从全血中抽提白细胞

从全血中分离白细胞

操作过程：

1．用抗凝管收集全血，抗凝管需EDTA材质或者柠檬酸钠材质，不能用肝素钠材质。2．全血白细胞分离：下列以3ml 抗凝血为例说明。

a．向一只15ml 离心管中加入3ml 抗凝血，而后加入9ml 红细胞裂解液。盖紧管盖，温柔的颠倒混匀数下。请不要剧烈振荡。

b．将离心管至于室温放置10 min（5-10 min，不要超过10 min）。

c．将离心管以2500 转离心5 min。

d．弃上清，尽可能将上清吸净，勿吸到管底白色班块细胞。

e．弃去上清后在管底出现可见的白色班块，此白色班块为富集的白细胞。如果裂解不完全（白色班块里还有红色细胞），加入1ml PBS 缓冲液重悬，然后重复a－d

步骤。

f．充分裂解后，可用1ml PBS缓冲液清洗一次，2500 转离心5 min。

g．弃上清，可获得血液样品中全部白细胞的80％以上。而后可加入适量Trizol （根据细胞数量而定5X106加1ml Trizol）后，用移液器充分吹打，混匀，直至出现清

亮不粘稠的液体，表示细胞充分裂解。

h．而后可以把以上的Trizol 试剂保存在生物冰中-70℃，最后用干冰运输寄于我们。