细胞蜡块ppt课件
细胞蜡块技术
细胞蜡块技术细胞蜡块技术是一种常用的实验方法，用于制备和处理细胞样本。
细胞蜡块是将细胞样本固定在蜡块中，以便进行细胞学研究和分析。
本文将介绍细胞蜡块技术的原理、应用和步骤。
细胞蜡块技术的原理是利用石蜡的固化特性，将细胞样本固定在蜡块中，并使细胞结构完整保留。
这种方法可以用于保存和保存大量的细胞样本，并且可以长期保存。
与其他固定方法相比，细胞蜡块技术具有较低的成本、易于操作和保存长期保存细胞样本的优势。
细胞蜡块技术在病理学和生物学研究中得到了广泛的应用。
在病理学中，细胞蜡块可以用于制备组织切片，进行病理诊断和分子生物学研究。
在生物学研究中，细胞蜡块可以用于制备细胞切片，观察细胞形态学和细胞结构的变化。
此外，细胞蜡块还可以用于免疫组织化学染色、原位杂交和蛋白质分析等实验。
制备细胞蜡块的步骤通常包括以下几个步骤：收集细胞样本、固定细胞、包埋细胞和切片。
首先，收集细胞样本，可以是细胞培养物、组织样本或体液样本。
然后，用适当的固定剂对细胞样本进行固定，以保持细胞结构的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林、乙醛等。
接下来，将固定的细胞样本置于蜡块模具中，加入熔化的石蜡，使细胞样本被蜡块包埋。
最后，用切片机将蜡块切割成薄片，以便观察和分析。
细胞蜡块技术的优点之一是可以长期保存细胞样本。
由于细胞样本被固定在蜡块中，可以避免细胞样本的降解和变性，使得细胞样本可以保存数年甚至数十年。
这对于长期研究和样本的交流和共享非常重要。
细胞蜡块技术还可以应用于临床诊断和治疗。
通过制备细胞蜡块，可以对疾病进行病理诊断和分子生物学分析，为临床治疗提供依据。
例如，通过对癌细胞蜡块的染色和分析，可以确定肿瘤的类型、分级和预后，指导临床治疗的决策。
细胞蜡块技术虽然在细胞学研究中得到了广泛应用，但仍然存在一些局限性。
首先，制备细胞蜡块需要专门的实验设备和技术，对实验人员的要求较高。
其次，细胞蜡块制备过程中可能引入一些伪影或变性，影响细胞结构的观察和分析。
皮肤病理石蜡切片PPT课件
鉴别病变性质
根据切片的病理表现，鉴 别皮肤疾病的性质，如炎 症、肿瘤等。
02
皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用
常见皮肤疾病的病理表现
皮肤肿瘤
良性和恶性皮肤肿瘤在石蜡切片 中呈现出不同的病理特征，如细 胞形态、组织结构、生长方式等。
感染性疾病
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皮肤病理石蜡切片ppt课 件
• 皮肤病理石蜡切片基础知识 • 皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用 • 皮肤病理石蜡切片的临床意义 • 皮肤病理石蜡切片的未来发展 • 皮肤病理石蜡切片相关问题解答
01
皮肤病理石蜡切片基础知识
定义与重要性
定义
皮肤病理石蜡切片是指将皮肤组织经 过一系列处理后，用石蜡包埋、切片 ，再进行染色得到的病理组织学图片 。
皮肤病理石蜡切片的操作过程是怎样的？
皮肤病理石蜡切片的操作过程包括取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等步骤，最后在 显微镜下观察并做出病理诊断。
注意事项
01
取材时需要注意什么？
取材时应该选取病变组织中具有代表性的部分，避免取材过度或不足，
影响诊断结果。
02 03
如何保证切片质量？
在制作石蜡切片过程中，需要保证脱水、包埋、切片等步骤的质量，以 确保切片平整、无气泡、无破损，从而提高显微镜下观察的准确性和可 靠性。
将固定后的组织进行石蜡包埋 、切片和染色。
观察与诊断
病理医生通过显微镜观察切片 ，根据病变特征做出诊断。
病例分析
病例一
病例三
患者皮肤出现红色斑块，病理表现为 血管增生和炎症细胞浸润，诊断为银 屑病。
患者皮肤出现水疱和糜烂，病理表现 为病毒感染引起的细胞病变，诊断为 单纯疱疹。
细胞蜡块技术在细胞学病理诊断中的应用
细胞蜡块技术在细胞学病理诊断中的应用细胞蜡块技术在细胞学病理诊断中的应用什么是细胞蜡块技术？细胞蜡块技术（cell block technology）是一种通过固化细胞样本获得组织样本的技术。
通常使用的是经过液基细胞学检查的剩余液体细胞样本，将其中的细胞聚集在一起并加入固化液，通过固体化使细胞形成小团块，这些小团块就可以进行常规的组织学检查。
细胞蜡块技术在细胞学病理诊断中的优势？细胞蜡块技术在细胞学病理诊断中具有以下优势：•可以同时进行细胞学和组织学检查，提高诊断准确性。
•可以获得高质量的细胞和组织样本，进一步提高诊断水平。
•更方便保存和储存样本，在需要复查时更加便捷。
细胞蜡块技术在哪些疾病的诊断中被广泛应用？细胞蜡块技术在以下疾病的诊断中被广泛应用：•肺癌：可以通过细胞蜡块技术获取足量的细胞样本，进行细胞学和免疫组化检查，对肺癌的诊断非常有帮助。
•乳腺癌：细胞蜡块技术可以获取足量的乳腺细胞和乳腺组织样本，对于细胞学和免疫组化检查有很高的灵敏度和特异度，可以提高诊断的准确性。
•甲状腺疾病：细胞蜡块技术可以获取足量的甲状腺细胞样本，通过组织学检查、免疫组化检查可以鉴别良恶性病变，提高诊断准确率。
如何进行细胞蜡块技术？细胞蜡块技术的步骤如下：1.获取细胞样本。
2.准备固化液，可以使用福尔马林或醋酸盐。
3.将细胞样本加入固化液中，轻轻搅拌，使细胞样本均匀分散在固化液中。
4.在一个盛装模具的容器中倒入固化液，使固化液与细胞样本充分混合。
5.固化液固化后，将固化的细胞块放入切片盘中，切出薄片进行染色及检查。
细胞蜡块技术的一些注意事项:•细胞样本必须为高质量的样本，不能出现杂质和纤维组织等。
•固化液的浓度、工艺、时间等均需要严格控制，否则会影响固化效果。
•液体比固体固化要快，需要掌握好固化的时间，避免固化不彻底或过度固化。
细胞蜡块技术是一种提高细胞学病理诊断准确性的有效方法，对于各种疾病的检查具有重要意义。
病理学实验切片ppt
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通过显微镜观察切片的组织结构 和成分，判断组织是否发生病变。
染色观察
通过染色判断组织中是否存在特定 的抗原或抗体，从而判断组织是否 发生病变。
免疫组化染色
通过免疫组化染色技术，对组织中 的抗原进行定位和定性分析，从而 判断组织是否发生病变。
切片保存与维护
保存环境
切片应保存在干燥、阴凉、通风 的地方，避免阳光直射和潮湿。
03 实验切片在病理学中的应 用
疾病诊断
诊断肿瘤
病理学实验切片可以用于诊断肿瘤， 通过观察细胞形态、组织结构以及染 色反应等特征，判断肿瘤的性质、类 型和分化程度。
鉴别良恶性肿瘤
判断预后
病理学实验切片还可以通过观察肿瘤 细胞增殖活性、组织学分级等因素， 预测患者的预后情况。
病理学实验切片可以鉴别良恶性肿瘤， 为治疗方案的选择提供依据。
切片厚度限制
切片厚度过大会导致组织结构失 真，影响病理诊断的准确性。
切片厚度过小则可能导致组织结 构细节丢失，无法准确判断病变
性质。
合适的切片厚度需要根据组织类 型和观察目的进行选择，一般而 言，厚度在3-5微米之间较为适
宜。
组织结构失真
由于切片过程中组织受到刀片 切割的机械力作用，可能会导 致组织结构变形。
详细描述
免疫组化切片是利用抗原-抗体反应的原理，通过标记抗体显示组织或细胞内的抗原。这种方法有助于确定肿瘤 的性质、来源和分化程度，对于肿瘤的诊断和分类具有重要意义。
原位杂交切片
总结词
原位杂交切片是利用核酸探针检测组织或细胞内核酸的切片。
详细描述
原位杂交技术是一种分子生物学技术，通过标记的核酸探针与组织或细胞内的核酸序列进行杂交，从 而检测特定基因的表达和定位。原位杂交切片在研究肿瘤发生、发展机制以及基因诊断方面具有重要 价值。
常规组织病理技术ppt课件
缺点： ●经酒精固定的标本对核的染色不良，也不利于 染色体的固定。 ●要证明细胞含的脂肪和类脂质时，不能用酒精 固定。 ●如要证明组织内的色素时，不宜以酒精作为固 定剂。 ●不适用于固定大块组织。 ● 酒精价格较贵。
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80%-95%的酒精作为固定剂为好 高浓度酒精组织硬化显著,放置过久组织 收缩明显且质脆,不但影响制片, 组织形态也 不好。 很少单独使用
甲醛氧化 --- 蚁酸与血红蛋白结合—福尔马林色素 避免长时间固定， 固定后流水冲洗
●尿酸结晶可被溶解。
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甲醛固定液的配制:
（1）10% formalin
市售甲醛（浓度为37~40%） 1份
水
9份
(2)中性甲醛 以PH7.2-7.4PBS为溶液配制的甲醛固定液
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优点： ● 如要证明尿酸结晶和保存糖类，则须用 100%酒精固定。 ●在已用别种固定液后，可用70%酒精较 久的保存组织。 ● 酒精既有固定作用，又有脱水作用。
染色
常规染色 染色的目的：增加组织在显微镜下的分辨率
HE染色 主要用以显示各种组织、细胞的一般形
态结构以及疾病过程中病变的发生、发展及修 复的过程。
常规染色 特殊染色
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（一）染色原理
1、细胞核染色原理：核酸阴离子+苏木素阳离子→蓝色
2、细胞浆染色原理：蛋白质阳离子+伊红阴离子→伊红色
PH值低于蛋白质等电点
传统病理学技术
常规组织病理技术
（formalin固定 石蜡切片 HE）
现代新技术
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免疫组化
HE
乳腺导管
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免疫荧光
HE
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结肠癌 EB病毒原位分子杂交
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细胞蜡块PPT精选文档
3．细胞核特征 细胞核特征是判断良性与 恶性细胞的关键。正常细胞核体积相对较小，呈 圆形或卵圆形，边界光滑，染色质呈细颗粒状。
涂片上同一类型细胞之间的差别很小，称为 单形性。细胞核变化与特征见表8-5。
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4．细胞质特征 细胞质由Golgi体、核糖体、 内质网、线粒体和代谢物等组成，是影响细胞染色 性的重要因素之一。
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（二）液基细胞学技术 液基细胞学（LBC）技术是一种半自动或全自动
标本处理技术，其优点是： ①涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰。 ②筛检简便、快速。 ③能提高诊断的灵敏度和特异度。 ④能显著降低标本的不满意率。 ⑤可用于原位杂交和免疫细胞化学染色。
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LBC技术是对传统技术的有效补充， 但对某些非妇科标本，因LBC涂片缺乏背 景成分，会影响细胞学的诊断。目前，常 用的LBC技术有ThinPrep法和SurePath Prep法。LBC技术与传统技术比较见表8-3。
正常细胞或分化好的肿瘤细胞常见黏液球、泡 沫状微空泡、微绒毛刷状缘和纤毛。邻近细胞会出 现细胞质铸模现象。少数细胞有吞噬现象，见于良 性或恶性疾病，后者更常见。
细胞质变性包括水肿性和空泡样变化等，质膜 完整性丧失使细胞内容物溢出，即细胞溶解。 19
• 胸腹水病理细胞学制作蜡块技术就是将送检的胸 腹水，通过病理技术流程的处理，制作成细胞学 常规蜡块，将其细胞成分保存在蜡块中，从而切 片进行常规显微镜下诊断，判别细胞的性质、类 型，达到较为精确的肿瘤细胞的诊断。
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• 临床意义: • 1、增加了细胞涂片的数量、密度，并对细胞做了
很好保存，既能重复多切片，又能辅助肿瘤免疫 组化检测，提高了胸腹水中肿瘤诊断的阳性率。
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细胞蜡块制作流程及免疫组化运用
细胞蜡块制作流程及免疫组化运用In the process of making paraffin blocks for immunohistochemistry, the first step is to fix the tissue samples in formalin. Formalin fixation helps preserve the tissue structure and proteins for analysis. The fixed tissue is then dehydrated in a series of alcohol baths to remove water from the tissue. This is important to ensure optimal infiltration of the tissue with paraffin.接下来，将固定的组织样本浸泡在蜡中，使其充分渗透。
蜡渗透后，将组织放入模具中，倒入熔化的蜡液，然后将其冷却固化。
这样制成的蜡块可以方便地切片并进行免疫组化染色。
在免疫组化染色过程中，蜡块的切片会被放置在玻片上，接着通过脱脂、脱水和再次脱脂等步骤去除蜡和水分。
The next step involves antigen retrieval, where the tissue sections are heated in a buffer solution to unmask the antigens and improve antibody binding. This step is crucial for successful immunohistochemistry staining. After antigen retrieval, the tissue sections are blocked with a protein solution to minimize nonspecific binding of antibodies. The primary antibody specific to the targetantigen is then applied to the tissue sections and allowed to bind overnight at 4 degrees Celsius.接着是对组织切片进行染色，首先是涂抹特异性初级抗体，使其与目标抗原结合。
石蜡细胞学教学课件
细胞分化的过程与调控机制
基因选择性表达
01
细胞分化的根本原因是基因的选择性表达，使得同一来源的细
胞产生形态、结构和功能上的差异。
表观遗传学调控
02
通过DNA甲基化、组蛋白修饰等表观遗传学手段对基因表达进
行调控，影响细胞分化方向。
细胞间相互作用和信号传导
03
细胞间通过信号分子传递信息，调控彼此的分化方向和进程。
石蜡细胞学教学课件
汇报人：XX 2024-01-16
目 录
• 石蜡细胞学概述 • 石蜡制片技术 • 细胞形态与结构观察 • 细胞化学成分的显示与定位 • 细胞增殖与分化研究 • 石蜡细胞学的实验设计与数据分析
01 石蜡细胞学概述
石蜡细胞学的定义与发展
定义
石蜡细胞学是研究石蜡包埋组织细胞形态、结构和功能的一 门科学。
发展历程
自19世纪中叶石蜡切片技术问世以来，石蜡细胞学逐渐发展 成为生物学和医学领域的重要分支。随着技术的不断革新， 如免疫组织化学、原位杂交等技术的应用，石蜡细胞学研究 领域不断拓展和深化。
石蜡细胞学的应用领域
01
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医学领域
在病理学、组织学、解剖 学等领域广泛应用，用于 疾病的诊断、治疗和预防 。
生物学领域
用于研究细胞形态、结构 、功能和分化等生物学问 题，揭示生命现象的本质 和规律。
法医学领域
用于尸检、死因鉴定等法 医学实践，为司法审判提 供证据支持。
石蜡细胞学的研究意义
揭示生命现象
通过研究细胞形态、结构和功能 的变化，揭示生命现象的本质和 规律，为生物学和医学领域提供
理论支持。
辅助疾病诊断
显微镜观察
经过染色的石蜡切片在显微镜下 可以清晰地观察到细胞的形态、 结构和排列方式，为细胞学研究 和医学诊断提供重要依据。
细胞蜡块制作流程
细胞蜡块制作流程第一步：组织样本的采集首先，需要收集组织样本，可以是从活体上取得的组织标本，也可以是尸体解剖后得到的组织标本。
在采集组织样本时，需要注意保持组织的完整性和其所处的环境，以免对后续的实验造成影响。
第二步：组织固定采集到的组织样本需要立即进行固定处理，以保持组织结构和形态的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林、乙醇、缓冲盐酸等。
固定的方法大致有三种：浸泡法、浸渍法和灌注法，不同的固定方法需要使用不同的固定剂及时间。
第三步：蜡块包埋在组织固定后，需要进行包埋（Embedding）处理。
首先将固定组织置于70%乙醇中浸泡一段时间，去除水分和固定剂后，将其置于85%乙醇中浸泡，再转移置于95%乙醇、绝对乙醇，并最终浸泡于蜡中。
蜡块制备的蜡包括熔点约56-58°C的低熔点石蜡或熔点约60-63°C的高熔点石蜡，低熔点石蜡和高熔点石蜡的比例通常为1:1。
蜡包埋的目的是将组织固定在蜡块中，以便于后续的切片及染色处理。
第四步：制备组织切片将包埋在蜡块中的组织标本放入切片机中进行切片。
切片机通常使用金刚石刀或钨钢刀，刀片的厚度通常为3-5微米，切得过厚的切片会使细胞过于密集，不易观察，切得过薄的切片则容易断裂。
切片的品质对后续的染色及观察有很大影响，因此切片过程需要谨慎操作。
第五步：切片染色将切片浸泡于染色剂中，进行染色处理。
常用的染色方法包括常规的苏木精-伊红染色、免疫组化染色、原位杂交等。
不同的染色方法需要使用不同的染色剂及染色时间，染色过程中需要控制好温度和时间，避免染色不均匀或过度染色。
第六步：制备玻片将染色好的组织切片搬移到玻片上，并用透明胶水或溶胶将其固定在玻片上。
制备玻片的过程需要小心操作，以避免组织切片被破坏或移位。
第七步：整理和检查最后，需要对制备好的细胞蜡块进行检查。
通过显微镜观察切片的形态结构，检查染色情况，确保样本的完整性和染色的准确性。
如有需要，可对样本进行数字化扫描，以便于后续的研究和分析。
细胞蜡块制作流程及免疫组化运用
细胞蜡块制作流程及免疫组化运用1.细胞蜡块制作是一种常见的实验技术。
Cell block preparation is a common laboratory technique.2.首先，将收集到的细胞沉淀在离心管里。
First, the collected cells are centrifuged in a centrifuge tube.3.接着，将细胞沉淀固定在载玻片上。
Next, the cell pellet is fixed on a slide.4.固定后，将载玻片放入甲醇中进行脱水。
After fixation, the slide is dehydrated in methanol.5.然后，用蜡进行浸渍和包埋。
Then, the cells are infiltrated and embedded in paraffin wax.6.最后，切割成细胞蜡块。
Finally, the wax block is sectioned.7.细胞蜡块可以用于免疫组化实验。
The cell block can be used for immunohistochemistry.8.免疫组化是一种检测蛋白表达的技术。
Immunohistochemistry is a technique for detecting protein expression.9.通过免疫组化，可以确定细胞中特定蛋白的分布和定位。
Immunohistochemistry can determine the distribution and localization of specific proteins in the cells.10.首先，细胞蜡块被切成非常薄的切片。
First, the cell block is sectioned into very thin slices.11.然后，切片被放置在载玻片上。
细胞蜡块的制作方法
细胞蜡块的制作方法嘿，朋友们！今天咱就来讲讲细胞蜡块的制作方法。
这可是个精细活儿，就像雕琢一件艺术品一样呢！先来说说准备工作吧。
就好比要出门旅行得先收拾好行李，咱得把需要的东西都准备齐全咯。
各种试剂啦、器具啦，一个都不能少。
这就像是战士上战场，武器得带齐呀！然后就是取材啦。
这一步可得小心谨慎，得像考古学家挖掘珍贵文物似的，轻点儿，再轻点儿，千万别把那些珍贵的细胞给弄坏喽。
从样本中选取合适的部分，这可是关键的第一步呢！接下来就是脱水啦。
把取好的材料放进去，让它们好好地“洗个澡”，把水分都去掉。
这就好像洗衣服要甩干水分一样，只有把水去掉了，后面才能更好地进行操作呀。
脱水完了就该透明啦。
这一步就像是给细胞们蒙上一层神秘的面纱，让它们变得更加奇妙。
再然后就是浸蜡啦。
把细胞们放进融化的蜡液里，让它们好好地泡个“蜡浴”。
这就好像给它们穿上了一层厚厚的铠甲，保护着它们呢。
浸蜡之后，就是包埋啦。
把处理好的细胞小心翼翼地放进模具里，然后再倒上蜡液，等蜡液凝固，嘿，一个初步的细胞蜡块就出来啦。
这感觉就像盖房子，一砖一瓦地搭建起来。
等蜡块冷却变硬了，就可以进行切片啦。
这可是个技术活儿，得切得薄薄的，均匀的。
就像切面条一样，得切得恰到好处，不能厚了也不能薄了。
切好片后，就可以进行染色啦。
给这些小小的细胞片染上漂亮的颜色，让它们更加清晰地展现在我们眼前。
这就像是给一幅画上色，让它变得更加生动、美丽。
你说这细胞蜡块的制作是不是很神奇呀？就像变魔术一样，把那些小小的细胞变成了可以观察研究的样本。
每一步都需要我们精心操作，不能有丝毫马虎。
这可关系到后续的研究和诊断呢！要是哪一步出了差错，那可就前功尽弃啦！所以呀，咱可得认真对待，就像对待一件极其重要的事情一样。
总之呢，细胞蜡块的制作方法虽然有些复杂，但只要我们一步一步地来，细心、耐心地去做，就一定能做出完美的细胞蜡块。
这不仅是一门技术，更是一门艺术呢！大家加油吧，让我们一起在细胞的世界里探索奥秘！。
细胞蜡块ppt课件
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细针穿刺细胞标本的采集 通过穿刺吸取或非吸取法，可从充满液体的 器官或实体性器官中采集细胞标本，如肿瘤、心 包膜腔积液、胸膜腔积液、腹膜腔积液和脑脊液 等。影像学技术能对小而深、移动且难以触摸的 病变部位进行定位，有助于穿刺采集标本。
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涂片制备 直接涂片是将新鲜标本直接涂在载玻片上。间 接涂片是将各种液体标本进行浓缩处理后再涂片。 涂片制备方法见图8-1，图8-2。 渗出液、灌洗液和尿液等标本不易黏附在载玻 片上，宜采用蛋白类（如牛血清清蛋白）或离子类 （如多聚赖氨酸）黏附剂，增强细胞和载玻片之间 的黏附力，最大限度的保存标本中的细胞。
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制作的方法： 1.接到胸腹水后，将其静止沉淀1小时，然后吸取底
部液体置入塑料离心管中; 2.加入10%福尔马林液5ml，离心3500/5min，倾去上
清液;
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3.加入10%福尔马林液5ml，离心; 4.重复1次并静置，等待取材; 5.取材时用滤纸包裹即可，并通过脱水—浸蜡—包
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3．细胞核特征 细胞核特征是判断良性与 恶性细胞的关键。正常细胞核体积相对较小，呈 圆形或卵圆形，边界光滑，染色质呈细颗粒状。
涂片上同一类型细胞之间的差别很小，称为 单形性。细胞核变化与特征见表8-5。
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4．细胞质特征 细胞19质由Golgi体、核糖体、 内质网、线粒体和代谢物等组成，是影响细胞染色 性的重要因素之一。
三、标本固定
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1．湿固定 是通过使细胞的胞质脱水、蛋白质凝 固而达到固定的目的。
常用的固定液为乙醇类液体，常用方法有浸润法
和包被法。
湿固定可引起细胞皱缩，Carnoy固定液（乙醇-氯 仿-冰乙酸固定液）能溶解红细胞，适用于处理明显血 性的标本。聚乙二醇固定液能在涂片表面形成一层保
植物组织石蜡切片的制作课件
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• 切片刀的锐利与否
• 通常切片厚度为8～12微米，切出一片接一片的蜡带，用
毛笔轻托轻放在纸上。
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7. 粘片与烤片
• 用粘附剂将展平的蜡片牢附于载玻片上，以免在以 后操作中材料脱落。
• 经染色可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不同类 型的细胞组织。
• 根据观察要求及研究内容采用不同的染色剂及染法。
• 番红与固绿染色法
• 番红用l％的水溶液，固绿用0.5％的酒精液(用95％的
酒精配制)
• 染色步骤如下：
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10. 切片脱水、透明和封固
材料较硬的，用熔点较高的石蜡包埋；
切片较薄时（在8微米以下），用熔点较高的石蜡包 埋；
夏季采用熔点较高的石蜡（56,58）,冬季宜选用熔点 较低的石蜡（52,54）。
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• 石蜡的处理：
新蜡应溶一次，增加密度。
并用滤纸过滤去除杂质。
加5%～10%的蜂蜡(工蜂腹部下面四对蜡腺分泌物质 ),
最常用的固定液为FAA。固定时间不受限制，短则
数小时，长可延至数月或数年。
配方：
50％或70％酒精 90毫升
冰醋酸
5毫升
福尔马林
5毫升
柔软材料用50％酒精，坚硬材料用70％酒精配制。
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• 卡诺氏(Carnoy’s)固定液：有极强的渗透力
• 固定根尖和花药只需40-60分钟，时间太长不好(不能超
• 染色后的切片经梯度酒精脱水，二甲苯透明后，滴加 适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下， 进行封片。
细胞蜡块制作流程
细胞蜡块制作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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细胞质变性包括水肿性和空泡样变化等，质膜 完整性丧失使细胞内容物溢出，即细胞溶解。
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胸腹水病理细胞学制作蜡块技术就是将送检的胸腹 水，通过病理技术流程的处理，制作成细胞学常规 蜡块，将其细胞成分保存在蜡块中，从而切片进行 常规显微镜下诊断，判别细胞的性质、类型，达到 较为精确的肿瘤细胞的诊断。
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六、细胞病理学诊断 细胞病理学诊断是一个复杂的过程，但不能 过分强调最终结论的重要性。因为细胞学检查的 影响因素很多（表8-4），当涂片上有大量保存 良好的细胞时，会提高诊断的准确性，而缺乏背 景资料、涂片不佳、染色模糊等则会导致误诊。
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（一）细胞形态学判断16 的基本原则 1．细胞数量和类型 细胞数量和类型提供了靶 组织或器官的重要信息，足够量的标本是提高结果 可靠性的重要因素。 2．结构特征 在细胞学涂片中常常缺乏结构特 征。正常上皮细胞常保持细胞极性和细胞间黏附性 典型的恶性上皮细胞的极性差，细胞间相互重叠， 有时三维状聚集呈圆形。分化差的癌细胞黏附性更 差，多散在分布。
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细胞学在很多的情况下，仅仅作为筛查或只能给出 倾向性的诊断结果。尤其在针吸细胞学是唯一诊断 手段的情况下，这些缺陷给患者的诊断及后续治疗 带来了相当大的困难，如胸、腹水的细胞学定性， 转移癌与间皮瘤的鉴别等。
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我科采用北京首都医科大学附属北京友谊医院病理 科余小蒙医师创立的“酒精凝固-甲醛固定法”细胞 蜡块技术（及改进技术）制作FNA细胞蜡块，其具 有操作方便、快捷、微创，可重复切片用于免疫组 化及特殊染色，很好地弥补了传统FNA检查中的不 足，能够方便患者，快捷并更准确地做出诊断，满 足临床诊断需求。
检。
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2．空气干燥固定 是通过空气蒸发的方法 达到固定目的。最好是 逆着气流方向尽快将涂 片干燥。与湿固定相比， 空气干燥固定有使细胞 增大的趋势（图8-3）。
图8-3 标本固定方法比较定， D. 空气干燥固定）
四、标本浓缩技术 9 （一）传统技术 1．离心法和细胞离心法 ①离心法：适用于大 量液体的标本。②细胞离心法：适用于少量液体、中 等量细胞的标本。 2．滤膜过滤法 滤膜过滤法适用于大量液体、 少量细胞的标本。 3．细胞块法 适用于大多数悬液标本。制备方 法有血浆凝血酶法和琼脂法等。
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细针穿刺细胞标本的采集 通过穿刺吸取或非吸取法，可从充满液体的 器官或实体性器官中采集细胞标本，如肿瘤、心 包膜腔积液、胸膜腔积液、腹膜腔积液和脑脊液 等。影像学技术能对小而深、移动且难以触摸的 病变部位进行定位，有助于穿刺采集标本。
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涂片制备 直接涂片是将新鲜标本直接涂在载玻片上。间 接涂片是将各种液体标本进行浓缩处理后再涂片。 涂片制备方法见图8-1，图8-2。 渗出液、灌洗液和尿液等标本不易黏附在载玻 片上，宜采用蛋白类（如牛血清清蛋白）或离子类 （如多聚赖氨酸）黏附剂，增强细胞和载玻片之间 的黏附力，最大限度的保存标本中的细胞。
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（二）液基细胞学技术 液基细胞学（LBC）技术是一种半自动或全自动
标本处理技术，其优点是： ①涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰。 ②筛检简便、快速。 ③能提高诊断的灵敏度和特异度。 ④能显著降低标本的不满意率。 ⑤可用于原位杂交和免疫细胞化学染色。
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LBC技术是对传统技术的有效补充， 但对某些非妇科标本，因LBC涂片缺乏背 景成分，会影响细胞学的诊断。目前，常 用的LBC技术有ThinPrep法和SurePath Prep法。LBC技术与传统技术比较见表8-3。
穿刺涂片、TCT结合细胞蜡块 在病理诊断中的应用
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细胞病理学是一种常用的病理学检查方法，与组织 病理学检查相比，传统细针吸取方法（fine needle aspiration, FNA）FNA涂片有着不可忽视的缺陷：样 本量少，并且很难还原组织学结构，不可重复切片， 以及较难进行特殊染色等，这些缺陷直接影响了病 理医生的诊断准确性。
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临床意义: 1、增加了细胞涂片的数量、密度，并对细胞做了很
好保存，既能重复多切片，又能辅助肿瘤免疫组化 检测，提高了胸腹水中肿瘤诊断的阳性率。
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2、查到肿瘤细胞时，对细胞类型能够做很好的分型， 为肿瘤规范治疗提供更多参考依据。
3、此项技术较以前脱落细胞学普通涂片准确性更高， 保存更方便，对疾病的诊断更加明确。
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五、染色方法 Papanicolaou染色法适用于湿固定的涂片。 Romanowsky染色法适用于空气干燥固定的涂片， 在非妇科标本染色中常用。 苏木素和伊红染色法是组织切片最常用的染色 方法，也是许多细胞病理学实验室常用的染色方法。 不同染色技术均适用于妇科或非妇科标本的永 久性染色。
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3．细胞核特征 细胞核特征是判断良性与 恶性细胞的关键。正常细胞核体积相对较小，呈 圆形或卵圆形，边界光滑，染色质呈细颗粒状。
涂片上同一类型细胞之间的差别很小，称为 单形性。细胞核变化与特征见表8-5。
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4．细胞质特征 细胞19质由Golgi体、核糖体、 内质网、线粒体和代谢物等组成，是影响细胞染色 性的重要因素之一。
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制作的方法： 1.接到胸腹水后，将其静止沉淀1小时，然后吸取底
部液体置入塑料离心管中; 2.加入10%福尔马林液5ml，离心3500/5min，倾去上
清液;
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3.加入10%福尔马林液5ml，离心; 4.重复1次并静置，等待取材; 5.取材时用滤纸包裹即可，并通过脱水—浸蜡—包
三、标本固定
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1．湿固定 是通过使细胞的胞质脱水、蛋白质凝 固而达到固定的目的。
常用的固定液为乙醇类液体，常用方法有浸润法
和包被法。
湿固定可引起细胞皱缩，Carnoy固定液（乙醇-氯 仿-冰乙酸固定液）能溶解红细胞，适用于处理明显血 性的标本。聚乙二醇固定液能在涂片表面形成一层保
护性蜡质膜，适用于标本的长途转运和大规模人群筛