免疫球蛋白的检测和临床应用培训课件
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《免疫球蛋白使用》课件
免疫防御：抵抗病原体入侵，保护机体免受感染 免疫调节：调节免疫反应，维持免疫系统的平衡 免疫识别：识别并清除体内异常细胞，如肿瘤细胞 免疫记忆：记忆并识别再次入侵的病原体，提高免疫反应效率
Part Three
预防感染：免疫球蛋白可以增强机体的免疫力，预防病毒、细菌等病原体 的感染。
治疗疾病：免疫球蛋白可以用于治疗一些免疫系统疾病，如过敏、哮喘等。
灭活方法：热处理、 化学处理、辐射处 理等
灭活目的：降低免 疫球蛋白的活性， 使其失去生物活性
除菌方法：过滤、 紫外线照射、化学 消毒等
除菌目的：去除免 疫球蛋白中的微生 物和病毒，保证产 品的安全性
原料选择：选择高 质量的原料，如血 液、血清等
生产工艺：采用先 进的生产工艺，如 离心、过滤、沉淀 等
质量检测：进行严 格的质量检测，如 蛋白质含量、纯度 、活性等
储存条件：保证适 宜的储存条件，如 低温、避光、干燥 等
Part Five
免疫球蛋白的来源：人源性、动物源性、重组来源 免疫球蛋白的制备方法：提取、纯化、灭活、浓缩 免疫球蛋白的副作用：过敏反应、感染风险、免疫抑制 免疫球蛋白的使用注意事项：剂量、疗程、禁忌症、不良反应
IgA：主要存在于呼吸道、消化道等粘膜表面，具有抗感 染、抗过敏等作用
IgM：主要存在于血液中，具有抗感染、抗肿瘤等作用
IgE：主要存在于血液中，具有抗过敏、抗寄生虫等作用
IgD：主要存在于血液中，具有抗感染、抗肿瘤等作用
IgG4：主要存在于血液中，具有抗感染、抗肿瘤等作用
免疫球蛋白由四条多肽链组成，包括两条重链和两条轻链 重链和轻链之间通过二硫键连接，形成Y字形结构 重链和轻链的氨基酸序列不同，决定了免疫球蛋白的特异性 免疫球蛋白具有高度可变区，可以识别并结合抗原
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（三）注意事项 1. 部分单克隆冷球蛋白可在低于 10 ℃时 发生沉淀，故取标本时要保温 2. 部分冷球蛋白在冷的条件下可迅速沉淀， 但有的需要数天，故此应放置一周 3. 正常人血清也可含有冷球蛋白，但属多 克隆冷球蛋白的性质，且含量低 4. 冷纤维蛋白原、 C 反应蛋白 - 蛋白复 合物和肝素沉淀蛋白等也具有冷沉淀特性， 实验时应加以区别
思考题： 1．IgG、IgA、IgM的测定技术 2．体液中IgG、IgA、IgM测定的临床应用 3．IgE、IgD、的测定技术 4．异常免疫球蛋白的检测技术来自THANKYOU
SUCCESS
2019/4/14
（一）定性分析 分离血清作二支分装，一支置 4℃， 一支置37℃，直立，一般于24～72小时， 4℃一管可出现沉淀 （二）定量分析 将沉淀用冷 pH7.0 ， 0.05mol/L 磷酸 盐缓冲液洗涤，然后将沉淀再溶解于 10 倍体积的 pH8.6 的 0.05mol 巴比妥 / 巴 比妥钠缓冲液中，置 37 ℃ 30min，进行 免疫电泳或免疫固定电泳进行型别鉴定
THANK
YOU
SUCCESS
2019/4/14
第四节 异常免疫球蛋白的检测
一、 M 蛋白的检测与鉴定 M 蛋白是一种异常单克隆免疫球蛋白，多 见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋 巴瘤。
（一）血清蛋白区带电泳 IgG 型多位于 α 区与慢 γ 区 IgA 型多位于慢 γ 区与 β 区 IgM 型多位于 β 2 区或 γ 区 IgD 型多位于 β 区或 γ 区 但最终鉴定需用特异性抗体，在轻链病 时 M 蛋白呈淡染区带常在 β 或 γ 区， 需与尿中本周蛋白检测或尿蛋白电泳同时 观察。
第三节 IgE 和 IgD 的测定
一、 IgE 的测定方法 1 、放射免疫法：固相抗 -IgE+IgE+ 125 I 标记抗人 IgE 2 、化学发光免疫分析法：固相抗 IgE+IgE+ 酶标抗 IgE+ 底物 3 、乳胶颗粒免疫浊度法 4 、酶免疫试验
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• 分泌型IgA具有免疫排除功能，即分泌型IgA结合饮食中大量 的可溶性抗原以及肠道正常菌群或病原微生物所释放的热原 物质，防止它们进入血液。
26
IgD
• <1% 血清Ig • IgD是成熟B细胞的重要表面标志， B细胞的膜受体 • B细胞的分化过程中首先出现mIgM，mIgD的出现标
志着B细胞成熟 • 对防止免疫耐受有一定作用 • 半衰期短2.8天.
化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。
• 新生儿出生4～6个月后，血中可出现IgA，以后逐渐升高，到青 少年期达到高峰。
• 例：与脊髓灰质炎病毒结合，阻抑其吸附到易感细胞上，分泌
型IgA还可中和毒素如霍乱弧菌毒素和大肠杆毒素 。
25
IgA的特点
• 参与皮肤粘膜的局部抗感染作用 • 初乳中含有高浓度的sIgA----母乳喂养； • 通过替代途径激活补体； • 参与Ⅲ型超敏反应；
天然抗原 机体
（多个抗原表位）
诱发多个B 细胞克隆活 化
产生多种针对不同表位的相应抗体 （多克隆抗体）
32
33
二、单克隆抗体 (monoclonal antibody, McAb)
由一个始祖细胞分化、增殖所产生的遗传性状完全 相同的细胞群称为克隆（clone）。
由一个克隆B细胞产生的、只作用于单一抗 原表位的高度特异性抗体称为单克隆抗体。 又称第二代人工抗体。
• 参与II、III型超敏反应。
例：应用对麻疹、甲型肝炎等有免疫力的产妇或正常人丙种或胎
盘球蛋白可进行人工被动免疫，能有效地预防相应的传染性疾
病。不少自身抗体如抗甲状腺球蛋白抗体、SLE的LE因子（抗核
抗体）以及引起Ⅲ型变态反应免疫复合物中的抗体大都也属于
IgG。
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IgD
• <1% 血清Ig • IgD是成熟B细胞的重要表面标志， B细胞的膜受体 • B细胞的分化过程中首先出现mIgM，mIgD的出现标
志着B细胞成熟 • 对防止免疫耐受有一定作用 • 半衰期短2.8天.
化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。
• 新生儿出生4～6个月后，血中可出现IgA，以后逐渐升高，到青 少年期达到高峰。
• 例：与脊髓灰质炎病毒结合，阻抑其吸附到易感细胞上，分泌
型IgA还可中和毒素如霍乱弧菌毒素和大肠杆毒素 。
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IgA的特点
• 参与皮肤粘膜的局部抗感染作用 • 初乳中含有高浓度的sIgA----母乳喂养； • 通过替代途径激活补体； • 参与Ⅲ型超敏反应；
天然抗原 机体
（多个抗原表位）
诱发多个B 细胞克隆活 化
产生多种针对不同表位的相应抗体 （多克隆抗体）
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二、单克隆抗体 (monoclonal antibody, McAb)
由一个始祖细胞分化、增殖所产生的遗传性状完全 相同的细胞群称为克隆（clone）。
由一个克隆B细胞产生的、只作用于单一抗 原表位的高度特异性抗体称为单克隆抗体。 又称第二代人工抗体。
• 参与II、III型超敏反应。
例：应用对麻疹、甲型肝炎等有免疫力的产妇或正常人丙种或胎
盘球蛋白可进行人工被动免疫，能有效地预防相应的传染性疾
病。不少自身抗体如抗甲状腺球蛋白抗体、SLE的LE因子（抗核
抗体）以及引起Ⅲ型变态反应免疫复合物中的抗体大都也属于
IgG。
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存在形式
• 膜型 (membrane immunoglobulin, mIg) — B细胞膜上的抗原受体BCR；
• 分泌型 (secreted immunoglobulin, sIg) — 分泌进入体液, 介导体液免疫应答。
第一节 免疫球蛋白的结构
一、基本结构
H2L2
• V区 • 3个超变区（HVR） • 互补决定区（CDR1 CDR2 CDR3） • 抗原结合部位（ABS）
概念
1. 抗体（antibody, Ab）功能性概念 是介导体液免疫的重要效应分子，是B细
胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产 生的糖蛋白，主要存在于血清等体液中， 通过与相应抗原特异性结合，发挥体液免 疫功能。
2. 免疫球蛋白（immunoglobulin, Ig）结构性 概念 具有抗体活性或化学结构与抗体分 子相似的球蛋白。(Ab, BCR,其他分子)
(2)四个亚类； IgG1, IgG2 and IgG4
IgG3
(3)血清中含量最高(75%Ig)；
(4)半衰期最长(21～23天)；
(5)3～5岁达成人水平(8.0～17mg/ml)；
(6)可与SPA结合。
2.生物学活性 (1)通过胎盘（新生儿抗感染）； (2)激活补体（裂解细胞）； (3)调理作用（促进吞噬）； (4)介导ADCC（细胞毒作用）。 3.实际意义 (1)抗感染； (2)自身抗体 → 自身免疫病； (3)介导变态反应(Ⅱ、Ⅲ型)； (4)封闭抗体 → 肿瘤细胞逃逸； (5)亲合层析法 — IgG纯化； (6)免疫学检测。
三、抗体多样性的遗传学基础
（1）胚系中众多的V、D、J基因片段； （2）V-D-J和V-J重排时，基因片段进行随机组合； （3）VDJ连接过程中的核苷酸缺失和N区的核苷酸插
免疫球蛋白和抗体培训课件
IgM的特点
➢ IgM是个体发育中最早产生的抗体，胚胎晚 期已能合成，新生儿脐带血中若IgM水平升 高，提示胎儿曾有宫内感染
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
1.重链与轻链
(1)根据重链分类： 根据重链靠近羧基末端氨基酸组成及排列顺序 不同，将重链分为种：γ、α、μ、δ、ε 根据重链组成不同，将Ig分为五类：IgG、 IgA、IgM、IgD、IgE
(2)根据轻链分型：κ、λ型
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4.J链和分泌片
➢ J链是一条多肽链，由浆细胞合成，以二硫键 的形式共价结合到Ig的重链上。
➢ 分泌片：由黏膜上皮细胞合成和分泌多肽， 以非共价形式结合到二聚体上，保护IgA， 使之不受环境中酶的破坏，并介导IgA的转 运
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二、免疫球蛋白的分子结构
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（一）免疫球蛋白的基本结构
➢ 四肽链结构 ，链间二 硫键连接
➢ 两条重链（H）和两条 轻链（L）
➢ 氨基端和羧基端。
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3. 铰链区
位于CH1与CH2之间， 含有丰富的脯氨酸， 因此易伸展弯曲，而 且易被木瓜蛋白酶、 胃蛋白酶等水解。
（二）免疫球蛋白的水解片段
➢ IgM是个体发育中最早产生的抗体，胚胎晚 期已能合成，新生儿脐带血中若IgM水平升 高，提示胎儿曾有宫内感染
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1.重链与轻链
(1)根据重链分类： 根据重链靠近羧基末端氨基酸组成及排列顺序 不同，将重链分为种：γ、α、μ、δ、ε 根据重链组成不同，将Ig分为五类：IgG、 IgA、IgM、IgD、IgE
(2)根据轻链分型：κ、λ型
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4.J链和分泌片
➢ J链是一条多肽链，由浆细胞合成，以二硫键 的形式共价结合到Ig的重链上。
➢ 分泌片：由黏膜上皮细胞合成和分泌多肽， 以非共价形式结合到二聚体上，保护IgA， 使之不受环境中酶的破坏，并介导IgA的转 运
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二、免疫球蛋白的分子结构
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（一）免疫球蛋白的基本结构
➢ 四肽链结构 ，链间二 硫键连接
➢ 两条重链（H）和两条 轻链（L）
➢ 氨基端和羧基端。
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3. 铰链区
位于CH1与CH2之间， 含有丰富的脯氨酸， 因此易伸展弯曲，而 且易被木瓜蛋白酶、 胃蛋白酶等水解。
（二）免疫球蛋白的水解片段
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3）骨架区 VH和VL各有4个FR。
2. 恒定区（constant region,C区)： Ig 分子的C端，在轻链1/2和重
链3/4处，氨基酸的组成和排列比较恒 定。
Ig的类别
1）类：根据CH氨基酸组成排列不同分为五大类
γμαδ
ε
IgG IgM IgA IgD IgE
亚类：IgG1~4；IgM1~2; IgA1~2
2）型：根据CL氨基酸组成排列不同分为两型
κ型和λ型
2、铰链区（Hinge region）
特点：位于CH1和CH2之间，富含 脯氨酸，极富弹性。
功能： 1.有利于Ab与Ag的结合； 2.有利于Ig补体功能区的暴露。
3、连接链（J链）和分泌片段
J链：由浆细胞合成的富含半胱氨酸的 多肽链。起连接及稳定多聚体结构的 作用。
分泌片（SP）：由黏膜上皮细胞合成 和分泌的含糖肽链。起保护sIgA及介 导其主动运输的作用。
二、免疫球蛋白的结构
（一）基本结构（以IgG为例） （二）功能区 （三）水解片段
（二）免疫球蛋白的功能区
1、定义：Ig的多肽链分子可折叠成若干个链
内由二硫键连接的球形结构。每个球形结构约由 110个氨基酸组成，具有一定的功能，故称功能区。
IgA的特征和功能
1、特征 产生—部位：MALT； 时间：出生后3-6月始合成； 存在—形式：单体血清型和二聚体分泌型； 部位：唾液、泪液、乳汁及呼吸道、
消化道、泌尿道的分泌液中和粘膜表面； 时间：半衰期，6天左右； 浓度：血清中Ig含量 10%-20%
2、功能
1）血清型：同IgG，但不重要
2）分泌型：粘膜局部抗感染免 疫的重要因素（又称局部免疫抗 体）。
(一) 识别并特异性结合抗原 （二）激活补体 （三）通过Fc段结合具有FcR的细胞
医学检验·检查项目：血清免疫球蛋白测定_课件模板
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
相关症状： 扁桃体小或缺如、网状青斑。
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相关疾病：
原发性单克隆免疫球蛋白病、继发性单克 隆免疫球蛋白病、脊柱裂和有关畸形、冷 球蛋白血症、小儿白细胞黏附分子缺陷Ⅰ 型、先天性性联无γ-球蛋白血症、特发 性迟发性免疫球蛋白缺乏症、婴儿期短暂 性低丙球蛋白血症、异常γ-球蛋白血症、 重症联合免疫缺陷。
医学检验·各论 血清免疫球蛋白测定
内容课件模板
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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简介： 免疫球蛋白（Ig）具有抗体活性，能
与相应抗原专一结合，是体内普遍存在的 一类蛋白质。
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
临床意义：
Ig显著减低 ①见于先天性低丙种球 蛋白血症，如 IgG、IgA、IgM三种全缺的 Bruton病（仅限于男性），三种Ig缺某一 或二种（减少或无能）的丙种球蛋白异常 血症，后者最多见的是IgA缺乏症（隐性 遗传）。 ②见于获得性低丙种球蛋白血 症（如肾病综合征、蛋白质丢失性肠病、 先天性
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
临床意义：
风疹病等）以及瑞（Swiss）氏胸腺发育 不全伴无丙种球蛋白血症。Ig 明显增高 ①见于免疫性疾病，如系统性红斑狼疮急 性期、慢性活动性肝炎、类风湿性关节炎 活动期等。 ③见于多发性骨髓瘤，可按 其所产生Ig不同而有G型（IgG增多）、A 型（IgA增高）、D型、E型（后两型极少 见）等。 ④
医学检验·各论：血清免疫球蛋白测定 >>>
特定蛋白检测的临床意义与应用培训ppt课件
➢慢性肾脏病在成人中的发生率大约为10% ➢早期知晓率不到10% ➢终末期肾衰患者数量正以每年8%的速度增长 ➢超过150万人依赖肾脏替代治疗而生存
特定蛋白检测的临床意义与应用
27
尿微量白蛋白定义： 正常情况下尿中只有极少量的白蛋白。尿微量白蛋白是指 尿中白蛋白量低浓度升高，属于不正常情况下分泌出的白蛋白。
成人 新生儿
超敏CRP浓度的解释
检测结果
(mg/L)
临床应用建议
＜1.0
心血管疾病：低危险性
1.0~3.0
心血管疾病：中危险性
＞3.0
心血管疾病：高危险性
＞2.0
提示新生儿感染
特定蛋白检测的临床意义与应用
16
5 、CRP在不同临床疾病中的应用
脑膜炎
➢己经证实脑膜炎时检测CRP很有用处，因为它可以用来区别细菌或病毒感染，敏 感性为96%，特异性93%，阴性预期值99%，其他实验室指标无一能达到此水平。
特定蛋白检测的临床意义与应用
23
糖化血红蛋白-HbA1c
HbA1c的生物学特点：
➢H不b 1短c 义内：或
红出
发的 缓响慢， 、映 可两
、的
平➢
产间物、，是 糖空 血、
要岛成素 。因素对其干扰不大
➢与血糖浓度、血糖与血红蛋白接触时间及红细胞存活时间相关
特定蛋白检测的临床意义与应用
24
HbA1c的临床意义与应用：
CRP在区分细菌和病毒感染方面能提供比WBC更精确的信息
特定蛋白检测的临床意义与应用
7
ESR检测
缺点： 1 、感染时变化缓慢， 2-3天可见升高，至少2-3周恢复正常
2、易受温度、贫血、血沉管位置、异常免疫球蛋白或复合物、药物等 影响
特定蛋白检测的临床意义与应用
27
尿微量白蛋白定义： 正常情况下尿中只有极少量的白蛋白。尿微量白蛋白是指 尿中白蛋白量低浓度升高，属于不正常情况下分泌出的白蛋白。
成人 新生儿
超敏CRP浓度的解释
检测结果
(mg/L)
临床应用建议
＜1.0
心血管疾病：低危险性
1.0~3.0
心血管疾病：中危险性
＞3.0
心血管疾病：高危险性
＞2.0
提示新生儿感染
特定蛋白检测的临床意义与应用
16
5 、CRP在不同临床疾病中的应用
脑膜炎
➢己经证实脑膜炎时检测CRP很有用处，因为它可以用来区别细菌或病毒感染，敏 感性为96%，特异性93%，阴性预期值99%，其他实验室指标无一能达到此水平。
特定蛋白检测的临床意义与应用
23
糖化血红蛋白-HbA1c
HbA1c的生物学特点：
➢H不b 1短c 义内：或
红出
发的 缓响慢， 、映 可两
、的
平➢
产间物、，是 糖空 血、
要岛成素 。因素对其干扰不大
➢与血糖浓度、血糖与血红蛋白接触时间及红细胞存活时间相关
特定蛋白检测的临床意义与应用
24
HbA1c的临床意义与应用：
CRP在区分细菌和病毒感染方面能提供比WBC更精确的信息
特定蛋白检测的临床意义与应用
7
ESR检测
缺点： 1 、感染时变化缓慢， 2-3天可见升高，至少2-3周恢复正常
2、易受温度、贫血、血沉管位置、异常免疫球蛋白或复合物、药物等 影响
免疫球蛋白的功能培训ppt课件
第24题 解析：参考答案：B [解析] 第一空，由“享受顺周期的经济上升发展”可知，这些金融机构是顺着形势做事情。“济 困扶危”指救济贫困的人，扶助有困难的人。与“顺周期”相反，排除D。
依次填入划横线部分最恰当的一项是：______ A.知难而上 两面三刀 出人意表 B.激流勇进 刀头舔蜜 出奇制胜 C.游刃有余 代人捉刀 鸡鸣狗盗 D.举重若轻 笑里藏刀 剑走偏锋
89、当下“文化”成为最热的词之一。如何继承发扬传统文化、形成中国人自己的文化 ，增强我们的文化软实力，已成热门话题。但这种共识其实是相当模糊的，很多争议 因此而生。学繁体字、穿唐装、开国学班……围绕“传统文化”生出的热闹一场接一场， 但讨论的背后都离不开对“文化”概念的深层次辨析。
如果这是一篇文章的开头，接下来的内容最有可能是______。 A.对“什么是文化”展开讨论 B.探讨如何继承和发扬传统文化 C.对当前“复古风”进行解读和反思 D.分析“文化”缘何成为当下的最热词之一
90、如果从伦理的角度着眼，两极分化是一种悲剧性的社会现实。面对落入破产者行 列的许多小生产者和劳动者，我们不能不寄予深切的同情。但是从生产力的角度着眼 ，两极分化是商品经济的价值规律发生作用后的必然经济结果，它发挥着约束和激励 的功能，使人力资源和物质资源都趋于更合理的配置。 对这段话理解正确的一项是 。 A.从发展商品经济的角度看，两极分化具有一定的积极意义 B.我们应该对落入破产者行列的小生产者和劳动者寄予深切的同情 C.我们不应该对落入破产者行列的小生产者和劳动者寄予太多的同情 D.我们应该首先从经济的角度考虑问题，而不应该过多地从伦理的角度考虑问题
产物，具有中和毒素、阻断病原 体入侵、清除病原微生物等功能； • 在体外，产生凝集、沉淀现象用 于检测
免疫球蛋白的功能
依次填入划横线部分最恰当的一项是：______ A.知难而上 两面三刀 出人意表 B.激流勇进 刀头舔蜜 出奇制胜 C.游刃有余 代人捉刀 鸡鸣狗盗 D.举重若轻 笑里藏刀 剑走偏锋
89、当下“文化”成为最热的词之一。如何继承发扬传统文化、形成中国人自己的文化 ，增强我们的文化软实力，已成热门话题。但这种共识其实是相当模糊的，很多争议 因此而生。学繁体字、穿唐装、开国学班……围绕“传统文化”生出的热闹一场接一场， 但讨论的背后都离不开对“文化”概念的深层次辨析。
如果这是一篇文章的开头，接下来的内容最有可能是______。 A.对“什么是文化”展开讨论 B.探讨如何继承和发扬传统文化 C.对当前“复古风”进行解读和反思 D.分析“文化”缘何成为当下的最热词之一
90、如果从伦理的角度着眼，两极分化是一种悲剧性的社会现实。面对落入破产者行 列的许多小生产者和劳动者，我们不能不寄予深切的同情。但是从生产力的角度着眼 ，两极分化是商品经济的价值规律发生作用后的必然经济结果，它发挥着约束和激励 的功能，使人力资源和物质资源都趋于更合理的配置。 对这段话理解正确的一项是 。 A.从发展商品经济的角度看，两极分化具有一定的积极意义 B.我们应该对落入破产者行列的小生产者和劳动者寄予深切的同情 C.我们不应该对落入破产者行列的小生产者和劳动者寄予太多的同情 D.我们应该首先从经济的角度考虑问题，而不应该过多地从伦理的角度考虑问题
产物，具有中和毒素、阻断病原 体入侵、清除病原微生物等功能； • 在体外，产生凝集、沉淀现象用 于检测
免疫球蛋白的功能
免疫球蛋白检测及应用课件21页PPT
39、没有不老的誓言，没有不变的承 诺，踏 上旅途 ，义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 的人， 决不会 坚韧勤 勉。
免疫球蛋白测定及应用
一、免疫球蛋白定量检测方法
（一）单向琼脂扩散法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清，温度，标准曲
线，异常沉淀线
（二）免疫比浊法 透射比浊法 散射比浊法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清，缓冲液，
（二）免疫球蛋白定量 某一类免疫球蛋白的显著增高
（三）轻链片段定量测定 单向免疫扩散法或ELISA
（四）免疫电泳或免疫固定电泳 （五）本周蛋白测定
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
①中枢神经系统内源性合成增加 ②血中IgG增高
③血脑屏障通透性增高。
四、M蛋白的检测
M蛋白是B淋巴细胞或浆细胞单克 隆异常增殖所产生的一种在氨基酸 组成及顺序上十分均一的异常单克 隆免疫球蛋白（monoclonal Ig）， 多见于多发性骨髓瘤，巨球蛋白血 症和恶性淋巴瘤。
（一）血清蛋白区带电泳 M区带的出现
三 、免疫球蛋白定量临床意义
（一）血清Ig定量临床意义 1.低Ig血症 （1）先天性低Ig血症 （2）获得性低Ig血症
2.高Ig血症 （1）非特异型多克隆免疫球蛋 白增高症
（2）特异型单克隆免疫球蛋白 增殖症
3.IgD 在疾病中的意义尚不明确。妊娠 末期及吸烟者IgD含量升高。IgD 型骨髓瘤患者血清中IgD水平比 正常人高10000倍，是惟一明确 可作为疫法 （五）免疫电泳及免疫固定电泳
免疫球蛋白测定及应用
一、免疫球蛋白定量检测方法
（一）单向琼脂扩散法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清，温度，标准曲
线，异常沉淀线
（二）免疫比浊法 透射比浊法 散射比浊法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清，缓冲液，
（二）免疫球蛋白定量 某一类免疫球蛋白的显著增高
（三）轻链片段定量测定 单向免疫扩散法或ELISA
（四）免疫电泳或免疫固定电泳 （五）本周蛋白测定
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
①中枢神经系统内源性合成增加 ②血中IgG增高
③血脑屏障通透性增高。
四、M蛋白的检测
M蛋白是B淋巴细胞或浆细胞单克 隆异常增殖所产生的一种在氨基酸 组成及顺序上十分均一的异常单克 隆免疫球蛋白（monoclonal Ig）， 多见于多发性骨髓瘤，巨球蛋白血 症和恶性淋巴瘤。
（一）血清蛋白区带电泳 M区带的出现
三 、免疫球蛋白定量临床意义
（一）血清Ig定量临床意义 1.低Ig血症 （1）先天性低Ig血症 （2）获得性低Ig血症
2.高Ig血症 （1）非特异型多克隆免疫球蛋 白增高症
（2）特异型单克隆免疫球蛋白 增殖症
3.IgD 在疾病中的意义尚不明确。妊娠 末期及吸烟者IgD含量升高。IgD 型骨髓瘤患者血清中IgD水平比 正常人高10000倍，是惟一明确 可作为疫法 （五）免疫电泳及免疫固定电泳
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三、免疫球蛋白的异质性
不同抗原表位刺激所产生不同的抗 体分子，其识别抗原的特异性不同 （V区不同）
同一抗原表位诱生的不同类型的抗 体，其识别抗原的特异性相同（C区 不同）
免疫球蛋白有不同种类 免疫球蛋白同时可作为抗原，其具
有不同的抗原特异性
免疫球蛋白具有异质性
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免疫球蛋白的免疫原性
其它成分 J链（joining chain） 分泌片（secretory piece, sp）
水解片段
功能区
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Flexibility of immunoglobulins
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Ｊ链和分泌片
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VH和VL：与抗原特异性结合的部位
CL和CH1：某些同种异型（allotype）遗传标记
IgG的CH2、IgM的CH3： 补体C1q结合点 激活补体经典途径
IgG的CH3： 结合单核/巨噬细胞表面FcR 不同生物学效应
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免疫球蛋白的结构域
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一般认为SIgA可能以膜结合蛋白形式存在于粘 膜表面，分泌片选择性地介导IgA 二聚体的装配 和转运，并有稳定SIgA的结构，避免蛋白酶的 消化水解
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免疫球蛋白的水解片段
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木瓜蛋白酶(papain)水解IgG：得到两个相 同的Fab段和一个Fc段
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游离轻链的检测
本周氏蛋白 血清蛋白电泳 免疫固定电泳 免疫比浊法检测游离轻链
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免疫比浊法检测
高敏感性：可达到5-10mg/L 高特于性 高检测速率 定量检测：可同时检测κ型和λ型轻链的水平以及两者
的比值，有利于鉴别诊断和监测病情的变化
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IgE测定及临床意义
（二）临床意义
1.I型变态反应性疾病，如特发性哮喘、特发性皮炎、过敏 性鼻炎等IgE常升高。
2.非变态反应性疾病，如IgE骨髓瘤、寄生虫感染等IgE升 高。
3.急性或慢性肝炎、SLE、类风湿关节炎等疾病IgE可升高。 4. IgE降低见于原发性无丙种球蛋白血症、肿瘤及化疗药
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IgD测定及临床意义
（一）测定方法 IgD的测定方法有放射免疫分析法，乳胶颗粒免疫
比浊分析法、酶联免疫吸附试验。在临床用得最多 的是酶联免疫吸附试验测定IgD。 （二）临床意义 目前IgD的生物功能尚未完全阐明，血清中IgD升高 主要见于妊娠末期，IgD型骨髓瘤，甲状腺炎和大 量吸烟。IgD降低见于原发性无丙种球蛋白血症、 肺硅沉着病（矽肺）、细胞毒药物治疗后。
免疫球蛋白的检测和临床 应用
免疫球蛋白的结构
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检测方法
血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM,定量测定方法一般有 单向环状免疫扩散法，火箭免疫电泳法，ELISA,免 疫比浊法，放射免疫分析法等，但临床常用单向环 状免疫扩散法和免疫比浊法来测定血清免疫球蛋白 含量。
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游离轻链通过肾小球滤过而从血液中快速清除，然 后被近端肾小管重吸收和分解，因此游离轻链的检 测可以实时评估病情进展，研究表明大量的游离轻 链可以被肾脏吸收，所以只有非常少的游离轻链逃 过近端肾小管的重吸收，在正常的尿中含有极少量 的游离轻链。
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IgG
作为血清中最主要的抗体成分，约占人体血清中总 免疫球蛋白含量的75%。是唯一能通过胎盘的Ig， IgG是血液和细胞外液中的主要抗体，也是机体再 次免疫应答的主要抗体，大多数抗感染抗体与自身 抗体都为IgG 类。
16岁以上成年人IgG临床参考范围为： 6.0~16.0g/L
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Ig 在蛋A正白常含人量血的1清0中～的20含%量。仅新次生于儿I血gG清，中占无血Ig清A免抗疫体球，
但可从母乳中获得分泌型IgA。分为血清型IgA和分 泌型IgA：
其中血清型IgA含量占总IgA的85%左右，虽然血清 型IgA虽有IgG和IgM的某些功能，但在血清中并不 显示重要的免疫功能。
物应用后。
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什么是游离轻链?
与重链结合成免疫球蛋白的轻链称为结合轻链，未 与重链结合的轻链称为游离轻链。
游离轻链的量最终取决于B细胞的合成分泌与肾脏 清除的动态平衡结果，临床上多种疾病都可导致血 清，肾脏清除率降低及浆细胞病等。
分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、 鼻和支气管分泌液、胃肠液、尿液、汗液等。机体 粘膜局部抗感染免疫的主要抗体。故又称粘膜局部 抗体。
16岁以上成年人IgA临床参考范围为： 0.76~3.9g/L 免疫球蛋白的检测和临床 6
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IgM
IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，是机 体抗感染的先头部队，血清中检出IgM，提示新近 发生感染，可用于感染的早期诊断。
分泌型IgM为五聚体，是分子量最大的Ig，沉降系 数为19S，称为巨球蛋白，一般不能通过血管壁， 主要存在于血液中。
16岁以上成年人IgG临床参考范围为： 0.4~3.45g/L
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。
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IgG 、IgA、IgM均升高
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血正常清人I血g清D中和IgIDg含E量很低，仅占血清免疫球蛋白
总量的0.2%。IgD可在个体发育的任何时间产生， 半衰期2.8天。血清IgD的生物学功能尚不清楚，膜 结合型IgD（mIgD）构成BCR，是B细胞分化发育 成熟的标志，未成熟的B细胞仅表达mIgM，成熟B 细胞可同时表达mIgM和mIgD，称为初始B细胞 （native B cell）；活化的B细胞或记忆B细胞其表 面的mIgD逐渐消失。IgE是正常人血清中含量最少 的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞 分泌。其重要特征为糖含量高达12%。IgE为亲细 胞抗体，可引起I型超敏反应。此外，IgE可能与机 体抗寄生虫免疫有关。
慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎，原发性胆汁性肝 硬化，隐匿性肝硬化患者血清中可见三种免疫球蛋 白均升高。慢性细菌感染如慢性支气管炎，肺结核， 血 IgG可升高，宫内感染时脐血或出生的新生儿血 清中IgM含量可增高。
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IgG、IgA、IgM降低
有先天性和获得性两类，先天性低免疫球蛋白血症，主要 见于体液免疫缺陷病和联合免疫缺陷病。另一种情况是3 种Ig中缺1种或2种，如IgA缺乏患者，易发生反复呼吸道 感染；IgG缺乏患者，易发生化脓性感染；IgM缺乏患者， 易发生革兰阴性菌败血症。获得性低Ig血症，血清中IgG 常小于5 g/ L，引起原因较多，如大量蛋白流失的疾病 （剥脱性皮炎、肠淋巴管扩张症和肾病综合征）、淋巴系 统肿瘤（淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤）、中毒性骨髓疾病、 长期使用免疫抑制剂等。
Κ型游离轻链或λ型游离轻链中某一个指标浓度异常 增高和比值异常，常提示有单克隆类疾病，如多发 性骨髓瘤，巨球蛋白血症，原发性淀粉样变性，轻 链沉积病等。
Κ型或λ型游离轻链同时增高，可能原因有感染，肾 功能受损或结缔组织类疾病。
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多发性骨髓瘤
多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种浆 细胞单克隆恶性增生性疾病, 其特征为由晚期B细胞 分化的肿瘤性浆细胞分泌单克隆免疫球蛋白或重链, 并伴有溶骨性病变和/或骨质疏松。