常见缓冲液配制方法

常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液配制方法 Prepared on 24 November 2020常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = ， mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ mol/L）X毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = ， mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量 = ， mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量， mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量， mol/L溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L）Na2Ac·3H2O分子量 = ， mol/L溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为85.61克/升。

Na2HPO4·12H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。

NaH2PO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。

磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。

这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。

1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。

b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。

c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。

搅拌以加速溶解过程。

d.继续搅拌，使其冷却至室温。

e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。

f.用去离子水稀释至总体积100mL。

2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。

-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。

3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。

以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。

b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。

-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。

4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。

常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。

配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。

2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。

配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。

-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。

3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。

配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。

-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。

4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。

配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。

5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。

配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。

以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。

在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。

常见缓冲液的配制

常见缓冲液的配制附溶液配制方法：pH7.2 0.01mol/L PBSKH2PO40.38gNa2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g蒸馏水加至1000mLpH7.4 PBS/TNaCl8.0gKH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）KCl0.2g吐温200.5mL蒸馏水加至1000mLpH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原液1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g蒸馏水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1% 醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸馏水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）四氢呋喃10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS 100mlM-缓冲液（pH7.2）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mgEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇1mmol 0.07ml4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1mlM-缓冲液99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（pH7.2）97ml0.2% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml冰醋（乙）酸7ml蒸馏水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸馏水1000ml0.17mol/L氯化铵液氯化铵4.574g蒸馏水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g 蒸馏水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O）19.333g蒸馏水500ml0.12mol/L草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O）8.527g蒸馏水500ml0.17mol/L醋酸铵液醋酸铵6.552g蒸馏水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸馏水500ml0.32mol/L甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸馏水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇（比重0.803）11.976ml蒸馏水500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。

常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1mol/L 溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。

NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8，配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。

用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na 2HPO 4分子量 = 14.98，0.2 mol/L 溶液为28.40克/升。

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含35.01克/升。

C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液氢氧柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。

毫升。

Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。

用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）三羟甲基氨基甲烷（Tris ）HOCH2 CH2OH CHOCH2 NH2分子量=121.14;0. 1M 溶液为12.114克/升。

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法缓冲液是一种用于调节溶液的pH值的溶液，常用于实验室中的生物化学和分子生物学实验中。

根据所需的pH范围和实验目的，可以使用不同的缓冲液配制方法。

以下是一些常见的缓冲液配制方法：1.磷酸盐缓冲液（PBS）磷酸盐缓冲液是一种常见的生物学实验中使用的缓冲液。

它的制备方法如下：-取一个容器，加入8克氯化钠（NaCl），0.2克磷酸二氢钠（NaH2PO4），和1.44克磷酸氢二钠（Na2HPO4）。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

2. Tris缓冲液Tris缓冲液适用于pH 7-9范围内的实验。

制备方法如下：- 取一个容器，加入121.14克Tris（羟甲基氨基甲烷）。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

3.醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液适用于pH3-5范围内的实验。

制备方法如下：-取一个容器，加入20毫升醋酸钠三水合物（NaC2H3O2·3H2O）。

-加入6毫升醋酸。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

4.磷酸缓冲液磷酸缓冲液适用于pH2-8范围内的实验。

制备方法如下：-取一个容器，加入0.126克磷酸二氢钾（KH2PO4）。

-加入0.680克磷酸二氢钠（Na2HPO4）。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

5.碳酸氢盐缓冲液（HEPES缓冲液）HEPES缓冲液适用于pH6-8范围内的实验。

-取一个容器，加入10克HEPES。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。

不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。

下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。

配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。

2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。

配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。

3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。

配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。

-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。

4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。

配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。

- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。

- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。

配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。

下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。

一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。

二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。

三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。

以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。

在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。

以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。

而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。

最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。

对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。

以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。

常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液LX毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = , mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升;2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液 mol/LX毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl,再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = , mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = , mol/L溶液为28.40克/升;Na2HPO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液含35.01克/升;C 4H2O7·H2O分子量 = , mol/L溶液为21.01克/升;4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存;5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液 mol/L柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量, mol/L 溶液为21.01克/升;柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量, mol/L 溶液为29.41克/毫升; 6．乙酸–乙酸钠缓冲液 mol/LNa 2Ac·3H 2O 分子量 = , mol/L 溶液为27.22克/升; 7．磷酸盐缓冲液1磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液Na2HPO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液为85.61克/升;Na2HPO4·12H2O分子量 = , mol/L溶液为克/升;NaH2PO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液为克/升;磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝,pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝,pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4,pH＝1～4,配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐,pH＝6～8,配碱性缓冲液：用Na2HPO4,pH＝10～12;用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS十二烷基硫酸钠会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾;磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小,如稀释10倍后pH 的变化小于;其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用;2磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液1/15 mol/L15M11.876克15M9.078克0.05M0.2M18℃0.04M8.25克0.05M25℃0.1M严;11．硼酸–硼砂缓冲液0.2M 硼酸根硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=;溶液=0.2M 硼酸根含19.07克/升; 硼酸H 3BO 3,分子量=,溶液为12.37克/升; 硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存; 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液0.05MX 毫升0.2M甘氨酸+Y 毫升加水稀释至200毫升甘氨酸分子量=;0.2M 溶液含15.01克/升; 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液0.05M 硼酸根 X 毫升0.05M 硼砂+Y 毫升加水稀释至200毫升硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=;0.05M 溶液为19.07克/升; 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液0.1M Ca 2+、Mg 2+存在时不得使用Na 2CO 2·10H 2O 分子量=;0.1M 溶液为28.62克/升; N 2HCO 3分子量=;0.1M 溶液为8.40克/升; 15．“PBS”缓冲液pH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions注：为保证pH值的准确度,上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制;常用pH缓冲溶液的配制和pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。

配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。

因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。

以下是各种缓冲液的配制方法。

一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。

用蒸馏水调节至1 L。

2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。

二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。

Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。

MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。

七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。

HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。

常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法1.醋酸/醋酸钠缓冲溶液：醋酸/醋酸钠缓冲溶液具有较宽的酸碱度范围，在生物化学以及分析化学实验中得到广泛应用。

其配制方法如下：(1)准备一定浓度的醋酸溶液，可以采用浓缩醋酸与适量的水混合而成。

(2)根据所需的缓冲溶液pH值，计算所需浓度的醋酸钠。

(3)将计算所需的醋酸钠溶解在适量的去离子水中，得到所需的缓冲溶液。

2.磷酸盐缓冲溶液：磷酸盐缓冲溶液在生物化学以及分子生物学实验中常用于维持pH值。

以下介绍两种常见的磷酸盐缓冲溶液的配制方法：(1)磷酸盐酸性缓冲液：-准备所需的酸性磷酸盐缓冲液，将一定量的二氢磷酸钠溶解在适量的去离子水中。

-根据所需的pH值，使用盐酸调节溶液的酸度，直至达到所需的pH 值。

(2)磷酸盐碱性缓冲液：-准备所需的碱性磷酸盐缓冲液，将一定量的氢磷酸二钠溶解在适量的去离子水中。

-根据所需的pH值，使用氢氧化钠调节溶液的碱性，直至达到所需的pH值。

3.碳酸盐缓冲溶液：碳酸盐缓冲溶液在一些生物化学实验中用于控制pH值。

以下介绍两种常见的碳酸盐缓冲溶液的配制方法：(1)酸性碳酸盐缓冲液：-准备所需的酸性碳酸盐缓冲液，将一定量的二氧化碳通过气体输注器向含有一定浓度的NaHCO3溶液中通入，直至溶液中的二氧化碳饱和。

(2)碱性碳酸盐缓冲液：-准备所需的碱性碳酸盐缓冲液，将一定量的Na2CO3溶解在适量的去离子水中。

4.三氯乙酸/氯化钾缓冲溶液：三氯乙酸/氯化钾缓冲溶液在DNA和RNA等生物大分子的提取和纯化过程中常用作酶及细胞的裂解缓冲液。

以下是常见的三氯乙酸/氯化钾缓冲溶液的配制方法：(1)将一定量的三氯乙酸和氯化钾溶解在适量的去离子水中，混合均匀。

(2)根据所需的缓冲溶液pH值，使用醋酸或氢氧化钾调节溶液的pH 值，直至达到所需的pH值。

5.甘氨酸缓冲溶液：甘氨酸缓冲溶液在生物化学实验中常用于维持pH值，并在一些药物的制剂和生物制品的稳定性中得到应用。

以下是甘氨酸缓冲溶液的配制方法：(1)准备一定浓度的甘氨酸溶液，将甘氨酸与适量的去离子水溶解。

常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3、7):取5mol/L醋酸溶液15、0ml,加乙醇60ml与水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3、7,用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8、0):取三羟甲基氨基甲烷12、14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8、0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8、1):取氯化钙0、294g,加0、2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml 使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8、1,加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9、0):取三羟甲基氨基甲烷6、06g,加盐酸赖氨酸3、65g,氯化钠5、8g,乙二胺四醋酸二钠0、37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9、0。

乌洛托品缓冲液:取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4、2ml,再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7、4):取巴比妥钠4、42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7、4,滤过。

巴比妥缓冲液(pH8、6):取巴比妥5、52g与巴比妥钠30、9g,加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7、8):取巴比妥钠5、05g,加氯化钠3、7g及水适量使溶解,另取明胶0、5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0、2mol/L盐酸溶液调节pH值至7、8,再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3、3):取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中与,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3、25～3、30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5、6):取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5、6,加水稀释至1000ml,混匀。

枸橼酸盐缓冲液:取枸橼酸4、2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。

常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

液或浓盐酸调节，冰箱保存。

6872柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

7．磷酸盐缓冲液242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。

NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH X 围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8，配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。

用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH X 围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。

其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。

史上最全缓冲溶液配制方法

常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0 甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X Y pH X Y2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/mlpH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/ml2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/LC6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M柠檬酸C6H8O7·H2O/g氢氧化钠NaOH/g浓盐酸HCl/ml终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10 使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法缓冲溶液是在化学实验和生物实验中常用的一种溶液，用于调节溶液的pH值，使其保持在特定的pH范围内。

常用缓冲溶液的配制方法有许多种，下面将介绍几种常见的缓冲溶液的配制方法。

一、Tris缓冲液配制方法：Tris缓冲液是一种常用的生物学缓冲液，常用于蛋白质电泳、酶反应等实验中，其配制方法如下：1. 准备所需的试剂：Tris碱（Tris base，化学名三羟基甲基氨基甲烷）。

2. 在计量瓶中称取适量的Tris碱，并将其溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的Tris碱溶液。

3. 调节溶液pH值：使用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节Tris溶液的pH值。

通常，Tris缓冲液的pH范围为7-9，具体的pH值取决于实验的要求。

4.定容：将溶液调节至最终所需体积，通过加入蒸馏水来调节。

二、Phosphate缓冲液配制方法：Phosphate缓冲液是生化实验中常用的一种缓冲液，其配制方法如下：1.准备所需的试剂：磷酸二氢钠（NaH2PO4）和磷酸氢二钠（Na2HPO4）。

2.在计量瓶中称取适量的NaH2PO4和Na2HPO4，分别溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的NaH2PO4和Na2HPO4溶液。

3.调节溶液pH值：根据所需pH范围选择NaH2PO4和Na2HPO4的比例，同时用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节pH值。

4.定容：将溶液调节至最终所需体积。

三、Acetate缓冲液配制方法：Acetate缓冲液是一种常用的酸性缓冲液，在酶反应、DNA电泳等实验中常用，其配制方法如下：1. 准备所需的试剂：乙酸（Acetic acid）和醋酸钠（Sodium acetate）。

2.在计量瓶中称取适量的乙酸和醋酸钠，分别溶解于蒸馏水中，得到所需浓度的乙酸和醋酸钠溶液。

3.调节溶液pH值：根据所需pH范围选择乙酸和醋酸钠的比例，同时用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节pH值。

4.定容：将溶液调节至最终所需体积。

(最全)常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。

53种常见缓冲液配制方法(总结)

53种常见缓冲液配制方法（总结）
第一类：氢氧化物缓冲液
1、氢氧化硫酸缓冲液：添加一定量的硫酸钾到相当量的硝酸钾中，按需可加入一定量的氢氧化钠，并使氢离子浓度保持在 0.05~0.10mol / L，即可得到pH为2.5~3.0的硫酸缓冲液，其综合离子强度约为 0.150 mol/L。

2、硝酸缓冲液：将一定量的硝酸钾溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为4.7的硝酸缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

3、三甲基磺酰胺缓冲液：将一定量的三甲基磺酰胺溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在
0.05~0.10mol / L，即可得到pH为7.2~7.5的三甲基磺酰胺缓冲液，其综合离子约为 0.10 mol/L。

第二类：基态缓冲液
1、乙醇缓冲液：将一定量的乙醇溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为6.3的乙醇缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

2、氢氟酸缓冲液：将一定量的氢氟酸溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.05~0.08mol / L，即可得到pH约为2.2的氢氟酸缓冲液，其综合离子约为 0.06~0.10 mol/L。