柚苷酶及柠檬苦素酶
柠檬苦素类化合物概述.
柑桔柠檬苦素类化合物的研究：一个综述摘要：柑橘中柠檬苦素类似物是一种罕见的天然化合物。
现已深入研究了其生物化学性质，生物功能，在食品中的应用，在植物生理学中的重要性，在不同植物物种和栽培品种的关系，副产品回收，和商业应用。
柠檬苦素类似物作为在食品中存在的潜在预防癌症的化合物，有着很大的意义。
本章总结了前人对柑橘中柠檬苦素类似物的化学和生物化学研究，以及探讨了以柠檬苦素类似物在人类和植物健康中发挥着的作用为研究方向的进一步研究项目。
柑橘类水果是世界上最受欢迎的食品之一，每年全球农业产量超过1亿吨。
作为一种被消耗的新鲜水果，柑橘的数量十分可观，越来越多的消耗来自于柑橘的加工产品，比如果汁、浓缩果汁、柑橘类饮料、其他食品等，都会消耗很多的水果。
除了是一种受喜欢的水果外，柑橘类水果已被证明具有许多对人体健康有重要影响的成分：维生素C、类胡萝卜素、叶酸、黄酮类化合物、类柠檬苦素、钾、优质水溶性纤维等等。
然而，在处理柑橘产品中有一个长期存在的问题，即苦味，尤其是橙汁和柚子汁中苦味更为明显。
在不同的栽培品种中苦的程度各不相同。
果汁中存在的苦味使其有着较低的市场价值，有时用吸附树脂处理，与其他无苦味的果汁混合，或丢弃。
在柑橘类果汁中苦味是由两种化合物导致：二氢黄酮新橙皮，如在柚子相关品种中发现的柚皮苷，和类柠檬苦素（1,2）。
柠檬苦素类似物是于芸香科、楝科家族的植物中出现的高含氧的三萜化合物。
柠檬苦素作为这组植物化学物质中的第一大化合物，从1841年以来已经被认为是柑橘的组成部分（3）。
1938年从脐橙果汁中得到分离（4），并在1949年（5）证明了脐橙果汁中的苦味原理。
柠檬苦素结构却是在发现该种物质的120年后才发现。
其结构是通过组合化学的方法和X-射线晶体学在20世纪60年代确定（6，7）。
柠檬苦素的化学成分是C26H30O8，分子质量是470。
柠檬苦素类化合物是柑桔类水果中已被证明具有生物活性的重要的质量成分。
柚皮苷酶对柑橘类果汁脱苦效果的研究
根据柚皮苷酶作用的特性, 分别研究酶剂量对脱苦 效果的影响 (在果汁温度为 45℃、果汁 pH 3. 5、作用时 间 60 m in 的条件下) ; 果汁的 pH 值对脱苦效果的影响 (在酶量为 0. 5 g·L - 1、果汁温度为 45℃、作用时间 60 m in 的条件下) ; 果汁温度对脱苦效果的影响 (在酶量为
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农业工程学报
2004 年
影响果汁本身的质量, 就必须在较短的时间内完成酶处 理脱苦的任务。
图 3 果汁的 pH 值与脱苦率的关系 F ig. 3 R elation sh ip betw een ju ice pH value and deb ittering rate
图 1 标准曲线图 F ig. 1 Standa rd cu rve
图 2 柚皮苷酶用量与脱苦率的关系 F ig. 2 R ela tion sh ip betw een na ring ina se u sage
am oun t and deb ittering ra te
③样液测定: 准确吸取待测液 3 mL 2 份, 于 2 支具 塞试管中, 加试剂空白液至 5. 0 mL , 各加 90% 二甘醇 5. 0 mL , 再分别加 4 m o l·L - 1 N aO H 0. 0 和 0. 1 mL , 摇匀, 以标准曲线同样的方法进行发色、测定, 以加碱管 的吸光度减去不加碱管中的吸光值, 查标准曲线, 即得 所取样液中柚皮苷含量毫克数。
柠檬苦素类化合物生物活性研究进展
安徽农学通报2024年01期经济作物柠檬苦素类化合物生物活性研究进展张文琦1纪宏秀1吴倩1王猛1魏德莉2（1聊城大学生命科学学院，山东聊城252059；2聊城市人民医院，山东聊城252200）摘要柠檬苦素类化合物是一类高度氧化的四环三萜类次生代谢产物，主要存在于芸香科（Rutaceae）和楝科（Meliaceae）植物中，包括柠檬苦素、诺米林和黄柏酮等物质。
本文对柠檬苦素类化合物的生理活性进行概述，总结其各类生物学活性及作用机制，为柠檬苦素进一步用于健康保护、食品开发和农业生产等提供参考。
关键词柠檬苦素；生物活性；抗癌；抗菌中图分类号S567.9文献标识码A文章编号1007-7731（2024）01-0021-06Overview of researches on limonoids and their biological activitiesZHANG Wenqi1JI Hongxiu1WU Qian1WANG Meng1WEI Deli2（1School of Life Sciences,Liaocheng University,Liaocheng252059,China;2Liaocheng People’s Hospital,Liaocheng252200,China）Abstract Limonoids are a class of highly oxidized tetracyclic triterpenoid secondary metabolites that are mainly found in the Rutaceae and Meliaceae plant families,including substances such as limonin,nomilin,and obacunone.In this study,we mainly review the main physical and chemical properties of limonins and their physiological activities on the body,systematically summarize their various biological activities and mechanisms of action,hoping to lay an important foundation for further application of limonins in health care,food development,agricultural production and other aspects.Keywords limonoids;biological activities;anticancer;antimicrobial柠檬苦素类化合物是一类具有呋喃环并且高度氧化的四环三萜类化合物，具有中等极性，不溶于水和乙烷，溶于烃类、醇和酮。
北京市平谷区2023-2024学年九年级上学期期末考试化学试卷(含答案)
北京市平谷区2023-2024学年九年级上学期期末考试化学2024.1学校班级姓名考号考生须知1．本试卷共9页，共两部分，40道小题，满分70分。
考试时间：70分钟。
2．在试卷和答题卡上准确填写学校名称、班级、姓名和考号。
3．试题答案一律填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。
4．在答题卡上，选择题用2B铅笔作答，其他试题用黑色字迹签字笔作答。
5．考试结束，请将本试卷和答题卡一并交回。
可能用到的相对原子质量：：H—1 O—16 C —12 Si—28第一部分选择题（共25分）每小题1分。
在每小题列出的四个选项中，选出符合题目要求的一项。
空气是人类赖以生存的自然资源，我们应该保护它。
回答1~3题。
1.空气成分中，体积分数约为21%的是A．氮气 B．二氧化碳 C．氧气 D．稀有气体2.下列关于二氧化碳用途说法不正确的是A．光合作用 B．供给呼吸 C．制碳酸饮料 D．灭火3.2012年我国新修订《环境空气质量标准》，下列项目未列入空气质量监测的是A．NO2 B．N2 C．CO D．PM2.54.下列符号能表示2个氢原子的是A．2H B．H2 C．H2O D．2H25.下列物质含有氧分子的是A．水B．过氧化氢C．氧气D．二氧化碳6.以下生活垃圾应该投入可回收物垃圾桶的是A．吃剩的苹果核 B.废书本 C.宠物粪便 D.用过的餐巾纸7.下列物质中，属于纯净物的是A．海水 B．食醋 C．高锰酸钾 D．加碘食盐8. 下列物质的用途中，主要利用其化学性质的是A．石墨用作电极 B．活性炭吸附水中的颜色和气味C．生石灰用作食品加热包 D．干冰用于人工降雨9. 如图所示的图标表示禁止燃放鞭炮的是A. B. C. D.10.O 2和O 3的化学性质不同，本质原因是A ．密度不同B ．原子种类不同C ．分子质量不同D ．分子种类不同元素组成了绚烂多彩的物质世界，回答11~15题。
11.地壳中含量最多的元素是A ．氧B ．硅C ．铝D ．铁12. 下列元素的元素符号书写不正确的是A ．铜 CuB ．氯 CLC ．硫 SD ．镁 Mg 13.碳元素与氧元素的本质区别是A ．质子数不同B ．电子数不同C ．中子数不同D ．最外层电子数不同14. 碳酸钙是常用补钙剂，缺钙人群可适当食用。
柚苷酶在柑橘类果汁脱苦中的应用
柚苷酶在柑橘类果汁脱苦中的应用作者：张夙夙来源：《安徽农学通报》2014年第12期摘要：以柚皮苷为主的苦味物质广泛存在于柑橘中，使得柑橘类果汁在饮用时口感不佳，难以被消费者接受。
该文就柚苷酶的性质、脱苦机理、方法及其影响因素，以及对柚苷酶在柑橘类果汁脱苦中的应用进行了综述。
关键词：柚苷酶；柑橘类果汁；脱苦中图分类号 TS275.5 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2014）12-39-02Abstract：Citrus juice is difficult to be accepted by consumers when drinking because of the bitterness substances such as naringins are widely exists in citrus.This review deals with the application of naringinase on debittering of citrus juice focus on properties of naringinase，mechanism，as well as methods and effect factors of debittering.Key words：Naringinase；Citrus juice；Debittering柑橘类果汁中的苦味物质主要是由以柚皮苷、新橙皮苷等为代表的类黄酮化合物和以柠檬苦素、诺米林等为代表的三萜系化合物造成的[1]。
由于这些苦味物质的存在，使柑橘类果汁的品质受到影响，令消费者在饮用时难以接受，口感不佳。
因此，柑橘类果汁的脱苦技术在柑橘类果汁的加工过程中显得尤为重要。
由于柑橘类果汁苦味的主要来源是柚皮苷，因此去除柚皮苷就能降低果汁的苦味。
目前柚皮苷的去除方法有多种，利用柚苷酶的酶法脱苦技术，因其能在保持柑橘类果汁品质的基础上较好地去除苦味[2]，受到越来越多的重视。
柚苷酶及柠檬苦素酶
柚苷酶及柠檬苦素酶一、柑橘中的苦味物质柑橘类果实的苦味物质主要有以柚皮苷、新橙皮苷、枸杞苷等为代表的黄烷酮糖苷类化合物和以柠檬苦素、诺米林等为代表的三萜系化合物的衍生物—柠檬苦素类似物。
1、柚皮苷的结构和分布柚皮苷(Naringin)是一种二氢黄酮类化合物，它又称柚苷、柑橘苷、异橙皮苷、柚皮素-7-O-新橙皮糖苷，学名为柚皮素-7-β-D-葡萄糖(2→1)-α-L-鼠李糖，分子式C27H32O14，分子量580.55，其结构式如图1所示。
图 1- 1柚皮苷的结构式主要存在于芸香科植物柚(Pummelo,Citrus,grandis)、葡萄柚(Grapefruit，Citrus paradisi)、酸橙(Sour orange,Citrus aurantium)及其变种的果皮和果实中，以及枳实、枳壳、骨碎补、化橘红等中草药中。
普通柚果汁中柚皮苷含量为40-138 ppm，葡萄柚汁中柚皮苷含量为136-362 ppm，枳实、枳壳及化橘红中柚皮苷含量分别为1.87-22.72%和0.3-29.2%，因产地、品种、原料成熟度不同而异。
骨碎补中柚皮苷含量为0.3-1.5%。
此外，枸桔果实及叶、梧桐科植物球穗千斤拔叶、唇形科植物牛至以及蕨类植物如Ceterach officinarum 和铁线蕨属的一些种类组织中也含有柚皮苷，但这些植物中柚皮苷的含量较低。
柚皮苷在蒸馏水中苦味阀值为20 mg/L，在果汁中约为30 mg/L。
其溶解度随含糖量的增加而升高，随pH值的升高而降低，在没有成熟的柑橘果实中柚皮苷含量最多。
2 柠檬苦素类似物2.1柠檬苦素类似物的结构和分布柠檬苦素类似物又称类柠檬苦素(Limonoids），是一类具有呋喃环的三萜类化合物。
类柠檬苦素具有高度氧化的三萜醇类诱导体结构，与C-17位的呋喃结合，形成C-3位或者C-6位的内脂环，具有C-14、C-15位向的环氧化物特征，主要以游离苷元和配糖体两种形式存在，见图2。
超声波提取柠檬苦素
操作步骤
⑤将滤液旋转挥发至总体积的三分之一。 （即样液） ⑥减压蒸馏滤液至浸膏状。 ⑦二氮甲烷溶解，加2倍体积异丙醇，4℃低 温结晶石油醚洗涤，得无色片状晶体。 ⑧计算得率。
工艺流程图
石油醚超声脱脂
80%乙醇提取
脱脂粉末 乙醇提取物
干燥的 柑橘粉
减压蒸馏 无色片 状晶体 二氮甲烷溶解，加2倍体积异丙醇， 4℃低温结晶石油醚洗涤， 浸膏
计算含量
式中：A 1 为标液中柠檬苦素的峰面积；A 2 为样品溶液中柠 檬苦素峰面积；C 为标液中柠檬苦素的质量浓度( m g /ml )； 样品质量。
计算得率
提取率＝产品目标物质含量*产品质量/ （原料目标物质含量*原料质量）
得率＝产品质量/原料质量
超声波提取技术
• 超声波在溶剂和样品之间产生声波空化作用，使 固体样品分散，增大样品与萃取溶剂之间的接触面 积，提高目标物从固相转移到液相的传质速率。
.
超声波提取的原理
•超声波在物质介质中的相互作用效应可分为热效应、空化效 应和机械传质效应。超声波的热效应、机械传质作用及空化作 用成为超声技术在提取应用中的三大理论依据。
样品前处理
鲜果皮、桔核100kg，于40一45℃鼓 风烘干，烘干后于粉碎机中粉碎至80目， 用石油醚超声脱脂后密封包装于一4℃冰 箱中，备用。
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标准曲线的制作
1、柠檬苦素标准溶液的配制 精确称取柠檬苦素标准品5.0m g ，用甲醇溶 解定容至 25 ml容量瓶中配成0.2mg/ml 的标准 液，用0.45 μm的微孔滤膜过滤，备用。 2、标准曲线的绘制 取柠檬苦素标准溶液分别进样5 、1 0、1 5、 2 0、2 5、3 0、3 5μl 于液相色谱仪中，检测峰 面积。以浓度( C ) 为横坐标，峰面积( A ）为纵 坐标，绘制标准曲线。
柚苷酶选育方案
柚苷酶菌种选育方案一第一阶段：菌种的培养与选育一、培养产柚苷酶菌种培养基配方：低糖柚苷培养基（500ml)MgSO4 0.5%, ——2.5gK2HPO4 0.1% ——0.5g, KCL0.5%, ——2.5g蔗糖1%，——5.0gNaNO30.3%, ——1.5g柚苷0.5%，——2.5g琼脂1.5%。
——7.5gPH自然（来自西南农业大学柚苷酶生产菌的选育）。
实验仪器：烧杯(200ml 一个)，三角瓶（1000ml 一支），量筒（100ml），玻棒，容量瓶（500ml 一支）天平(0.1 和0.0001) ，药匙，高压蒸汽灭菌锅，磁力搅拌器,精密PH计，棉花，纱布，牛皮纸，标签纸，麻绳，皮筋。
配制培养基：1、按上述配方称量药品，置于烧杯中加少许水搅拌至全溶；2、将混合液倒入500ml的容量瓶中定容；3、将定容混合液倒入1000ml烧杯中，加入1.5% 琼脂(先溶），用磁力搅拌器加热搅拌融化;4、将融液分装到1000ml的三角瓶中，加塞，用牛皮纸包扎，灭菌锅灭菌（0.1MPa，121度，灭菌30min）；5、贴上标签，灭菌完后，冷却放入培养箱保存（待用）。
2，接种仪器及药品：柚苷酶，蒸馏水，无菌水，新制低糖柚苷培养基涂布器，培养皿(20个) ，称量纸，移液枪，移液枪盒，0.1和1.0的移液枪头， 1.5ml 离心管（10个），离心管盒，培养箱，超净台，电子天平（0.0001），高压灭菌锅，橡皮筋，旧报纸，。
菌种选育：1、用酒精擦拭天平外表面，之后放置在超净台过夜灭菌；2、将移液枪枪头放入移液枪枪盒，离心管放入离心管盒(离心管单独灭菌，称量纸，牛皮纸），并分别用旧报纸包好，同时也将培养皿，涂布器，烧杯，手套用旧报纸包装好，将50ml二次蒸馏水加入三角瓶中加塞包扎，分次用高压灭菌锅灭菌（0.1MPa，121度，灭菌30min），之后放入超净台灭菌半小时；3、取出柚苷酶在超净台中戴手套打开包装，用灭菌后的称量纸称量50mg酶粉末；4、取六只灭菌好的1.5ml离心管，编号（1——7），分别用移液枪加入0.9ml无菌水，（3、4步双人同时操作）；5、将粉末倒入1号离心管中，震荡充分溶解，用移液枪取出0.1ml溶液加入2号离心管中，震荡混匀，在3——7号进行同样操作，依次配备出10-1（2号管），10-2，10-3，10-4，10-5，10-6。
柚苷酶及柠檬苦素酶
柚苷酶及柠檬苦素酶一、柑橘中的苦味物质柑橘类果实的苦味物质主要有以柚皮苷、新橙皮苷、枸杞苷等为代表的黄烷酮糖苷类化合物和以柠檬苦素、诺米林等为代表的三萜系化合物的衍生物—柠檬苦素类似物。
1、柚皮苷的结构和分布柚皮苷(Naringin)是一种二氢黄酮类化合物，它又称柚苷、柑橘苷、异橙皮苷、柚皮素-7-O-新橙皮糖苷，学名为柚皮素-7-β-D-葡萄糖(2→1)-α-L-鼠李糖，分子式C27H32O14，分子量580.55，其结构式如图1所示。
图 1- 1柚皮苷的结构式主要存在于芸香科植物柚(Pummelo,Citrus,grandis)、葡萄柚(Grapefruit，Citrus paradisi)、酸橙(Sour orange,Citrus aurantium)及其变种的果皮和果实中，以及枳实、枳壳、骨碎补、化橘红等中草药中。
普通柚果汁中柚皮苷含量为40-138 ppm，葡萄柚汁中柚皮苷含量为136-362 ppm，枳实、枳壳及化橘红中柚皮苷含量分别为1.87-22.72%和0.3-29.2%，因产地、品种、原料成熟度不同而异。
骨碎补中柚皮苷含量为0.3-1.5%。
此外，枸桔果实及叶、梧桐科植物球穗千斤拔叶、唇形科植物牛至以及蕨类植物如Ceterach officinarum 和铁线蕨属的一些种类组织中也含有柚皮苷，但这些植物中柚皮苷的含量较低。
柚皮苷在蒸馏水中苦味阀值为20 mg/L，在果汁中约为30 mg/L。
其溶解度随含糖量的增加而升高，随pH值的升高而降低，在没有成熟的柑橘果实中柚皮苷含量最多。
2 柠檬苦素类似物2.1柠檬苦素类似物的结构和分布柠檬苦素类似物又称类柠檬苦素(Limonoids），是一类具有呋喃环的三萜类化合物。
类柠檬苦素具有高度氧化的三萜醇类诱导体结构，与C-17位的呋喃结合，形成C-3位或者C-6位的内脂环，具有C-14、C-15位向的环氧化物特征，主要以游离苷元和配糖体两种形式存在，见图2。
酶在果蔬类食品生产中的应用3学时
研究表明，用果胶酯酶和聚半乳糖醛酸酶处理 苹果汁有很好的效果，但大部分商品酶对柠檬 汁、酸橙汁等pH值低的果汁的澄清作用不理想， 原因主要是过低的pH值抑制了酶的活性，研究 发现利用酶作用的产物即聚半乳糖醛酸可以起 到澄清作用。
固定化多酶系统（果胶酶、淀粉酶）
现在的研究趋向是使用固定化的多果胶酶系统 讲行果汁澄清，这些酶中包括降低果汁粘度、 降解果实组织的酶，甚至包括除去果汁中淀粉 的淀粉酶系统，因为一般果汁中都含有一些淀 粉，这些淀粉的存在会引起贮藏过程中果汁的 混浊，必须除去。
脱苦
酶制剂在柑桔果汁中可除去由柚皮苷和柠檬苦素 类似物而引起的苦味。如添加柚皮苷酶可使柚皮 苷水解成野黑樱素和鼠李糖，加入柠檬苷素脱氢 酶可把柠檬苦素氧化成柠檬苦素环内酯，从而达 到脱苦降苦的目的。
9.2.2 提取果胶
果实中的果胶在未成熟前是以不溶性的原果胶 形式存在的，在水果成熟过程中逐渐转变成可 溶性果胶。原果胶也可在酸、热作用下转变为 可溶性。由枯草杆菌、黑曲霉、酵母、担子菌 所生产的原果胶酶已被开发用于桔皮、苹果、 葡萄皮、胡萝卜中果胶的提取。用酶法提取果 胶与酸热法相比工艺简单，无污染，成本低， 产品质量除含糖量稍高外，无甚区别。
基因枪原理
导入ACC合成酶反义基因的番茄
Hamilton等于1990年首次构建了ACC氧化酶反 义RNA转基因番茄，在纯合转基因番茄果实中， 乙烯的合成被抑制了97%，从而使果实的成熟 延迟，贮藏期延长。导入ACC合成酶反义基因 的番茄也得到了类似的结果。转基因番茄的乙 烯合成也被抑制了99.5%，果实中不出现呼吸 跃变，叶绿素降解和番茄红素合成也都被抑制。 果实不能自然成熟，不变红，不变软，只有用 外源乙烯处理6天后才能使转基因番茄正常成 熟。因此，利用反义基因技术可以成功的培育 耐贮藏果蔬。
柠檬苦素的色谱研究进展
柠檬苦素的色谱检测方法研究进展摘要：赣南脐橙主要以鲜食为主，脐橙加工业落后，其主要原因为脐橙等柑橘类汁具严重的后苦作用，影响产品风味。
其中柠檬苦素为加工中主要苦味来源。
本文就柠檬苦素的色谱检测方法作简要的概述，旨在为脐橙的深加工中控制产品的质量提供一些参考。
关键词：脐橙；柠檬苦素；检测；色谱前言赣南是我国著名的脐橙生产基地，素有“中国脐橙之乡”之称。
赣南脐橙年产量已经突破150万吨，但目前国内对脐橙的开发利用率较低，95％以上产品仍依赖鲜销；且赣州以纽荷尔脐橙为主栽品种，占种植品种的90%以上，上市集中，常常出现“丰产不丰收”，脐橙滞销，果农“卖果难”等问题。
解决赣南脐橙滞销问题，最可行的办法就是大力发展脐橙深加工，而脐橙原料在深加工过程中变苦，是困扰脐橙果酒生产的难题。
脐橙鲜食或其鲜榨果汁并无苦味，但压榨的橙汁在室温中存放几个小时或在冰箱中冷藏过夜，会变苦。
这种脐橙果汁中的延迟苦味源于无苦味的前体物生成了柠檬苦素。
据报道，脐橙等柑橘类汁出现延迟苦味的原因主要是在酸性、加热、冰冻或机械损伤等逆境环境条件下，果实中所存在的非苦味的柠檬苦素A环内酯转变成了具有强烈苦味的柠檬苦素[1]。
脐橙苦味主要来自柠檬苦素类(limonin)的变化。
柠檬苦素含量的高低直接影响脐橙及其产品的品质，测定柠檬苦素的含量可用于控制脐橙及其相关产品的质量。
随着仪器分析技术的广泛应用和检测技术的发展，研究者建立了多种检测柠檬苦素类似物的方法，主要有分光光度法、薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)等。
1.薄层层析法薄层色谱法的优点是简便快捷，缺点是由于是目测，结果误差较大，所以分析重现性一直束缚着其的发展。
Dreyer 在最初的柠檬苦素检测方面做出了重要贡献，1965 年，Dreyer 首次使用薄层层析法( TLC) 对柠檬苦素类似物甙元进行了定量分析，用核磁共振技术（NMR）对柠檬苦素结构的解析[2]。
随后Hasegawa 和Bennett 利用这两种方法分离、鉴定30 种柠檬苦素苷配基和20 种柠檬苦素配糖体[3]。
柚皮苷酶在柑橘类饮料生产中的应用
柚皮苷酶在柑橘类饮料生产中脱苦的应用柑橘是柑、桔、橙、金柑、柚、枳等水果的总称。
就柑橘汁而言，产品出现的过度苦味是柑橘加工业所面临的严重问题。
研究表明，柑橘类苦味物质主要分为两大类: 一类是黄烷酮糖苷类化合物，主要代表物为柚皮苷、新橙皮苷、枸杞苷等；另一类是三萜系化合物，主要代表物为柠檬苦素和诺米林等。
目前主要的脱苦方法有：代谢脱苦、屏蔽脱苦、吸附脱苦、酶法脱苦、固定化细胞脱苦、超临界CO脱苦、膜分离脱苦、基因工程脱苦等。
酶法脱苦具有操作简单、脱苦条件温2和、脱苦效率高、便于应用等优点。
一.实验目的1、了解柑橘类果汁的制作过程，熟悉工艺流程。
2、理解柚皮苷酶在柑橘类饮料生产中的脱苦原理和作用。
3、对柚苷酶进行柑橘类果汁的脱苦的工艺参数进行研究。
二.实验原理1、由于柑橘类果汁中，苦味的主要来源是柚皮苷，去除柚皮苷就会使果汁苦味减轻。
酶法脱苦所用到的酶主要是柚皮苷酶，它由α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶组成。
α-L-鼠李糖苷酶可将柑橘类果汁中黄烷酮糖苷类化合物的柚皮苷水解成樱桃苷和鼠李糖,樱桃苷的苦味约为柚皮苷的三分之一, 因此苦味有所减轻；樱桃苷可在β-D-葡萄糖苷酶的继续作用下生成无苦味的柚皮素和葡萄糖。
2、一定量的原果汁→测定柚皮苷原含量→加柚皮苷酶处理→测定柚皮苷现含量→数据分析。
三.实验材料1、实验材料：梁平柚。
2、实验试剂：柚皮苷、柚皮苷酶、氢氧化钠、柠檬酸、二甘醇、抗坏血酸。
3、实验器材：电热恒温水浴锅、电子分析天平、pH计、台式离心机、离心管、多功能食品粉碎机、分光光度计、小刀、水银温度计、试管、胶头滴管、100ml容量瓶。
四.实验步骤1、榨取梁平柚原汁具体工艺流程如下：选取原料（梁平柚）→清洗去皮→破碎（加入抗坏血酸护色）→榨汁(四层医用纱布袋挤压榨汁) →过滤(五层医用纱布过滤) →离心分离(4600r/min，10min处理) →原果汁2、柚汁的pH值对柚汁脱苦效果的影响榨取得到的原果汁的pH在2.3～3.6之间。
QuEChERS-HPLC测定柚类果实中柠檬苦素类化合物
QuEChERS-HPLC测定柚类果实中柠檬苦素类化合物
钟世欢;陈青俊;王京;叶佳明;杨琳;王岳;陈云义;孙崇德
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2022(48)4
【摘要】建立了柠檬苦素类化合物的QuEChERS-HPLC检测方法,同时测定了不同品种柚类果实中柠檬苦素、诺米林、黄柏酮3种柠檬苦素类化合物含量。
样品经乙腈均质超声提取,离心后取上清液,用QuEChERS净化管净化,通过CAPCELL PAK C_(18)MG色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)梯度洗脱分离,检测波长为210 nm,二极管阵列检测器。
结果表明,方法在0.10~200μg/mL线性良好,相关系数大于0.999,平均回收率为99.0%~100.3%,相对标准偏差为1.0%~2.1%。
柚类果实不同品种以及不同果实组织部位中3种柠檬苦素类化合物含量差异显著。
该研究可为柠檬苦素类化合物在食品和医药等领域的利用研究提供参考。
【总页数】5页(P261-265)
【作者】钟世欢;陈青俊;王京;叶佳明;杨琳;王岳;陈云义;孙崇德
【作者单位】赞宇科技集团股份有限公司;浙江公正检验中心有限公司;浙江大学果实品质生物学实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.渗滤法从柚籽中提取柠檬苦素类化合物
2.羧基和咪唑基团在柚柠檬苦素类化合物糖基转移酶催化反应中的作用
3.柑桔果实中柠檬苦素类化合物的研究现状与展望
4.柚籽中类柠檬苦素的初提工艺研究
5.柚籽中类柠檬苦素的初提工艺研究
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常山胡柚不同部位中柠檬苦素的含量分析
常山胡柚不同部位中柠檬苦素的含量分析刘晓政;严晓丽;胡丹;施堂红;占元毅【摘要】利用高效液相色谱法检测常山胡柚中柠檬苦素的含量,并对常山3个不同胡柚基地的胡柚不同部位中柠檬苦素的含量进行了对比分析.结果表明,不同基地的常山胡柚不同部位中柠檬苦素含量变化规律基本相同,其中胡柚皮中含量最多,其次是囊衣,最后是海绵层.用水作为提取溶剂,提取温度80℃,料液比1∶25(g∶ mL),提取时间90 min,胡柚皮中柠檬苦素含量达2.68 mg/g,囊衣中柠檬苦素含量可达1.13 mg/g,海绵层中柠檬苦素含量可达0.88 mg/g.超声辅助提取时,含量依次为3.01 mg/g、1.37 mg/g、1.12 mg/g.【期刊名称】《食品工程》【年(卷),期】2017(000)002【总页数】4页(P54-57)【关键词】常山胡柚;柠檬苦素;提取;检测【作者】刘晓政;严晓丽;胡丹;施堂红;占元毅【作者单位】浙江省果品质量检验中心,浙江常山324200;浙江省果品质量检验中心,浙江常山324200;浙江省果品质量检验中心,浙江常山324200;浙江省果品质量检验中心,浙江常山324200;浙江省果品质量检验中心,浙江常山324200【正文语种】中文【中图分类】TS255.7常山胡柚，又名金柚，于20世纪70年代末期被发现，1991年被东北林学院张韵冰教授正式命名为常山胡柚，以产地命名，具有鲜明的地域特色。
常山胡柚果实与常见的柑桔类果实不同，甜度不如砂糖橘，香味不如脐橙，具有清凉祛火、平喘化痰、生津止咳、健胃壮身、降血脂、抗便秘、抗衰老等特殊的药理功效。
当地柚农形容胡柚是“有点苦、确实凉”。
常山胡柚“有点苦”的主要原因是胡柚中含有的柠檬苦素类化合物。
柠檬苦素类化合物是存在于芸香科和楝科植物中一类三萜系化合物，是具有高度生物活性的植物次生代谢产物。
柑桔属芸香科植物，是天然柠檬苦素化合物的主要来源。
最新研究表明，柠檬苦素类化合物在抗癌、镇痛、调节体内胆固醇水平、防止动脉粥样硬化和除虫方面具有明显效果，被认为是理想的功能食品添加物。
台湾文旦柚和蜜柚之柠檬苦素葡萄糖转移酶研究
台湾文旦柚和蜜柚之柠檬苦素葡萄糖转移酶研究吴思节;徐源泰【期刊名称】《农业科学》【年(卷),期】2016(006)004【摘要】柑橘类果汁在加工过程,在风味上受柠檬苦素影响甚巨,本研究针对台湾柚类柠檬苦素葡萄糖转移酶基因(limonin glucosyltransferase gene, lgt),选殖出一1600 bp片段,并对其作用活性位置预测出一段转录的44胺基酸序列,得到一个完整的开放框架(open reading frame),此段功能性基因有助于未来进行构筑与选殖,应用于柑橘类果汁在风味改进的研究。
本研究亦探讨台湾的文旦柚和蜜柚lgt在开花至成熟时期的表现情况。
结果得知,蜜柚中仅有第二型存在,且果实中含有大量lgt表现,而文旦同时具有两型lgt存在,但表现量相较于蜜柚低,此结果可应证前人之结论,即文旦柚于果实成长后期采收,因 lgt表现量不足,而导致其果实中仍含有大量苦味化合物仍有存在,导至于加工过程中苦味化合物的生成。
本研究利用內果皮以快速蛋白纯化系统(FPLC) HiTrap Q管柱进行纯化,得分子量大约40 kDa之LGTase,并以2,2''''-二辛可宁酸(bicinchoninic acid)定量蛋白质为0.6,1 mg/ml,此方法有助提高柚类加工过程中果皮废弃物的利用性。
【总页数】11页(P99-109)【作者】吴思节;徐源泰【作者单位】[1]台湾大学园艺学系,台湾台北;;[1]台湾大学园艺学系,台湾台北【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.羧基和咪唑基团在柚柠檬苦素类化合物糖基转移酶催化反应中的作用 [J], M.R.KARIM;F.HASHINAGA2.琯溪蜜柚和玉环文旦柚果皮挥发油化学成分分析比较 [J], 方健;周期;薛胜霞;王贤亲3.文旦柚和下河蜜柚组织培养快速无性繁殖 [J], 邹金美;余金富;叶国利;李长选;吴玲玲;林荣福;潘一山4.台湾文旦柚的栽培管理 [J], 曾玉荣5.台湾花莲文旦柚抵沪度中秋 [J], 袁亚祥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。