计测量溶液的pH值。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。
不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。
下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。
配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。
2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。
配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。
3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。
配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。
-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。
4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。
配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。
- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。
- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。
配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。
各种缓冲液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = ， mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ mol/L）X毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = ， mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = ， mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = ， mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
②5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L ）柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量， mol/L 溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量， mol/L 溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L ）Na 2Ac·3H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为31.21克/升。
（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）15M11.876克15M9.078克0.05M0.2M18℃0.04M8.25克0.05M25℃0.1M1M溶液为12.114克/升。
各种缓冲液配制方法
各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。
下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。
一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。
二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。
三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。
以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。
在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。
以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。
而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。
最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。
对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。
以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。
配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。
因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。
以下是各种缓冲液的配制方法。
一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。
用蒸馏水调节至1 L。
2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。
二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。
Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。
MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。
七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。
HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3、7):取5mol/L醋酸溶液15、0ml,加乙醇60ml与水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3、7,用水稀释至1000ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8、0):取三羟甲基氨基甲烷12、14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8、0。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8、1):取氯化钙0、294g,加0、2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml 使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8、1,加水稀释至100ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9、0):取三羟甲基氨基甲烷6、06g,加盐酸赖氨酸3、65g,氯化钠5、8g,乙二胺四醋酸二钠0、37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9、0。
乌洛托品缓冲液:取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4、2ml,再用水稀释至250ml。
巴比妥缓冲液(pH7、4):取巴比妥钠4、42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7、4,滤过。
巴比妥缓冲液(pH8、6):取巴比妥5、52g与巴比妥钠30、9g,加水使溶解成2000ml。
巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7、8):取巴比妥钠5、05g,加氯化钠3、7g及水适量使溶解,另取明胶0、5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0、2mol/L盐酸溶液调节pH值至7、8,再用水稀释至500ml。
甲酸钠缓冲液(pH3、3):取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中与,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3、25～3、30。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5、6):取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5、6,加水稀释至1000ml,混匀。
枸橼酸盐缓冲液:取枸橼酸4、2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。
史上最全缓冲溶液配制方法
常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0 甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X Y pH X Y2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/mlpH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/ml2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/LC6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M柠檬酸C6H8O7·H2O/g氢氧化钠NaOH/g浓盐酸HCl/ml终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10 使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
实验室常用缓冲液配置方案
实验室常用缓冲液配置方案实验室里，各种缓冲液就像是实验操作的基石，有了它们，实验才能顺利进行。
今天，我就来和大家分享一下，我积累十年的实验室常用缓冲液配置经验，保证你一看就懂，一学就会！一、磷酸盐缓冲液（PBS）PBS，这可是实验室的“老熟人”了。
配置方法如下：1.称取8克NaCl，0.2克KCl，1.44克Na2HPO4，0.24克KH2PO4，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用pH计调整溶液至7.4。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
二、Tris缓冲液Tris缓冲液，用途广泛，特别是在蛋白质实验中，是不可或缺的。
1.称取121.1克Trisbase，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
三、醋酸缓冲液醋酸缓冲液，主要用于微生物实验和细胞培养。
1.称取5.7克NaAc·3H2O，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用冰醋酸调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
四、甘氨酸缓冲液甘氨酸缓冲液，适用于蛋白质电泳等实验。
1.称取15.1克甘氨酸，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用NaOH调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
五、氨水缓冲液氨水缓冲液，主要用于微生物实验。
1.量取100毫升浓氨水，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，搅拌均匀。
3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
六、硼酸缓冲液硼酸缓冲液，适用于核酸实验。
1.称取12.4克硼酸，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用NaOH调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
七、EDTA缓冲液EDTA缓冲液，主要用于金属离子螯合实验。
53种常见缓冲液配制方法(总结)
53种常见缓冲液配制方法（总结）
第一类：氢氧化物缓冲液
1、氢氧化硫酸缓冲液：添加一定量的硫酸钾到相当量的硝酸钾中，按需可加入一定量的氢氧化钠，并使氢离子浓度保持在 0.05~0.10mol / L，即可得到pH为2.5~3.0的硫酸缓冲液，其综合离子强度约为 0.150 mol/L。
2、硝酸缓冲液：将一定量的硝酸钾溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为4.7的硝酸缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。
3、三甲基磺酰胺缓冲液：将一定量的三甲基磺酰胺溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在
0.05~0.10mol / L，即可得到pH为7.2~7.5的三甲基磺酰胺缓冲液，其综合离子约为 0.10 mol/L。
第二类：基态缓冲液
1、乙醇缓冲液：将一定量的乙醇溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为6.3的乙醇缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。
2、氢氟酸缓冲液：将一定量的氢氟酸溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.05~0.08mol / L，即可得到pH约为2.2的氢氟酸缓冲液，其综合离子约为 0.06~0.10 mol/L。
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不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液六十一秒的常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理（2007年6月16日更新）（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）甘氨酸分子量＝75.07。
0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。
（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。
0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。
（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。
（六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L）NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。
冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。
（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
（八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L）Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。
（九）巴比妥纳-盐酸缓冲液巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。
（十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L）50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100Tris分子量＝121.14 ；0.1 mol/L溶液为12.114 g/L。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
（十一）、硼酸-硼砂缓冲液(0.2 mol/L硼酸根)硼砂：Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05 mol/L溶液（等于0.2 mol/L硼酸根）含19.07 g/L。
硼酸：H3BO3分子量＝61.84；0.2 mol/L的溶液为12.37 g/L。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
（十二）甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）甘氨酸分子量＝75.07；0.2 mol/L溶液含15.01 g/L（十三）硼砂-氢氧化纳缓冲液（0.05 mol/L硼酸根）硼砂Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05 mol/L硼砂溶液（等于0.2 mol/L硼酸根）为19.07Na2CO3·10H2O分子量＝286.2；0.1 mol/L溶液为28.62 g/L。
NaHCO3分子量＝84.0；0.1 mol/L溶液为8.40 g/L。
============================（2007年6月16日更新）==================================缓冲溶液的理论知识：一、缓冲溶液与缓冲作用原理（一）缓冲作用与缓冲溶液纯水在25℃时PH值为7.0，但只要与空气接触一段时间，因为吸收二氧化碳而使PH 值降到5.5左右。
1滴浓盐酸（约12.4mol·L-1）加入1升纯水中，可使[H＋]增加5000倍左右（由1.0×10-7增至5×10-4mol·L-1），若将1滴氢氧化钠溶液（12.4mol·L-1）加到1升纯水中，PH变化也有3个单位。
可见纯水的PH值因加入少量的强酸或强碱而发生很大变化。
然而，1滴浓盐酸加入到1升HOAc-NaOAc混合溶液或NaH2PO4-Na2HPO4混合溶液中，[H+]的增加不到百分之一（从1.00×10-7增至1.01×10-7mol·L-1）,PH值没有明显变化.这种能对抗外来少量强酸\强碱或稍加稀释不引起溶液PH值发生明显变化的作用叫做缓冲作用;具有缓冲作用的溶液,叫做缓冲溶液。
（二）缓冲溶液的组成缓冲溶液由足够浓度的共轭酸碱对组成。
其中，能对抗外来强碱的称为共轭酸，能对抗外来强酸的称为共轭碱，这一对共轭酸碱通常称为缓冲对、缓冲剂或缓冲系，常见的缓冲对主要有三种类型。
1．弱酸及其对应的盐例如，HOAc-NaOAc（实际上是OAc-）；H2CO3-NaHCO3；H2C8H4O4-KHC8H4O4（邻苯二甲酸-邻苯二甲酸氢钾）；H3BO3-Na2B4O7（四硼酸钠水解后产生H2BO-3）。
2．多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐，例如，NaHCO3-Na2CO3；NaH2PO4-Na2HPO4；NaH2C5HO7（柠檬酸二氢钠）-Na2HC6H5O7；KHC8H4O4-K2C8H4O4。
3．弱碱及其对应的盐例如NH3-NH+4CL-；RNH2-RNH+3A-（伯胺及其盐）；Tris-TrisH+A-（三羟甲基烷及其盐）。
（三）缓冲溶液的作用原理现以HOAc-NaOAc缓冲溶液为例，说明缓冲溶液之所以能抵抗少量强酸或强碱使PH 稳定的原理。
醋酸是弱酸，在溶液中的离解度很小，溶液中主要以HOAc分子形式存在，OAc-的浓度很低。
醋酸钠是强电解质，在溶液中全部离解成Na+和OAc-，由于同离子效应，加入NaOAc后使HOAc离解平衡向左移动，使HOAc的离解度减小，[HOAc]增大。
所以，在HOAc-NaOAc混合溶液中，存在着大量的HOAc和OAc-。
其中HOAc主要来自共轭酸HOAc，OAc-主要来自NaOAc。
这个溶液有一定的[H+]，即有一定的PH值。
在HOAc-NaOAc缓冲溶液中，存在着如下的化学平衡：在缓冲溶液中加入少量强酸（如HCL），则增加了溶液的[H+]。
假设不发生其他反应，溶液的PH值应该减小。
但是由于[H+]增加，抗酸成分即共轭碱OAc-与增加的H+结合成HOAc，破坏了HOAc原有的离解平衡，使平衡左移即向生成共轭碱HOAc分子的方向移动，直至建立新的平衡。
因为加入H+较少，溶液中OAc-浓度较大，所以加入的H+绝大部分转变成弱酸HOAc，因此溶液的PH值不发生明显的降低。
在缓冲溶液中加入少量强碱（如NaOH），则增加了溶液中OH-的浓度。
假设不发生其他反应，溶液的PH值应该增大。
但由于溶液中的H+立即加入的OH-结合成更难离解的H2O，这就破坏了HOAc原有的离解平衡，促使HOAc的离解平衡向右移动，即不断向生成H+和OAc-的方向移动，直至加入的OH-绝大部分转变成H2O，建立新的平衡为止。
因为加入的OH－少，溶液中抗碱成分即共轭酸HOAc的浓度较大，因此溶液的PH值不发生明显升高。
在溶液稍加稀释时，其中[H+]虽然降低了，但[OAc-]同时降低了，同离子效应减弱，促使HOAc的离解度增加，所产生的H+可维持溶液的PH值不发生明显的变化。
所以，溶液具有抗酸、抗碱和抗稀释作用。
多元酸的酸式盐及其对应的次级盐的作用原理与前面讨论的相似。
例如，在NaH2PO4-Na2HPO4溶液中存在着离解平衡：HPO2-4是抗酸成分，通过平衡移能对抗外加酸的影响。
H2PO2-4是抗碱成分，通过平衡右移能对抗外加碱的影响。
弱碱及其对应盐的缓冲作用原理，例如，NH3-NH4CL（即NH3-NH+4）溶液中，NH3能对抗外加酸的影响是抗酸成分，NH+4能对抗外加碱的影响是抗碱成分。
前者通过下述平衡向右移动而抗酸，后者通过平衡向左移动而抗碱，从而使溶液的PH值稳定。
二、缓冲溶液PH的计算（一）亨德森方程式在缓冲溶液例如HOAc－NaOAc溶液中，有以下的离解平衡：等式两边各取负对数，则即HOAc的离解度比较小，由于溶液中大量的OAc-对HOAc所产生的同离子效应，使HOAc的离解度变得更小。
因此上式中的[HOAc]可以看作等于HOAc的总浓度[共轭酸]（即缓冲溶液中共轭酸的浓度）。
同时，在溶液中NaOAc全部离解，可以认为溶液中[OAc-]等于NaOAc的总浓度[共轭碱]（即配制的缓冲溶液中共轭碱的浓度）。
将[共轭酸]和[共轭碱]代入上式，则得（3-11)上式称为亨德森-哈塞尔巴赫方程式，简称为亨德森（Henderson）方程式。
它表明缓冲溶液的PH值决定于共轭酸的离解常数Ka和组成缓冲溶液的共轭碱与共轭酸浓度的比值。
对于一定的共轭酸，PKa为定值，所以缓冲溶液的PH就决定于两者浓度的比值即缓冲比。
当缓冲溶液加水稀释时，由于共轭碱和共轭酸的浓度受到同等程度的稀释，缓冲比是不变的；在一定的稀释度范围内，缓冲溶液的PH值实际上也几乎不变。
式(3-11)中的浓度项指的是混合溶液中共轭酸碱的浓度,而不是混合前的浓度.若混合前共轭酸的量浓度是c酸,体积是V酸,共轭碱的量浓度是c碱,体积是V碱,则式(3-11)可改写成：（3-12）若两种溶液的量浓度相等，则（3-13）若是等体积的两溶液相混合，则（3-14）以上几种形式都称为亨德森方程式，可用以计算各种组成类型缓冲溶液的PH近似值。
当用于弱酸及其对应的盐组成的缓冲溶液的PH值时，PKa即弱酸的离解常数负对数（见书后附表），[共轭碱]即[弱酸盐]。
当用于多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐组成缓冲溶液的PH值时，共轭酸即酸式盐，pKa即该酸式盐负离子的离解常数的负对数，共轭碱即该酸式盐的次级盐。
例如，NaHCO3－Na2CO3缓冲溶液的PH值：（3-15）式中PKa即H2CO3的PKa2。
同样，NaH2PO4－Na2HPO4缓冲溶液的PH值：（3-16）式中PKa为H3PO4的PKa2。
弱碱和它的共轭酸缓冲溶液的PH值也可根据式（3-11）计算。
（二）缓冲溶液PH值计算举例例5 0.1mol.L-1的HOAc500mL与0.2mol.L-1的NaOAc250mL配成缓冲溶液，计算溶液的pH值。
解：把所给条件代入式（3-11），由书后附表查得HOAc的pKa=4.75，则得：例6 将0.3mol.L-1HOAc溶液10mL与0.1mol.L-1NaOH溶液10mL混合后制成缓冲溶液，试计算这个溶液的pH值（2.5℃时，HOAc时pKa=4.75)。