生物分离工程 第九章.有害物质

• 甲醛标准溶液的浓度计算： • X=（V1-V2）×c1×15 X—甲醛标准溶液的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； V1—空白试验所消耗的硫代硫酸钠标准溶液的体积，单 位为毫升（mL）； V2—滴定甲醛溶液所消耗的硫代硫酸钠标准溶液的体积 ，单位为毫升（mL）； c1—硫代硫酸钠标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（ mol/L）； 15—与1.00mL碘标准溶液（1.000mol/L）相当的甲醛的质 量，单位为毫克（mg）。
• 四、计算
X——样品中总二氧化硫的含量，mg／L； c——碘标准滴定溶液的物质的量浓度，mol／L； V——测定样品消耗的碘标准滴定溶液的体积，mL； V0——空白试验消耗的碘标准滴定溶液的体积，mL； 32——与1.00 mL碘标准溶液［c（1／2 I2）=1.000 mol／L］相当的以毫克表示的二氧化硫的质量； 25——取样体积，mL。
（2） 吸取 0 mL，0.10 mL，0.20 mL，0.30 mL，0.40 mL，0.50 mL 铅标准使用液（相当 0.0 μg，1.0 μg， 2.0 μg，3.0 μg，4.0 μg，5.0 μg 铅），分别臵于 125 mL 分液漏斗中，各加硝酸（1+99）至 20 mL。 于试样消化液、试剂空白液和铅标准液中各加 2.0 mL 柠檬酸铵溶液（200 g/L），l.0 mL 盐酸羟胺溶液（200 g/L）和 2 滴酚红指示液，用氨水（1＋1）调至红色， 再各加 2.0 mL 氰化钾溶液（100 g/L），混匀。各加 5.0 mL 二硫腙使用液，剧烈振摇 1 min，静臵分层后， 三氯甲烷层经脱脂棉滤入 1 cm比色杯中，以三氯甲烷调 节零点于波长 510 nm处测吸光度，各点减去零管吸收值 后，绘制标准曲线或计算一元回归方程，试样与曲线比 较。
标 葡 萄 酒、果 酒 250 ---0.2 50 黄 酒 -----0.5 ---酒
项目
总二氧化硫（ SO2） / （mg/L） 甲醛/（mg/L） 铅/（mg/L） ≤ ≤ ≤ ≤
a
啤 ---2.0 0.5 ----
展青霉素 a/ （ ug/L ） 仅限于果酒中
的苹果酒、山楂酒
第一节 甲醇含量的检测 一、来源 二、毒害作用 三、案例 1、2005年，云梦县一白酒加工销售点出售 的散装白酒中，甲醇含量竟然超过国家规定标 准200余倍。该县查封这批害人的毒酒，并对已 售出的少量有毒白酒进行追查。 云梦县质检局在城关泰山路一家白酒加工销 售点检查时，发现该点加工销售的散装白酒， 每100毫升甲醇含量达到8.32克，而国家规定白 酒中甲醇含量每100毫升不得超过0.04克。执法 人员现场封存了有毒白酒540余公斤。店主李某 称，该酒只销售了30余公斤。
2、样品处理
3、试剂 （1）高锰酸钾-磷酸溶液 （2）草酸-硫酸溶液 （3）品红-亚硫酸溶液 （4）标准甲醇溶液 （5） 60%（vol）无甲醇酒精 4、实验步骤 （1）标准系列管的制备
编号
0
1 0.20
2 0.40
3
4
5 1.00
甲醇标准溶 0 液（mL）
0.60 0.80
60%（vol） 0.50 0.50 无甲醇酒精 （mL）
5、计算
m 1000 甲醇(g／L) ＝ V 1000
6、说明及注意事项
第三法
变色酸法
1．原理 甲醇在磷酸溶液中，被高锰酸钾氧化成甲醛，用偏重亚硫酸钠除去过量的高锰酸钾，甲醛与变色酸 在浓硫酸存在下，先缩合，随之氧化，生成对醌结构的蓝紫色化合物。与标准系列比较定量。 反应式如下： 5CH3OH +2KMnO4 + 4H3PO4 5HCHO +2MnHPO4 + 2KH2PO4 + 8H2O
0.50 4.10
0.50 0.50 3.90 3.70
0.50 3.50
水（mL）
4.50 4.30
于各管中加入2.00 mL高锰酸钾-磷酸溶液，摇匀， 放臵10分钟。加2.00 mL草酸-硫酸溶液，褪色后， 加5.00 mL品红-亚硫酸溶液，摇匀，于室温下显色 30min(如室温低于200C，则需在200C水浴中显色)。 显色30分钟后，立即在590nm 波长下测光密度，绘 制标准曲线。从标准曲线上求得试样管光密度所对 应的甲醇量(毫克)，然后计算出样品中甲醇的含量。 （2）试样管的制备 品红-亚硫酸的呈色灵敏度与酒精含量有关，故 标准管与酒样管中酒精度应需一致。标准管中采用 酒精度为6％(vol)，因此，试样管中酒精度也需调 制成6％(vol)，参照标准管。
• 据公安部门初步调查，四名死者所饮用白酒均来自 五峰镇万马池十一号宏斌酒水批发部所批出，该店 业主王长兵，男，三十三岁，目前已被警方控制， 据其交代，今年三月十五日，他从宜都市聚能日用 品商店购进工业甲醇三点七四吨，共勾兑假酒六千 五百公斤，已售出约五千公斤，主要销往五峰县五 峰镇、采花乡宋家河、长乐坪镇白鹿庄。至三月二 十四日上午，相关部门追回嫌疑人所交代的假酒四 千二百八十八公斤。截止目前，五峰全县已查封散 装白酒七万六千八百三十二公斤，封存甲醇二千九 百七十公斤。 • 目前，该县领导带队深入各乡镇进行拉网式排查， 进一步加强宣传，同时向周边长阳县、宜都市告知 这一信息，以防问题散装白酒流入周边地区。
第二节 杂醇油（高级醇）含量的检测 一、概述 二、分析方法 （一） GC （二）对二甲胺基苯甲醛比色法 1、原理：除正丙醇外的高级醇，在浓硫酸 作用下，都会脱水，生成不饱和烃（如：异丁 醇变成丁烯，异戊醇变成戊烯）。而不饱和烃 与对—二甲氨基苯甲醛反应生成橙红色化合物， 与标准系列比较定量。
2、分析步骤 3、说明及注意事项 • （1）对—二甲氨基苯甲醛对不同醇类的显色 程度不一致。对相同量醇类，其显色灵敏度为 异丁醇﹥异戊醇﹥正戊醇，而正丙醇、异丙醇、 正丁醇等显色灵敏度很差。同时，酒中杂醇油 成分复杂，比例不一。准确的测定方法应采用 气相色谱法。 • （2）该显色反应不是杂醇油的特效反应，凡 试样中能被硫酸脱水生成不饱和烯烃的化合物， 如醛、酮和萜等都有类似反应而干扰测定。可 用盐酸间苯二胺处理。
/(mg/L） • a甲醇、氰化物指标均按 100％酒精度折算。
食品安全国家标准发酵酒及其配制酒 GB2758—2012 2013-02-01 实施 • 项 目 指 标 检验方法 啤酒 甲醛 / (mg/L)≤ 2.0 GB/T 5009.49
• 发酵酒卫生标准
指
GB2758-2005（已淘汰）
四、分析方法 （一）GC （二）品红—亚硫酸比色法 1、原理：甲醇测定采用氧化法。将甲醇氧化 成甲醛，用品红-亚硫酸显色，以比色法测定。 （1）甲醇在磷酸介质中被高锰酸钾氧化为甲醛： 5CH3OH + 2KMnO4 +4H3PO4＝5HCHO +2KH2PO4 + 2MnHPO4 + 8H2O （2）过量的高锰酸钾被草酸还原： 5H2C2O4 + 2KMnO4 + 3H2SO4＝ 2MnSO4 + K2SO4 + 10CO2 + 8H2O （3）所生成的甲醛与品红-亚硫酸（又称喜夫试 剂，Schiff）反应，生成醌式结构的蓝紫色化合 物，以比色法测定。
2、山西朔州假酒案 • 1998年除夕夜——“紧急通知：我市近日流入 清徐、文水、孝义生产的散装白酒，已造成严 重后果，望广大市民不要饮用此酒。”
• 文水县农民王青华用34吨甲醇加水后勾兑成散 装白酒57.5吨，出售给个体户批发商王晓东、 杨万才、刘世春等人。这些人明知道这些散装 白酒甲醇含量严重超标（后来经测定，每升含 甲醇361克，超过国家标准902倍），但为了牟 取暴利，铤而走险，臵广大乡亲生命于不顾， 造成27人丧生。 1998年3月9日，王北五峰甲醇中毒死亡人员增至4人 12人住院 • 新闻发布：国家葡萄酒质量网 • 发布时间：2009-3-26 中新社宜昌三月二十五日 电 (刘良伟 上官纯青)至二十五日下午，发生在湖 北省五峰土家族自治县的甲醇勾兑的散装白酒致死 人命事件，累计已有四人死亡，十二人住进医院抢 救治疗，还有十八人因出现不良反应在医院门诊输 液治疗。目前，宜昌市已启动食品安全三级应急响 应，采取系列措施控制事态进一步发展。湖北省质 监局、卫生厅、工商局、公安厅等部门派员已赶至 五峰指导事件调查处理工作。 三月二十三日十三时 零三分至二十四日十七时，湖北五峰县公安局连续 接到报案，共有四人疑似酒精中毒死亡。经公安、 质监、卫生等部门赶到现场调查取证，初步检验结 果表明酒中甲醇超标。
第三节
微量甲醛含量的检测
一、原理 甲醛在过量乙酸铵的存在下 , 与乙酰丙酮和 铵离子生成黄色的3,5-二乙酰基-1,4二氢吡啶 化合物，在波长 415nm 处有最大吸收，颜色的 深浅与甲醛的含量成正比，相应可得出试样中 甲醛的含量。 二、步骤（见实验指导书）
• 甲醛标准溶液的配制和标定： 吸取36%∽38%甲醛溶液7.0 mL，加入0.5 mL1mol/L硫酸，用水稀释至250 mL。此液为标准溶 液。 吸取上述标准溶液10.0 mL于100mL容量瓶中，加 水稀释定容。再吸取10.0mL稀释溶液于250mL碘量瓶 中，加90 mL水；20mL0.1mol/L碘标准溶液和15mL 1mol/L氢氧化钠溶液，摇匀，放臵15min。再加入 20mL1mol/L硫酸溶液酸化，用0.1000mol/L硫代硫酸 钠标准溶液滴定至淡黄色，然后加约1mL5g/L淀粉指 示剂，继续滴定至蓝色褪去即为终点。同时做试剂 空白试验。
3、 蒙古国副总理恩赫包勒德（08.1.2）说， 首都乌兰巴托巴嘎诺尔区新年期间发生饮用伪 劣白酒中毒事件，已造成11人死亡。 恩赫包勒德说，经调查，有52人在饮用同一 厂家生产的白酒后出现中毒症状，酒中甲醇含 量严重超标。除死者外，其余41名中毒者仍在 医院接受救治，其中3人病情严重。 恩赫包勒德说，政府已查封酒厂，并禁止在 巴嘎诺尔区出售白酒，质检机构已开始对乌兰 巴托市场上出售的酒精类饮料进行检查。 白酒在蒙古国是必不可少的招待品。