实验常用试剂,缓冲液的配制方法
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法：(1)磷酸盐缓冲液（PBS）的配制方法：-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。
-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液，然后稀释为需要的浓度。
-例如，1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。
(2) 神经元无血清培养基（Neurobasal Medium）的配制方法：- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。
-根据制造商提供的配方，按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。
-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。
(3) 洗涤缓冲液（Washing Buffer）的配制方法：-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液（PBS）及其他添加剂。
- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。
-根据实验需求，可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。
(4) 乙醇（Ethanol）溶液的配制方法：-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。
- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。
-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。
2.常见缓冲液配制方法：(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法：- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris（三羟甲基氨基甲烷）和Tricine（三甘胺酸）等化学品。
- 根据实验要求，在一定PH范围内，按照不同比例混合Tris和Tricine，溶解于适量的蒸馏水中。
(2) 氯化钾缓冲液（KCl Buffer）的配制方法：- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。
-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。
-根据实验要求，调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。
(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法：- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂的配制方法2×SDS gel-loading buffer10×PBS10×SDS-PAGE电泳液10×转膜液细胞裂解液□组分浓度 50mM Tris-HCl(pH6.8)，100mM DTT，2%SDS，0.1%Bromophenol blue，10%Glycerol□配制量 10ml□配制方法 DTT 0.1572g，Bromophenol blue 0.01g，Tris-HCl(1M pH6.8) 500ul，10% SDS 2ml，Glycerol 1ml，超纯水定容至10ml。
分装后于4度保存。
□组分浓度 NaCl 8%，KCl 0.2%，Na2HPO4.12H2O 2.9%g，KH2PO4 0.2%g□配制量 1L□配制方法称取NaCl 80.0g，KCl 2.0g，Na2HPO4.12H2O29.0g，KH2PO4 2.0g，超纯水定容至1L。
□组分浓度 Tris 250mM，甘氨酸 2M，SDS 1%□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g，甘氨酸 144.0g，SDS 10.0g,超纯水定容至1L。
□组分浓度 Tris 250mM，甘氨酸 2M□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g，甘氨酸 144.0g，超纯水定容至1L。
注意：1×转膜液的配制为100ml 10×转膜液，200ml甲醇定容至1L。
□组分浓度 NaCl 150mM，NP-40 0.5%，Tris-HCl 10mM，PMSF 0.1mM， aprotimin 2ug/ml， NaN3 0.02%□配制量 100ml□配制方法称取17mgPMSF溶于1ml甲醇，2mg aprotimin溶于10ml水配制成200ug/ml的储存液备用；称取NaCl 0.88g，NaN3 20mg,加入NP-40 0.5ml，Tris-HCl(1M pH7.2) 1ml，溶有PMSF的甲醇1ml，aprotimin储存液1ml，混匀溶解后超纯水定容至100ml。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中，调节pH值至7.4，溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液（NaHCO3，0.5mol/L）加入1L水中，经过气泡交换，可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液（K2HPO4，0.5mol/L）加入800mL水中，调节pH值至7.2，搅拌均匀，即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na（C10H14N2O8Na2）加入
1000mL水中，热溶解，调节pH值至7.0，搅拌均匀，得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐（C10H13N3O8)=14.2H2O）加入
1000mL的水中，搅拌，调节pH值至7.4，搅拌均匀，即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液（Na2HPO4）加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液（Ca(H2PO4)2）中，搅拌均匀，即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液（NaH2PO4）
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液（Ca(HCO3)2）中，搅拌均匀，即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多，根据实验需求，可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方，以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液（Phosphate buffer）磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中，用于控制溶液的pH值，适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液（Sodium chloride solution）氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一，通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液，常见的配方为0.9%氯化钠溶液（生理盐水）。
3. 碳酸氢盐缓冲液（Bicarbonate buffer）碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中，用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液（Tris buffer）Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液，可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液（pH 7.4），需要用Tris（三氯甲烷磺酸，Tris-HCl）和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液（Phosphate-buffered saline）PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液，具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液（pH7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液（Glycine buffer）甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中，用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液（pH8.3），需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液（Bovine serum albumin solution）BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质，用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
实验室常用试剂缓冲液配制
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。
下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方：PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）、PBST（含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液）和TBS（三氯甲烷缓冲盐溶液）。
配制PBS缓冲液：-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。
-调整pH值至7.4，采用10M氢氧化钠（NaOH）或者盐酸（HCl）。
-用去离子水稀释至1xPBS。
配制PBST缓冲液：-配制1xPBS。
- 加入0.1%（v/v）Tween-20。
-混合均匀。
配制TBS缓冲液：-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。
-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。
-调整pH值至8.0，采用盐酸（HCl）。
-用去离子水稀释至1xTBS。
2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型，一般包括凝胶和毛细管电泳。
配制凝胶电泳缓冲液：-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。
-用热板搅拌器加热，搅拌至溶解。
-冷却至室温后，调整pH值至8.3，采用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）。
-用去离子水稀释至所需浓度。
配制毛细管电泳缓冲液：-加入10mM氢氧化钠（NaOH）和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。
-调整pH值至9.2，采用盐酸（HCl）。
-加入1mM十二烷基硫酸钠。
-用去离子水稀释至所需浓度。
3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。
BCA法配制试剂：-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂（提取液A）。
-加入0.1M硫酸（提取液B）。
-混合提取液A和提取液B，即得到试剂。
Lowry法配制试剂：-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液（A液）到250mL锥形瓶中。
-混合硫酸/磷酸/酒精试剂（B液）。
-将A液倒入B液中混合，待用。
Bradford法配制试剂：-加入试剂A到450mL去离子水中。
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.离心管清洗液配制方法：将500mL蒸馏水加入500mL乙醇中配制而成。
2.TE缓冲液配制方法：将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合，加入蒸馏水配制而成。
最终pH值约为8.0。
3.LB培养基配制方法：将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨加入1L蒸馏水中，调整pH至7.0-7.5、将溶液加热，搅拌溶解，然后使用纸滤器滤过，装入含有取10g搅拌均匀的琼脂糖的培养皿中。
灭菌后冷却到45°C左右，然后再倒入培养皿中。
4. 蒸馏水（Milli-Q水）配制方法：使用商用蒸馏水设备如 Milli-Q等，生成去离子水，再通过0.22 μm的滤器进行过滤，获得蒸馏水。
5. LB/Agar培养基配制方法：将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨、15g/L 琼脂加入1L蒸馏水中，调整pH至7.0-7.5、将溶液加热，搅拌溶解，然后使用纸滤器滤过。
将过滤后的溶液倒入培养皿中，灭菌后冷却到45°C 左右。
1.TBE缓冲液配制方法：将1 M Tris-Borate 溶液、0.1 M EDTA 溶液、10% (w/v) Boric acid 溶液按5:19:75的比例混合，加入蒸馏水配制而成。
最终pH值约为8.0。
2.TAE缓冲液配制方法：将40 mM Tris、20 mM 醋酸和1 mM EDTA 按1:0.5:0.1的比例混合，加入蒸馏水配制而成。
最终pH值约为8.0。
3. Tris-HCl缓冲液配制方法：将1 M Tris-HCl 溶液加入蒸馏水，调整pH值至所需范围。
4.PBS缓冲液配制方法：将0.2g/LKH2PO4、0.2g/LNa2HPO4、8.5g/LNaCl和0.2g/LKCl加入1L蒸馏水中，调整pH值至7.45. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）配制方法：将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合，加入蒸馏水配制而成。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。
配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。
因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。
以下是各种缓冲液的配制方法。
一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。
用蒸馏水调节至1 L。
2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。
二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。
Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。
MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。
七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。
HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
Kan（卡那霉素）50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解，定容至50mL。
3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。
LB培养基□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中Tryptone（胰化蛋白胨）10gYeast Extract（酵母提取物）5gNaCl（氯化钠）10g2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
5.高温高压灭菌后，4℃保存。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法缓冲溶液是在化学实验和生物实验中常用的一种溶液，用于调节溶液的pH值，使其保持在特定的pH范围内。
常用缓冲溶液的配制方法有许多种，下面将介绍几种常见的缓冲溶液的配制方法。
一、Tris缓冲液配制方法：Tris缓冲液是一种常用的生物学缓冲液，常用于蛋白质电泳、酶反应等实验中，其配制方法如下：1. 准备所需的试剂：Tris碱（Tris base，化学名三羟基甲基氨基甲烷）。
2. 在计量瓶中称取适量的Tris碱，并将其溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的Tris碱溶液。
3. 调节溶液pH值：使用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节Tris溶液的pH值。
通常，Tris缓冲液的pH范围为7-9，具体的pH值取决于实验的要求。
4.定容：将溶液调节至最终所需体积，通过加入蒸馏水来调节。
二、Phosphate缓冲液配制方法：Phosphate缓冲液是生化实验中常用的一种缓冲液，其配制方法如下：1.准备所需的试剂：磷酸二氢钠（NaH2PO4）和磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
2.在计量瓶中称取适量的NaH2PO4和Na2HPO4，分别溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的NaH2PO4和Na2HPO4溶液。
3.调节溶液pH值：根据所需pH范围选择NaH2PO4和Na2HPO4的比例，同时用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节pH值。
4.定容：将溶液调节至最终所需体积。
三、Acetate缓冲液配制方法：Acetate缓冲液是一种常用的酸性缓冲液，在酶反应、DNA电泳等实验中常用，其配制方法如下：1. 准备所需的试剂：乙酸（Acetic acid）和醋酸钠（Sodium acetate）。
2.在计量瓶中称取适量的乙酸和醋酸钠，分别溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的乙酸和醋酸钠溶液。
3.调节溶液pH值：根据所需pH范围选择乙酸和醋酸钠的比例，同时用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节pH值。
4.定容：将溶液调节至最终所需体积。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法试剂是进行科学实验和研究所必需的物质。
常用试剂包括化学品、酶、抗体等。
缓冲液则是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液。
下面将介绍几种常用试剂和缓冲液的配制方法。
1.硫酸铜溶液硫酸铜溶液常用于定量分析和化学反应。
其配制方法如下：(1) 准备100ml容量瓶，称取1.27g的硫酸铜并将其溶解于去离子水中。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。
2.盐酸盐酸常用于酸碱中和实验及有机合成。
其配制方法如下：(1) 准备500ml容量瓶，称取36.5-37.5%的盐酸浓缩液25ml。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。
3.硝酸银溶液硝酸银溶液常用于检测氯离子的存在。
其配制方法如下：(1) 准备100ml容量瓶，称取2.91g的硝酸银固体并将其溶解于去离子水中。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。
4.碘液碘液常用于检测淀粉的存在。
其配制方法如下：(1) 准备100ml容量瓶，称取0.25g的碘固体，并将其溶解于去离子水中。
(2)加入去离子水至容量瓶刻度线，均匀摇匀。
缓冲液是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液，常用于生物化学、细胞生物学和分子生物学实验中。
以下是几种常用缓冲液的配制方法：1. Tris缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。
(2)打开pH计，将电极插入去离子水中进行校准。
(3) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。
(4) 将7.94g Tris酸加入加热的去离子水中，搅拌溶解。
(5) 加入约5ml盐酸，搅拌均匀，并用盐酸调节溶液至所需pH值。
2.PBS缓冲液(1)准备所需的磷酸二氢盐、氯化钠和氯化钾。
(2) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。
(3)将0.2g磷酸二氢盐、8g氯化钠和0.2g氯化钾加入加热的去离子水中，搅拌溶解。
(4)用盐酸或氢氧化钠调节溶液至所需pH值。
3. Tris-HCl缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。
超级实用的实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1 M Tris-HCl(pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓HCl调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml 的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
PBS Buffer组份浓度137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 配制量 1 L配制方法3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
实验室常用缓冲液配置方案
实验室常用缓冲液配置方案实验室里，各种缓冲液就像是实验操作的基石，有了它们，实验才能顺利进行。
今天，我就来和大家分享一下，我积累十年的实验室常用缓冲液配置经验，保证你一看就懂，一学就会！一、磷酸盐缓冲液（PBS）PBS，这可是实验室的“老熟人”了。
配置方法如下：1.称取8克NaCl，0.2克KCl，1.44克Na2HPO4，0.24克KH2PO4，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用pH计调整溶液至7.4。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
二、Tris缓冲液Tris缓冲液，用途广泛，特别是在蛋白质实验中，是不可或缺的。
1.称取121.1克Trisbase，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
三、醋酸缓冲液醋酸缓冲液，主要用于微生物实验和细胞培养。
1.称取5.7克NaAc·3H2O，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用冰醋酸调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
四、甘氨酸缓冲液甘氨酸缓冲液，适用于蛋白质电泳等实验。
1.称取15.1克甘氨酸，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用NaOH调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
五、氨水缓冲液氨水缓冲液，主要用于微生物实验。
1.量取100毫升浓氨水，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，搅拌均匀。
3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
六、硼酸缓冲液硼酸缓冲液，适用于核酸实验。
1.称取12.4克硼酸，放入烧杯中。
2.加入800毫升去离子水，用玻璃棒搅拌至溶解。
3.用NaOH调整溶液至所需pH值。
4.定容至1000毫升，过滤，分装，灭菌。
七、EDTA缓冲液EDTA缓冲液，主要用于金属离子螯合实验。
常用试剂、溶液及缓冲液的配制
常用试剂、溶液及缓冲液的配制1常用试剂、溶液及缓冲液的配制1.基本要求分子生物学所用试剂必须是分析纯或分子生物学试剂级。
溶液配制水尽可能使用灭菌、蒸馏、去离子水（建议用Milli-Q过滤系统或类似系统进行过滤）。
除非有特殊的说明，大部分配制的溶液需用0.22um孔径滤膜过滤除菌或者高压灭菌（15psi，121℃,20～30min）。
使用高压灭菌的水、灭过菌的容器以及灭过菌的贮液来配制溶液，会延长所配制溶液的使用时间。
用干燥的化学试剂和无菌水配置的溶液一般都不需要在灭菌；有些酸、碱和一些有机化合物溶液也不需要灭菌，因为微生物不能在这些溶液中生长。
制备的溶液应该分成小分保存。
如果没有特别说明，则所有贮液和缓冲液至少能在室温下贮存六个月。
作为贮液应贮存在4℃或-20℃，使用时取出到达到室温后再开启，以防止试剂内的缩合作用，以确保度数精确。
以质量浓度表示的溶液浓度是指在100ml溶液中溶质的质量，质量单位为g；以体积分数表示的溶液浓度是指总体积为100ml溶液中各组分成分的体积，体积单位为ml。
缓冲液的ph为25℃是溶液的ph。
2.浓酸及碱的摩尔浓度溶液质量分数/% 浓度/mol/L冰乙酸甲酸盐酸硝酸磷酸硫酸氢氧化铵氢氧化钾氢氧化钠 90～100903670859528（NH3）505017.423.411.615.714.61814.813.519.13.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（spermidine）溶解2.55g亚精胺（相对分子质量为254.6）于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份。
贮存于-20℃.不须将溶液灭菌1mol/L精胺（spermine）溶解3.48g精胺（相对分子质量为348.2）于足量水中，使终体积为10ml，分装为小份贮存于-20℃.不须将溶液灭菌。
10mol/L乙酸铵（ammonium acetate）将77.1g乙酸铵（相对分子质量为77.1）溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。
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实验常用试剂、缓冲液的配制方法
Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml
□组份浓度100mg/ml Ampicillin
□配制量50mL
□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
Kan（卡那霉素）50mg/ml
□组分浓度50mg/ml卡那霉素
□配制量50mL
□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml
□组份浓度24mg/L IPTG
□配制量50mL
□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
X- Gal 20mg/m
□组份浓度20mg/L X-Gal
□配制量50mL
□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解，
定容至50mL。
3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。
LB培养基
□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl
□配制量1L
□配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中
Tryptone（胰化蛋白胨）10g
Yeast Extract（酵母提取物）5g
NaCl（氯化钠）10g
2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
5.高温高压灭菌后，4℃保存。
注：1. LB固体培养基每100ml LB培养基加入1.5g琼脂粉。
2. 5N NaOH新配后溶液加入需要重新测定。
3.待培养基温度降至50℃时，以手不烫为准，按比例加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。
50×TAE Buffer (pH8.5)
□组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA
□配制量100m L
□配制方法 1.称量下列试剂，置于200mL烧杯中。
Tris 24.2 g
Na2EDTA·2H2O 3.72 g
2.向烧杯中加入约80 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加入5.71 ml的冰乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至100mL后，室温保存。
注：1xTAE的稀释（如500ml1xTAE即10mL 50xTAE稀释于490mL的去离子水）。
1％琼脂糖凝胶（核酸电泳用）
□组份浓度1％琼脂糖凝胶
□配制量100m L
□配制方法 1.称量1g琼脂糖置于200mL锥形瓶中。
2.加入100ml1×TAE Buffer，摇动混匀。
3.放入微波炉加热2min至琼脂糖完全溶化。
4.插入梳子，等温度降下来，倒胶。
1.M Tris-HCl
□组份浓度 1 M Tris-HCl（pH6.8）
□配制量100mL
□配置方法 1.称量12.11gTris 置于200mL 烧杯中。
2.加入约80mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加入11mL的浓盐酸。
4.定容至100mL，室温保存。
1.5M Tris-HCl
□组份浓度 1.5 M Tris-HCl（pH8.8）
□配制量100L
□配置方法 1.称取18.17gTris置于200mL烧杯中。
2. 加入约80mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至100mL。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH 值。
5 N NaOH
□组份浓度5N NaOH
□配制量100mL
□配置方法 1. 量取80mL 去离子水置于100～200mL 塑料烧杯中
2. 称取20g NaOH 逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌以放热。
3. 待NaOH完全溶解后，定容至100mL。
4. 将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。
注：NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂。
2.5 N HCl
□组份浓度 2.5 N HCl
□配制量100mL
□配置方法 1.在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸
（11.6N），均匀混合。
2.室温保存。
25xPB Buffer
□组份浓度25xPB Buffer
□配制量100mL
□配制方法 1. 称量下列试剂，置于100 ML烧杯中。
Na2HPO4 (磷酸氢二钠) 2.74g
NaH2PO4（磷酸二氢钠）0.79g
2. 向烧杯中加入约80 ML去离子水，充分搅拌溶解。
3. 定容至100 ML。
1xPBS Buffer
□组份浓度1xPBS Buffer
□配制量100mL
□配制方法 1. 称量8.5g Nacl置于100 ML烧杯中。
2. 向烧杯中加入40 ML 25xPB Buffer搅拌溶解。
3. 滴加5N NaoH调节PH值至7.2，将溶液定容至1L.
4. 高温灭菌后，室温保存。
注：PBST的配制:1L 1xPBS加1ml吐温-20。
10%（W/V）过硫酸铵
□组分浓度10%（W/V）过硫酸铵
□配制量10mL
□配制方法 1.称取1g过硫酸铵；
2.加入10ml的去离子水后搅拌溶解，
3.贮存于4℃。
注：10%过硫酸铵最好现配现用，配好的溶液在4℃保存可使用2周左右，过期会失去催化效果。
10%（W/V）SDS
□组份浓度10%（W/V）
□配制量100mL
□配制方法 1.称量10gSDS 置于100～200mL 烧杯中，加入约80mL的去离子水，
68℃加热溶解。
2.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2 。
3.将溶液定容至100mL后，室温保存
5X Tris-Glycine Buffer
□组分浓度0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5% (W/V)SDS
□配制量1L
□配制方法 1.称取下列试剂，置于1L的烧杯中
Tris 15.1g
Glycine 94g
SDS 5.0g
2.加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。
3.加入去离子水定容至1L后，室温保存。
注：1X Tris-Glycine Buffer（500ml即量取100ml稀释于400ml去离子水中）。
考马斯亮蓝R-250染色液
□组份浓度0.1％（W/V）考马斯亮蓝R-250，25%（V/V）异丙醇，10％（V/V）
冰醋酸
□配制量1L
□配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。
2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。
3.加入100mL的冰乙醋酸，均匀搅拌。
4.加入650mL的去离子水，均匀搅拌。
5.用滤纸去除颗粒物质后，室温保存。
考马斯亮蓝染色脱色液
□组份浓度10％（V/V）醋酸，5％（V/V）乙醇
□配制量1L
□配置方法 1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
醋酸100mL
乙醇50mL
dH2O 850mL
2.充分混合后使用。
膜转移缓冲液（Western杂交用）
□组份浓度39 mM Glycine，48 mM Tris，0.037%(W/V)SDS，20%(V/V)甲醇
□配制量 1 L
□配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中。
Glycine 2.9 g
Tris 5.8 g
SDS 0.37 g
2.向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加去离子水将溶液定溶至800 ml。
4.加入200 ml的甲醇，室温保存。
封闭缓冲液（Western杂交用）
□组份浓度5%(W/V)脱脂奶粉/PBST Buffer
□配制量100 mL
□配制方法 1.称0.5g脱脂奶粉加入到10ml PBST Buffer中，搅拌溶解。
2.4℃保存待用(本封闭液应该现配现用)。
100mM EDTA(PH8.0)
□组份浓度100mM EDTA
□配制量100mL
□配制方法 1.称取37.524gNa2EDTA·2H2O,置于200mL烧杯里。
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌。
3.用NaOH调节PH值至8.0（让EDTA完全溶解）。
4.加去离子水将溶液定容至100ml。
5.高压灭菌后，室温保存。