单克隆抗体原理.docx

单克隆抗体原理

抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙，即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代，但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性

单克隆抗体制备过程

杂交瘤细胞的制备

1)．提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。

2)．应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性

3)．对杂交瘤细胞进行细胞培养，选出所需要的细胞群，并进行克隆化培养，得到稳定的杂交瘤细胞，再进行大规模培养获得单克隆抗体。

单克隆抗体的提纯

工业发酵主要类别,乙醇发酵、食品发酵、微生物发酵

发酵工程的一般过程可分为三个步骤：第一，准备阶段；第二，发酵阶

段；第三，产品的分离提取阶段。

为什么说基因工程发酵工程和酶工程之间存在着交叉渗透现象？

1. 比如想获得某种可以治疗疾病的蛋白酶——这种酶的制备、纯化等过程就属于酶工程。

2. 这种蛋白酶是某生物的某基因的产物，把这个基因克隆构建到载体上——这就属于基因工程。

3. 把基因整合到细胞里面表达，得到这种酶——这就属于细胞工程。

4. 把细胞放到发酵罐中大规模生产——这就属于发酵工程。

利用固定化生物催化剂的优点有很多：

①酶成份可以重复利用；

②适合于连续操作；

③产品中不会掺杂入酶；

④可以更加精确地控制催化过程；

⑤酶的稳定性得到改善或提高；

⑥可发展成多酶反应系统；

⑦减少了下水排放的问题；

⑧在工业和医药业上有大的潜力等。

论述蛋白质工程与基因工程的关系

基因工程的发展有四代：第一代蛋白多肽基因的高效表达，也称经典基因工程；第二代蛋白编码基因的定向诱变，也称蛋白质工程；第三代代谢信息途径的修饰重构，也称途径工程；第四代基因组或染色体的转移，也称基因组工程。可见，蛋白质工程是基因工程的一部分，是基因工程发展的第二代。

简述特异性免疫答应和非特异性免疫答应的基本过程和特点

1）无特异性，作用广泛；

（2）先天具备；

（3）初次与抗原接触即能发挥效应，但无记忆性；

（4）可稳定遗传；

（5）同一物种的正常个体间差异不大。

非特异性免疫是机体的第一道免疫防线，也是特异性免疫的基础。适应性免疫应答包括细胞免疫与体液免疫，其特征是：

（1）特异性，即T、B淋巴细胞仅能针对相应抗原表位发生免疫应答；

（2）获得性，是指个体出生后受特定抗原刺激而获得的免疫；

（3）记忆性，即再次遇到相同抗原刺激时，仍存在于体内的记忆细胞产生免疫效应，出现迅速而增强的应答；

（4）可传递性，特异性免疫应答产物（抗体、致敏T细胞）可直接输注使受者获得相应的特异免疫力（该过程称为被动免疫）。

（5）自限性，可通过免疫调节，使免疫应答控制在适度水平或自限终止。