DNAGREEN核酸染料使用说明
SYBR GreenⅠ 核酸染料
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6μl
ddH O 2
补足至50μl
上海美季生物技术有限公司 Tel : 021-61452531 Fax : 021-61452532 Email : info@
该产品可用作实时定量 PCR专用荧光指示剂。用于任何一台 real-time PCR 仪上进行 PCR 反应。一般 使用时将 SYBR GREEN Ⅰ 稀释至 1X 浓度。 为了得到更高的荧光信号强度,根据所使用的聚合酶对其 耐受程度的不同,可以选择性的提高SYBR GREEN Ⅰ的浓度至3-4×。
上海美季生物技术有限公司
模板DNA
引物1[10 μM] 引物2[10 μM] 10×PCR Buffer dNTP Mixture (2.5mM each) Taq (2.5U/μl)
20×SYBR Green Ⅰ
<0.1μg
1μl 1μl 5μl 4μl
0.5-2μl
2.5μl
25mM MgCl2
特点
操作简单 价格便宜 适用范围广
储存方法
长期储存在 -20 ℃ 以下,避光 ;4Tel : 021-61452531 Fax : 021-61452532 Email : info@
上海美季生物技术有限公司
产品简介
SYBR GreenⅠ 核酸染料
SYBR Green Ⅰ是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料。与双链DNA结合后,其荧光大大增 强。这一性质使其用于扩增产物的检测非常理想。 SYBR Green Ⅰ的最大吸收波长约为 497nm,发射波长最大约为520nm。在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR Green Ⅰ荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射强荧光信号,而不掺入链中的SYBR Green Ⅰ染料分子仅有微弱荧光信号背景,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加同步。
DNAGREEN核酸染料使用说明
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DNAGREEN核酸染料使用说明货号:G7140规格:0.5ml(10000×)保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。
注意:DNAGREEN核酸染料属于微量核酸检测试剂,使用时请按照说明书操作。
产品简介:目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I(属于花氰类染料)虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高,但由于其化学稳定性差;此外,SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位,很容易使DNA条带模糊和扭曲,电泳清晰度和分辨率下降。
所以在实际应用中依然不能有效替代EB。
本产品是同时具有EB稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料,其特点如下:1.低毒。
其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2.灵敏。
检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求。
3.稳定。
对光、水和热的稳定性跟EB相当,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4.无分子间位移现象。
不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5.使用方法多样。
既可以加入熔化的胶中,也可以电泳后染色,还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7.观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源,可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9.DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察(需要将胶放在黑色背景下)。
由于避免了UV对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
使用方法:电泳中染色:本方法是将DNAGREEN直接加入溶化的凝胶中使用,只适用于琼脂糖凝胶电泳,不适用于PAGE。
1.将DNAGREEN直接加入到融化的琼脂糖凝胶中,每100mL凝胶加3-10uL DNAGREEN,混合均匀后倒胶。
琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料(如EB和SYBR Green I,否则会相互干扰)。
DNAGREEN核酸染料说明书
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DNAGREEN核酸染料说明书货号:G7140规格:0.5ml(10000×)保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。
注意:本产品属于微量核酸检测试剂,使用时请按照说明书操作。
产品简介:目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I(属于花氰类染料)虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高,但由于其化学稳定性差;此外,SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位,很容易使DNA条带模糊和扭曲,电泳清晰度和分辨率下降。
所以在实际应用中依然不能有效替代EB。
本产品是同时具有EB稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料,其特点如下:1.低毒。
其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2.灵敏。
检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求。
3.稳定。
对光、水和热的稳定性跟EB相当,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4.无分子间位移现象。
不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5.使用方法多样。
既可以加入熔化的胶中,也可以电泳后染色,还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7.观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源,可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9.DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察(需要将胶放在黑色背景下)。
由于避免了UV对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
使用方法:电泳中染色:本方法是将DNAGREEN直接加入溶化的凝胶中使用,只适用于琼脂糖凝胶电泳,不适用于PAGE。
1.将DNAGREEN直接加入到融化的琼脂糖凝胶中,每100mL凝胶加3-10uL DNAGREEN,混合均匀后倒胶。
琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料(如EB和SYBR Green I,否则会相互干扰)。
南京灵敏度高的核酸染料的使用方法
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南京灵敏度高的核酸染料的使用方法南京灵敏度高的核酸染料是一种广泛应用于分子生物学领域的染料,它能够在水平上提高DNA和RNA的检测敏感度和定量性能。
本文将详细介绍南京灵敏度高的核酸染料的使用方法,包括选择染料种类、操作前准备工作、实验步骤和注意事项等方面。
一、选择南京灵敏度高的核酸染料目前市场上存在许多种有灵敏度高的核酸染料,要选择适合自己实验的染料,需要考虑到以下几点:1、染料颜色:不需要油绿色或者绿色的染料,而是需要选择在GelDoc等成像软件上具有较高亮度且区分率较高的颜色,比如紫外线激发下的深蓝色或者暗红色。
2、染料浓度:选择进口品牌或者大名鼎鼎的品牌,以确保染料浓度准确,不至于影响定量结果。
3、染料用量:按照各自的实验需求,选择不同的染料用量,最好是浓度低但是能够显色清晰的染料。
二、操作前准备工作在进行核酸染色实验之前,需要进行以下准备工作:1、准备好检测所需要的DNA或者RNA样本。
本实验建议用质粒DNA,其不需要如同限制酶切片段那样到次数轴上,只需要做多次步骤,即可做出好几个等级的对照片。
2、根据实验所需的染色剂量,准备好透明的PCR管和电泳用塑料凝胶。
3、检查好实验平台是否干净。
可以使用0.1%甲醛杀菌,并用去离子水冲洗干净。
三、实验步骤1、样品制备:将DNA或RNA样本加入到PCR管2μl离心管中,加入10μl TBE缓冲液,使用30mm针筒进行混合,至于混合比例是1:6.2、电泳载体准备:将凝胶放在盖板上,在电泳盒中加入TBE缓冲液进行电泳,30分钟后取出。
3、样品电泳:将样品加入到凝胶槽中,进行电泳,电压为180V,电流为60mA,电泳时间为30-40分钟。
4、染色:在按照染料的要求使用,通常是将染料放入PET环中,使用电子泳床对其进行冷泳处理,1-2h后可以进行成像。
5、成像:使用GelDoc等成像软件进行成像。
选择最佳光源,调整图像设置,进行成像。
四、注意事项1、注意实验室卫生,防止氧化还原物质泄漏导致伤害。
上海常用的核酸染料的使用方法
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上海常用的核酸染料的使用方法
核酸染料在细胞学、免疫学、分子生物学研究以及临床检测等方面都有重要应
用价值。
上海常用的核酸染料有几种,它们在实验室研究样本的各种特性时扮演着重要的角色,如同悬挂灯笼般确定样本当前的活性和分子形态。
下面将介绍上海常用核酸染料在实验室使用时的几种方法。
首先,互补核酸染料可用于核酸的检测,因此很适合检测单链DNA或双链DNA
以及各类核酸杂质。
它可以实现荧光发射或发射的检测,简便的实验方法让许多研究人员受益。
其次,荧光增强剂将普通和低荧光强度红色染料的荧光强度提升10
倍以上,它的覆盖面比吸收染料覆盖的面更广,能检测更少量核酸,在实验室使用时操作起来具有便利性。
再者,序列确定染料用于核酸定位。
它可以识别序列突变,快速检测基因变体,被广泛应用于DNA序列确定,基因组研究、基因诊断,遗传检测等多种研究领域。
最后,荧光寡核苷酸染料可用于克隆验证,它可以测定用于PCR扩增的目的克隆的真实性,从而准确判断是哪个克隆是有进行修饰的。
上海常用的核酸染料的使用方法介绍完毕,总之,核酸染料使用实验室仪器检
测核酸的效果更佳,但更重要的是要根据样本的情况选择合适的染料进行检测,以获取更加准确的实验结果。
另外,掌握正确的染料使用方法也是制定检测流程中不可或缺的一部分,应根据实验规程进行操作,并定期进行染料检测,以确保实验结果准确可靠。
SYBRGreen I 使用介绍
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SYBR Green I使用介绍SYBR Green I核酸染料简介SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单,无须脱色或冲洗;至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低,可适用于多种电泳分析。
SYBR Green I 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等。
SYBR Green I 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用;另外,SYBR Green I 与EB相比,诱变能力大大降低。
SYBR Green I 核酸染料特点● 灵敏高:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
● 操作简单:无须脱色或冲洗。
● 适用范围广:可适用于多种电泳分析。
● 使用方便:不影响其它修饰酶作用。
● 经济:价格比银染便宜。
电泳用SYBR Green I 使用方法简介一、SYBR Green I预染色方法1、该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。
2、工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍,即为SYBR Green Ⅰ工作液。
SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3、制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
4、样品染色:向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。
SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
5、DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和5μL DNA Marker稀释液和1μLSYBR Green Ⅰ工作液混匀,室温放置5分钟,使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。
核酸染料安全操作及保养规程
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核酸染料安全操作及保养规程核酸染料是生物学实验中广泛使用的化学试剂,但其使用过程中需要特别注意安全操作和保养。
以下是关于核酸染料的安全操作及保养规程。
安全操作规程1. 佩戴个人防护装备在使用核酸染料前,必须佩戴个人防护装备,包括实验室常规的实验手套、实验服、护目镜和口罩。
这些装备可以有效地保护实验人员在操作时的安全。
2. 避免直接接触核酸染料必须避免直接接触皮肤、眼睛和呼吸道,也不能食用。
在使用前,应该阅读核酸染料的物质安全数据表(SDS)并按照要求操作。
3. 避免液体飞溅在使用核酸染料的过程中,应该避免液体飞溅。
为了避免此类情况发生,建议使用带盖的试管和离心管、用滤纸吸去冷却液或分离液上的余液、避免用力搅拌等。
4. 存储与使用环境核酸染料的保存与使用,需要满足相应的环境要求。
一般来说,应该存储在低温(-20°C)和干燥的地方,远离明火和热源。
5. 废弃核酸染料在使用过程中产生的废弃物应该按照相关标准进行处理。
废弃物通常应放入特定的废物容器中,以免对环境和人体健康造成危害。
保养规程1. 冰冻保存核酸染料得以长期保存的关键是冰冻保存。
在从高温环境中取出试剂后,应该尽量避免反复冷却和融化。
存储时应置于 -20°C 的冰箱中,保存时注意不要与空气接触。
2. 避免粘附核酸染料使用后,必须清理其容器并在温水中反复冲洗。
此外,在使用之前应确保试剂容器是干燥的。
避免在容器壁上形成固体附着。
粘附物可能对试剂、其他化学物质以及实验人员的安全产生影响。
3. 交替使用在使用核酸染料时,应该尽可能地避免交替使用同一支试剂。
为了防止多次开盖或多次洗涤容器,可以使用多个标签在容器上标记,将每支试剂和其对应的标签放在一起,以避免混淆。
4. 防水保护对于带有防水特性的核酸染料,需要注意不要破坏其防水性。
在使用过程中,应该保持容器的密封性和防水性,以避免试剂受潮而不能使用。
5. 管理使用期限核酸染料的使用期限应该严格管理。
SYBR Green I 核酸染料使用说明
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SYBR Green I核酸染料使用说明货号:SR4110规格:50/100ul保存:-20℃避光保存,有效期至少一年。
产品说明:SYBR Green I染料是一种直接与双链DNA(dsDNA)结合的荧光染料,是荧光定量PCR 最常用的DNA结合染料。
在定量PCR中,SYBR Green I可与双链DNA(dsDNA)非特异性结合后发出荧光,则可以通过检测反应体系中的SYBR Green I荧光强度,达到检测PCR产物扩增量的目的。
游离状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,一旦与dsDNA结合,其荧光增加1000倍,一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例,且会随扩增产物的增加而增加;所以通过检测PCR反应液中的荧光信号强度,可以对目的基因进行准确定量,同时还可以测定扩增的目的DNA片段的熔解温度。
使用说明:使用时,配置PCR反应混合液,将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系,使终浓度为0.5×(0.2×到1×之间调整)。
以上操作建议在冰上进行。
注:①反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。
②Realtime PCR扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明书。
注意事项:使用浓度对荧光PCR结果的影响SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。
如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低,这就意味着低拷贝的样品可能无法检出;而在高浓度时,将会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。
所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为0.2×到1×之间。
镁离子浓度的影响提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。
我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时,镁离子浓度比无SYBR Green I的普通PCR反应高出0.5~3mM。
SYBR Green染色方法
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1. 预染染色法 A. 配制Loading Buffer预染液 将该染料与6×Loading Buffer按照1:9的比例 混合(如5μl的染料与45μl的6×Loading Buffer混合)。配制的Loading Buffer预染液 可常温或4°C避光保存三天。
注:含有SDS的Loading Buffer会影响电泳结 果,不适合配合本染料使用,建议使用不含 SDS的Loading Buffer。 2. 制胶 按常规操作溶解琼脂糖,待冷却到65~55°C 后,加入染料(1 μl的染料制备10 ml的胶), 轻轻混合摇匀,然后制胶。 3. 样品、Marker预染 A. 样品预染:将需要进行电泳的样品与配
应可用至少 4 次。 c. 将凝胶完全侵入染色液中,室温避光震
荡染色 30~60 min。染色时间根据胶浓 度及厚度确定。凝胶越厚、浓度越高, 所需的染色时间越长。 B. 聚丙烯酰胺凝胶电泳后染染色法
a. 按照正常方式进行电泳 b. 用 pH 7.0~8.5 的缓冲液(例如 TAE、TBE
或 TE),按照 3:10,000 或 4:10,000 的 比例稀释该染料,轻轻震荡混匀,即成 染色液。染色液一周内,避光低温储存 应可用至少 4 次。
ngon 中指示带位置判断电泳时间,电泳时间 A.
太长会导致 DNA 跑出凝胶。连续电泳时 a. 间超过 2 小时会导致染料从 DNA 上分 离出来,使电泳条带变淡。 使用过的含染料的凝胶可以融化后重新 b. 倒胶使用,但是制胶时需要重新添加染 料。 使用本染料,也可在制胶时不加入染料,
样品直接用 Loading Buffer 预染液预染
c. 将凝胶完全侵入染色液中,室温避光震
荡染色 30~60min。染色时间根据胶浓 度及厚度确定。凝胶越厚、浓度越高, 所需的染色时间越长。
SYBR Green Ⅰ 核酸染料(10000×)使用说明
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SYBR GreenⅠ核酸染料(10000×)使用说明货号:SY1020规格:50/100ul保存:-20℃避光保存,有效期12个月。
产品简介:采用琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺电泳方法检测双链DNA时,SYBR GreenⅠ是最灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBR GreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。
由于与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。
SYBR GreenⅠ的最低检出限:20pg DNA(254nm);60pg DNA(300nm紫外透射);此外,SYBR GreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1-2ng,300nm紫外透射),比EB灵敏20至100倍。
SYBR GreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。
SYBR Green Ⅰ用于琼脂糖电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。
此外,SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。
使用说明:该产品使用方法同EB.点染法:用于琼脂糖凝胶电泳:取原液1ul加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml,再加入6×DNA Loading buffer上样缓冲液1ml混匀,(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后静置5min后直接上样。
胶染法:常规配置琼脂糖凝胶100ml,加热至融化,待温度将至50-70℃(感觉不烫手)加入该原液10ul。
待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。
注意事项:1.SYBR GreenⅠ应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装冻存,短期可以4℃保存。
2.胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNA marker稀释5-10倍后使用。
3.在预染色方法中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
信噪比高的核酸染料的使用方法

信噪比高的核酸染料的使用方法
要使用信噪比高的核酸染料,通常需要按照以下步骤进行操作:
1. 准备样品:准备用核酸染料染色的核酸样品。
可以是DNA、RNA或其他核酸。
2. 核酸染色:根据染料的使用说明,将核酸样品与核酸染料混合。
通常,核酸染料会选择性地与核酸结合,使其发出荧光。
3. 反应时间:根据核酸染料的说明,让核酸和染料反应一段时间,以确保充分的染色。
4. 洗涤:根据核酸染料的说明,将未结合的染料或其他杂质洗掉。
可以使用洗涤缓冲液、混悬液或洗涤剂等。
5. 显微镜观察:将染色后的核酸样品置于显微镜下观察。
通常,使用荧光显微镜或荧光成像设备可以更清晰地观察到核酸的荧光信号。
值得注意的是,不同的核酸染料在使用方法上可能会有所不同,因此请仔细阅读染料的使用说明,并按照指导进行操作。
此外,如果使用核酸染料在定量分析中,还需要根据实验需要进行稀释或标准曲线浓度调整等步骤。
核酸染料

EB溴化乙锭(EB)是一种荧光染料,这种扁平分子可以嵌入核酸双链的配对的碱基之间,在紫外线激发下,发出红色荧光。
单链DNA、RNA分子常存在自身配对的双链区,也可以嵌入EB分子,但嵌入量少,因而,荧光较低,其最低检测量为0.1μgSYBR Green ISYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。
在游离状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。
因此,SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。
SYBR Green I 的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm。
1.在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
2.在紫外照射透视下,与双链DNA 接合的SYBR Green I 呈现绿色荧光。
如果胶中含有单链DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
3.SYBR Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。
建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
SYBR Green I ISYBR Green I I可以对RNA或单链的DNA进行染色。
SYBR Green I IRNA染料并不是特异性的结合RNA或DNA单链,但是其对单链的结合效率是双链的约2倍,。
GoldViewGoldView™是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA 时,GoldView™与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。
在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而且也可用于染RNA。
GoldViewⅠ特别适合于大片段DNA的检测(大于1kb的片段,检测灵敏度与EB相当);当DNA片段小于1kb时,检测灵敏度低于EB,特别是低于500bp的片段, GoldViewⅠ型可能亮度很弱或检测不到。
绿色荧光核酸染料(10000×)说明书

绿色荧光核酸染料(10000×)说明书货号:G8140规格:1.0ml(10000×)保存:常温保存,有效期至少一年。
产品介绍:绿色荧光核酸染料是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型DNA染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。
在紫外灯下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光。
使用方法:将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)放入微波炉中融化,冷却至60℃左右(不烫手时)后加入10ul绿色荧光核酸染料,轻轻摇匀后倒胶(避免产生气泡),待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察。
注意事项:1、胶厚度宜不要超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2、加入绿色荧光核酸染料的琼脂糖凝胶反复融化可能对DNA检测的灵敏度产生一定影响,但不明显。
3、绿色荧光核酸染料在pH3.6-7.0之间能更好地与核酸结合,因此电泳时最好使用新鲜的电泳缓冲液。
4、由于绿色荧光核酸染料产生绿色荧光,因此不适于用一般单色胶卷拍照,可以使用凝胶成像系统保存图像。
5、含有绿色荧光核酸染料的凝胶不适于进行凝胶回收实验。
要进行回收实验,请使用EB或GoldView II型核酸染色剂。
6、绿色荧光核酸染料特别适合于大片段DNA的检测(大于1kb的片段,检测灵敏度与EB相当);当DNA片段小于1kb时,检测灵敏度低于EB,特别是低于500bp的片段,绿色荧光核酸染料可能亮度很弱或检测不到。
如果检测小片段的DNA,请选用GoldView II型核酸染色剂,该染色剂适合于检测所有片段大小的DNA 片段。
应用特点:高效:绿色荧光核酸染料可以检测50ng级的DNA或RNA片段。
其激发波长有多处,其中两处最强:230nm 和490nm。
南京灵敏度高的核酸染料的使用方法

南京灵敏度高的核酸染料的使用方法南京灵敏度高的核酸染料的使用方法引言:核酸染料是一种用于检测和分析核酸分子的化学染料。
在生物学研究中,核酸染料被广泛应用于核酸凝胶电泳、核酸杂交、PCR扩增等实验技术中。
南京灵敏度高的核酸染料是一种新型的核酸染料,具有高灵敏度、高稳定性和低毒性等优点。
本文将介绍南京灵敏度高的核酸染料的使用方法。
一、实验准备:核酸样品:准备待检测的核酸样品,如DNA或RNA。
核酸染料:购买南京灵敏度高的核酸染料,如SYBR Green I 或SYBR Safe。
TAE缓冲液:配置适量的TAE缓冲液,用于制备核酸凝胶。
核酸凝胶:制备1%的琼脂糖凝胶,加入适量的核酸染料。
二、核酸染色:准备样品:将待检测的核酸样品加入适量的缓冲液中,使其浓度达到合适的检测范围。
加入核酸染料:将适量的核酸染料加入核酸样品中,使其浓度达到合适的染色范围。
注意,核酸染料的浓度不宜过高,以免对核酸分子产生影响。
混匀:轻轻摇晃样品,使核酸染料充分与核酸样品混合。
孵育:将样品孵育在适当的温度下,通常为室温或37℃,孵育的时间根据实验需求而定,可以是几分钟到几小时。
染色结果:观察核酸染色结果,南京灵敏度高的核酸染料的染色结果通常为荧光信号的出现。
三、核酸凝胶电泳:准备核酸凝胶:将核酸凝胶倒入电泳槽中,确保凝胶平整,并且没有气泡。
加载样品:使用微量移液器,将核酸样品加载到凝胶槽中的孔中,注意加载的顺序和间距。
电泳条件:将电泳槽连接到电源,设定适当的电压和电流,进行电泳分离。
南京灵敏度高的核酸染料可以使用较低的电压和电流条件进行电泳,以避免核酸样品的破裂和损伤。
染色和成像:电泳结束后,将凝胶转移到染色盒中,加入足够的核酸染料,并在暗室或黑暗条件下进行染色。
然后,使用适当的荧光成像设备观察和记录核酸带的出现和迁移。
四、注意事项:核酸染料的使用量应根据实验样品的浓度和体积进行调整,以避免过高或过低的染色效果。
南京灵敏度高的核酸染料具有较低的毒性,但仍需注意避免接触皮肤和黏膜,避免误食。
天津核酸染料的使用方法
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天津核酸染料的使用方法天津核酸染料被广泛应用于生物学和医学领域中的核酸分析和研究中。
下面将介绍一种常见的天津核酸染料的使用方法,并对其进行拓展说明。
首先,天津核酸染料通常用于核酸凝胶电泳分析。
核酸电泳是一种常用的实验方法,用于检测核酸的大小、纯度和浓度。
核酸染料可以在电泳过程中与DNA或RNA结合,并在紫外线照射下发出荧光,从而使核酸带在凝胶上可见。
使用天津核酸染料进行核酸电泳的步骤如下:1. 准备样品:将待分析的DNA或RNA样品提取、纯化,并在适当的缓冲液中稀释至合适的浓度。
2. 制备凝胶:根据需要,制备琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶,并根据样品大小选择合适的凝胶浓度和孔隙大小。
3. 加载样品:将样品与核酸染料按照所需比例混合,通常是1 μL样品加入1 μL染料。
将混合物加载至凝胶孔内。
4. 电泳运行:将凝胶置于电泳槽中,将电泳缓冲液加入槽中,连接电源并设定合适的电压和时间。
在电泳过程中,核酸会根据大小迁移至凝胶上不同的位置。
5. 实验结果:在电泳结束后,关闭电源,取出凝胶,将其放在紫外灯下照射。
核酸染料与DNA或RNA结合后发出荧光,可通过荧光成像系统或肉眼观察到核酸带的位置和强度。
拓展说明:天津核酸染料的使用方法有很多种,还可以应用于其他核酸相关的实验中。
例如,天津核酸染料可以用于质谱分析中,通过与核酸相互作用,实现核酸的质谱检测。
此外,还可以将核酸染料与荧光共振能量转移技术结合,用于研究核酸的结构和相互作用。
在使用天津核酸染料时,需要注意以下几点:1. 染料浓度:核酸染料的浓度应根据样品的浓度和容量来确定,通常需要进行一系列的浓度试验来确定最佳浓度。
2. 染色时间:核酸染料与DNA或RNA结合需要一定的时间,通常在室温下反应15-30分钟,但不宜过长,以免影响核酸分析的结果。
3. 染料选择:根据实验需要,选择合适的核酸染料。
天津核酸染料有多种选择,如天津蓝、天津红等,可根据染料的特点和实验要求进行选择。
武汉核酸染料的使用方法
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武汉核酸染料的使用方法
武汉核酸染料是一种用于新冠病毒检测的物质。
它由一种叫做“氢氧化钠”的化学物质和一种叫做“荧光素钠”的化学物质组成。
这两种化学物质在人体内会发生化学反应,释放出荧光物质,使其可
以检测到被检测者新冠病毒的核酸。
下面是武汉核酸染料的使用方法:
1. 采集样本:使用采样器采集被检测者的鼻拭子或咽拭子样本。
2. 洗涤样本:将采集到的样本放入含有氢氧化钠的溶液中,使其与荧光素钠反应。
3. 提取荧光信号:将反应后的样本取出,通过特殊的技术提取荧光信号。
4. 检测样本:将提取出的荧光信号进行荧光检测,以确定样本中是否存在新冠病毒的核酸。
使用武汉核酸染料需要进行一定的准备和操作技术。
在进行样本采集和洗涤时,需要注意保持样本的完整性和准确性。
在进行荧光提取和检测时,需要注意以下几点:
- 氢氧化钠和荧光素钠的比例需要经过精确计算,以确保反应的准确性和稳定性。
- 样本的洗涤和提取需要在特定的温度和条件下进行,以确保反应的准确性和结果的可靠性。
- 在检测时,需要使用专业的检测仪器,以确保检测结果的准确性和可靠性。
武汉核酸染料是一种非常有前途的新冠病毒检测技术。
它的使用可以有效地检测出被检测者是否感染了新冠病毒,为有效地控制疫情提供支持。
绿如蓝核酸染料
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技术咨询电话:400-607-9999注意:本制品仅供研究使用,请勿用于临床治疗等其他用途绿如蓝核酸染料, PCR 级( DNAGREEN,PCR Grade ) 货号: M030016产品及特点: 第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I )在高浓度下会抑制荧光PCR ,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm 分析。
本产品跟SYTO9、LC Green 、EvaGreen 一样,是第三代饱和型荧光染料,在饱和浓度下也不抑制荧光PCR 反应,具有下列特点:1. 饱和浓度不抑制PCR 反应,因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I 。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA 分子间发生移位,因此荧光强度跟DNA 变性程度呈线性关系,可以用于精细的Tm 测定实验,如High-resolution melting curve analysis 等。
4. 跟目前常用的PCR 仪器 (包括iCycler 、LightCycler 、ABI 测序仪) 兼容。
激发和发射光谱跟FAM 和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I 的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内,毒性和致突变性远低于SYBR Green I 。
6. 可以用于qPCR 、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM 、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。
规格及成分运输及保存:常温运输、-20℃避光保存,有效期为一年。
使用方法先将本产品放置在室温融化,然后震荡10秒钟,短暂离心后待用。
下面以50 uL 的标准PCR 反应体系为例说明其使用: 1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:2.放入荧光PCR 仪中进行qPCR ,并在退火或延长反应时记录荧光信号。
使用的光学参数可以跟FAM 或SYBR Green I 完全一样。
FastStart Essential DNA Green Master-中文说明书-BioRad版本 copy

FastStart Essential DNA Green MasterVersion 04 (2013年10月)适用货号:06 402 712 001 5×1 ml (5×100次反应,20μl体系)06 924 204 001 10×5 ml (10×500次反应,20μl体系)产品保存条件:-15~ -25℃,避光保存注意:该使用指南为简易版,在实际使用时请查阅正式英文说明书。
1. 产品概述产品描述管号/管盖色标签用途保存条件1 绿色FastStartEssential DNAGreen Master;2×conc. ● 2×预混液, 即用型●含FastStart Taq DNA聚合酶,反应缓冲液,dNTPs, SYBRGreen I, MgCl2-15~ -25℃,避光保存;试剂首次融解后可置2~8℃保存一月*2 无色H2O, PCR grade 调整最终反应体系-15~ -25℃*请避免将该产品反复冻融。
反应液制备后(加入引物和模板后),可在室温稳定放置24h,需避光放置。
产品应用FastStart Essential DNA Green Master采用了热启动聚合酶以提高qPCR反应的灵敏度和特异性,预混液包含了基于SYBR Green I检测模式的qPCR和两步法qRT-PCR进行DNA定量检测所需的所有试剂(除了引物与模板)。
试剂的Mg2+浓度已经优化,通用于不同的引物和模板特性,实验中无须优化。
结合UDG酶的使用,可在实验中防止PCR扩增产物的交叉污染。
该试剂适用于不需要ROX校正的实时荧光定量仪器。
2. 产品使用方法2.1 实验前准备实验最佳反应条件(包括DNA模板量、PCR引物浓度、扩增温度程序、循环次数) 应根据不同的模板/引物而异。
样本准备• 请使用纯度、浓度经优化摸索且不含PCR抑制物的DNA模板(如,基因组DNA、质粒DNA、cDNA)。
DNA染色操作流程
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DNA染色操作流程1.样本制备:首先需要准备含有DNA的样本。
样本可以是从细胞、组织、体液等生物材料中提取的DNA,也可以是在实验室中已经纯化和扩增的DNA。
样本的准备方式取决于实验的目的和所要分析的DNA种类。
2.DNA固定:将样本中的DNA固定在载玻片上或在试管中。
固定DNA的方法有多种,可以使用碱性溶液、乙醇等物质对DNA进行固定。
固定DNA的目的是为了保持它们的完整性和形态,以便进行后续的操作。
3. DNA染色:DNA染色一般使用荧光染料或核酸结合染料。
荧光染料有各种颜色可供选择,比如DAPI、SYBR Green、Ethidium Bromide等。
核酸结合染料如Giemsa染料,可以染色DNA和其他细胞成分,用于细胞遗传学和染色体分析。
4.洗涤:染色完毕后,需要对样本进行洗涤,去除多余的染料和背景。
洗涤时间和次数可以根据实验要求进行调整,以确保洗涤干净而不损失染色信号。
5.结果观察与分析:观察和分析染色结果。
使用显微镜观察DNA染色的样本,观察DNA的形态和配对情况。
可以通过计算染色的强度、形态以及定位等参数来对染色结果进行定量和统计分析。
6.结果记录:将结果记录下来,包括观察到的DNA形态、细胞数量、染色强度等信息。
这些记录可以用于后续的数据分析和报告撰写。
此外,需要注意的是,在进行DNA染色实验时,要遵循一些基本的实验室规范,确保实验的准确性和可重复性。
比如,需要使用无菌操作的技术来减少污染的可能,使用标准曲线和质控品来验证实验的可靠性,并且进行合适的阴性对照实验来排除背景干扰。
DNA染色的操作流程非常重要,它直接影响到实验结果的准确性和可靠性。
正确的染色流程可以帮助研究人员清晰地观察和分析DNA,为后续的实验和研究提供重要的基础。
通过对DNA染色流程的理解和实践,我们可以更好地了解和研究DNA分子,揭示其在生物学中的重要功能和机制。
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DNAGREEN核酸染料使用说明
货号:G7140
规格:0.5ml(10000×)
保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。
注意:DNAGREEN核酸染料属于微量核酸检测试剂,使用时请按照说明书操作。
产品简介:
目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I(属于花氰类染料)虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高,但由于其化学稳定性差;此外,SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位,很容易使DNA条带模糊和扭曲,电泳清晰度和分辨率下降。
所以在实际应用中依然不能有效替代EB。
本产品是同时具有EB稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料,其特点如下:
1.低毒。
其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2.灵敏。
检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求。
3.稳定。
对光、水和热的稳定性跟EB相当,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4.无分子间位移现象。
不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5.使用方法多样。
既可以加入熔化的胶中,也可以电泳后染色,还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7.观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源,可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9.DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察(需要将胶放在黑色背景下)。
由于避
免了UV对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
使用方法:
电泳中染色:
本方法是将DNAGREEN直接加入溶化的凝胶中使用,只适用于琼脂糖凝胶电泳,不适用于PAGE。
1.将DNAGREEN直接加入到融化的琼脂糖凝胶中,每100mL凝胶加3-10uL DNAGREEN,混合均匀后倒胶。
琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料(如EB和SYBR Green I,否则会相互干扰)。
在100mL琼脂糖凝胶中加入DNAGREEN的量不要超过10uL,否则背景增强。
注意:一定要保证琼脂糖彻底熔化,尤其是在第一次熔化胶的时候,否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。
2.将DNA样品与DNA上样液按比例混合后上样。
注意:一定要使用不含SDS等去污剂的上样液,否则SDS会跟染料结合,极大地降低灵敏度。
3.上样后电泳,电泳参数同常规的电泳。
4.电泳结束后在300nm左右的UV下观察。
注意:不要使用波长为260nm或360nm的UV,否则检测灵敏度会降低。
如果DNA或RNA浓度较高,还可以直接在日光下直接观察(需要将胶放在黑色背景下),避免UV对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
5.用配置了520-550nm滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。
注意:不要使用与EB兼容的红色滤光片(它能阻挡520-550nm的光)。
如果能再加上能滤去UV的滤光片,效果会更好。
6.后续Southern、转膜或DNA胶回收实验按常规操作进行。
电泳后染色:
本方法是在电泳后对DNA进行染色,适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE。
但该方法需要单独的
染色处理,染料用量较大,不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。
1.按照常规方法进行电泳。
2.用去离子水将DNAGREEN稀释500倍后(100mL水需要加0.2mL DNAGREEN),将凝胶放入,室温下摇晃染色30分钟(对琼脂糖凝胶)或15分钟(对PAGE)。
3.用水脱色10-30分钟,具体时间需根据背景强弱决定。
注意:电泳后染色液可以反复使用次数。
疑难解答:
Q:本产品可否用于RNA染色?
A:可以,不论RNA是在甲醛变性胶中电泳,还是在普通的SuperBuffer-2、TBE或TAE胶中电泳,RNA染色后在300nm下都跟DNA一样呈绿色,
Q:本产品是否可以加入上样液中进行染色?
A:不行,本产品只能直接加入凝胶中进行染色或电泳后再染色。
Q:为何前端(靠近正极)的DNA条带很淡或根本看不见?
A:跟EB一样,电泳时DNAGREEN朝负极方向移动,当前端的DNA(最小片段)进入没有DNAGREEN 的区域时,已经结合的染料分子会逐渐从DNA分子上脱落,所以条带会变淡或根本看不见。
解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色;之二是在每100mL电泳缓冲液中补加3-5uL 染料。
Q:本产品在哪种缓冲液中效果最好?
A:DNAGREEN染料在不同缓冲液中背景荧光强度不同,从弱到强的顺序是:SuperBuffer-2、TBE、TAE。
在背景较强的缓冲液体中,可以适当降低染料的用量,比如100mL胶中加3-5uL。
最佳浓度需要稍做摸索。
Q:用SYBR染色的DNA在电泳时为何容易发生条带模糊和扭曲现象?
A:SYBR染料一般与DNA的小沟结合,但在常规电泳条件下该结合并不牢固,染料分子可以
在标记的和未标记的DNA分子之间转移,使DNA分子的泳动速度时快(无染料结合时)时慢(有染料结合时),发生条带模糊和扭曲现象。
嵌入型染料(如EB和本产品)与DNA结合牢固,则无此现象。
相关试剂:
T10505×TBE缓冲液
T106050×TAE缓冲液
D10106×DNA Lodding Buffer
M1060D2000DNA Ladder
PC11202×Taq PCR MasterMix(含染料)。