常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法

1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）

X毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升

)

甘氨酸分子量 = ， mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ mol/L）

邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

Na 2HPO 4分子量 = ， mol/L 溶液为28.40克/升。

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Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液含35.01克/升。 C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

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使用时可以每升中加入

1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化

钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L ）

6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量， mol/L 溶液为29.41克/毫升。

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22

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7．磷酸盐缓冲液

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Na2HPO4·12H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。

NaH2PO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝

配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，

配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，

配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。

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用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于。

其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。

1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。

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硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H3BO3,分子量=,溶液为12.37克/升。

)

硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）

X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升加水稀释至200毫升

甘氨酸分子量=;0.2M溶液含15.01克/升。

13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）

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硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;0.05M溶液为19.07克/升。

14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）

2+2+

Na2CO2·10H2O分子量=;0.1M溶液为28.62克/升。

N2HCO3分子量=;0.1M溶液为8.40克/升。

15．“PBS”缓冲液

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pH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions

注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。

常用pH缓冲溶液的配制和pH值

Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions