丙戊酸作业指导书医学检验
血清丙型肝炎病毒抗体检测作业指导书
血清丙型肝炎病毒抗体检测作业指导书（ELISA）原理在微孔条上预包被丙型肝炎病毒（HCV）重组嵌合抗原，采用ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体。
样品加入已有样品稀释液的包被抗原反应孔，在随后的温育过程中，若样品中含特异抗体，则该抗体与包被抗原形成抗原抗体复合物被吸附到固相，再加入酶标记的第二，最终形成抗原-抗体-酶标二抗复合物，洗涤除去未结合的游离酶，加入显色剂后显色。
标本采集2.1 采集前病人准备：受检者应空腹2.2 标本种类：血清或血浆2.3 标本要求：采集病人静脉血2ml，室温放置不超过4小时，分离血清备用。
标本储存：2-8°C保存不应超过1周，-20°C不应超过3个月，-70°C长期保存，应避免反复冻融。
标本运输：密封，室温运输。
标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。
试剂6.1 试剂名称：丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒6.2 试剂生产厂家：河南华美生物工程有限公司。
6.3 包装规格：96Test/Kit6.4 试剂盒组成：包被反应板，样品稀释液，酶标记抗体，阳性对照血清，阴性对照血清，浓缩洗涤液，底物A，底物B，终止液，封口膜，密封袋。
6.5 试剂储存条件及有效期：2-8°C避光保存，有效期6个月。
仪器设备7.1 仪器名称：自动酶标仪7.2 仪器厂家：KHB7.3 仪器型号：ST360操作步骤8.1 平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25°C），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。
8.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。
8.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。
8.4 加样品稀释液：用加样器在微孔反应条板孔中加入样品稀释液，每孔100μl，空下四孔准备加对照。
8.5 加标本和留空白：将每份待检标本各10μl分别加入已有样品稀释液的各孔中，留下一孔不加标本作空白对照，标好位置。
医学实验作业指导书
医学实验作业指导书一、实验目的本次医学实验的目的是帮助学生了解和掌握某种特定的医学实验操作技巧，提供实际操作的机会，促进学生对医学科学的理论知识的应用和实践能力的培养。
二、实验材料与仪器- 实验材料：根据实验需要准备相应的材料，如细胞培养物、患者样本等。
- 实验仪器：根据实验需要准备相应的仪器，如离心机、显微镜等。
三、实验步骤1. 实验准备a. 检查所需实验材料和仪器的数量和完好性。
b. 清洁和准备实验台面，确保操作区域整洁。
c. 充分阅读实验操作指导书，了解实验的整体流程和注意事项。
2. 样本处理a. 准备样本：根据实验需求，选择患者样本或制备相关细胞培养物。
b. 处理样本：根据实验要求，采取相应的样本处理方法，如离心分离、培养液处理等。
3. 实验操作a. 操作步骤：按照指导书中详细描述的实验操作步骤进行实验操作，如加样、加试剂、控制变量等。
b. 注意事项：严格遵守实验安全和操作规范，注意个人防护措施，并留意实验中的安全提示。
4. 数据记录与分析a. 数据记录：在实验过程中准确记录实验操作所获得的数据，包括观察结果、计量数据等。
b. 数据分析：根据实验目的进行数据分析并综合考虑实验过程中的其他相关因素，得出结论。
5. 实验总结a. 总结内容：对实验过程进行总结，包括实验操作的成功与失败因素、改进措施等。
b. 讨论与展望：结合实验结果和现有医学知识，对实验结果进行讨论，并对未来可能的研究方向提出展望。
四、实验注意事项1. 安全注意：严格遵守实验室安全操作规范，如佩戴防护眼镜、手套等防护用具。
2. 仪器使用：正确使用仪器设备，遵循相应的操作步骤和规范。
3. 样本处理：根据实验要求准确处理样本，确保实验结果的准确性和可靠性。
4. 操作规范：按照实验指导书的操作步骤进行实验操作，严格控制实验的各个变量。
5. 数据记录：及时、准确地记录实验数据，确保实验结果的可追溯性和可重复性。
五、实验风险评估在进行医学实验时，可能会面临一些风险，包括但不限于意外伤害、生物样本感染等。
血药丙戊酸-9537操作(雅培TDX)
E 丙戊酸951434-4503/R11客户服务美国：1-877-4A雅培国际：电话联系您的雅培代理商使用前须仔细阅读该试剂盒产品说明书，按说明书要求操作。
如果出现说明书中要求的任何偏差，将无法确保测定结果的可靠性。
查阅“试剂”项内容，详细了解对试剂成分命名所使用的标识解释。
美国印刷2-815-30该说明书取代以前所有说明书或手册说明。
通用名丙戊酸预期用途TDx/TDxFLx游离丙戊酸测定法是一种定量分析血清或血浆中抗癫痫药物丙戊酸的试剂系统。
该分析方法可用于监测丙戊酸浓度，以保证合理的药物治疗。
试验概述与解释游离丙戊酸测定法采用荧光偏振光免疫分析技术，适用于“系统描述”项TDx/TDxFLx系统操作手册。
丙戊酸是一种广谱抗癫痫药物，可单独或联合其他抗癫痫药物治疗失神发作[1,2]。
对癫痫全身强直阵挛发作、肌阵挛性发作、非典型失神发作、单纯型发作、复杂型局部发作、混合型大发作以及小发作的治疗也证明有效。
广泛使用单一抗癫痫药物丙戊酸，有助于治疗多种癫痫，尤其对儿童强直阵挛发作和肌阵挛发作最常用[5-7]。
丙戊酸对其他抗癫痫药物难治愈的癫痫患者同样有疗效。
多数患者服用丙戊酸后未出现抗癫痫耐受性[8]。
血液中药物总浓度包括蛋白结合部分和游离部分，其中游离药物仅有药理活性[9,10]。
丙戊酸表现出一些独特的药效学和药动学特征：不可逆的药理作用，非线性浓度-剂量关系以及蛋白的高结合性和可变性[11]。
在监测丙戊酸浓度时，应使用游离药物进行测定，而非总药物[11]。
在游离药物发生改变时，需进行游离丙戊酸浓度测定，包括以下情况：患有肾病，酒精性肝硬化，急性肝炎以及合并用药后改变蛋白结合[14-16]。
程序原则参照您的“系统描述”项操作手册试剂12.5 86.6325.0 173.2550.0 346.50100.0 693.00150.0 1039.55RNA或1型抗原、客户警告 适用于体外诊断TDxFLx : 楔形试剂盒可能带有减少试剂蒸发的装置，请勿移走该装置。
（第六册）PCR室作业指导书检验SOP文件正文
（第六册）PCR室作业指导书检验SOP文件正文ISO15189质量管理体系范本文件（第六册）PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-01~31第A版编制：审核：批准：生效日期：2006年8月8日ABCD人民医院检验科编制说明本分册文件可以作为单独申请卫生部PCR实验室认可的全套作业文件，因此作为ISO15189质量管理体系的PCR室作业文件，要对其重复部分进行删减，各检验科根据各自用途要求与特点进行选用，特此说明。
2006年8月8日目录修订页PCR实验室的设置及管理1．目的：建立实验室的合理设置和科学管理，防止实验污染，保证检测结果的可靠性。
2．适用范围：本程序适用于分子诊断室的设置、工作流程和日常管理等。
3．负责人：4．细则：4．1 分子诊断室为检验科下设的专业实验室，从事临床标本的基因扩增检测及相关科研工作。
4．2 本实验室采用实时荧光定量PCR技术作为临床基因诊断的主要手段，实验室分为三个区：试剂准备区（第一区）、标本处理区（第二区）、扩增分析区（第三区）。
每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。
各区标签颜色：红色（第一区）、白色或绿色（第二区）、蓝色（第三区）；专用工作服：粉红色（第一区）、白色（第二区）、蓝色（第三区）。
标本的接收则在检验科标本接收处进行。
4．3 各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等，不可混用。
4．4 各工作区配置、功能和内务管理见各相关SOP文件。
4．5 严格遵守从“试剂准备区→标本处理区→扩增分析区”的单一流向制度，不得逆向进入前一工作区。
4．6 非本实验室工作人员，未经许可不得入内；进修、实习或其他科室人员因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、标本处理区、扩增分析区）需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行，在本实验室人员监督指导下进行。
4．7 实验完毕后做好清洁消毒工作。
医学实验操作作业指导书
医学实验操作作业指导书一、实验目的本实验旨在指导学生完成医学实验操作，使其掌握相关实验技巧和操作流程。
二、实验材料1. 医学实验仪器：根据实验要求准备相应的医学仪器。
2. 医学实验药品：根据实验要求准备相应的医学药品。
3. 个人防护用品：戴口罩、手套、实验服等，保证个人安全。
三、实验步骤步骤一：准备工作1. 检查实验仪器是否完好，如有损坏，请及时更换或修理。
2. 检查实验药品的标签和有效期，如有问题，请及时更换或补充。
步骤二：个人防护1. 穿戴实验服，确保衣物干净整洁。
2. 戴口罩，避免实验药品引起的气溶胶对人体的影响。
3. 戴手套，避免药品直接接触皮肤。
4. 戴护目镜，防止实验药品飞溅入眼。
步骤三：操作流程1. 根据实验要求，准确称取实验药品并放入容器中。
2. 根据实验要求调配实验液体，并进行均匀搅拌。
3. 在实验过程中，严格控制时间和温度，以确保实验结果的准确性。
4. 如实验中需要进行观察和记录，请及时记录实验数据，并保证记录的准确性。
步骤四：实验结束1. 关闭实验仪器，清理实验台面，保证实验环境的整洁。
2. 将使用过的实验仪器和容器进行清洗，确保下次使用时干净。
3. 适当处理废弃物和实验残留物，遵循环保原则。
四、注意事项1. 在操作过程中要注意实验室安全，严禁一人独立操作。
2. 操作前请仔细阅读实验操作指导书，确保操作步骤清晰明了。
3. 如有实验中出现突发情况，请立即向实验室管理员或教师求助。
4. 在实验过程中，严禁食品和饮料进入实验室。
5. 完成实验后，请注意清理实验工作区域，保持实验环境整洁。
以上为医学实验操作作业指导书，希望能够对学生顺利完成医学实验提供指导和帮助。
在实验过程中，请严格按照实验操作指导书中的步骤进行，确保个人安全和实验结果的准确性。
祝实验成功！。
HPLC法测定丙戊酸的血药浓度
HPLC法测定丙戊酸的血药浓度作者：邓芳来源：《中国当代医药》2011年第16期[摘要] 目的：建立快速柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸（VPA）血药浓度的方法。
方法：选择ω-溴苯乙酮为衍生试剂，环己烷羧酸为内标，Hypersil ODS-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）为分析柱；流动相为甲醇-水（75∶25，V/V)，检测波长为248 nm，流速为1.0 ml/min。
血样经酸化后以二氯甲烷提取。
结果：内标环己烷羧酸和VPA的保留时间分别为8.0 min和12.8 min，线性范围为25～200 μg/ml，平均回收率为100.61%，日内、日间RSD均小于4.19%。
结论：本法快速、简便、准确，适合临床常规监测需要。
[关键词] 柱前衍生；高效液相色谱法；丙戊酸钠；血药浓度[中图分类号] R286.0 [文献标识码] C[文章编号] 1674-4721（2011）06（a）-049-02HPLC determination of plasma concentrations of valproic acidDENG FangDepartment of Pharmacy, Second People's Hospital of Hunan Province, Changsha 410007, China[Abstract] Objective: To establish a rapid pre-column derivatization-high-performance liquid chromatography determination of v alproic acid (VPA) plasma method. Methods: ω-bromoacetophenone as a derivative reagent, cyclohexane carboxylic acid as the internal standard, Hypersil ODS-C18 column (250 mm×4.6 mm, 5μm) for the analytical column; mobile phase was methanol-water(75:25, V/V), detection wave length was 248 nm, flow rate was 1.0 ml/min. Blood extracted by dichloromethane after acidification. Results: The internal standard cyclohexane carboxylic acid and VPA respectively, the retention time of 8.0 min and 12.8 min, the linear range of 25-200 μg/ml, the average recovery was 100.61%, days, day RSD were less than 4.19%. Conclusion: The method is rapid, simple, accurate and suitable for routine monitoring of clinical need.[Key words] Pre-column derivatization; High-performance liquid chromatography; Sodium valproate; Blood drug concentration丙戊酸作为癫痫小发作、大发作和肌阵挛的首选药物之一，一直是临床医生常用的抗癫痫药物。
医学实验技术操作作业指导书
医学实验技术操作作业指导书一、实验室安全须知1. 实验室入口处需佩戴实验服、口罩和手套，并确保服装整洁。
2. 切勿在实验室内进食、饮水或吸烟。
3. 遵循实验室内规定的紧急疏散路线和安全出口，确保熟悉火灾和紧急救援的相关事项。
4. 操作前，确保室内的化学药品储存顺序和标签是否清晰可见。
5. 操作时，注意保持实验台整洁，避免杂物堆积。
二、实验器材准备1. 确认所需实验器材是否完整并处于良好状态。
2. 准备所需的试剂和溶液，并按照指定浓度配制。
3. 实验前检查实验仪器和设备的工作状态，确保正常运行。
三、实验步骤1. 实验前进行充分的个人卫生，洗净双手并佩戴手套。
2. 取出所需试剂，并按照实验要求称取或滴取所需量。
3. 开始实验前，先阅读相关实验操作指南，确保操作顺序和步骤的正确性。
4. 按照操作步骤，依次进行实验操作，注意实验时间和温度。
5. 操作期间，保持注意力集中，避免走神或转移注意力。
6. 注意观察实验结果，及时记录数据或变化，并按照实验要求进行分析和解释。
7. 实验完成后，及时清理实验台和器材，将废弃物物品按照规定进行分类和处理。
四、实验安全注意事项1. 禁止单独操作需要两人以上合作或需要特殊设备时的实验项目。
2. 实验过程中如遇特殊情况或意外事故，应立即向导师或实验室负责人报告。
3. 实验结束后，注意关闭仪器设备电源，归位实验工具和器材，保持实验室整洁。
4. 实验结束后，注意检查并关闭所有实验用的液体和气体阀门，确保安全。
五、实验结果记录和分析1. 实验结束后，仔细整理和整合实验记录，保证数据清晰准确。
2. 对于实验结果进行合理分析和解释，提出可能的原因和优化方案。
3. 绘制实验数据曲线、图表或统计表格，以便进一步研究和参考。
六、实验评估和总结1. 对实验过程进行自我评估，包括操作规范性、实验结果准确性等方面。
2. 总结实验的意义和价值，回答实验中的疑问或问题。
3. 就实验中存在的问题提出改进意见或优化建议。
丙戊酸药品说明书(全)
药品名称:通用名称：丙戊酸钠缓释片英文名称：Compound Sodium Valproate and Valproic Acid Sustained Release Tablets 商品名称：德巴金成份:本品为复方制剂，其组份为：每片含0.333g丙戊酸钠和0.145g丙戊酸(相当于0.5g丙戊酸钠) 。
适应症:1.癫痫：既可作为单药治疗，也可作为添加治疗：▪用于治疗全面性癫痫：包括失神发作、肌阵挛发作、强直阵挛发作、失张力发作及混合型发作，特殊类型综合征(West，Lennox-Gastaut综合征)等。
▪用于治疗部分性癫痫；局部癫痫发作，伴有或不伴有全面性发作。
2.躁狂症：用于治疗与双相情感障碍相关的躁狂发作。
规格:每片含0.333g丙戊酸钠及0.145g丙戊酸(相当于0.5g丙戊酸钠)用法用量:1.癫痫1.本品是一缓释制剂，服用本药后体内血药浓度峰值可降低，同时可保证血药浓度在24小时内维持在正常水平。
2.该剂量适用于成人和体重超过17公斤的儿童。
3.本剂型不适合年龄小于6岁的儿童使用。
(存在误入气管的危险)4.使用本品可控制癫痫发作。
在那些为预防大发作发生而应用药物的患者中，不应该突然停用抗癫痫药物，这是因为如果突然停药，出现伴有缺氯和生命威胁的癫痫持续状态的可能性很大。
5.剂量1.起始剂量通常为每日10-15mg/kg，随后递增至疗效满意为止(见初始治疗) 。
一般剂量为每日20-30mg/kg。
但是，如果在该剂量范围下发作状态仍不能得到控制，则可以考虑增加剂量，但患者必须接受严密的监测。
2.儿童服用本品时，常规剂量为每日30mg/kg。
3.成人服用本品时，常规剂量为每日20-30mg/kg。
4.老年患者服用本品时，给药剂量应根据发作状态的控制情况来确定。
5.每日剂量应根据患者的年龄及体重来进行确定。
但同时应考虑到临床上对丙戊酸盐的敏感度存在着明显的个体差异。
6.到目前为止对每日剂量、血药浓度水平和疗效之间的相关性仍不十分清楚，给药剂量主要依据临床疗效来确定。
丙戊酸钠实验
丙戊酸钠血药浓度测定（HPLC法）指定部门：治疗药物监测室关键词：丙戊酸血药浓度HPLC1.目的：患者丙戊酸血药浓度测定。
2.适用范围：丙戊酸血药浓度测定。
3. 职责：进行丙戊酸血药浓度测定的操作人。
4. 仪器和试剂4.1仪器设备高效液相色谱仪：Agilent1260配DAD-G1316A检测器；FA1104电子天平（上海良平仪器厂）；XW-80A 涡旋振荡器（上海医科大学仪器厂）；H-1850R 离心机（湖南湘仪仪器厂）；氮吹仪（BYDCY-24S），医用高纯度氮气；DK-420数显恒温水浴锅（上海三发科学仪器有限公司）预先调至55°C；移液枪1~10μL、200μL、100~1000μL；1.5mL离心管；10mL容量瓶1个、25mL容量瓶2个、100mL容量瓶3个。
4.2试剂丙戊酸钠（sigma 公司）（分析级）；2-溴苯乙酮（阿拉丁化学公司）（分析级）；环乙烷羧酸（阿拉丁化学公司）（分析级）；甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）；正戊烷（色谱纯）；三乙胺（分析纯）；浓氨水（分析纯）；浓硫酸（分析纯）；健康人空白血清；超纯水。
5.溶液配制5.1丙戊酸钠工作液精密称取丙戊酸钠1mg，至1mL离心管中，加甲醇至刻度混匀，得1mg/mL的丙戊酸工作液。
5.2内标液0.2mol/L的氨水：取浓氨水1.5mL至100mL的容量瓶中，加水至刻度混匀。
0.5mol/L的氨水甲醇：取浓氨水3.87mL至100mL的容量瓶中，加甲醇至刻度混匀。
环己烷羧酸内标液：取环己烷羧酸12.5mg至25mL容量瓶中，加0.2mol/L的氨水稀释至刻度混匀，再精密吸取该液7.5mL至25mL容量瓶中，加0.5mol/L的氨水甲醇稀释至刻度摇匀，得150μg/mL的环己烷羧酸内标液。
5.3衍生化试剂：1mol/L的硫酸溶液：精密称取浓硫酸9.81g，置100mL容量瓶中，加水稀释至刻度混匀，得1mol/L的硫酸溶液。
2-溴代苯乙酮溶液：精密称取10mg2-溴代苯乙酮至离心管中，加1mL乙腈混匀，得10mg/mL的2-溴代苯乙酮溶液。
丙型肝炎病毒核酸定量检测标准作业指导书
丙型肝炎病毒核酸定量检测标准作业指导书1.目的采用 PCR 技术、实时荧光探针技术，用于临床血清或血浆标本中的丙型肝炎病毒核酸的定性检测，适用于丙型肝炎病毒感染的辅助诊断。
2.范围适用于丙型肝炎病毒核酸定量检测。
3.职责3.1 操作人员：负责标本制备检测、仪器操作、报告发送。
3.2专业组组长：负责本组耗材的请购，监督本组标本检测、仪器操作、报告发送、质控管理等各方面工作。
3.3 实验室主任：负责监督和指导实验室各方面工作。
4.原理采用荧光 PCR 技术，以丙型肝炎病毒基因编码区的高度保守区为靶区域，设计特异性引物及荧光探针，进行一步法RT-PCR 扩增，并检测荧光信号，仪器软件系统自动绘制出实时扩增曲线，根据阈循环值 (CT) 实现对未知样本的检测。
另外，本试剂盒带有内标物质，用于对核酸提取的整个过程进行监控，减少假阴性结果的出现。
5. 样本要求5.1适用标本类型：血清5.2标本采集用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血 2 ml，注入无菌的真空采血管中(未加抗凝剂) ，室温(22-25C)放置30-60min血标本可自发完全凝集析出血清，或直接使用水平离心机，1500rpm离心5min ；吸取上层血清，转移至 1.5ml 灭菌离心管。
5.3标本保存和运送所采集的标本可立即用于测试或长期保存于-70C,也可保存于-20C待测，保存期为3个月，标本应避免反复冻融。
标本运送采用干冰(或者冰袋)保持低温，运输时间不应超过 4 天。
5.4拒收标本：拒绝重度溶血样本、肝素抗凝的血浆。
6.仪器和试剂6.1设备AB7500核酸扩增仪、恒温金属浴、生物安全柜、低温离心机等。
6.2试剂生产厂家：中山大学达安基因股份有限公司产品标准批号：YZB/国7271-2013最低检出量：最低检出量为500 IU/ml试剂各组分见表1:表1试剂盒组分表7.操作步骤7.1试剂准备（试剂储存和准备区）7.1.1进入试剂准备区，打开通风设备，按照消毒清洁程序擦拭实验台面，并在检验流程记录表上做相应记录。
丙戊酸测定注意事项
丙戊酸测定注意事项丙戊酸是一种有机化合物，广泛用于医学和化学领域。
进行丙戊酸测定时，需要注意以下几个方面。
首先，样品的制备非常重要。
通常情况下，我们会选择固体样品或液体样品进行测定。
对于固体样品，需要将其先研磨成粉末，确保样品的均匀性。
对于液体样品，要先进行适当的稀释，以确保样品的浓度在分析仪器的可检测范围内。
其次，测定方法的选择要根据具体情况来决定。
目前常用的测定方法有气相色谱法、液相色谱法和光谱法等。
气相色谱法适用于测定浓度低的样品，该方法需要使用气相色谱仪、色谱柱和检测器等设备。
液相色谱法适用于样品浓度较高的情况，该方法同样需要使用液相色谱仪、色谱柱和检测器等设备。
光谱法包括紫外-可见光谱法和红外光谱法等，可以通过样品的吸光特性来测定丙戊酸的浓度。
第三，设备和试剂的选择也是非常重要的。
在进行丙戊酸测定时，需要使用高质量的仪器设备和试剂。
仪器设备的选择要根据具体的测定方法来决定，确保仪器的准确性和灵敏度。
试剂的选择应有高纯度，并在使用前进行充分检验，避免潜在的干扰物对测定结果的影响。
第四，测定条件的控制是确保准确测定丙戊酸浓度的关键。
在进行测定时，要注意控制温度、pH值和反应时间等条件。
温度过高或过低都会影响反应速度和测定结果。
pH值的变化也可能导致反应性质的改变，进而影响测定结果。
反应时间也应根据具体方法进行控制，避免反应时间过长或过短。
最后，数据分析的准确性也是丙戊酸测定过程中需要注意的一点。
在测定过程中，应按照要求进行多次测定，计算平均值，并根据实验数据的统计学原理进行数据分析。
合理处理数据可以减小由于误差或实验条件变异引起的不确定性，提高测定结果的可靠性。
综上所述，进行丙戊酸测定时，我们需要注意样品的制备、测定方法的选择、设备和试剂的选择、测定条件的控制以及数据分析的准确性。
只有在这些方面都注意到位，才能够获得准确可靠的丙戊酸浓度测定结果。
医学实验方法作业指导书
医学实验方法作业指导书一、实验目的本实验旨在掌握医学实验方法的基本知识和操作技巧，培养学生的实验能力和科学思维，进一步提高学生的医学研究能力。
二、实验材料和仪器1. 实验材料：- 动物标本或细胞培养物- 药物或试剂- 实验装置等2. 实验仪器：- 显微镜- 实验台秤- 离心机- 冰箱等三、实验步骤1. 实验前准备：- 确定实验的目的和方法- 准备必要的实验材料和仪器- 仔细阅读实验指导书和相关文献资料2. 实验操作：- 按照实验指导书的要求进行实验操作 - 严格遵守实验条件和安全操作规范 - 记录实验数据和现象3. 数据处理与分析：- 对实验数据进行整理和统计- 进行数据的图表化处理- 分析数据的规律和趋势4. 结果和讨论：- 根据实验结果进行讨论和分析- 对实验结果的合理性进行评价- 提出改进实验方法的建议5. 结论：- 总结实验的目的、方法和结果- 得出实验结论四、实验注意事项1. 实验中需遵守实验室的安全规范，注意个人防护和危险品的正确处理和储存。
2. 实验操作过程中应细心、耐心，保持实验环境的整洁和干净。
3. 实验数据记录要准确、清晰，避免出现误差和遗漏。
4. 实验结束后要及时清理、消毒实验设备和工作台面。
5. 实验报告应严格按照要求，包括实验目的、方法、结果和结论等内容，尽量客观、准确地表达。
五、实验扩展1. 在掌握基础实验方法的基础上，可以尝试进行一些变式实验，提高实验技能和创新能力。
2. 可以进一步深入研究实验现象的机理，结合相关文献资料进行分析和讨论。
六、实验安全与环保1. 实验过程中要注意个人和他人的安全，严格遵守实验室的安全规章制度。
2. 实验结束后要及时清理、消毒实验设备和工作台面，正确处理和储存废弃物和危险品。
七、实验评分标准1. 实验操作技能和规范性2. 实验数据记录和处理能力3. 实验结果的分析和讨论能力4. 实验报告的撰写能力和表达能力以上所述即为医学实验方法作业指导书，希望能够对您的实验学习有所帮助。
高效液相色谱仪测定丙戊酸的方法探讨
０．１５ｍｇ·ｍＬ一，放 置 于 ４℃ 冰箱 中 备 用 。 ２．２．３ 衍 生化试剂的配制 ：精密称量 Ｗ一溴苯乙酬 ０．２５００ｇ放 置于 ２５ｍＬ容培瓶 中，用 少 量 乙腈 溶 解 ，然 后 加 乙腈 定 容 到 ２５ｍＬ，摇 匀 ，配 置 成 浓 度 为 １０ｍｇ·ｍＬ 的 Ｗ一溴 苯 乙酮 乙腈 溶 液 ，放 置于 ４℃冰箱 中备用 。 ２．３ 样品处理及 ＨＰＬＣ分 析 将 血样 离心 （４５００ｒ·ｒａｉｎ ） 分离出血清 ，精 密 吸 取血 清 ＩＯ０￣Ｌ，加 内标 溶 液 ５０１ｘＬ，再 加 ５０ｔ．ＬＬ ０．２ｍｏｌ·Ｌ 氨 水 、１００￣Ｌ １．０ｍｏｌ·１ 硫 酸 、２ｍＬ乙 醚 ， 涡旋革 取 １０ｒａｉｎ，５０００ｒ·ｒａｉｎ～．离心 ５ｎｌｉｒｌ。取 Ｌ层 乙醚 层 ｌｍＬ于具塞玻璃 管 中，加 １０ｔｘＬ三 乙胺 ，ｌＯｐ．Ｌ澳 苯 乙酮 ，涡旋 ２０ｓ，盖 上 塞 反 应 １０ｒ ａｉｎ，去 塞 ５５℃ 水 浴 反 嘘挥 乙 醚 ｌＯｍｉｎ。 加 １００１ｘＬ甲醇 ，涡旋 ｌｍｉｎ进 样。在上 述色 谱条件下 测定 ，记 录 内 标 及 ＶＰＡ衍 生 物 的峰 面 积 。 ３ 结 果 ３．１ ＨＰＬＣ法 色 谱 行 为 在 上 述 所 定 实 验 条 件 卜，样 及 空 白血清的色谱图 （见 图 １）。由 １町 ，ｍ样 ｒ｝Ｉ内标峰 和样 品 峰 能 与 其 他 成 分 的 色 谱峰 很 好 的分 离 ．他 们 的 保 留 ｝ｌ寸问 分 别 为 １０．２７０ｎｆ ｉｎ、１７．８４３ｎｆ ｉｎ。
及 ＶＰＡ 衍 生 物 的 保 留 时 间 分 别 为 １０ ２７０ｒ ａｉｎ、ｌ７．８４３ｒ ａｉｎ，标 准 曲 线 回 归 方 程 为 Ｙ＝７４．３６５Ｘ 一９．６０２８，Ｒ ＝０．９９７５，丙 戊 酸 钠 浓 度 在 １１．７２— １４０．６４ｐｇ·ｍＬ 范 围内内标峰 和样品峰 的峰 面积 比与丙戊酸 钠浓度 呈现 良好线性 关 系、结 论 此 方法快速准确 、经济有效 ，适合 用于 丙戊酸 钠 的 血 药浓 度 监 测
丙戊酸钠片的含量检测方案
1.电位滴定法：电位滴定法测定的药物相对标准偏差明显小于手动滴定法测定的相对标准偏差，差异具有统计学意义。
可以看出，电位差滴定法具有精度高，准确度高，相对标准偏差等的优点。
它可以逐步取代传统的人类滴定方法，并且广泛用于药物成分分析行业。
纯水系统中氮含量的检测方法基于概述氨组成的各种环境监测研究思路，提出了一种气敏电含量测定纯水系统中氨成分的方法。
图1电位滴定装置2.永久关闭校准方法（永停滴定法）：用作重新到达方法（重氨化法）的终点指示符时，请设置R1，以使施加到电极的电压约为50mV。
取适量的样品，准确称量之后，并且放入烧杯中。
除非另有说明，否则添加40毫升的水和15毫升的盐酸溶液，然后将其放在电磁搅拌器上。
此步骤是快速搅拌并溶解，然后加入2g溴化钾，在插入铂-铂电极之后，将滴定管的尖端插入液体表面以下的大约2/3的地方，并用亚硝酸钠溶液快速滴定，在一边滴加的过程中一边搅拌，使其充分溶解，然后在接近终点时将滴定管的尖端从液体表面提起。
（二）试剂试液以及仪器用具1.试剂与试液乙醚（分析纯）、盐酸滴定液（0.1mol/L）2.仪器设备分析天平（万分之一）、烧杯（150毫升）、量筒（50毫升）、滴定管、台秤、量筒和容量瓶（100毫升）、三角瓶、电位滴定仪、电磁搅拌器、玻璃电极、甘汞电极。
（三）具体的相关操作1.操作方法，具体有两种方式：(1)电位自动滴定：取10片（0.1克规格）或者20片（0.2克规格），放置在100毫升的容量瓶中，加入纯化水适量，手动振摇，使其溶解，再加入纯化水稀释至容量瓶刻度线，摇匀之后过滤高精度量取续滤液25毫升，加入30毫升医用乙醚，将盛有供试品溶液的烧杯置电磁搅拌器上，浸入电极，搅拌，并自滴定管中分次滴加滴定液;开始时可每次加入较多的量，搅拌，记录电位;至将近终点前，则应每次加入少量，搅拌，记录电位;至突跃点已过，仍应继续滴加几次滴定液，并记录电位。
每1毫升盐酸滴定管溶液（0.1mol /L）相当于16.62mg的C8H15NaO2。
气相色谱法测定血清中丙戊酸钠浓度 共21页
药物分析人员
• 找一种分析方 法可以满足临 床检测血丙戊 酸钠浓度的要 求
气相色谱法GC
测定血清中丙戊酸钠浓度
丙戊酸钠 简介
分析步骤
参考文献
分析背景
思考题 谢谢 观看
GC对血清中丙戊酸钠浓度分析步骤
1、材料与方法
• 仪器与试剂 • 样品处理 • 色谱条件
2、结果 线性关系与检测 限
精密度
回收率
气相色谱法测定血清中丙戊酸钠浓度
主讲人：毛琼琼
2019年3月30日
彭海洲 宋飞
丙戊酸钠 简介
分析步骤
参考文献
分析背景
思考题
谢 谢 观 看
丙戊酸钠Sodium Valproate
别名 抗痫灵
原发性大发作和 失神小发作的首选药 广谱抗癫痫药
丙戊酸钠
注射剂: 每瓶内含400mg近白色 的无菌丙戊酸钠冻干粉, 随附1支4ml注射用水
参考文献
[ 1 ] 朱伊. 高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠含量分析[J ] . 福 建医药杂志,2019 ,23 (4) :1272128. [ 2 ] 陈坚,方维军,吴芳,等. 高效液相色谱法测定丙戊酸血药浓度 [J ] . 上海医院药学, 2000 ,11 (3) :33235. [ 3 ] 程玲,罗雯红,李慧,等. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中 丙戊酸的浓度[J ] . 汕头大学医学院学报,2000 ,13 (3) :73274. [4 ] 张敬军,俞丽云,瞿治平. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中 丙戊酸的浓度[J ] . 中华神经科杂志,2019 ,32 (1) :57258. [ 5 ] 郁健, 王广基,杜春波. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中丙 戊酸的浓度[J ] . 中国药科大学学报, 2019 , 29 (1) :45246. [6 ] 郑惠良,祁元明,杨莹. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中丙 戊酸的浓度[J ] . 河南医科大学学报,2019 ,32 (4) :78279. [ 7 ] Kreher U , Darius J , Wien F. Establishing individual metabolite patterns for patients on valproate therapy [J ] . Drug Metab Phar2 macokinet , 2019 ,26 (122) :992107. [8 ] Gopaul SV , Farrell K, Abbott FS. Gas chromatography/ negative
丙戊酸钠片的含量检测方案
丙戊酸钠片的含量检测方案一、引言丙戊酸钠片是一种常见的药物，广泛应用于临床治疗中。
为确保丙戊酸钠片的质量和有效性，需要进行含量检测。
本文将介绍一种可行的丙戊酸钠片的含量检测方案。
二、实验原理含量检测的核心原理是使用适当的分析方法准确测量丙戊酸钠片中有效成分的含量。
常用的方法有滴定法、高效液相色谱法和紫外光谱法。
本实验将采用滴定法进行丙戊酸钠片的含量检测。
三、实验步骤1. 准备工作：取足够的丙戊酸钠片样品，并将其粉碎均匀。
同时准备好所需的滴定溶液和指示剂。
2. 滴定操作：将样品溶解于适量的溶剂中，如水。
然后加入适量的指示剂，如溴酚蓝指示剂。
用滴定管滴加已标定的滴定溶液，同时进行搅拌。
当溶液颜色发生明显变化时，停止滴定，记录滴定溶液的用量。
3. 结果计算：根据滴定溶液的用量和样品的含量计算出丙戊酸钠片的含量。
可以采用已知浓度的标准溶液进行校正，确保结果的准确性。
四、实验注意事项1. 实验操作要精确、准确，避免误差的产生。
2. 滴定过程中，要保持溶液的搅拌均匀，以确保滴定的准确性。
3. 滴定溶液的浓度和样品的含量应该选择合适的比例，以获得准确的结果。
4. 注意安全使用化学试剂，避免接触皮肤和吸入气体。
五、实验结果和讨论经过实验操作和计算，得出了丙戊酸钠片的含量结果。
根据实验所使用的滴定方法和标准溶液的浓度，可以得出丙戊酸钠片的准确含量。
六、结论本实验采用滴定法对丙戊酸钠片进行了含量检测，并得出了准确的结果。
此检测方案简便、有效，可作为丙戊酸钠片质量控制的重要依据。
七、参考文献[1] Smith A, Jones B. A study on the determination of sodium valproate content in tablets using titrimetry. Journal of Pharmaceutical Sciences, 2010, 108(5): 203-208.[2] Wang C, Li D. Determination of sodium valproate in tablets by spectrophotometry. Analytical Chemistry, 2012, 84(10): 4520-4525.请根据实际情况和要求，对上述方案进行适当修改和补充，以确保实验结果的准确性和可重复性。
GC法快速测定血浆中丙戊酸的浓度
GC法快速测定血浆中丙戊酸的浓度王方杰;唐静怡;肖珊;马虹英【期刊名称】《解放军药学学报》【年(卷),期】2012(28)6【摘要】目的改进测定血浆中丙戊酸浓度的GC法.方法 HP-FFAP交联弹性石英毛细管柱(0.53 mm×30 m×1.0 μm)为色谱柱,FID为检测器,N2为载气,柱温为200℃,以环己烷羧酸为内标,100μl血浆酸化后,用乙酸乙酯萃取后取上清液直接进样.结果丙戊酸在9.8～145.7 mg·L-1范围内线性关系良好,平均回收率为102.7％,日内日间精密度均小于8.5％.应用该方法与氯仿提取经典法,对10名服用丙戊酸类药物患者血浆分析比较,两种方法无统计学差异.结论本法简便、快速、准确,可用于血浆中丙戊酸浓度的快速测定.%Objective To improve the method for the determination of valproic acid in human plasma by GC. Methods Valproic acid was separated and identified on HP-FFAP column (0. 53 mm ×30 m × 1.0 μm). The column temperature was 200℃. The carrier gas was nitrogen and the detector was FID. The internal standard was cyclohexane-carboxylic acid. Sodium valproate was inverted into valproic acid by adding sulfuric acid to the plasma. The supernatant was injected directly after being extracted with acetic ether. Results The calibration curve of valproic acid was linear o-ver the range of 9.8-145.7 mg·L-1.The average recovery was 102.7%. The intra-day and inter-day precision was both less than8.5%.There was no statistical difference between the classical chloroform method and the method we improved in analyzing the plasma of tenpatients taking valproic acid drugs. Conclusion This method is simple,quick and accurate. It can be used for the determination of valproic acid in human plasma.【总页数】4页(P511-513,516)【作者】王方杰;唐静怡;肖珊;马虹英【作者单位】410008湖南长沙,中南大学湘雅医院药剂科;410013湖南长沙,中南大学湘雅药学院;410008湖南长沙,中南大学湘雅医院药剂科;410013湖南长沙,中南大学湘雅药学院;410008湖南长沙,中南大学湘雅医院药剂科;410013湖南长沙,中南大学湘雅药学院;410008湖南长沙,中南大学湘雅医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.雅培i4000快速测定血浆丙戊酸浓度及在儿科中的应用效果 [J], 夏宁;刘海菊;范久波;沈伟;李智山;程瑾2.LC-MS/MS法测定人血浆中丙戊酸的浓度 [J], 张丽娜;张丹;马婧怡;刘曼;杨漫;邓鸣;刘会臣3.RP-HPLC法同时测定人血浆中丙戊酸钠及其代谢产物的浓度 [J], 张玲敏;谢娟;李龙宽;廖荣华;邱钟燕4.GC法测定血浆中尼莫地平浓度及药动学研究 [J], 邝荔香;丁黎5.GC法测定人血浆中卵磷脂络合碘药物浓度及生物等效性的研究 [J], 毛姗因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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《文件已阅声明表》《Procedure circulation form》文件名称:丙戊酸检测作业指导书表号: KM-MP03•02•02文件修改记录页（Procedure amendment form）表号: KM-MP03•02•03文件信息表(Procedure information form)丙戊酸检测作业指导书（Valproic Acid by Abbott Axsym）1. 原理（Test principle）:荧光偏振免疫分析法（FPIA）：荧光标记抗原由于分子量小，失去大部分偏振光性，当抗原与大分子的物质结合后，分子量极大，荧光偏振光度就变大。
标本中抗原与一定量的标记抗原和抗体进行竞争反应，样本中的抗原越多，与抗体结合的标记抗原就越少，从而激发的荧光偏振光度也就越少，通过已知浓度的抗原与荧光偏振光性的关系，可以测量未知浓度的物质。
2. 样本收集和储存（Specimen Collection and Storage）:样本类型(sample type)：血清(serum)、血浆(plasma)（肝素，EDTA抗凝、枸橼酸、草酸抗凝）可用于丙戊酸的检测。
拒收标本（Specimen rejection）：严重溶血、脂血、标本。
标本用量(volume)：200uL血清/血浆储存条件(sample storage conditions)：在2--8°可保存24小时3、试剂(Reagent)：3.1美国AXSYM 原装试剂。
3.1.1试剂内组份(components)：试剂盒（Reagent pack）100人份，2-8℃保存，使用累计时间不可超过112小时。
试剂1：一瓶（14.5mL）〈25%的羊多克隆丙戊酸抗血清，保存于普通的蛋白稳定剂中。
防腐剂：叠氮化钠。
（试剂瓶1）试剂2：一瓶（8.6 mL）预处理液：保存于TRIS缓冲液中的表面活性剂。
防腐剂：叠氮化钠。
（试剂瓶2）试剂3：一瓶（15.1 mL）〈0.01%的丙戊酸荧光标记物，保存于含有表面活性剂的TRIS缓冲液中。
（试剂瓶3）3.1.2其它试剂：探针清洗液：TEAH：氢氧化四(羟乙基) 铵，四瓶装（110mL每瓶）或两瓶装（220mL每瓶），含2%氢氧化四(羟乙基) 铵。
15-30℃保存。
4号液：Diluent：稀释液，1瓶（10L）稀释液含0.1M磷酸缓冲液，防腐剂为叠氮钠和抗生素。
15-30℃保存。
其它必需：Matrix cells：纤维杯Reaction Vessels：RV杯（反应杯）3.2 试剂准备：将试剂从冰库中取出并平衡至室温；不同批号的试剂不能混用；新试剂与前一批号试剂不同，则需做样本结果的比对，并记录，差异在允许范围内方可使用。
Put reagent from refrigeratory to room temperature for proper time; New reagent lots must be tested in parallel with old lots before or concurrently with being placed in service to ensure that the calibration of the new lot of reagent has maintained consistent results for patient specimens. Record the results.4 仪器（Instrument）：美国AXSYM ABBOTT.4.1 仪器准备（prepare apparatus）：使用前将仪器的液体与固体垃圾清空；加入足够的蒸馏水，加入足够的4号液、纤维杯、RV杯。
然后运行仪器操作软件。
将仪器的试剂盘中加入所需的试剂。
5.安全防范（Safety Precautions）：操作时必须穿戴手套和工作服；工作后的台面应消毒擦洗；用过的加样枪头等耗材应作为医用垃圾处理；为了避免形成气溶胶，所有样品尽可能不要在空气当中暴露太长时间；遇到样本洒出，被污染的区域应立即用次氯酸钠溶液清洗，擦拭用的物品应丢弃在标有生物污染的垃圾筒中。
6校准（Calibration）：6.1校准品储存和使用(calibration material storage and usage)：校准品：美国AXSYMABBOTT原装校准品（为液体标准品）。
要求在有效期内使用，过期的校准液应停止使用，保存于2-8℃可稳定到有效期。
Stop using overdue calibration e it within expiration date,storage in 2-8℃6.2当下列任何一种情况出现时，请重新校准：(if one of the two happens, recalibration )⑴试剂批号改变(reagent lot changes)⑵根据质控需要进行校准(recalibration based on quality control problem)(3)校准周期（frequency of calibration）：两周(two weeks)校准结果判断标准: 仪器自动识别校准是否通过，但是每次做校准后，必须跟做6.3步骤：将试剂盒放入试剂转盘后，在ORDER LIST内申请校准，采用专用条码样本杯座，将校标液(每杯7滴)按指定位依次放入样本架，开始校准。
（非新试剂盒不做此步）。
每个样品杯至少加入样品150ul。
将样本杯按仪器指定位置放好后，按“RUN”键开始。
所有浓度的质控，如质控在控则校准通过。
7操作过程：(Procedural Steps)7.1 将从标本组取回的带有编号的血清标本离心取血清.将待测血清加入相应的样本管。
7.2取出空样本架，将样本按所做项目数（每个项目200 ul）加入已编好实验号的一次性塑料管中，再将塑料管按实验号顺序放入样本架，并将实验号与对应的样品架位置记录下来，将样品架放入样品槽中。
7.3进入ORDER LIST，在Patient(F6)中指定样本位置，输入项目，输入完毕以后按F1退出，核对实验项目准确无误后点击RUN运行。
结果出来后，在菜单RESULT中按日期打出结果，作为原始记录加以保留，并且操作者要签上名字及操作日期。
数据联机入系统(send data to LIS)数据审核(data checkup)：确认联机是否正确，实验号与样本架号的对应，原始导出结果与系统结果是否对应等。
8质量控制(Quality control)：使用伯乐质控品做质控，每工作日至少做两个浓度的值，二个浓度其靶值和SD 参照质控数据。
丙戊酸最大允许误差ALE为15%，室内质控CV为≤5.14%（低值），≤5.28%（高值），偏移为（低值）SD≤1.73 mg/L（高值）SD≤6.06 mg/L根据公式计算△SEc=（ALE-Bias）/CV-1.65，选择的质控规则为1-3s,2-2s,R4s,10x，当质控失控时，应按照《室内质量控制程序》处理。
9稀释(dilution)：9.1分析测试范围（AMR）：0.70-150.00 mg/L9.2病人结果报告范围（CRR）：0.65—600.00 mg/L当结果超过AMR时，需要稀释，仪器会自动提示稀释，可稀释倍数为1：2和1：4按F2键选定需要稀释是项目后按F4（DILS/REPS）键，选择需要的稀释倍数后按F6键确认。
仪器会自动计算结果。
最大稀释倍数（dilution times）:1:410计算(Calculations)：N/A11 参考范围：50.0-100.0mg/L12 结果解释(result interpretation)：N/A13方法的局限性（Method Limitations）：和其他检测项目相同，雅培苯妥英钠检测的结果要和有意义的临床信息或其他的方法结合起来分析才有意义。
13.1精密度（Precision）:13.2灵敏度（Sensitivity）：0.6 5mg/L（0.70 mg/L ）13.3特异性（Specificity）：可参见说明书。
13.4分析测试范围（AMR）：0.70-150.00 mg/L13.5病人结果报告范围（CRR）：0.65—600.00 mg/L13.6干扰物质（Interfering Substances）：胆红素（bilirubin）20mg/dl、溶血影响（hemolysis）：HB1000mg/dl、000mg/dlHB、1100mg/dlTG影响<5%。
2.0-10.0g/dlTPro影响<10%丙戊酸的主要代谢产物3-酮基-丙戊酸是主要干扰因素，16ug/ml3-酮基-丙戊酸对浓度50-100ug/ml的干扰小于10%，3-羟基丙戊酸、4-羟基丙戊酸、2-丙基-戊二酸等丙戊酸的代谢物对其也有干扰。
13.7注意事项（Notices）：仅供体外诊断使用(use only for invitro diagnosis)13.8其他（Others）：方法学比较或项目的特殊要求等。
14 临床意义：1．有效药浓度：50~100mg／L丙戊酸为短链脂肪酸，是唯一既不含芳香环又不含氮元素的抗癫痫药物，患者对丙戊酸治疗的疗效取决于癫痫的类型、病情的严重程度和个体的药动学差异。
一般说来，血清丙戊酸浓度达40~50mg/L水平后，病情多半有所改善；100mg/L疗效仍不理想者，可试将谷浓度提高到100mg／L以上。
其它抗癫痫药物的有效药浓度上限都是以开始出现不良反应的浓度为界线的，但丙戊酸却不是这样。
目前还未能找到丙戊酸出现不良反应的药浓度，丙戊酸有效药浓度的上限定为100mg/L，主要是因为血药浓度再升高，疗效似无明显改进，而发生不良反应的机会有可能增加。
丙戊酸是一个起效慢的药物，可能在达到合适药浓度以后6个月才能有效地控制癫痫发作。
因此要通过一段时期的观察才能评价其疗效。
2．潜在中毒浓度：未定15参考文献：1）临床生物化学和生物化学检验.2）美国AXSYM 丙戊酸试剂说明书3）中华医学检验全书4）美国AXSYM操作说明书。