总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性评估

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总蛋白检测标准操作规程

9.5质控结果判断
利用Westgard多规则质控方法（12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
65-85g/L
11.检验结果的解释
仪器加样针、比色杯、管路等未清洗干净时可能对试验结果产生影响。
反应曲线异常时需进行确认，干扰物质超出限度时需进行确认。
高度溶血可导致结果偏高。
14.参考文献
14.1《全国临床检验操作规程》
14.2《试剂使用说明书》
14.3《校准品使用说明书》
14.4《临床生物化学检验质量管理与操作规程》
当发生以下情况时建议重新校准：变更试剂批号;质控值发生显著偏移;生化分析仪进行了较大维护。
9.质量控制程序
9.1质控品来源
BACKMAN质控品，上海市临检中心提供
9.2质控品浓度
低/中/高三个浓度
9.3储存条件
复溶后于-20℃冷冻保存可稳定1个月。
9.4使用方法
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温，轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
试剂
硫酸铜
3.0g/L
酒石酸钾钠
9.0g/L
氢氧化钠
0.6mol/L
碘化钾
5.0g/L
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
546nm
辅助波长
700nm
反应方法
终点法
反应方向
向上
反应温度
37℃
试剂
250ul
5.3注意事项
推荐选用血清，因为血浆含纤维蛋白，故肝素抗凝血浆的TP值一般比血清高。标本应避免溶血、脂血、黄疸。

蛋白质测定方法之双缩脲法(Biuret法)

双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。

在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。

凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。

紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。

测定范围为1~10mg蛋白质。

干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris 缓冲液和某些氨基酸等。

此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。

主要的缺点是灵敏度差。

因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。

（二）试剂与器材1.试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml 的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。

如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。

牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。

（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4•5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。

此试剂可长期保存。

若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。

2.器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。

（三）操作方法1.标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。

充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。

用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。

双缩脲法测定血清总蛋白的方法学评价

双缩脲法测定血清总蛋白的方法学评价吴文钦（广东医学院医学检验学院广东-东莞 523808）摘要：目的对双缩尿法测定血清总蛋白进行方法性能评价，达到提高分析方法质量的目的。

方法配制双缩脲试剂，并用所配制的双缩脲试剂与标准血清总蛋白进行批内重复性试验、回收试验以及线性范围评价试验，从而评价双缩尿法测定血清总蛋白的精密度、准确度和线性范围。

结果用分光光度计测定波540nm 处的吸光度A，进行相关数据分析，双缩脲法测定血清总蛋白的批内重复性试验的变异系数 CV%为2.36%，回收试验平均回收率为105%，线性范围评价试验R2为0.9980。

结论在严格规范操作下，双缩脲法测定血清总蛋白的精密度高，准确度以及线性范围较好，满足临床对血清总蛋白定量测定要求，是临床测定血清总蛋白的常规方法。

关键词：双缩脲法；血清总蛋白；方法学评价Biuret method was developed for the determination of protein evaluation methodologyAbstract Objective The purpose of the double reduction of urine protein determination of serum total performance evaluation methods, to improve the quality of analytical methods.Methods Biuret test preparation, and formulated with the biuret test standard serum total protein in the assay reproducibility test, recovery test and linear range of evaluation test to evaluate the double reduction of urine assay precision of serum total protein, accuracy and linear range.Results A spectrophotometer absorbance at 540nm wave, the associated data analysis, determination of intra-assay coefficient of variation of total serum protein test reproducibility CV% was 2.36%, the average recovery recovery test 105% biuret method, linear evaluation test range R2 is 0.9980.Conclusion In the strictly regulate the operation, biuret serum total protein, high precision, accuracy and linearity better meet the clinical requirements for quantitative determination of total serum protein, serum total protein conventional methods of clinical measurement.Key words Biuret method; Total serum protein; Evaluation Methodology为满足临床医疗对实验室检验的不断要求，实验室需要不断引进新方法或者改进原有的方法。

蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验报告[整理]

生物化学实验报告姓名：学号：专业年级：组别：生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验日期实验地点合作者指导老师评分教师签名批改日期1、实验目的1.1.掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作；1.2.掌握双缩脲试剂的配制；1.3.熟悉血清总蛋白的临床意义；1.4.了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。

二、实验原理2.1.两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子内含有两个邻接的肽键，在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应，生成紫红色络合物。

2.2.蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键（-CO-NH-），同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应，生成的紫红色络合物，且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10～120g/L范围内有良好的线性关系。

三、材料与方法：3.1.实验材料：3.1.1.实验试剂：①小牛血清；②6.0mol/LNaOH溶液；③双缩脲试剂:硫酸酮、酒石酸钾钠、碘化钾；④蛋白质标准液（70g/L）；⑤0.9%NaCl；⑥蒸馏水。

3.1.2.实验器材：①试管；②烧杯；③容量瓶；④加样枪；⑤刻度吸管；⑥玻璃棒；⑥1100分光光度计；⑦电子天平；⑧水浴锅。

3.2.实验步骤四、结果与讨论：4.1.实验现象：①选取三支洁净无损的试管，从左往右依次加入0.9%氯化钠溶液、蛋白质标准液、相应的小牛血清各0.5ml，分别命名为B试管、S试管和U试管，再分别向三支试管内加入4ml 的双缩脲试剂，溶液均成蓝色透明状。

②将三支试管放入37℃水浴锅中加热20min ，取出后，B 试管呈淡蓝色，S 试管和U 试管均成浅紫色，且S 试管的颜色比U 试管的颜色深。

（如图一）图一水浴后三支试管颜色图二分光计读数U 0.1520.151 0.152 0.1517结果计算：代入公式：血清总蛋白（g/L)=(Au/As)X 蛋白质标准液浓度（g/L)，得出结果：血清总蛋白=57.493g/L 。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告实验报告：双缩脲法测定血清总蛋白摘要：本实验采用双缩脲法测定血清总蛋白浓度。

通过对比实验组和对照组样本的比色反应，得出了血清总蛋白的浓度。

实验结果表明，该方法简便、可靠、准确，适用于血清总蛋白的浓度测定。

实验目的：1.掌握双缩脲法测定血清总蛋白浓度的基本原理和方法。

2.了解比色法在实验中的应用及操作技巧。

3.验证双缩脲法测定血清总蛋白浓度的可靠性和准确性。

实验方法：1.取不同浓度的血清标准品6个，分别标注不同浓度和编号。

2.取待测样品6个，标注不同编号。

3.将标准品和待测样品加入10ml离心管中，每个管中各加入1ml蒸馏水。

4.在离心管中分别加入1ml蛋白试剂A和B，摇匀，并放置15分钟。

5.加入1ml无水乙醇摇匀。

6.在1ml离心管中加入1ml0.1mol/L NaOH溶液，使溶液转为蓝色。

7.在250nm处比色计测定吸光度（对照组样本的吸光度为0）。

8.计算出样品的血清总蛋白浓度。

实验结果：对照组样本吸光度为0，实验组6个样本的吸光度如下表：编号吸光度S1 0.163S2 0.344S3 0.516S4 0.688S5 0.860S6 1.032标准品的吸光度如下表：编号吸光度浓度G1 0.163 0.7g/LG2 0.344 1.4g/LG3 0.516 2.0g/LG4 0.688 2.8g/LG5 0.860 3.4g/LG6 1.032 4.1g/L通过双缩脲法测定，我们计算出每个实验组样本的血清总蛋白浓度。

编号浓度（g/L）S1 0.7S2 1.4S3 2.0S4 2.8S5 3.4S6 4.1实验结论：1.通过双缩脲法测定血清总蛋白，准确地测定了实验组样本的血清总蛋白浓度。

2.双缩脲法测定血清总蛋白浓度的方法简便、可靠、准确，适用于血清总蛋白浓度测定。

总蛋白测定(双缩脲法)SOP

q 总蛋白测定（双缩脲法）SOP1.原理：所有蛋白质分子都含有肽键。

在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色的化合物。

蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系，依次可以计算蛋白质的含量。

2.方法：双缩脲法3.试剂：总蛋白试剂其含量为氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mol/L碘化钾20mol/L硫酸铜12mol/L4.储存条件及有效期：（1）原包装试剂在2℃-8℃避光贮存，有效期36个月。

（2）试剂开盖后在2℃-8℃避光保存，稳定期30天。

5. 样本要求：（1）样本种类：新鲜无溶血血清。

（2）样本采集：取空腹静脉血 3.0ml，置于带分离胶试管中，标本采集后，3000r/min离心5min，分离血清，立即密封送检。

（3）样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。

（4）样本保存：密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。

6. 检验步骤：（1）开生化仪见生化仪的SOP。

（2）操作步骤：参数设置；试剂装载；校准；质控；样本装载；测定；结果审查；报告。

a.参数设置b.试剂装载每天在生化仪上进行试剂检查，检测的样本数，如发现量不多或不能满足当天需要，则需要加试剂，注意同一批号，不同批号的不能混用。

c.校准换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。

d.质控在做样本之前每天做质控，质控符合要求才可以做样本，不符合要求需要做校准，做完校准后，用校准品当样本来测，做质控。

e.样本装载样本符合要求，放在试管架上，编号，上机检测。

f.测定g.结果审查h.报告7. 参考值55-85g/L8 .临床意义：+(1) 血清总蛋白浓度增高a.血清中水分减少，而使总蛋白浓度相对增高。

凡体内水分的排出大于水分的摄入时，均可引起血浆浓缩，尤其是急性失水时（如呕吐，腹泻，高热等）变化更为显著，血清总蛋白浓度有时可达100-150 g/L。

单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的对比分析

单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的对比分析发布时间：2022-01-25T07:22:16.075Z 来源：《中国科技人才》2021年第29期作者：蒋炳姣[导读] 国际临床化学协会(IFCC)建议，在严格控制条件下，推荐使用双缩脲法测定血浆总蛋白，这也使得该检测方法在临床中广泛应用。

广西冠峰生物制品有限公司广西南宁 530299摘要:目的：探究在对血浆总蛋白进行测定时，应用单试剂与双试剂双缩脲法测定的结果对比。

方法：随机选择我公司血浆标本100例，分为70例脂浊标本以及30例正常血浆标本，分别采用单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白，并将结果进行对比分析。

结果：单试剂双缩脲法测定中，对正常血浆组标本与4.00 <TG<10.00 mmoL/ L组、TG >10 .03 mmoL/ L组标本测定结果比较，存在明显差异（P＜0.05），双试剂双缩脲法测定中，对正常血浆组标本与4.00 <TG<10.00 mmoL/ L组、TG >10 .03 mmoL/ L组的标本测定结果比较，存在明显差异（P＜0.05）。

但是单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的结果比较，三组均不存在明显差异（P＞0.05）。

结论：总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒的检测结果无明显偏差，为体现检测结果表达更完整，建议实验室使用双试剂盒检测血浆样本。

关键词:单试剂；双试剂；双缩脲法；血浆总蛋白国际临床化学协会(IFCC)建议，在严格控制条件下，推荐使用双缩脲法测定血浆总蛋白，这也使得该检测方法在临床中广泛应用。

既往研究表明，对于脂浊标本，通过双试剂双缩脲法测量其血浆总蛋白的干扰是已知的，并且脂质混浊度越显著，干扰越大[1]。

另外如果应用单试剂双缩脲法测定时，由于标本中存在黄疸、油腻浑浊、溶血的影响，不适合自动分析，同时也存在样品空白干扰的情况。

而有条件的实验室，通过双试剂双缩脲法评估血浆蛋白质的含量，可以有效地提高对报告结果的准确性[2]。

总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)

总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)简介：总蛋白(T otal Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成。

对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。

目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。

Leagene 总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。

可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm 。

双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响。

本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、取1ml 蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准(BSA)中，充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。

亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。

特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。

2、样本处理：血清、血浆样本直接取50μl 检测。

对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水=1：9比例，加入9倍体积的生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，2500g 离心10min ，取50μl 上清待检。

3、 TP 测定操作，按下表依次加入试剂：编号名称TC0547100T TC0547200T Storage试剂(A): 双缩脲试剂 250ml 500ml 4℃ 试剂(B): 蛋白标准(BSA) 20mg 20mg RT 试剂(C): 蛋白标准配制液 1.5ml 1.5ml RT 试剂(D): 双缩脲空白试剂 50ml 100ml 4℃ 试剂(E): ddH 2O 1ml2mlRT使用说明书1份空白管标准管待测管ddH 2O(ml)0.05 蛋白标准溶液(如1mg/ml)(ml) 0.05 待检样品(血清、血浆、组织)(ml)0.05双缩脲试剂(ml) 2.5 2.5 2.54、混匀, 37℃孵育。

蛋白质的定量测定一-双缩脲法

06
CATALOGUE
双缩脲法的改进和发展方向
改进方法
优化试剂配比
通过调整试剂浓度和比例，提高方法的灵敏度和准确性，减少误差。
扩大应用范围
针对不同来源和性质的蛋白质样品，优化实验条件，使其能够适用于更多样品的测定。
ABCD
简化操作步骤
减少实验步骤，降低操作难度，提高实验效率。
提高检测速度
采用快速显色反应或缩短反应时间的方法，缩短实验周期，提高检测速度。
蛋白质结构研究
通过双缩脲法测定不同蛋白质的含量，有助于研究蛋白质的结构和功能，进一步了解生物体的生命活动。
蛋白质合成与代谢研究
双缩脲法可以用于研究生物体内蛋白质的合成与代谢过程，探索相关生理机制。
在医学研究中的应用
临床诊断
双缩脲法可以用于检测尿液、血液等生物样本中的蛋白质含量，辅助医生进行临床诊断。
药物研发
在药物研发过程中，双缩脲法可用于检测药物对蛋白质的影响，评估药物的疗效和安全性。
病理学研究
通过双缩脲法测定病变组织中蛋白质的含量，有助于病理学研究，深入了解疾病的发生和发展机制。
在食品工业中的应用
食品品质控制
01
双缩脲法可以用于检测食品中的蛋白质含量，确保食品品质符
合标准。
营养标签
03
CATALOGUE
双缩脲法的结果分析
实验结果记录
实验过程中，需要详细记录每个实验步骤的操作和结果，包括加入试剂的种类、浓度、体积，以及反应过程中的现象和变化等。
实验结果记录应准确、详细，包括实验数据和观察到的现象，以便后续分析和处理。
结果计算与处理
根据实验记录的数据，进行相应的计算和处理，以得出蛋白质的含量。

血清总蛋白测定(双缩脲

血清总蛋白测定（双缩脲）1. 简介血清总蛋白是指血液中所有蛋白质的总和，包括白蛋白和球蛋白等。

血清总蛋白测定是一项常见的检验方法，用于评估患者的蛋白质代谢情况，以及某些疾病的诊断和监测。

双缩脲法是一种常用的血清总蛋白测定方法，本文将介绍该方法的原理、操作流程和结果解读。

2. 原理双缩脲法利用缩脲与蛋白质中的酚类物质反应生成有颜色的复合物，通过测量复合物的吸光度来定量测定血清中的总蛋白含量。

该方法具有简单、灵敏、快速等特点，被广泛应用于临床实验室及科研领域。

3. 操作流程3.1 样本处理从被检测者的静脉血中采集适量的血清样本，并放置在离心管中，离心10分钟将血清分离出来。

将分离得到的血清样本转移到干净的试管中。

3.2 加入试剂取适量的双缩脲试剂，按照其说明书的要求加入到试管中，与血清样本进行充分混合。

注意避免空气泡的形成。

3.3 酶解反应将试管放置于恒温水浴中，根据试剂的要求进行酶解反应。

一般情况下，反应时间为30分钟。

3.4 测定吸光度将反应体放入分光光度计中，设置波长为试剂说明书要求的波长，记录吸光度值。

3.5 统计结果根据标准曲线，计算出血清样本中总蛋白的含量。

4. 结果解读根据血清总蛋白测定的结果，可以得出以下结论： - 如果测定的结果高于正常范围，可能说明患者在蛋白质代谢方面存在异常，如蛋白质合成过多或凋亡减少。

- 如果测定的结果低于正常范围，可能说明患者在蛋白质合成方面存在问题，如肝功能受损或营养不足等。

需要注意的是，血清总蛋白测定的结果受到多种因素影响，如年龄、性别、饮食习惯等，因此在结果解读时需要综合考虑患者的临床情况。

5. 总结血清总蛋白测定是一种常用的检验方法，通过双缩脲法可以快速、准确地测定血清中的总蛋白含量。

该方法操作简单，结果解读可为临床医生提供重要的参考依据。

但需要注意的是，结果的解读需要综合考虑患者的临床情况，以及其他相关检验指标的结果，才能做出正确的诊断。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告一、实验目的掌握双缩脲法测定血清总蛋白的原理和操作方法，熟悉分光光度计的使用，了解血清总蛋白测定的临床意义。

二、实验原理双缩脲试剂是由硫酸铜的碱性溶液与酒石酸钾钠的碱性溶液混合而成。

当含有两个或两个以上肽键的化合物（如蛋白质）与双缩脲试剂反应时，形成紫红色的络合物。

其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，在 540nm 波长处有最大吸收峰。

通过比色法，可以测定样品中蛋白质的含量。

三、实验材料与设备1、试剂双缩脲试剂：称取硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）15g 和酒石酸钾钠60g，用 500ml 蒸馏水溶解，在搅拌下加入 300ml 10%氢氧化钠溶液，用水稀释至 1000ml，贮存于塑料瓶中，可长期保存。

标准蛋白溶液（10g/L）：称取干燥的牛血清白蛋白 10g，用少量生理盐水溶解后，转移至 100ml 容量瓶中，用生理盐水定容至刻度，摇匀。

生理盐水。

2、器材分光光度计离心机移液器试管刻度吸管四、实验步骤1、标准曲线的绘制取 6 支干燥洁净的试管，按下表进行操作：｜试管编号｜ 1 ｜ 2 ｜ 3 ｜ 4 ｜ 5 ｜ 6 ｜｜｜｜｜｜｜｜｜｜标准蛋白溶液（ml）｜ 0 ｜ 02 ｜ 04 ｜ 06 ｜ 08 ｜ 10 ｜｜生理盐水（ml）｜ 10 ｜ 08 ｜ 06 ｜ 04 ｜ 02 ｜ 0 ｜｜蛋白质含量（g/L）｜ 0 ｜ 2 ｜ 4 ｜ 6 ｜ 8 ｜ 10 ｜向各管中加入 4ml 双缩脲试剂，充分混匀，室温放置 30 分钟后，以空白管调零，在 540nm 波长处测定各管的吸光度值（A）。

以蛋白质含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。

2、血清样品的测定取 3 支试管，分别标记为测定管、空白管和对照管。

测定管：准确吸取血清样品01ml，加入生理盐水09ml，充分混匀。

再加入 4ml 双缩脲试剂，室温放置 30 分钟后，在 540nm 波长处测定吸光度值（A₁）。

总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求derui

总蛋白（TP）测定试剂盒
2、性能指标
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。

表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在波长546 nm，光径1.0 cm，温度37℃条件下，吸光度≤0.200。

2.3分析灵敏度
试剂盒测试70 g/L被测物时，吸光度变化值≥0.150。

2.4线性范围
2.4.1 试剂盒在30.0～120.0 g/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.995。

2.4.2 在30.0～120.0 g/L 区间（范围）内，线性相对偏差应不超过±6.0%。

2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤2.0%。

2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤5.0%。

2.6准确度
相对偏差（Bias%）应在±5.0%范围内。

2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。

双缩脲法测定总蛋白含量

双缩脲法测定总蛋白含量双缩脲法是一种常用的方法，用于测定生物体中的总蛋白含量。

本文将介绍双缩脲法的原理、步骤和应用，以及一些注意事项。

总蛋白是生物体中一类重要的生化指标，它包括了多种蛋白质分子的总量。

测定总蛋白含量可以用于评估生物体的健康状态、疾病诊断以及药物疗效的监测等方面。

而双缩脲法则是一种常用的测定总蛋白含量的方法。

双缩脲法的原理是利用了蛋白质与染料间的结合反应。

当染料分子与蛋白质结合时，会导致染料的吸收光谱发生变化。

通过测量吸光度的变化，可以间接地推算出样品中的总蛋白含量。

在进行双缩脲法测定总蛋白含量时，需要准备一系列试剂和仪器设备。

首先是双缩脲试剂，它是一种含有染料的溶液。

其次是样品，可以是血清、尿液、细胞提取液等。

还需要分光光度计，用于测量吸光度的变化。

具体操作步骤如下：1. 首先准备好双缩脲试剂和待测样品。

将双缩脲试剂稀释至适当浓度，使其能够与样品中的总蛋白发生反应。

2. 取一定量的样品，加入双缩脲试剂中，充分混合。

注意避免产生气泡。

3. 置于室温下静置一段时间，使样品与试剂充分反应。

4. 使用分光光度计，设置好波长，并将样品吸光度读数。

5. 根据吸光度的读数，结合标准曲线，计算出样品中的总蛋白含量。

双缩脲法的应用非常广泛。

它可以用于临床医学中，用于评估病人的肾功能、肝功能等。

在实验室研究中，双缩脲法也是常用的测定总蛋白含量的方法之一。

需要注意的是，双缩脲法测定总蛋白含量也有一些限制和注意事项。

首先，双缩脲法只能测定总蛋白的含量，无法区分不同种类的蛋白质。

其次，双缩脲法的准确性受到样品的干扰因素影响较大，所以在操作过程中需要尽量减少干扰物的存在。

此外，双缩脲法对某些物质有一定的选择性，因此在应用时需要根据具体情况进行调整和修正。

双缩脲法是一种常用的测定总蛋白含量的方法。

它通过测量吸光度的变化，间接地推算出样品中的总蛋白含量。

双缩脲法具有简单、快速、经济的特点，广泛应用于临床医学和科学研究领域。

总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求sainuopu

总蛋白（TP）测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中总蛋白的含量。

1.1 试剂盒包装规格试剂：1×20ml；2×60ml；3×40ml；4×60ml；4×400ml；2×30ml。

校准品：1×1ml；1×3ml。

1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂：亮蓝色澄清液体。

校准品：无色至浅黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.2。

2.4 分析灵敏度测定浓度为50g/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.2。

2.5 线性范围在（10，100）g/L线性范围内，线性相关系数r应不小于0.990。

在[30，100）g/L范围内的线性相对偏差应不大于±10%；在（10，30）g/L范围内的线性绝对偏差应不大于±3.0g/L。

2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于3%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于5%。

2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。

2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至NIST生产的有证参考物质（SRM927）。

2.10 稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

一、实验目的1. 掌握双缩脲法测定血清总蛋白的基本原理和操作步骤；2. 了解双缩脲试剂的配制方法和使用注意事项；3. 熟悉血清总蛋白的临床意义；4. 通过实验，提高实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理双缩脲法是一种测定蛋白质含量的方法，其原理是：在碱性溶液中，蛋白质分子中的肽键与铜离子（Cu2+）发生反应，形成紫红色络合物。

该络合物在特定波长（如540nm）下的吸光度与蛋白质含量呈线性关系。

通过测定吸光度，可以计算出样品中蛋白质的含量。

三、实验材料与试剂1. 实验材料：牛血清、生理盐水、双缩脲试剂、蛋白质标准液、试管、加样枪、刻度吸管、洗耳球、水浴锅、分光光度计。

2. 实验试剂：（1）双缩脲试剂：硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化钾；（2）蛋白质标准液：70g/L；（3）生理盐水：0.9%。

四、实验步骤1. 准备工作：将牛血清、生理盐水、双缩脲试剂、蛋白质标准液等实验材料准备好，并检查仪器设备是否正常。

2. 标准曲线的制作：（1）取6支试管，分别编号为1-6号；（2）向1-5号试管中加入不同浓度的蛋白质标准液，6号试管为空白对照；（3）向每支试管中加入适量的双缩脲试剂；（4）将试管放入水浴锅中，室温放置30分钟；（5）用分光光度计测定540nm处的吸光度，记录数据；（6）以蛋白质浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 样品测定：（1）取3支试管，分别编号为A、B、C；（2）向A、B、C号试管中加入适量的牛血清；（3）向A、B号试管中加入适量的双缩脲试剂，C号试管为空白对照；（4）将试管放入水浴锅中，室温放置30分钟；（5）用分光光度计测定540nm处的吸光度，记录数据；（6）根据标准曲线，计算A、B号试管中蛋白质的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：根据实验数据，绘制标准曲线，横坐标为蛋白质浓度（g/L），纵坐标为吸光度。

曲线线性良好，相关系数R2=0.99。

2. 样品测定：根据标准曲线，计算A、B号试管中蛋白质的含量，结果如下：A号试管：蛋白质含量为70g/L；B号试管：蛋白质含量为68g/L。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告双缩脲法测定血清总蛋白实验报告引言：血清总蛋白是血液中的一种重要指标，它反映了人体内蛋白质的总量和分布情况。

测定血清总蛋白可以帮助医生判断患者的营养状况、肝功能以及某些疾病的发展情况。

本实验采用了双缩脲法，通过与标准物质的比色反应，定量测定了血清总蛋白的含量。

实验方法：1. 实验仪器与试剂准备本实验所需仪器有分光光度计、移液器、比色皿等。

所需试剂有双缩脲试剂、标准物质（如牛血清白蛋白）以及待测血清样品。

2. 样品预处理将待测血清样品离心，取上清液，并用移液器将上清液吸取到比色皿中。

3. 加入双缩脲试剂用移液器向比色皿中加入适量的双缩脲试剂，并轻轻搅拌均匀，使样品与试剂充分反应。

4. 与标准物质比色将标准物质分别加入不同的比色皿中，每个比色皿中加入相同体积的双缩脲试剂，与待测血清样品同时进行比色。

5. 分光光度计测定将比色皿放入分光光度计中，设定波长为标准波长，记录吸光度值。

6. 绘制标准曲线将吸光度值与标准物质的浓度进行对照，绘制标准曲线。

7. 计算待测血清样品的总蛋白含量根据待测血清样品的吸光度值，在标准曲线上找到对应的浓度，即可计算出待测血清样品的总蛋白含量。

结果与讨论：在本次实验中，我们测得待测血清样品的吸光度值为0.6。

根据标准曲线，我们可以得知该吸光度值对应的总蛋白浓度为30 g/L。

通过与标准物质的比色反应，我们成功地测定了待测血清样品的总蛋白含量。

总蛋白是人体内重要的营养物质，对于维持正常的生理功能至关重要。

通过测定血清总蛋白的含量，我们可以了解患者的营养状况。

如果总蛋白含量过低，可能意味着患者存在蛋白质摄入不足或吸收不良的问题。

而过高的总蛋白含量可能与肝功能异常、肾脏疾病等有关。

然而，需要注意的是，双缩脲法只能测定血清总蛋白的含量，并不能提供蛋白质的具体组成信息。

在实际应用中，还需要结合其他指标和临床病史来综合判断患者的健康状况。

结论：通过双缩脲法测定血清总蛋白的含量，我们可以快速、准确地了解患者的营养状况和某些疾病的发展情况。

两种校准品和3种双缩脲试剂测定血清总蛋白结果偏倚评估及方法学评价

双缩脲法测定血清总蛋白至今已将近１０年的０历史，间不少学者对其进行了系统的实验并发表了其大量的文献。美国临床化学协会和国际临床化学协会以Ｄｕａ１７ｏｍｓ９５年提出的配方为推荐方法 … ；９１１８年Ｄｕｓ将该法推荐为侯选参考方法；全国临ｏｍａ又《
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改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白比较分析

世界最新医学信息文摘 2018年第18卷第66期 127 改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白比较分析童占清（互助县中医院检验科，青海海东 810500）1.1 一般资料选取2017年2月至2018年2月在我院就诊患者的脂浊标本112例，另选68例正常血清标本作为对照组，观察组男63例，女49例，年龄18~75岁，平均年龄为（43.53±3.27）岁其中TG>10.00mmol/L，外观乳糜患者51例，4.00m m o l/L< TG<10.00mmol/L 61例；对照组男35例，女33例，年龄17~74岁，平均年龄为（43.61±3.31）岁，TG<2.00mmol/L。

两组患者年龄、性别等一般资料比较（P>0.05）。

1.2 仪器与试剂所有标本均采用全自动生化分析仪进行测定，改良双缩脲双试剂主要成分为酒石酸钾钠、氢氧化钠、硫酸铜，双缩脲单试剂主要成分为氢氧化钠、硫酸铜，校正液采用Dimension，质控液为朗道质控液。

1.3 方法改良双缩脲双试剂进行直接测定，其主要分析参数：两色性终点法，主波长542nm，副波长690nm。

双缩脲单试剂直接测定，主要分析参数：两点终点法，主波长544nm，副波长690nm。

1.4 统计学方法本研究中所有数据均采用SPSS22.0分析，计量资料采用（±s）表示，t检验；计数资料采用（%）表示，χ2检验，P<0.05，表明差异有统计学意义。

2 结果改良式双缩脲双试剂法与单试剂对正常血清标本血清总蛋白直接测定比较（P>0.05）；对脂浊标本进行直接测定，两种方法比较（P<0.05），详见表1。

3 讨论随着社会的发展，科学技术的进步，临床对血清总蛋白的测定要求越来越高，良好的测定方法对临床诊治相关疾病具有重要意义。

既往研究表明，脂浊对双缩脲法测定血清总蛋白会造成干扰，并且脂浊越明显所造成的干扰情况越大。

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法) 产品技术要求珠海森龙生物

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)性能指标
1 外观和性状
单试剂：R应为蓝色澄清液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2 装量
液体试剂的装量应不小于标示量。

3 试剂空白吸光度
试剂空白吸光度应不大于0.200 。

4 线性
试剂盒线性区间应覆盖[30.0 ，100]g/L；
a）线性相关系数 r 应不小于0.995；
b）线性偏差不应超过±6.0%。

5 准确度
相对偏差应不超过±5%。

6 分析灵敏度
70g/L样本吸光度差值（△A）应不小于0.150。

7 精密度
7.1 重复性
重复测试（70.0±10.0）g/L的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于2% 7.2 批间差
测试（70.0±10.0）g/L的样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于5%
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单试剂与双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的比较

单试剂与双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的比较杨爱华【期刊名称】《淮海医药》【年(卷),期】2006(24)4【摘要】目的将双缩脲试剂由单试剂改为双试剂方法,并就两种不同剂型方法作比较.方法双试剂配制,第1试剂为不含硫酸铜的双缩脲空白试剂,第2试剂系将单试剂中的硫酸铜增加1倍,二者等量混合即成单试剂.选取黄疸、脂浊、溶血及外观正常标本用两种方法同时在日立7060自动生化分析仪上测定总蛋白含量.结果血清总胆红素每增加100μ mol/L时,单试剂法总蛋增加.8 g/L,双试剂法不受干扰;脂浊血清对单试剂法结果影响十分明显,而双试剂法则完全可以排除脂浊干扰;溶血标本每1 g/L血红蛋白可使单试剂法总蛋白结果约增加2.2 g/L,双试剂法可基本去除此干扰;对外观正常标本两种方法测定结果差异无显著性.结论双剂型双缩脲法在不改变单试剂法反应原理,保留其优点的基础上,能克服黄疸、脂浊、溶血的干扰,具有很好的准确度和精密度,且适合于自动分析.【总页数】2页(P311-312)【作者】杨爱华【作者单位】江苏省姜堰市顾高人民医院,检验科,225502【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨 [J], 李发爵;陈明;徐爱妹2.血清总蛋白双试剂双缩脲法消除脂浊和胆红素的干扰 [J], 王凤学;李树仁;欧阳旭红3.免疫抑制双试剂法与单试剂法测定血清中CK—MB同工酶结果的比较 [J], 张桂荣;张桂梅4.总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性评估 [J], 范婵;刘艳婷;赵印;肖光军;杨娜;李祥坤;曹丹5.双试剂双缩脲法对脂浊标本血清总蛋白的测定 [J], 谢振纪;罗俏庄;周少清因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。