免疫学实验ppt课件
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医学免疫学实验课件-溶血实验
在实验过程中，需要观察并记录每个试管的变化情况，如 有无溶血、凝集等。
在实验结束后，需要对每个试管进行拍照并记录实验结果 ，如红细胞有无凝集、有无溶血等。这些结果将用于后续 的分析和讨论。
03
实验数据分析
溶血反应阳性率计算
计算每个样本的溶血反应阳性率，即阳性样本数除以总样本 数。
判断溶血反应阳性率的参考范围为：健康人群 < 5%，患者 < 10%。
当红细胞表面抗原与相应抗体结合后，可形成抗原-抗体复合 物，激活补体，导致红细胞溶解破裂，释放出血红蛋白；
通过检测血清中游离的抗体或红细胞抗原，可对相关疾病进 行诊断和鉴别诊断。
实验试剂与器材
试剂
抗A、抗B标准血清、A型、B型、O型试剂红细胞、生理盐水等；
器材
试管、移液管、离心管等。
02
实验步骤
THANKS
感谢观看
数据解读需遵循医学伦理和职业道德，保证患者隐私 和医疗安全。
05
相关应用
临床应用场景
溶血实验是医学免疫学中一个重要的实验，常用于检测红 细胞表面抗原和抗体，以及红细胞表面受体的检测。
溶血实验还用于检测血清中游离的抗体或抗原，以及红细 胞表面受体的激活状态，对于诊断多种疾病具有重要意义 。
其他领域应用
溶血实验在生物学、药理学、病理学等领域也有一定的应用 。
在生物学中，溶血实验可以用于研究生物膜的结构和功能， 探究生物膜与细胞之间的关系等。
未来发展趋势
溶血实验未来的发展趋势主要集中在提高实验的灵敏度和 特异性，以及寻找新的溶血方法等方面。
此外，溶血实验还可以应用于研究肿瘤细胞对红细胞的作 用，以及在药物筛选等领域的应用也有待于进一步拓展。
实验数据统计分析
在实验结束后，需要对每个试管进行拍照并记录实验结果 ，如红细胞有无凝集、有无溶血等。这些结果将用于后续 的分析和讨论。
03
实验数据分析
溶血反应阳性率计算
计算每个样本的溶血反应阳性率，即阳性样本数除以总样本 数。
判断溶血反应阳性率的参考范围为：健康人群 < 5%，患者 < 10%。
当红细胞表面抗原与相应抗体结合后，可形成抗原-抗体复合 物，激活补体，导致红细胞溶解破裂，释放出血红蛋白；
通过检测血清中游离的抗体或红细胞抗原，可对相关疾病进 行诊断和鉴别诊断。
实验试剂与器材
试剂
抗A、抗B标准血清、A型、B型、O型试剂红细胞、生理盐水等；
器材
试管、移液管、离心管等。
02
实验步骤
THANKS
感谢观看
数据解读需遵循医学伦理和职业道德，保证患者隐私 和医疗安全。
05
相关应用
临床应用场景
溶血实验是医学免疫学中一个重要的实验，常用于检测红 细胞表面抗原和抗体，以及红细胞表面受体的检测。
溶血实验还用于检测血清中游离的抗体或抗原，以及红细 胞表面受体的激活状态，对于诊断多种疾病具有重要意义 。
其他领域应用
溶血实验在生物学、药理学、病理学等领域也有一定的应用 。
在生物学中，溶血实验可以用于研究生物膜的结构和功能， 探究生物膜与细胞之间的关系等。
未来发展趋势
溶血实验未来的发展趋势主要集中在提高实验的灵敏度和 特异性，以及寻找新的溶血方法等方面。
此外，溶血实验还可以应用于研究肿瘤细胞对红细胞的作 用，以及在药物筛选等领域的应用也有待于进一步拓展。
实验数据统计分析
免疫学检验说课(课堂PPT)
▪ 《免疫学及检验技术》课程起到了承上启下的枢纽作 用。 前有《系统解剖学》、《病理生理学》、《生物 化学》等为基础，同时为后续课程《临床检验基础》、 《血液学检验》、《微生物学检验》等培养了这些专 业课程中所需要的免疫学检验操作能力 。
3
免疫学检验的新特点
五大特点
▪ 人才的专业化 ▪ 仪器的自动化 ▪ 试剂的商品化 ▪ 方法的标准化 ▪ 管理的科学化
9
课程内容框架
《免疫学及检验技术》知识模块可分为3个。 主要介绍免疫学基础知识及凝集反应、沉淀反 应和免疫标记技术，免疫学检验技术的原理、 技术要点及免疫性疾病的免疫学检验技术。 本课程共72学时，其中理论46学时，实践26 学时，在第二学期开设。
10
模块一
免疫学基础知识，16学时：主要学习免疫 学基本知识点，包括：抗原、抗体、补体、免 疫系统、主要组织相容性复合体、免疫应答等 疫学及检验技术》是研究免疫学技术及其在医学 领域中的一门应用学科。按照国家职业分类标准和高 职类专业人才培养的知识能力素质结构要求，本课程 在医学检验技术专业培养目标中属于核心课程，我校 将其设为该专业的必修课。
▪ 《免疫学及检验技术》已成为检验技师资格考试的必 考课程。在历年的考试内容中占有很大比重。学好本 课程对加强学生职业能力培养，提高职业素养起着较 好的支撑和促进作用。
▪ 网络教学：学生在学院网站上可以找到所需的免疫学检验 学习资料（包括推荐的CAI课件、多媒体课件、教学大纲、 教案、习题集、参考文献等）和链接的检验学知识相关网 站资料。
▪ 网上顾问：利用学院的计算机多媒体网络阅览室，指导学 生上网查阅免疫学检验学习资料，进行学习讨论。
▪ 在线测试：建立了《免疫学检验》在线测试系统，可供学 生课后进入复习强化。
3
免疫学检验的新特点
五大特点
▪ 人才的专业化 ▪ 仪器的自动化 ▪ 试剂的商品化 ▪ 方法的标准化 ▪ 管理的科学化
9
课程内容框架
《免疫学及检验技术》知识模块可分为3个。 主要介绍免疫学基础知识及凝集反应、沉淀反 应和免疫标记技术，免疫学检验技术的原理、 技术要点及免疫性疾病的免疫学检验技术。 本课程共72学时，其中理论46学时，实践26 学时，在第二学期开设。
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模块一
免疫学基础知识，16学时：主要学习免疫 学基本知识点，包括：抗原、抗体、补体、免 疫系统、主要组织相容性复合体、免疫应答等 疫学及检验技术》是研究免疫学技术及其在医学 领域中的一门应用学科。按照国家职业分类标准和高 职类专业人才培养的知识能力素质结构要求，本课程 在医学检验技术专业培养目标中属于核心课程，我校 将其设为该专业的必修课。
▪ 《免疫学及检验技术》已成为检验技师资格考试的必 考课程。在历年的考试内容中占有很大比重。学好本 课程对加强学生职业能力培养，提高职业素养起着较 好的支撑和促进作用。
▪ 网络教学：学生在学院网站上可以找到所需的免疫学检验 学习资料（包括推荐的CAI课件、多媒体课件、教学大纲、 教案、习题集、参考文献等）和链接的检验学知识相关网 站资料。
▪ 网上顾问：利用学院的计算机多媒体网络阅览室，指导学 生上网查阅免疫学检验学习资料，进行学习讨论。
▪ 在线测试：建立了《免疫学检验》在线测试系统，可供学 生课后进入复习强化。
医学免疫学实验课件溶血实验
离心
将血液样本离心，分离出血浆和红细胞。
悬液
将红细胞加入适量的生理盐水，制备成红细 胞悬液。
加样与反应
加入抗体
将制备好的红细胞悬液加入试管中，并加入相应的抗体。
37℃孵育
将试管放入37℃恒温箱中孵育30分钟，让红细胞与抗体充分 反应。
观察结果与记录
观察结果
观察试管中红细胞的变化 ，如溶血情况、凝集现象 等。
在临床诊断中，溶血实验可以用于检测和诊断自身免疫性疾病、输血反应、新生儿 溶血病等。
随着生物技术的发展，溶血实验的技术和方法也在不断改进和完善，未来有望实现 更加快速、准确、自动化的检测，为临床诊断提供更加可靠的依据。
06
相关知识点链接
红细胞膜抗原与抗体结合位点
红细胞膜抗原
是指红细胞膜表面具有的特定抗原决定 簇，可以与相应的抗体结合，进而触发 溶血反应。
人O型红细胞
具有表面表达的抗原，可与抗人球蛋白抗体结合，观察是否发生溶血。
补体与缓冲液
豚鼠补体
可与抗体结合，激活补体溶解细胞，促进溶血反应。
Tris-HCl缓冲液
用于调节反应体系的pH值，保持实验条件的稳定。
03
实验步骤与方法
红细胞悬液制备
采血
从志愿者身上采集适量血液，加入肝素抗凝 。
洗涤
用生理盐水洗涤红细胞，去除血浆和白细胞 。
结论
该实验结果表明不同种类的特异性抗体具有不同的作用效果，验证了抗 体特异性的原理。同时，该实验结果可用于进一步探讨不同抗体与抗原 的结合机制。
补体活性评估
实验目的
通过观察补体与特异性抗体结合后对红细胞溶解 的影响，评估补体的活性。
实验现象
在实验组中，加入补体后红细胞迅速溶解，产生 明显的溶血现象；而在对照组中，未加入补体的 红细胞溶解速度较慢。
实验诊断学--临床常用免疫学检查 ppt课件
ppt课件
16
IgM 约占血清总Ig的 5%~10%
分子量最大（900000），由五个IgM 单体连接而成，故又称巨球蛋白。
脾脏是它的主要合成部位，IgM主要分 布于血液中，防止发生菌血症方面起重 要作用，半衰期5天左右。
天然同族凝集素抗 A抗B、冷凝集素及 伤寒沙门菌的抗体
均属此类。
ppt课件
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百分比
参考值
正常人群各年龄 段个体中血清 IgG、IgA、IgM 的含量有很大差
异
70%-80% 7.0-16.6g/L
10%-15% 0.7-3. 5g/L
5%-10% 0.5-2.6g/L
0.02%-1% 0.6-2.0mg/L
0.002% 0.1-0.9mg/L
ppt课件
13
测定方法
❖ 血清中含量较高的 IgG、IgA、IgM多 采用单向免疫扩散法、火箭免疫电泳法和免 疫比浊法，而标本中含量极微的IgD和IgE则 采用敏感度较高的放射免疫法和酶免疫法等 进行定量测定。
ppt课件
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IgG 占总Ig的70%~80%
是血清中的主要抗体，主要由脾脏和 淋巴结合成，在机体的免疫防御中起重要作 用，抗细菌、病毒和寄生虫等，还具抗毒素 作用，为不完全抗体，分子量小 （150000），唯一能自由地通过胎盘。
半衰期约为23天， 故临床上使用丙球 作治疗时以2～3周
注射一次
ppt课件
ppt课件
22
高Ig血症
❖ 慢性细菌感染:肺结核,麻风,慢性支气管炎, 感染早期IgM显著升高，以后IgG升高，IgA 也可升高。
15
IgA 约占血清总Ig 10%~15%
分为血清型与分泌型两种，具有抗细 菌、抗病毒、抗毒素作用，其中的分泌 型（SIgA）在局部与抗呼吸道、消化道 和泌尿生殖道感染、炎症或肿瘤等病变 密切相关,是抗过敏的重要免疫屏障。
医学免疫学实验课件-实验五 设计性实验
微生物鉴定
1. 取标本 2. 增菌培养
杆菌鉴定程序： 第一天
镜检、分离培养（SS和EMB培养基）
第二天
纯培养 (KIA培养基)
第三天
镜检、生化反应、血清学实验、药敏实验
第四天
观察结果，鉴定菌种
显微镜检内容
形态 排列 染色性 特殊结构
放大倍数：10×100
分离培养——平板分区划线
分区划线
结果
发展为剧烈跳痛；5天前左下颌突然肿胀，疼痛更加剧烈， 并向同侧耳颞部放射。经当地卫生院连续4天抗菌治疗（静 脉滴注青霉素），未见好转，局部疼痛和肿胀更加明显， 并有吞咽痛及开口轻度受限。患者体温升高，食欲减退， 精神疲惫。 既往史：左下后牙反复疼痛史1年；每次发作时，均可经抗生 素治疗后好转。 体检：患者急性痛苦面容，体温38.6度，左颌面部肿胀，下颌 骨下缘轮廓消失，皮肤紧张，压痛，皮温增高，肤色发红， 有波动感。开口度3cm。龈及前庭沟黏膜充血水肿，龈袋 内有脓液。口底黏膜充血水肿，舌运动轻度受限。 实验室检查：白细胞15000/ mm3，中性粒细胞90％。
变黄且培养基断裂——产酸产气 2. 观察黑色沉淀——产生硫化氢
杆菌：
生化反应：肠杆菌科细菌生化鉴定 （材料：肠杆菌科细菌生化编码鉴定管）
血清学鉴定：沙门菌属血清学鉴定 （材料：沙门菌属诊断血清）
肠杆菌科细菌生化编码鉴定管
球菌鉴定程序： 第一天
镜检、分离培养（血琼脂平板）
第二天
纯培养 (血琼脂平板和普通琼脂平板)
第三天 第四天
镜检、血清学实验、生化反应、药敏实验 观察结果，鉴定菌种
球菌：
生化反应：触酶实验P75，血浆凝固酶实验 P43，甘露醇实验
血清学鉴定：ASO
免疫学实验二 ELISA(双抗夹心法)ppt课件
9
1.已知抗原包被酶标板
2.2拍干
2.1弃去板内包被抗原
2.3加满洗涤液（重复三次）
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10
3.加样
（1）阳性对照：第1、2孔加 HBsAb阳性对照血清50μl； （2）阴性对照：第3、4孔加 HBsAb阴性对照血清50μl； （3）空白对照：第5孔加生理盐 水100μl； （4）余下各孔加待检血清50μl 。
该技术的特点是敏感性高，特异性强，操作简易，结果容易观察。
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2
实验原理：
• 免疫酶技术是利用酶标记抗体或抗原，以检测 相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。其原 理是酶与抗体或抗原结合后既不改变抗体或抗 原的特异性及免疫反应性，也不影响酶的催化 效能。当存在相应酶底物时，酶能催化产生有 颜色的产物，颜色的有无及深浅能反映相应的 抗原或抗体是否存在及其量的多少。
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4. 加酶标记的抗HBsAb抗体：除空白对照外各孔50μl，充分 混匀。将即时帖覆盖于反应板上，37℃孵育30min。
5. 弃去反应孔内液体，拍干，用洗涤液注满各孔、静置30秒、 再拍干，重复洗涤5 次。(操作同2)
6. 显色：各孔（包括空白对照）加底物A液50μl（1滴），底 物B液50μl（1滴），置37℃避光温育15min。
实验二、酶联免疫吸附试验
Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA
实验内容： 间接法
－－－测乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）
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1
实验原理：
酶联免疫吸附试验（ELISA）是将抗原、抗体的特异性反应与酶对底 物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技术，可用于检测体 液中微量的特异性抗体或抗原。首先，抗原、抗体的特异性反应在一种 固相载体表面－聚苯乙烯微量反应板孔中进行，通过洗涤去除多余的游 离反应物；然后加入酶标记的抗体或酶标记的抗抗体，从而形成抗体－ 抗原－酶标抗体复合物（双抗体夹心法）或抗原－抗体－抗抗体复合物 （间接法）；此时加入酶底物和显色剂，在酶催化底物后，液体呈现显 色反应。液体显色的强弱与复合物中待测抗原或抗体的量呈正比，借此 可检测待测抗原或抗体的有无及含量。
免疫学实验课件：实验二直接凝集试验
实验二 凝集试验
一、目的要求
理解凝集反应的基本原理； 掌握玻片凝集反应的操作技术与结果
判定； 掌握试管凝集反应的操作技术与结果
判定。
二、凝集反应的原理
通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷, 在悬 液中相互排斥而呈均匀的分散状态。 凝集试验的发生分两阶段,当特异抗体与相应抗原颗粒相遇时， 发生特异性的结合形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的 静电排斥力。第二步在电解质的参与下进一步中和复合物外层 的电荷，从而聚集成较大的凝集块。
凝集反应的类型
两大类
玻片法：定性 直接凝集试验
试管法：定量
间接凝集试验
乳胶凝集试验 碳素凝集试验 间接血凝试验
三、实验材料
1. 玻板凝集试验
（1）玻片、移液枪、牙签等； （2）布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清和阴性血清 （3）待被检血清
2. 试管凝集试验
（1）试管（1 ㎝×8 ㎝ ）、试管架、恒温箱、各规格移液枪等； （2）布氏杆菌试管凝集抗原及布氏杆菌阳性血清、阴性血清； （3）待被检血清； （4）灭菌0.5%石碳酸生理盐水。
四、操作方法
1. 玻板凝集试验
（1）在洁净玻片上，各加15-20ul布氏杆菌阳性血清、阴性 血清、待检血清与生理盐水。
（2）加入布氏杆菌平板抗原15-20ul，滴在血清附近，不 与血清接触。用牙签将血清与抗原混匀，轻轻摇动玻板使 液滴呈旋状运动。
阴性血清（ຫໍສະໝຸດ ）结果判定：待检 阳性 血清 血清
• 出现颗粒状或块状凝集者为阳性反应；
• 未出现凝集者为阴性反应。
生理盐水
2. 试管凝集试验
（1）取试管八支，按下表加入生理盐水； （2）取布氏杆菌血清进行梯度稀释； （3）加入布氏杆菌检测抗原； （4）充分20.35混匀，置37℃ 温箱24小时。
一、目的要求
理解凝集反应的基本原理； 掌握玻片凝集反应的操作技术与结果
判定； 掌握试管凝集反应的操作技术与结果
判定。
二、凝集反应的原理
通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷, 在悬 液中相互排斥而呈均匀的分散状态。 凝集试验的发生分两阶段,当特异抗体与相应抗原颗粒相遇时， 发生特异性的结合形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的 静电排斥力。第二步在电解质的参与下进一步中和复合物外层 的电荷，从而聚集成较大的凝集块。
凝集反应的类型
两大类
玻片法：定性 直接凝集试验
试管法：定量
间接凝集试验
乳胶凝集试验 碳素凝集试验 间接血凝试验
三、实验材料
1. 玻板凝集试验
（1）玻片、移液枪、牙签等； （2）布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清和阴性血清 （3）待被检血清
2. 试管凝集试验
（1）试管（1 ㎝×8 ㎝ ）、试管架、恒温箱、各规格移液枪等； （2）布氏杆菌试管凝集抗原及布氏杆菌阳性血清、阴性血清； （3）待被检血清； （4）灭菌0.5%石碳酸生理盐水。
四、操作方法
1. 玻板凝集试验
（1）在洁净玻片上，各加15-20ul布氏杆菌阳性血清、阴性 血清、待检血清与生理盐水。
（2）加入布氏杆菌平板抗原15-20ul，滴在血清附近，不 与血清接触。用牙签将血清与抗原混匀，轻轻摇动玻板使 液滴呈旋状运动。
阴性血清（ຫໍສະໝຸດ ）结果判定：待检 阳性 血清 血清
• 出现颗粒状或块状凝集者为阳性反应；
• 未出现凝集者为阴性反应。
生理盐水
2. 试管凝集试验
（1）取试管八支，按下表加入生理盐水； （2）取布氏杆菌血清进行梯度稀释； （3）加入布氏杆菌检测抗原； （4）充分20.35混匀，置37℃ 温箱24小时。
医学免疫学实验之凝集反应和沉淀反应课件16页PPT
类风湿因子的检测
Normal serum
Patient’s serum
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Macroscopic agglutination of latex(乳胶颗粒) coated with human IgG serum from a patient with rheumatoid arthritis.
梅毒快速血清反应素RPR试验
1、4孔加AFP阳性对照 2、3、5、6孔加待检血清
3. 置于湿盒，37C 24h
•结果下周观察
学号
1
6
2
5
3
4
抗AFP抗体
对流免疫电泳检测血清中AFP
• 1、3孔加抗AFP抗体
+
• 2孔，AFP阳性对照血清
1
• 4孔，待检血清
3
pH 8.6巴比妥缓冲液
2
-
4
第2次 凝集反应与沉淀反应
1. 试管凝集（操作） 2. 双向扩散（操作）、对流免疫电泳（示教） 3. 抽血（每组一人，下次实验用）
• 肥达反应结果（观察结果注意：勿摇；先看对照管）
- 不凝集 + 小部分凝集，管底小量凝集，上层液体较混浊 ++ 部分凝集，管底部分凝集，上层液体微混浊 +++ 大部分凝集，凝块非全部下沉于管底而是稍有铺开，上层液体澄清 ++++ 完全凝集，管底有边缘不整齐的膜状凝集块，上层液体澄清透明。
沉淀反应 Precipitation Tests
RPR是心脂质（而不是密螺旋体的）梅 毒抗体试验，在疾病初期呈阳性。 将病人血清与炭联心脂质抗原试剂 混合，阳性血清显示凝集抗原颗粒。 (4分钟后观察颗粒凝集）
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根据载体的不同可将间接凝集反应分为： 间接血细胞凝集试验、间接乳胶凝集试验（及 间接乳胶凝集抑制试验）和金黄色葡萄球菌协 同凝集试验等。
免疫学实验
15
间接凝集抑制试验——妊娠试验
【实验原理】
可溶性抗原致敏的乳胶颗粒与相应抗体作用可 使乳胶颗粒凝集，此为间接乳胶凝集试验。若使抗 体先与可溶性抗原作用，再加入该抗原致敏的乳胶 颗粒，则乳胶凝集被抑制，此为间接乳胶凝集抑制 试验。
6
【实验思考】
1、在吞噬细胞中发现细菌时， 如何区别吞噬的细菌和粘附在吞噬 细胞表面的细菌？
2、简述机体非特异性免疫的概 念及特点。
免疫学实验
7
凝集反应
【实验目的】 1．了解凝集反应的原理、基本类型及其
临床意义。 2．掌握玻片凝集实验、间接凝集实验的
实验方法和结果分析。
免疫学实验
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【概述】
在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗 原与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集 块，称为凝集反应。凝集反应是一种定性的 检测方法，也可以进行半定量检测。凝集反 应可分为直接凝集反应和间接凝集反应。由 于凝集反应方法简便，目前在临床检验中仍 被广泛应用。
免疫学实验
3
【实验材料】
1.表皮（白色）葡萄球菌菌液（浓度 6~10亿/ml)。
2.肝素溶液（25U/ml）；甲醇，碱性 美蓝（或瑞氏）染液。
3.血红蛋白吸管，凹玻片，载玻片， 采血针，微量加样器，湿盒，显微镜，恒 温培养箱，75%酒精，棉签，香柏油，二甲 苯等。
免疫学实验
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【实验方法】
1、用微量加样器，吸取肝素20ul加入洁净凹玻片 凹孔内。
A型
A
抗B
B型
B
抗A
AB型
A、B
—、—O型—、—来自抗A、抗B免疫学实验
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【实验材料】
1．ABO血型鉴定试剂盒 内含抗A 分型试剂和抗B分型试剂各1支。
2．一次性采血针1枚、洁净玻片2 块、75％酒精、灭菌棉签。
3．84消毒液
免疫学实验
12
【实验方法】
1．取洁净载玻片1块，并标记（如图）
2．将抗A、B分型试剂分别加 A
（抗HCG）、乳胶抗原（HCG致敏） 各一支 2．待检尿、孕妇尿、正常尿。 3．有格玻片和毛细吸管等。
免疫学实验
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【实验方法】
1．在玻片的第1、第2和第3格内分别 加1滴正常尿、待检尿及孕妇尿。
2．每格内加入妊娠诊断试剂抗血清1 滴。轻轻摇动1~2 min使其充分混匀。
3．每格加入乳胶抗原1滴，轻轻摇动 玻片3~5 min后观察结果，记录各标本有无 凝集现象。
免疫学实验
13
【实验结果】 记录受检者红细胞凝集情况，根
据ABO血型鉴定表(下表)，判断受检 者的血型。
ABO血型鉴定表
抗A分型试剂侧 抗B分型试剂侧
血型
+
—
A
—
+
B
+
+
AB
—
—
O
“＋”表示红细胞凝集，“－”表示红细胞未凝集
免疫学实验
14
二、间接凝集反应
将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小 的颗粒性载体表面（这种载体与免疫无关）， 然后与相应抗体或抗原结合，在适量的电解质 存在下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集 反应。
免疫学实验课件
免疫学实验室
免疫学实验
1
中性粒细胞的吞噬作用
【实验目的】 1.熟悉中性粒细胞吞噬实验
的原理和方法。 2.通过本实验理解机体的非
特异性免疫机制。
免疫学实验
2
【实验原理】
中性粒细胞具有吞噬杀菌功 能，当与颗粒性物质（如葡萄球 菌等）混合孵育一定时间后，颗 粒性物质被吞噬杀灭，根据吞噬 率、吞噬指数可反映该细胞的吞 噬功能。
免疫学实验
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【实验结果】
孕妇尿格呈均匀浑浊乳状液，无凝集， 妊娠试验阳性；正常尿格出现白色细小凝集 物，随时间延长凝集物变成小块状，妊娠试 验阴性。待检尿若为乳状液，妊娠试验阳性； 若出现凝集，则妊娠试验阴性。
免疫学实验
9
一、直接凝集反应
细菌、细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与 下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集 反应 。常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。
玻片凝集试验——ABO血型鉴定
玻片凝集试验为定性试验，一般用已知抗体作 为诊断血清，与受检颗粒抗原，如菌液或红细胞抗 原各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼 观察凝集结果，出现凝集颗粒的为阳性。此法简便， 快速，适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断 或分型，也可用于红细胞ABO血型的鉴定。
孕妇尿中绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增 高。HCG与抗HCG抗体先作用后，再加入HCG致敏的乳 胶颗粒，不出现凝集反应，此为妊娠试验阳性；非 孕妇尿中HCG含量不足以消耗掉抗HCG抗体，抗体与 后加入的HCG致敏乳胶结合呈现凝集现象，则妊娠试 验阴性。
免疫学实验
16
【实验材料】 1．妊娠诊断试剂盒：内含抗血清
6、滴加甲醇固定3min，水洗。 7、加碱性美蓝染色1~2min，水洗，印干。 8、置油镜下观察吞噬和未吞噬的白细胞并计数。
免疫学实验
5
【实验结果】
吞噬百分 吞 观 率噬 察细 记菌 录的 的中 吞性 噬 数 数粒 细 10细 胞% 0胞 总
吞噬指数
被吞噬的细菌总数 观察记录的吞噬细胞 数总
免疫学实验
1滴于标记有A、B的玻片两侧。
抗 A
B
抗
B
3．用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以
采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。
用另一载玻片一端取适量血液加入抗抗A分型
试剂，并混匀；用另一端再取适量血液加入
抗抗B分型试剂，并混匀。用干棉签止血。
4．观察红细胞有无凝集发生。如有凝集， 可见红细胞凝集成块；无凝集，红细胞呈均 匀分散。判定结果后把玻片放入消毒液中。
2、用酒精棉签消毒手指后，刺破皮肤，以血红蛋 白吸管取血40ul，立即放入盛有肝素的凹玻片凹孔内， 并充分混匀。
3、用微量加样器取葡萄球菌菌液20ul加入上述凹 玻片凹孔内，充分混匀。
4、将凹玻片置于湿盒内，30℃温箱中30min，其间 每隔10min摇匀一次。
5、取一小滴上述混合液，置于载玻片上，用另一 载玻片推成薄血片，待干。
免疫学实验
10
【实验原理】
人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根 据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分 为四种。据此，将抗A和抗B抗体分别与待测 红细胞混合，抗A或（和）抗B抗体与红细胞 表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集， 据其凝集情况便可判定出受试者的血型。
ABO血型的划分
红细胞表面Ag
血清中Ab
免疫学实验
15
间接凝集抑制试验——妊娠试验
【实验原理】
可溶性抗原致敏的乳胶颗粒与相应抗体作用可 使乳胶颗粒凝集，此为间接乳胶凝集试验。若使抗 体先与可溶性抗原作用，再加入该抗原致敏的乳胶 颗粒，则乳胶凝集被抑制，此为间接乳胶凝集抑制 试验。
6
【实验思考】
1、在吞噬细胞中发现细菌时， 如何区别吞噬的细菌和粘附在吞噬 细胞表面的细菌？
2、简述机体非特异性免疫的概 念及特点。
免疫学实验
7
凝集反应
【实验目的】 1．了解凝集反应的原理、基本类型及其
临床意义。 2．掌握玻片凝集实验、间接凝集实验的
实验方法和结果分析。
免疫学实验
8
【概述】
在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗 原与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集 块，称为凝集反应。凝集反应是一种定性的 检测方法，也可以进行半定量检测。凝集反 应可分为直接凝集反应和间接凝集反应。由 于凝集反应方法简便，目前在临床检验中仍 被广泛应用。
免疫学实验
3
【实验材料】
1.表皮（白色）葡萄球菌菌液（浓度 6~10亿/ml)。
2.肝素溶液（25U/ml）；甲醇，碱性 美蓝（或瑞氏）染液。
3.血红蛋白吸管，凹玻片，载玻片， 采血针，微量加样器，湿盒，显微镜，恒 温培养箱，75%酒精，棉签，香柏油，二甲 苯等。
免疫学实验
4
【实验方法】
1、用微量加样器，吸取肝素20ul加入洁净凹玻片 凹孔内。
A型
A
抗B
B型
B
抗A
AB型
A、B
—、—O型—、—来自抗A、抗B免疫学实验
11
【实验材料】
1．ABO血型鉴定试剂盒 内含抗A 分型试剂和抗B分型试剂各1支。
2．一次性采血针1枚、洁净玻片2 块、75％酒精、灭菌棉签。
3．84消毒液
免疫学实验
12
【实验方法】
1．取洁净载玻片1块，并标记（如图）
2．将抗A、B分型试剂分别加 A
（抗HCG）、乳胶抗原（HCG致敏） 各一支 2．待检尿、孕妇尿、正常尿。 3．有格玻片和毛细吸管等。
免疫学实验
17
【实验方法】
1．在玻片的第1、第2和第3格内分别 加1滴正常尿、待检尿及孕妇尿。
2．每格内加入妊娠诊断试剂抗血清1 滴。轻轻摇动1~2 min使其充分混匀。
3．每格加入乳胶抗原1滴，轻轻摇动 玻片3~5 min后观察结果，记录各标本有无 凝集现象。
免疫学实验
13
【实验结果】 记录受检者红细胞凝集情况，根
据ABO血型鉴定表(下表)，判断受检 者的血型。
ABO血型鉴定表
抗A分型试剂侧 抗B分型试剂侧
血型
+
—
A
—
+
B
+
+
AB
—
—
O
“＋”表示红细胞凝集，“－”表示红细胞未凝集
免疫学实验
14
二、间接凝集反应
将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小 的颗粒性载体表面（这种载体与免疫无关）， 然后与相应抗体或抗原结合，在适量的电解质 存在下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集 反应。
免疫学实验课件
免疫学实验室
免疫学实验
1
中性粒细胞的吞噬作用
【实验目的】 1.熟悉中性粒细胞吞噬实验
的原理和方法。 2.通过本实验理解机体的非
特异性免疫机制。
免疫学实验
2
【实验原理】
中性粒细胞具有吞噬杀菌功 能，当与颗粒性物质（如葡萄球 菌等）混合孵育一定时间后，颗 粒性物质被吞噬杀灭，根据吞噬 率、吞噬指数可反映该细胞的吞 噬功能。
免疫学实验
18
【实验结果】
孕妇尿格呈均匀浑浊乳状液，无凝集， 妊娠试验阳性；正常尿格出现白色细小凝集 物，随时间延长凝集物变成小块状，妊娠试 验阴性。待检尿若为乳状液，妊娠试验阳性； 若出现凝集，则妊娠试验阴性。
免疫学实验
9
一、直接凝集反应
细菌、细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与 下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集 反应 。常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。
玻片凝集试验——ABO血型鉴定
玻片凝集试验为定性试验，一般用已知抗体作 为诊断血清，与受检颗粒抗原，如菌液或红细胞抗 原各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼 观察凝集结果，出现凝集颗粒的为阳性。此法简便， 快速，适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断 或分型，也可用于红细胞ABO血型的鉴定。
孕妇尿中绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增 高。HCG与抗HCG抗体先作用后，再加入HCG致敏的乳 胶颗粒，不出现凝集反应，此为妊娠试验阳性；非 孕妇尿中HCG含量不足以消耗掉抗HCG抗体，抗体与 后加入的HCG致敏乳胶结合呈现凝集现象，则妊娠试 验阴性。
免疫学实验
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【实验材料】 1．妊娠诊断试剂盒：内含抗血清
6、滴加甲醇固定3min，水洗。 7、加碱性美蓝染色1~2min，水洗，印干。 8、置油镜下观察吞噬和未吞噬的白细胞并计数。
免疫学实验
5
【实验结果】
吞噬百分 吞 观 率噬 察细 记菌 录的 的中 吞性 噬 数 数粒 细 10细 胞% 0胞 总
吞噬指数
被吞噬的细菌总数 观察记录的吞噬细胞 数总
免疫学实验
1滴于标记有A、B的玻片两侧。
抗 A
B
抗
B
3．用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以
采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。
用另一载玻片一端取适量血液加入抗抗A分型
试剂，并混匀；用另一端再取适量血液加入
抗抗B分型试剂，并混匀。用干棉签止血。
4．观察红细胞有无凝集发生。如有凝集， 可见红细胞凝集成块；无凝集，红细胞呈均 匀分散。判定结果后把玻片放入消毒液中。
2、用酒精棉签消毒手指后，刺破皮肤，以血红蛋 白吸管取血40ul，立即放入盛有肝素的凹玻片凹孔内， 并充分混匀。
3、用微量加样器取葡萄球菌菌液20ul加入上述凹 玻片凹孔内，充分混匀。
4、将凹玻片置于湿盒内，30℃温箱中30min，其间 每隔10min摇匀一次。
5、取一小滴上述混合液，置于载玻片上，用另一 载玻片推成薄血片，待干。
免疫学实验
10
【实验原理】
人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根 据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分 为四种。据此，将抗A和抗B抗体分别与待测 红细胞混合，抗A或（和）抗B抗体与红细胞 表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集， 据其凝集情况便可判定出受试者的血型。
ABO血型的划分
红细胞表面Ag
血清中Ab