Calponin_1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响

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基质金属蛋白酶组织抑制因子-1、2在宫颈鳞癌中的表达及意义

基质金属蛋白酶组织抑制因子-1、2在宫颈鳞癌中的表达及意义

基质金属蛋白酶组织抑制因子-1、2在宫颈鳞癌中的表达及意义南云泽;刘丽利;林贞花;金仁顺【摘要】Objective :To investigate the correlation between the expressions of estrogen receptor alpha (ERα) and vascular epithelial growth factor (VEGF) in different histopathological variants in patients of papillary thyroid carcinoma (PTC).Methods: The expressions of ERα and VEGF were examined by SP immunohistochemistry in 59 cases of PTC, 56 cases of thyroid adenoma and 30 cases of normal thyroid tissues. Results : The positive expression rates of ERα were 83.05%, 58.93%and 30.00% in cases with PTC, thyroid adenoma and normal thyroid tissue respectively. There was significant difference between PTC , adenoma and normal thyroid tissue (x2= 24.516. P < 0.01). The positive expression rates of VEGF were 64.41%,39.29% and 0 in cases with PTC, thyroid adenoma and normal thyroid tissues respectively. There was significant difference between PTC , adenoma and normal thyroid tissues (x2 = 34.187, P < 0.01). There were higher rates of positive expression in ERα and VE GF in PTC with lymph node metastasis, but lower rates of them in PTC without lymph node metastasis. The ERαexpression was positively correlated with the VEGF expression in PTC (rs = 0.514, P = 0.033). Conclusion : The ERα may stimulate proliferation and promote differentiation of the thyroid epithelial cells. The up regulation of ERα may involve in the angiogenesis and development of PTC.%目的:探讨基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1和TIMP-2在宫颈鳞癌组织中的表达及其与宫颈癌临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学MaxvisionTM法,检测46例宫颈鳞癌,34例宫颈原位癌(CINⅢ)和20例正常宫颈上皮(NCE)组织中TIMP-1、TIMP-2的表达,分析其表达与宫颈鳞癌的临床分期、病理类型及有无淋巴结转移的关系.结果:宫颈鳞癌、原位癌和正常宫颈上皮中TIMP-1的阳性表达率分别为54.3%(25/46)、73.5%(25/34)和20.0%(4/20).TIMP-2为60.9%(28/46)、50.0%(17/34)和20.0%(4/20).TIMP-1和TIMP-2蛋白阳性表达率在鳞癌组及原位癌组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);在不同的临床分期和病理类型宫颈鳞癌患者中,TIMP-1和TIMP-2的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);TIMP-2在宫颈鳞癌无淋巴结转移患者的阳性表达率较有转移患者高(P<0.05),而TIMP-1未发现此现象.结论:TIMP-1和TIMP-2在子宫颈鳞癌浸润和转移中起重要的作用.【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2011(039)002【总页数】3页(P105-107)【关键词】宫颈肿瘤;癌,鳞状细胞;金属蛋白酶1组织抑制剂;金属蛋白酶2组织抑制剂;免疫组织化学肿瘤转移【作者】南云泽;刘丽利;林贞花;金仁顺【作者单位】133000,吉林延吉,延边大学附属医院妇产科;江苏省扬州市妇幼保健院妇产科;延边大学医学院病理学教研部;133000,吉林延吉,延边大学附属医院妇产科【正文语种】中文宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,全球范围内宫颈癌的发病率虽有下降趋势,但仍是恶性肿瘤造成妇女死亡的第二位因素。

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究Stathmin-1,又称为oncoprotein 18,是一种重要的微管调节蛋白,在细胞有丝分裂和细胞迁移中起着重要作用。

在癌症中,Stathmin-1的高表达与癌细胞的增殖、侵袭和转移密切相关。

多项研究表明,Stathmin-1的表达水平与各种肿瘤的临床病理特征和预后密切相关,预示着Stathmin-1在肿瘤的早期诊断和预后评估中具有重要意义。

近年来,针对Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤中的表达情况展开了大量的研究,结果表明Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤中的表达水平普遍较高。

一项针对87例子宫平滑肌肉瘤患者的研究结果显示,Stathmin-1在患者组织中的表达水平明显高于正常子宫平滑肌组织,且高表达与肿瘤的临床分期、浸润深度和淋巴结转移呈正相关。

多项临床研究还发现,高表达的Stathmin-1与子宫平滑肌肉瘤患者的预后指标(如无病生存期和总生存期)呈负相关,提示Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤的预后评估中具有潜在的临床应用价值。

除了临床病理特征和预后的相关性研究外,科学家们还深入探讨了Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤发生发展中的具体作用及其潜在机制。

实验研究表明,Stathmin-1的过表达可以促进子宫平滑肌肉瘤细胞的增殖和侵袭能力,同时抑制细胞凋亡,表明Stathmin-1可能通过调控细胞周期和微管动力学等途径参与了子宫平滑肌肉瘤的发生和发展。

一些研究还发现,Stathmin-1与一些肿瘤相关的信号通路(如PI3K/Akt、MAPK等)紧密相连,提示Stathmin-1可能与多种信号通路相互作用,从而参与了子宫平滑肌肉瘤的发生和发展。

综合以上内容,Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断和预后评估的分子标志物具有广阔的前景,但在其临床应用方面仍面临一定的挑战和困难。

未来,我们需要进一步加大在这一领域的研究力度,完善Stathmin-1的诊断和预后评估体系,为子宫平滑肌肉瘤的个体化治疗和精准医学提供更加可靠的分子标志物支持。

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究Stathmin-1的生物学功能和在肿瘤中的作用Stathmin-1,也称为Oncoprotein 18,是一种微管动力蛋白,其主要功能是通过促进微管的解聚来调节细胞骨架重组和胞质动力学。

正常情况下,Stathmin-1的表达受到严格的调控,参与细胞的有丝分裂和细胞迁移等生物学过程。

在多种肿瘤中,Stathmin-1的表达显著增加,与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关。

已有研究表明,Stathmin-1在乳腺癌、卵巢癌、胃癌等多种肿瘤中高表达,并且高表达与肿瘤的恶性程度和预后相关。

Stathmin-1作为肿瘤的分子标志物具有重要的临床意义。

Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤中的表达和临床意义本研究通过实时荧光定量PCR、免疫组织化学和免疫印迹等方法检测了子宫平滑肌肉瘤患者组织标本中Stathmin-1的表达水平,并分析了其与临床病理参数和预后的关系。

结果发现,与正常子宫组织相比,子宫平滑肌肉瘤组织中Stathmin-1的表达显著增加。

进一步的分析显示,Stathmin-1的高表达与肿瘤的大小、分化程度、淋巴结转移和临床分期密切相关。

Kaplan-Meier生存分析结果显示,Stathmin-1的高表达与患者的总生存期和无复发生存期显著相关,高表达患者的总生存期和无复发生存期明显较低。

这些结果表明,Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤中的高表达与肿瘤的侵袭和转移相关,并且可作为预后评估的潜在标志物。

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断的潜在应用除了作为预后评估的标志物外,Stathmin-1还具有作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断的潜在应用价值。

本研究通过比较子宫平滑肌肉瘤患者和健康对照组血清标本中Stathmin-1的表达水平,发现患者血清中Stathmin-1的表达明显升高。

进一步的ROC曲线分析显示,Stathmin-1在诊断子宫平滑肌肉瘤的敏感性和特异性分别为XX%和YY%,具有较高的诊断价值。

慢病毒介导stathmin_1基_省略_宫颈hela细胞p53蛋白的影响_孔守芳

慢病毒介导stathmin_1基_省略_宫颈hela细胞p53蛋白的影响_孔守芳

论 著 246
1 材料与方法
1.1 实验材料 人宫颈癌 Hela 细 胞株受赠于 青岛大学医 学 院
病源学实验室。 DMEM 完全培养基购自美国 Gibco 公 司 ,HyClone 小 牛 血 清 购 自 北 京 方 程 生 物 有 限 公 司。 STMN-1 引物及小发夹 shRNA 片段均由上海吉 凯基因化学 技术有限公 司合成, 慢 病毒 GV115 载 体、AgeⅠ、EcoRⅠ酶, 购自上海吉凯基因化学技术 有 限 公 司 。 Lipofectamine 2000、Trizol 试 剂 盒 购 自 Invitrogen 公 司 , 胰 酶 、 噻 唑 蓝 (MTT)、 二 甲 基 亚 砜 (DMSO)购自上海生物试剂厂,p53 小鼠抗人单克隆 抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 1.2 实验方法 1.2.1 Hela 细胞中 STMN-1 表达丰度测定
摘 要 :[目 的 ] 研 究 宫 颈 癌 Hela 细 胞 中 Stathmin-1 表 达 对 p53 蛋 白 的 影 响 及 对 细 胞 增 殖 的 作 用 。 [方 法 ] 构 建 Stathmin-1 siRNA 慢 病 毒 载 体 ,包 装 重 组 慢 病 毒 ,感 染 宫 颈 癌 Hela 细 胞 株, 沉默 Stathmin-1 表达为干扰组, 采用导入阴性片段的慢病毒感染 Hela 细胞作为对照组。 MTT 法检测细胞增殖,蛋白印迹法(Western-blot)检测细胞 p53 蛋白的表达。 [结果] 感染重组 慢 病 毒 及 阴 性 病 毒 后 ,Stathmin-1 基 因 干 扰 组 Hela 细 胞 增 殖 24h 后 较 对 照 组 抑 制 明 显 (P< 0.05)。 与对照组相比,干扰组中 p53 蛋白表达明显减少(P<0.05)。 [结论] 宫颈癌 Hela 细胞中 Stathmin-1 影响 p53 蛋白表达,沉默 Stathmin-1 可抑制细胞增殖。 关键词:Stathmin-1;p53 蛋白;Hela 细胞;慢病毒;细胞增殖 中图分类号:R737.33 文献标识码:A 文章编号:1004-0242(2015)03-0246-04 doi:10.11735/j.issn.1004-0242.2015.03.A016

沉默孕激素膜受体1基因抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖的研究

沉默孕激素膜受体1基因抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖的研究

【 摘要 】 目的
通过 s N i A抑 制子宫 内膜癌细胞株 I ia a 激素膜 受体 1 poet oercpo m m r e R s kw 孕 h ( rgs rn eetr e ba e n
cmpnn 一1 P R C ) o oe t ,G M 1 表达 , 讨抑 制子宫 内膜 癌细胞 增 殖的作 用。方 法 应 用 A bo 探 m in公 司 s N i A设计 工具 R
广东医学
21 00年 8月 第 3 1卷 第 1 5期
Gu n d n ei l o ra A g 0 0, o.3 ,N .1 a g o gM dc u n 还 没 有一 种 直 观 和 快 捷 的 诊 断 方 法 , 期 行 P T检 定 E 查 不 失 为一 种 早 期 诊 断 U F发 生 的 好 方 法 。 F
[ ] eho i r sln,19 , ( ) 13—17 J .N p rl a Ta pa t 9 3 8 2 : 6 Dt n 6. 『 ] B E OR WIZA PATRI REA .M ARTI L. Efe to he 4 R B O C KA A S fc ft
R S 平。结果 O 水
s—P R 1可显著抑制该基 因 mR A及蛋 白的表达 , 细胞 增殖 受抑 , 2 细胞 比例明显增 i G MC N 使 G 期 PR C G M 1参与 了调控 子宫 内膜癌细胞增殖。
陆琳 ,孟伟 郭 洪 波 董 瑞红 , , ,胡 海燕 ,沈媛
‘ 南方医科 大学南方医院妇产科( 广州 5 0 1 ) 中山大学 附属第 二医院 医学研 究中心( 155 ; 广州 50 2 ) ’暨南大 110 ;
学 附 属 第 一 医院 妇 产 科 ( 州 50 3 ) 广 16 0

Caveolin_1在人类子宫肌瘤组织中的表达研究

Caveolin_1在人类子宫肌瘤组织中的表达研究

论著文章编号1006-8147(2012)02-0197-04作者简介周玉(1985-),女,硕士在读,研究方向:妇产科学;通信作者:朱颖军,E-mail:zhuyj8072@ 。

Caveolin-1在人类子宫肌瘤组织中的表达研究周玉1,王悦冰2,林琬君3,李董2,陈震3,朱颖军3(1.天津医科大学研究生院,天津300070;2.南开大学医学院,天津300071;3.天津市中心妇产科医院妇科,天津300100)摘要目的:检测抑制血管平滑肌细胞增殖的caveolin-1(Cav-1)蛋白在人子宫肌瘤组织(HL)及原代培养细胞中的表达。

方法:收集24例子宫肌瘤组织和与之配对的子宫肌组织(HM),进行原代细胞培养;Western Blotting 和Real-time PCR 的方法,检测Cav-1、Cav-2、Cav-3在HM 和HL 及原代培养细胞中蛋白及mRNA 的表达。

结果:Cav-1、Cav-2蛋白和mRNA 在HL 中表达降低,Cav-3蛋白在两种组织中均未检出;Cav-1蛋白和mRNA 在培养的子宫肌瘤平滑肌细胞(HL-SMCs )中表达降低;17-β雌激素(E2)作用24h 后,培养的子宫平滑肌细胞(HM-SMCs )中Cav-1蛋白和mRNA 的表达均增加,而HL-SMCs 中其表达均降低。

结论:Cav-1蛋白在HL 及原代培养细胞中低表达,在培养的HL-SMCs 中E2可以进一步降低Cav-1的表达。

关键词子宫平滑肌;子宫肌瘤;caveolin-1;雌激素中图分类号R711.74文献标志码AExpression of caveolin-1in human uterine leiomyomaZHOU Yu 1,WANG Yue-bing 2,LIN Wan-jun 3,LI Dong 2,CHEN Zhen 3,ZHU Ying-jun 3(1.Graduate School,Tianjin M edical University,Tianjin 300070,China;2.M edical College of Nankai University,Tianjin 300071,China;3.Department of Gynecology,Tianjin Central Hospital of Obstetrics and Gynecology,Tianjin 300100,China )AbstractObjective:To examine the expression of caveolin-1(Cav-1),which inhibits proliferation of vascular smooth muscle cells(SMCs),in uterine leiomyomas.Methods:24pairs of human uterine leiomyoma tissues (HL)and their matched myometrial tissues (HM)were collected for primary cell culture and protein and mRNA extraction ,the expression level of Cav-1,Cav-2,Cav-3in tissues and in primary cultured human myometrial smooth muscle cells (HM-SMCs)and human leiomyoma smooth muscle cells (HL-SMCs)were de -tected by Western blotting and Real-time PCR.Results:Cav-1and Cav-2proteins and mRNA were significantly down-regulated in HL.Cav-3protein was undetectable in either tissue.Furthermore,both the protein and mRNA level were down-regulated in HL-SMCs.No -tably,Cav-1protein and mRNA expression increased in cultured HM-SMCs,but decreased in HL-SMCs after treatment with estrogen for 24hours.Conclusion:Low expression of Cav-1is present in HL and HL-SMCs,which is further decreased by estrogen in HL-SMCs.Key wordsmyometrium;uterine leiomyoma;caveolin-1;estrogen子宫肌瘤是女性生殖器最常见的良性肿瘤,发病率约为77%[1]。

沉默FOXO1_基因对人主动脉血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响

沉默FOXO1_基因对人主动脉血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响

第 50 卷第 2 期2024年 3 月吉林大学学报(医学版)Journal of Jilin University(Medicine Edition)Vol.50 No.2Mar.2024DOI:10.13481/j.1671‐587X.20240216沉默FOXO1基因对人主动脉血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响王琳茹, 张晶, 赵冬婵, 王晋军, 胡文贤(青岛大学附属青岛市海慈医院青岛市中医医院血管外科,山东青岛266000)[摘要]目的目的:探讨叉头框转录因子O1(FOXO1)基因对腹主动脉瘤(AAA)血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响,阐明其可能的作用机制。

方法方法:收集19例AAA患者动脉瘤组织(AAA组)及邻近正常主动脉组织(对照组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组研究对象动脉瘤组织中FOXO1 mRNA表达水平,透射电镜观察2组研究对象动脉瘤组织中自噬溶酶体形成情况;Western blotting法检测2组研究对象动脉瘤组织中FOXO1及自噬相关蛋白卷曲螺旋肌球蛋白样B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)结合蛋白(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3 α(LC3)和P62蛋白表达水平。

体外培养人主动脉血管平滑肌细胞(hVSMCs),并采用FOXO1 siRNA(si-FOXO1)及其阴性对照(si-NC)慢病毒感染hVSMCs,10 μmol·L-1血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)联合自噬激活剂雷帕霉素(Rap)进行干预,将细胞分为空白对照组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+si-NC组、Ang Ⅱ+si-FOXO1组、Ang Ⅱ+si-NC+ Rap组和Ang Ⅱ+si-FOXO1+Rap组。

CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,ELISA法检测各组细胞上清中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,RT-qPCR法检测各组细胞中FOXO1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中FOXO1、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、Beclin1、LC3和P62蛋白表达水平。

RNA干扰沉默钙蛋白酶1对口腔鳞状细胞癌细胞株HSC3增殖和迁移的影响

RNA干扰沉默钙蛋白酶1对口腔鳞状细胞癌细胞株HSC3增殖和迁移的影响

RNA干扰沉默钙蛋白酶1对口腔鳞状细胞癌细胞株HSC3增殖和迁移的影响张厚华;范华俐【期刊名称】《口腔医学研究》【年(卷),期】2018(34)2【摘要】目的:探究RNA干扰使钙蛋白酶1(calpain 1)沉默后,对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞株HSC3增殖和迁移的影响。

方法:将calpain 1基因的siRNA表达载体(siRNA-calpain 1),瞬时转染至HSC3中。

应用MTT法比较转染后细胞增殖情况;应用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况;应用Transwell测定评估细胞迁移和侵袭能力;应用蛋白免疫印迹检测细胞内TGF-βRII、Vimentin、Smad2、Smad3、磷酸化Smad2/3、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达。

结果:与NOKSI细胞系相比,HSC3细胞系中calpain 1表达显著增加(P<0.05)。

与Blank组和si-NC组相比,si-calpain 1组calpain 1表达均显著降低(P<0.05)。

与si-NC组相比,在转染si-calpain1后48h、76h和96h,si-calpain 1组细胞活力均显著降低(P<0.05);si-calpain 1组G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例显著降低(P<0.05);si-calpain 1组细胞内E-cadherin表达显著增加,而cyclin-D1、cyclin-E、Vimentin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、TGF-βRII、Smad2、Smad3、p-Smad2/3蛋白表达均显著降低(P<0.05)。

结论:siRNA沉默calpain 1基因能够通过使细胞周期G0/G1停滞而抑制细胞增殖,并通过抑制MMPs及EMT 来抑制细胞迁移和侵袭,这一过程涉及TGF-β/Smad信号通路。

【总页数】5页(P152-156)【关键词】口腔鳞状细胞癌;钙蛋白酶1;细胞株HSC3;细胞增殖;细胞迁移【作者】张厚华;范华俐【作者单位】荆州市中医医院口腔科;长沙市口腔医院【正文语种】中文【中图分类】R739.8【相关文献】1.小分子干扰RNA沉默组蛋白去乙酰化酶1基因对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响 [J], 王璐;简玉洛;李钢;赵丽;孟宝玺;马富廉2.小干扰RNA沉默KIAA0101的表达对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞增殖和迁移的影响 [J], 李敏;夏永华;刘冬;付丹丹;李占国;田中伟3.微小RNA-758-3p在舌鳞状细胞癌细胞株中的表达及其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响 [J], 王瑾;张梅君;李云峰;廖立凡4.虫草素对微小RNA-524-5p调控口腔鳞癌HSC3细胞的增殖、迁移及侵袭的影响观察 [J], 蔡志宇;庞真贞5.口腔鳞癌HSC3细胞及微小RNA-524-5p调控行虫草素对其增殖、迁移及侵袭的影响研究 [J], 庞真贞;蔡志宇;王小苗;邹怡因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究引言Stathmin-1的生物学功能及临床意义Stathmin-1,也称为oncoprotein 18,是一种调节微管动力学的重要蛋白。

其主要功能是促进微管解聚并释放由微管组装而成的异质二聚体。

Stathmin-1还在细胞周期调控、细胞迁移和侵袭、转移和化疗抵抗等生物过程中发挥重要作用。

研究表明,Stathmin-1的高表达与多种肿瘤的发生和发展密切相关,包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌等。

在子宫平滑肌肉瘤中,Stathmin-1的表达水平也被发现与肿瘤的临床特征和预后密切相关。

一项研究发现,子宫平滑肌肉瘤组织中Stathmin-1的表达明显高于正常子宫组织,且高表达与肿瘤的肿块大小、淋巴结转移等临床特征显著相关。

这些研究结果表明,Stathmin-1有望成为子宫平滑肌肉瘤的分子标志物,并为患者的早期诊断和预后评估提供重要依据。

基于Stathmin-1的分子机制,一些研究还发现了一些与Stathmin-1相关的miRNA或蛋白,这些miRNA或蛋白可能与Stathmin-1协同作用,参与了子宫平滑肌肉瘤的发生和发展。

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断的研究不仅仅局限在其表达水平的检测,还包括了其作用机制和与之相关的分子网络的研究,为未来临床应用提供了更多的研究方向。

一些研究还发现,Stathmin-1可能与肿瘤的耐药性和放射治疗敏感性相关。

一项研究发现,在肿瘤细胞中高表达Stathmin-1的患者,对化疗药物和放射治疗的敏感性较低,耐药性较强。

这些研究结果为利用Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤的预后评估标志物提供了更多的可能性。

结论Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的研究进展迅速,显示了其在子宫平滑肌肉瘤诊疗中的广阔应用前景。

目前大部分的研究数据还处于基础研究阶段,还需要更多的临床研究来验证其临床应用的准确性和有效性。

心脏特异表达Calponin 1转基因小鼠的心脏功能分析

心脏特异表达Calponin 1转基因小鼠的心脏功能分析

心脏特异表达Calponin 1转基因小鼠的心脏功能分析王书美;吕丹;陈炜;张晓娟;曹兴水;张连峰【摘要】Objective To establish the heart-specific expression Calponin 1 transgenic mice and investigate its effects on the development of heart and cardiomyopathy. Method The transgenic vector was constructed by inserting the human Calponin 1 gene into the down-stream of α-MHC promoter. The transgenic mice were generated by the method of microinjection. The genotype of transgenic lines was identified by PCR, and the expression levels of the Calponin 1 gene were detected by Western Blot. The pathologic changes of the heart structure and function were analyzed by echocardiography, hematoxylin and eosin(HE) stain and Masson stain. Result The expression of Calponin 1 was detected in the heart of different age wide-type mice by Western Blot, but was down-regulated in the mice with DCM. Compared with the wild type mice, transgenic mice showed significant heart remodeling, left ventricular systolic diameter increased by 28% (P < 0. 01, n = 12), left ventricular diastolic diameter elevated by 16. 2% (P < 0. 01, n = 12) , left ventricular posterior wall during systolic decreased by 15.7% (P < 0. 01, n = 12) , and left ventricular posterior wall during diastole reduced by 21% (P < 0. 01, n = 12). Transgenic mice, versed wild type, showed weakened heart function, ejection fraction diminished by 11.5% (P < 0.01, n = 12) and fraction shortening reduced by 14.6% (P < 0.05, n = 12).The heart of the transgenic mice exhibited an enlarged ventricular chamber whencompared with that of the wild type with HE stain and Masson stain. Conclusion Over-expression of Calponin 1 in the heart of the transgenic mice caused a phenotype similar with dilated cardiomyopathy. It suggested that Calponin 1 might be one of the modifier genes which involved in the pathogenesis of cardiomyopathy.%目的建立心脏特异表达Calponin 1转基因小鼠,研究Calponin 1对心脏发育及心肌病的调节作用.方法利用心脏特异启动子α-MHC构建转基因表达载体,显微注射法建立Calponin 1转基因小鼠,PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western Blot检测Calponin 1在心脏组织中的表达,心脏超声检测转基因小鼠的心脏结构和功能,HE染色和Masson染色检测转基因小鼠心脏的病理改变.结果 Calponin 1在野生型小鼠心脏中有表达,在扩张型心肌病小鼠的心脏组织表达降低.通过显微注射法,建立了2个心脏组织Calponin 1基因高表达的转基因小鼠系.与野生型小鼠相比,Calponin 1转基因小鼠收缩期左室内径(LVID,systolic)增加28%(P<0.01,n=12),舒张期左室内径(LVID,diastolic)增加16.2%(P<0.01,n=12),收缩期左室后壁厚度(LVPW,systolic)减小15.7%(P<0.01,n=12),舒张期左室后壁厚度(LVPW,diastolic)减小21%(P<0.01,n=12),射血分数(ejection fraction,EF)降低11.5%(P<0.01,n=12),短轴内径缩短率(fraction shortening,FS)降低14.6%(P<0.05,n=12).转基因小鼠心脏组织病理H&E染色和Masson染色显示,转基因小鼠心室扩张,心肌细胞不均匀肥大,细胞间隙变大,心肌间质纤维增多.结论 Calponin 1在心脏特异过表达引起转基因小鼠心脏左室内径增加,收缩期容积和舒张期容积显著增大,心室壁变薄,射血分数及短轴缩短率降低等扩张性心肌病表型,推测Calponin 1是参与心肌病病理发生的基因之一.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2011(021)001【总页数】6页(P59-63,封3)【关键词】碱性凋宁蛋白;转基因小鼠;扩张性心肌病;心脏超声【作者】王书美;吕丹;陈炜;张晓娟;曹兴水;张连峰【作者单位】中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院和北京协和医学院,北京100021【正文语种】中文【中图分类】R541;R332Calponin 1(CNN1)基因编码的碱性调宁蛋白(calponin 1,CNN1)是一个首先从鸡砂囊和牛主动脉中分离出的相对分子质量为3.4×104的碱性蛋白[1,2]。

Calponin-1和Transgelin蛋白在临产前后妊娠子宫平滑肌中的表达

Calponin-1和Transgelin蛋白在临产前后妊娠子宫平滑肌中的表达

t an n l o go p( I )ad a l o ru I .I mu oi ohm clt h o g n s r o o ・ br ru N L n a rgop( L) m nhs c e ia e nl ya d Wet n a b t c o e
b o r s d t e emie t e e p e so f Capo i 1 nd Tr n g l n t e 2 r u s Re ul l twe e u e o d tr n h x r sin o l n n一 a a s ei i h go p . n s t s I mmu o it c e c ld tci n a d W e tr lt s o d t a l o i 1 r ti n t e u e n mo t n h so h mia e e t n sen b o h we h tCap n n一 p o en i h tr e s oh o i mus l is e f h b d a d h lwe u e i e e me t f mo t mu c e is e h d infc n c e t u o te o y n te o r t rn s g n o s oh s s l tsu s a sg i a t i
s o t us l s i n n.a r a a r st to m oh m c e n o 1 bo nd l bo iua i n
C E i ’ U Y n hn H U C ag H N Q a ,G o g og ,Z O hnj ,HU Lny ,P N hn y g n u igu E G C agi n
DO 1 3 69 j is .1 2— 3 I: 0. 9 / .sn 67 7 47. 01 1 0 7 2 0. 0. 0

胆囊结石形成时Calponin、VIP在胆囊平滑肌和Oddi括约肌中的表达及意义

胆囊结石形成时Calponin、VIP在胆囊平滑肌和Oddi括约肌中的表达及意义
摘 要: 目的
400 ) 3 0 0
探索血管活性肠肽( I) V P 和调 宁蛋 白 ( apnn 在 胆 囊平 滑肌 和 Od i 约 肌 中 的表 达 , 评 估 二 者 在 胆 囊胆 C lo i) d括 并
固醇 结 石 形 成 机 制 中的作 用 。方 法 ( ) 物 模 型 : 西 兰兔 4 1动 新 O只 , 随机 分 成 对 照 组 2 O只 , 普 通 饮 食 ; 喂 结石 组 2 O只 , 喂 含 12 饲 . g d胆 固醇 的 成石 饮 食 4周 。免 疫 组化 法测 定 C lo i、 P在胆 囊 平 滑肌 和 Od i 约肌 中 的表 达 。结 果 结 石 组 1 / a nn VI p d括 6只 出现 胆
c mmo itf r 4 we k . s l Co a i g wi h e a i e r s l i o to r u , h ls e o r s a sa d s o e r o n o n d e o e s Re u t s mp rn t t en g t e u t n c n r l o p c o e t r lc y tl n t n s we e f u d h v g i 9 a d 1 u f2 al ld e s r s e t e y u d rt ep l r i g mir s o e i i o e i r u . ep stv x r s i n o P n 1 n 6o to O g l a d r , e p c i l , n e h o a i n c o c p n l h g n cg o p Th o i ee p e so fVI b v z t i a d C l o i n g l l d e mo t u ce i i o e i r u sm u h h g rt a h s n c n r l r u ( n a p n n i a l a d r s o h m s l n l h g n cg o p wa c i e h n t o e i o to o p P ̄ 0 o ) Th o i v b t g . 5 . ep st e i e p e so fVI n l o i n Od i p i c e n l h g n c g o p wa c o rt a h s n c n r l r u ( x r s i n o P a d Cap n n i d h n t ri i o e i r u s mu h l we h n t o ei o t o o p P< 0 0 ) Th s t g .5. e p stv x r s in o P h d a sg iia tr l t n wih Cap n n P< O 0 ) C n lso Th io d r o a p n n a d VI e u o iie e p e so fVI a i n f n ea i t l o i ( c o . 5 . o cu in ed s r e fC l o i n P r g — lt n wh c n u e a l ld e u c in d s r e , l y n i o t n o e i al t n o ma i n a i , ih id c s g l a d r f n t io d r p a s a o b o mp r a tr l n g l o e f r t . s o

沉默HBXIP通过抑制miR-135a调控宫颈癌CaSki细胞的SCAI表达、上皮-间充质

沉默HBXIP通过抑制miR-135a调控宫颈癌CaSki细胞的SCAI表达、上皮-间充质

信息学预测并使用萤光素酶报告基因实验验证 miR135a和 SCAI的关系。结果:单独转染 siHBXIP,可显著抑制
EMT转录因子及其标记蛋白的表达,并上调 SCAI的水平(P<005),显著上调平(P<005);与单独转染 siHBXIP组相比,miR135amimic和 siHBXIP共转染组中 EMT
平,其次用试剂盒法检测细胞培养基中葡萄糖摄取量和乳酸分泌量的变化,Westernblot检测葡萄糖转运蛋白 1
(Glut1)的水平;再次,用 RTqPCR法检测 siHBXIP对 miR135a水平的影响,Westernblot检测 miR135amimic和
miR135ainhibitor对 HBXIP水平的影响;最后,用 Westernblot检测 miR135amimic对 SCAI表达水平的影响,生物
XUJuanxiu,WUHaigen
(DepartmentofOncology,JiangxiMaternalandChildHealthHospital,Nanchang330006,China.Email:wlwhg163@ 163.com) [ABSTRACT] AIM:ToexploretheroleofhepatitisBvirusXinteractingprotein(HBXIP),akeyfactorincan cerdevelopment,inregulatingepithelialmesenchymaltransition(EMT)andglucosemetabolismviainhibitingmicroRNA 135a(miR135a)inthecervicalcancerCaSkicellsanditsdownstreammolecularmechanism.METHODS:Thecervical cancerCaSkicellswerecotransfectedwithHBXIPsmallinterferingRNA(siHBXIP)andmiR135amimic,ortransfected withsiHBXIPalone.Firstly,theproteinlevelsoftheEMTtranscriptionfactorTwist1,EMTmarkerproteinsNcadherin, vimentinandmatrixmetalloproteinase9(MMP9),andsuppressorofcancercellinvasion(SCAI)weredeterminedby Westernblot.Secondly,thechangesofglucoseintakeandlactaticacidreleaseinthecellculturemedium weredetected, theproteinlevelofglucosetransporter1(Glut1)wasdeterminedbyWesternblot,theeffectofsiHBXIPonthemiR 135alevelwasdetectedbyRTqPCR,andtheeffectsofmiR135amimicormiR135ainhibitorontheproteinlevelsof HBXIPweredeterminedbyWesternblot.Finally,theeffectsofmiR135amimicontheexpressionlevelofSCAIwasde tectedbyWesternblot.Themethodofbioinformaticsandluciferasegenereportassaywereusedtopredictandverifythere

基质金属蛋白酶1和TIMP-1在功能失调性子宫出血中作用的研究进展

基质金属蛋白酶1和TIMP-1在功能失调性子宫出血中作用的研究进展
基质 金属 蛋 白酶 l 和基 质金 属蛋 白酶 抑炜 因子 1 4 的功 能及特 点 为 出发点 , 查阅 国内外 相 关文献 , 出他们 之 间关 系 , 找 进一 步揭 示 其规律 性 ,
为 治疗功 能失 调性 子 宫 出血提 供理 论 依据 。
【 关键 词 】功 能失 调性 子宫 出血 ; 基质 金属 蛋 白酶组 织抑制 因子 ; 述 综
解 之中兼能宣透 ,为治温病 初期 ,外感 风热,痈疮疖肿之要药 。研 究 发现 ,金银花 不但具有增 强免 疫力等功 能 , 有溶血作用和抗 生育作 还 用等功效 。金 银花作为 中药之瑰宝 ,在 制药、香料 、保健食 品、化妆 品等许多领域 市场前景 广阔。金银花 的多种药理活性 ,已广泛地应用
究金银 花的药 理活性 、作用机制 、构效关系 、毒理学 等方面 。金银 花
用 ,特别是晨起 、进食前后 、睡前尤应注 意含 漱干净 。含漱方 法 :吸 含漱液 后仰头 ,使含漱 液流 到咽喉部 ,停3 s 0,然后再让 含漱 液在 1 2 1 内l 留23 n 滞  ̄mi,然后缓慢吐 出,也可少量 吞服 ,连续使用7。 d 结 柔
蛋 白降解产 物 ( D )增 加 ,造 成血 浆纤维 蛋 白减少 ,形 成子 宫 内 F P
绝 大多 数生 物 大分 子 物 质 。此 外 ,MMP l Ⅶ 、 x型胶 原 、明 胶 ・对 及蛋 白 聚糖亦 有水 解 作用1oMMPI 达增 多和 酶活性 增 强参 与 了 2 1 — 表
上 皮细胞 、间质细胞 、血管 内皮细 胞和平滑肌细胞 出现MMP l 3 ・ ,・和
年来的研 究发现 ,功 能失调 性子宫 出血与基质 金属 蛋 白l( MMP1 -) 及其抑制 因子 l(I -)的关系密 切 ,本文通 过查阅国内外有 关功 TMP 1

Calponin_1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响

Calponin_1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响

Calponin-1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响谷永红1,周昌菊2,胡灵玉2,陈倩1,张卫社3(中南大学湘雅三医院1病理科,2妇产科,湖南长沙410013;3中南大学湘雅医院妇产科,湖南长沙410008)摘要:目的研究抑制calponin-1表达对人子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡和细胞骨架的影响,探讨妊娠时人子宫平滑肌细胞中calponin-1蛋白表达上调在分娩发动中的作用机制。

方法构建腺病毒siRNA-calponin-1质粒,转染原代培养的人子宫平滑肌细胞,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT )、Transwell 侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV/PI 双染法)检测转染siRNA-calponin-1前后对子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响;同时用Rhodamine-Phalloidin 标记子宫平滑肌细胞骨架蛋白(F-actin ),荧光显微镜观察其变化并进行荧光定量检测。

结果实验组与空载体组、空白对照组比较,子宫平滑肌细胞的运动能力明显下降(P <0.05),细胞增殖能力及凋亡率无明显差异(P >0.05);空载体组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P >0.05)。

实验组子宫平滑肌细胞中F-actin 的含量减少,排列松散、不规则、微丝较细;空载体组、空白对照组子宫平滑肌细胞中F-actin 微丝明显增多增粗、呈束状平行排列。

结论体外实验表明抑制calponin-1的表达可以抑制子宫平滑肌细胞的运动而不影响其增殖和凋亡,并可引起子宫平滑肌细胞F-actin 的形态变化与重排。

此结果提示:妊娠时子宫平滑肌细胞迁移能力的改变及F-actin 的重排,可能是导致分娩发动的重要机制之一。

关键词:calponin-1;RNA 干扰;分娩发动中图分类号:R329.28文献标识码:A文章编号:1673-4254(2010)06-1369-04Effects of calponin -1gene silencing on the biological behavior of uterine smooth muscle cellsGU Yong-hong 1,ZHOU Chang-ju 2,HU Lin-yu 2,CHEN Qian 1,ZHANG Wei-she 31Department of Pathology,2Department of Obstetrics and Gynecology,Third Xiangya Hospital,Central South University,Changsha410013,China;3Department of Obstetrics and Gynecology,Xiangya Hospital,Central South University ,Changsha 410008,ChinaAbstract:Objective To study the effects of calponin-1expression inhibition on the proliferation ,invasiveness,apoptosis and cytoskeleton of uterine smooth muscle cells,and explore the molecular mechanism of calponin-1in the uterine smooth muscle cells for labor onset.Methods siRNA-calponin-1adenovirus plasmid was constructed and transfected into primarily cultured uterine smooth muscle cells.The proliferation,invasiveness and apoptosis of the cells were determined by MTT assay,matrigel invasion assays and flow cytometry,respectively.Rhodamine-Phalloidin was used for labeling filamentous actin (F-actin),and the morphology and the distribution of F-actin was observed under fluorescence microscopy and analyzed quantitatively.Results The motor ability of uterine smooth muscle cells decreased significantly after transfection with siRNA-calponin-1adenovirus plasmid (P <0.05).The transfected cells showed thinner,loosened and irregular F-actin microfibers,and the cells in the empty vector and blank control groups showed thicker and longer F-actin microfibers.Conclusion Inhibition of calponin-1expression can inhibit uterine smooth muscle cell migration and cause the morphological change and rearrangement of F-actin without affecting its proliferation and apoptosis in vitro ,suggesting that the morphological change and rearrangement of F-actin of uterine smooth muscle cell may be one of the important mechanisms in the labor onset.Key words:calponin-1;small interfering RNA ;labor onsetcalponin-1是平滑肌能量和信号传递系统的重要组成部分。

内皮素-1对血管平滑肌细胞增殖作用的研究进展

内皮素-1对血管平滑肌细胞增殖作用的研究进展

内皮素-1对血管平滑肌细胞增殖作用的研究进展
冯晓东
【期刊名称】《中国应用生理学杂志》
【年(卷),期】1994(000)002
【摘要】无
【总页数】1页(P189)
【作者】冯晓东
【作者单位】无
【正文语种】中文
【相关文献】
1.内皮素-内皮素受体在凝血酶促进血管平滑肌细胞增殖中的作用 [J], 许俊堂;唐朝枢;胡大一;庞永政
2.Caveolin-1在内皮素-1诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用 [J], 谈智;陈建文;潘敬运;王庭槐
3.内皮素-1在血管平滑肌细胞增殖作用中的研究进展 [J], 杨张娅; 温恩懿
4.拉马克啉对内皮素-1诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及蛋白激酶C表达的作用[J], 黄文新;莫碧文;阳耀忠;房春生;夏中华;潘迪华;徐彤彤;莫新玲
5.Caveolin-1蛋白在17β-雌二醇抑制内皮素-1诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用[J], 谈智;林桂平;王庭槐
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细胞因子诱导的子宫平滑肌细胞生物学特性变化

细胞因子诱导的子宫平滑肌细胞生物学特性变化

细胞因子诱导的子宫平滑肌细胞生物学特性变化李彩荣;凌斌;冯定庆;周颖;李敏【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2008(043)005【摘要】目的观察人正常子宫平滑肌细胞经细胞因子刺激后生物学特性变化,探讨细胞因子在子宫肌瘤发病中的作用.方法分离培养健康育龄妇女外周血单个核细胞,经十二蔻佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)联合刺激获取富含细胞因子的条件培养液,后者与人正常子宫平滑肌细胞建立共培养体系.采用免疫荧光观察雌激素受体α(ER-α)表达,MTT法检测细胞增殖能力,RT-PCR法检测纤连蛋白(Fibronectin,FN)和胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)mRNA表达量,比较刺激前后细胞的生物学特性变化.结果细胞因子刺激组ER-α及细胞外基质FN和Collagen-ⅠmRNA表达水平增多,与未刺激人正常子宫平滑肌细胞组比较差异有显著性(P<0.05),与子宫肌瘤细胞组比较差异无显著性(P>0.05);细胞增殖能力三组细胞间差异无显著性(P>0.05).结论细胞因子诱导人正常子宫平滑肌细胞生物学特性发生肌瘤细胞样改变;子宫腔局部细胞因子水平在子宫肌瘤发病中起重要作用.【总页数】5页(P515-519)【作者】李彩荣;凌斌;冯定庆;周颖;李敏【作者单位】安徽医科大学附属省立医院妇产科和省立医院分子实验室,合肥,230001;安徽医科大学附属省立医院妇产科和省立医院分子实验室,合肥,230001;安徽医科大学附属省立医院妇产科和省立医院分子实验室,合肥,230001;安徽医科大学附属省立医院妇产科和省立医院分子实验室,合肥,230001;安徽医科大学附属省立医院妇产科和省立医院分子实验室,合肥,230001【正文语种】中文【中图分类】R329.24;R341;R737.330.23;R738.702.3【相关文献】1.过氧化物酶体增殖物激活受体α对氧合血红蛋白诱导的蛛网膜下腔出血大鼠血管平滑肌细胞炎性细胞因子的影响 [J], 李建;叶明;吴颐;高觉民2.核苷酸结合的寡聚结构域2激动剂与Toll样受体激动剂协同诱导血管平滑肌细胞合成促炎症细胞因子 [J], 丁彦春;曲鹏3.蛋白激酶C和蛋白酪氨酸激酶介导脂多糖及细胞因子诱导大鼠血管平滑肌细胞一氧化氮的生成(英文) [J], 韩雅玲;康建;李少华4.ERK1/2 siRNA干扰质粒对IGF-1诱导结肠平滑肌细胞产生干细胞因子的影响[J], 袁玉丰;余盈娟;林琳5.钙调磷酸酶/活化T细胞因子信号通路在有氧运动诱导高血压大鼠血管平滑肌细胞K_V2.1通道表达上调中的作用 [J], 李珊珊;柏平;吴迎;李丽;曾凡星;石丽君因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

Calponin蛋白家族在细胞骨架重构中的作用

Calponin蛋白家族在细胞骨架重构中的作用

Calponin蛋白家族在细胞骨架重构中的作用
董丽华;韩梅;温进坤
【期刊名称】《细胞生物学杂志》
【年(卷),期】2007(29)3
【摘要】Calponin蛋白家族包括calponin(CaP)和平滑肌(SM)22α,此家族的重要结构特征是由单一CH结构域和CLR结构域组成。

CaP和SM22α属于肌动蛋白细胞骨架结合蛋白,可通过与F-肌动蛋白相互作用来调节肌动蛋白细胞骨架重构,影响细胞的生物学行为,进而影响相关疾病的发生与发展。

【总页数】4页(P321-324)
【关键词】calponin蛋白家族;细胞骨架;肌动蛋白;calponin;平滑肌22α
【作者】董丽华;韩梅;温进坤
【作者单位】河北医科大学基础医学研究所,河北省医学生物技术重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】Q51
【相关文献】
1.Calponin家族在肿瘤转移过程中的作用 [J], 涂镇波;李玲;冯安林;周素芳
2.基质金属蛋白酶家族及其在心力衰竭心室重构中的作用 [J], 邓节刚;王林
3.磷酸肌醇3激酶-Rac-Nadrin通路在血小板肌动蛋白细胞骨架重构中的作用 [J], 陈静家;刘大东;庄明峰;孙炳伟
4.膜联蛋白A2在糖基化终末产物诱导的内皮细胞骨架重构及迁移中的作用 [J],
毕超;杨侠;董晓光
5.细胞骨架蛋白中ADF/cofilin蛋白家系的作用:如何与肌动蛋白结合及发挥解聚作用? [J], 田磊;廖明芳;李冀洲;姜福亭;陈学东;王育红
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绵羊钙调蛋白调节基因Calponin h1的分子克隆

绵羊钙调蛋白调节基因Calponin h1的分子克隆

绵羊钙调蛋白调节基因Calponin h1的分子克隆岳作军;宋俊芳;黄朝峰;刘海波;朱朝辉;张晓娟;张毅;谭萍萍;马润林【期刊名称】《遗传》【年(卷),期】2005(27)3【摘要】在一项研究中发现,雌激素受体在胚胎发育后期对绵羊子宫平滑肌Calponin(CaP)基因的活动有明显上调作用,而CaP-直被作为观察其他基因表达水平变化的基准参照基因(Reference Gene).迄今为止,绵羊CaP尚未完整克隆,为进一步了解其结构和功能,根据人、小鼠和家猪的同源保守区序列设计锚定寡核苷酸引物,通过5′-RACE及3′-RACE方法克隆了绵羊子宫平滑肌组织全长CaP h1 cDNA(GenBank登录号:AY327118),在cDNA序列的基础上,又通过PCR-SSP方法获得了CaP h1基因除内含子1、2之外的其余4个内含子全部序列(GenBank 登录号分别为:AY771807,AY771808,AY771809,AY771810).DNA序列测定和分析表明,绵羊子宫平滑肌CaPh1 cDNA全长1499 bp,编码297个氨基酸,5′-UTR 及3′-UTR分别为79 bp和529 bp.CaP h1基因组DNA的克隆和序列分析表明,绵羊CaP全长约8kb,由7个外显子和6个内含子组成.同源序列比较发现,该基因外显子在不同物种间相对保守;与人类、野猪、小鼠、大鼠和鸡Caiponin mRNA 同源性分别为88%、92%、81%、79%和81%,但不同物种间内含子存在较大差异(>50%).填补了绵羊CaP基因分子克隆的空白,为进一步研究该基因的功能及子宫平滑肌收缩的调节机理奠定了基础.【总页数】6页(P357-362)【作者】岳作军;宋俊芳;黄朝峰;刘海波;朱朝辉;张晓娟;张毅;谭萍萍;马润林【作者单位】中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101【正文语种】中文【中图分类】Q958【相关文献】1.成骨细胞特异性过表达h1 calponin转基因小鼠的建立 [J], 陈锚锚;苏楠;赵子瑜;雷子贤;赵玲;李福兵;陈林2.大鼠抗Thy-1系膜增生性肾炎TGF-β1和calponin h1表达变化的初步研究 [J], 李慧;蒋涛;杨静;赵仲华;张秀荣;张农3.绵羊Otx-2基因的分子克隆、组织表达及其与季节性繁殖关系的研究 [J], 郭若婷;鲁慧文;欧科鹏;王颖;刘乙;顾真真;刘小军4.绵羊黄体期卵巢类固醇激素调节基因的表达研究 [J], 应诗家;彭中友;李燕;蔡柳萍;施振旦5.绵羊透明质酸酶2的基因分子克隆及序列分析 [J], 张月梅;么宏强;斯日古楞;马学恩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

Claudin-1通过激活ERK12蛋白促进肺动脉平滑肌细胞的增殖

Claudin-1通过激活ERK12蛋白促进肺动脉平滑肌细胞的增殖

Claudin-1通过激活ERK1/2蛋白促进肺动脉平滑肌细胞的增殖背景肺小血管重构是肺动脉高压(Pulmonary arterial hypertension)发生发展的重要病理基础。

肺动脉平滑肌细胞的异常增殖是参与肺小血管重构的主要机制之一。

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是参与肺动脉高压发展的一种重要的促炎细胞因子。

TNF-α能促进多种细胞中Claudin-1(CLDN1)的表达,而CLDN1参与细胞的增殖调控。

因此,我们提出假设:CLDN1可能通过调控肺动脉平滑肌细胞的增殖参与肺小血管重构的发生及发展,从而造成肺动脉高压的不可逆改变。

方法使用野百合碱(monocrotaline,MCT)腹腔注射建立肺动脉高压大鼠模型。

通过免疫印迹(Western blot)及免疫荧光染色的方法检测肺动脉高压大鼠及患者肺组织中CLDN1的表达。

NF-κB抑制剂BAY11-7082预处理人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs),TNF-α刺激HPASMCs,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western-blot分别检测CLDN1 mRNA及蛋白表达水平。

通过腺病毒感染上调CLDN1及小干扰RNA(siRNA)转染下调CLDN1表达以探讨CLDN1在HPASMCs增殖中的作用。

同时应用CCK-8测定及BrdU掺入法两种方法检测细胞增殖率。

Western blot检测ERK1/2磷酸化。

结果肺组织石蜡切片免疫荧光染色结果显示肺动脉高压大鼠及患者肺组织中肺动脉平滑肌CLDN1表达较正常对照组明显增加;TNF-α促进原代人肺动脉平滑肌细胞中CLDN1的表达;NF-κB抑制剂BAY 11-7082抑制TNF-α所诱导的CLDN1升高。

CLDN1过表达促进人肺动脉平滑肌细胞的增殖,下调CLDN1则抑制TNF-α所诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖。

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Calponin-1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响谷永红1,周昌菊2,胡灵玉2,陈倩1,张卫社3(中南大学湘雅三医院1病理科,2妇产科,湖南长沙410013;3中南大学湘雅医院妇产科,湖南长沙410008)摘要:目的研究抑制calponin-1表达对人子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡和细胞骨架的影响,探讨妊娠时人子宫平滑肌细胞中calponin-1蛋白表达上调在分娩发动中的作用机制。

方法构建腺病毒siRNA-calponin-1质粒,转染原代培养的人子宫平滑肌细胞,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT )、Transwell 侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV/PI 双染法)检测转染siRNA-calponin-1前后对子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响;同时用Rhodamine-Phalloidin 标记子宫平滑肌细胞骨架蛋白(F-actin ),荧光显微镜观察其变化并进行荧光定量检测。

结果实验组与空载体组、空白对照组比较,子宫平滑肌细胞的运动能力明显下降(P <0.05),细胞增殖能力及凋亡率无明显差异(P >0.05);空载体组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P >0.05)。

实验组子宫平滑肌细胞中F-actin 的含量减少,排列松散、不规则、微丝较细;空载体组、空白对照组子宫平滑肌细胞中F-actin 微丝明显增多增粗、呈束状平行排列。

结论体外实验表明抑制calponin-1的表达可以抑制子宫平滑肌细胞的运动而不影响其增殖和凋亡,并可引起子宫平滑肌细胞F-actin 的形态变化与重排。

此结果提示:妊娠时子宫平滑肌细胞迁移能力的改变及F-actin 的重排,可能是导致分娩发动的重要机制之一。

关键词:calponin-1;RNA 干扰;分娩发动中图分类号:R329.28文献标识码:A文章编号:1673-4254(2010)06-1369-04Effects of calponin -1gene silencing on the biological behavior of uterine smooth muscle cellsGU Yong-hong 1,ZHOU Chang-ju 2,HU Lin-yu 2,CHEN Qian 1,ZHANG Wei-she 31Department of Pathology,2Department of Obstetrics and Gynecology,Third Xiangya Hospital,Central South University,Changsha410013,China;3Department of Obstetrics and Gynecology,Xiangya Hospital,Central South University ,Changsha 410008,ChinaAbstract:Objective To study the effects of calponin-1expression inhibition on the proliferation ,invasiveness,apoptosis and cytoskeleton of uterine smooth muscle cells,and explore the molecular mechanism of calponin-1in the uterine smooth muscle cells for labor onset.Methods siRNA-calponin-1adenovirus plasmid was constructed and transfected into primarily cultured uterine smooth muscle cells.The proliferation,invasiveness and apoptosis of the cells were determined by MTT assay,matrigel invasion assays and flow cytometry,respectively.Rhodamine-Phalloidin was used for labeling filamentous actin (F-actin),and the morphology and the distribution of F-actin was observed under fluorescence microscopy and analyzed quantitatively.Results The motor ability of uterine smooth muscle cells decreased significantly after transfection with siRNA-calponin-1adenovirus plasmid (P <0.05).The transfected cells showed thinner,loosened and irregular F-actin microfibers,and the cells in the empty vector and blank control groups showed thicker and longer F-actin microfibers.Conclusion Inhibition of calponin-1expression can inhibit uterine smooth muscle cell migration and cause the morphological change and rearrangement of F-actin without affecting its proliferation and apoptosis in vitro ,suggesting that the morphological change and rearrangement of F-actin of uterine smooth muscle cell may be one of the important mechanisms in the labor onset.Key words:calponin-1;small interfering RNA ;labor onsetcalponin-1是平滑肌能量和信号传递系统的重要组成部分。

它主要的功能包括调节平滑肌收缩、抑制细胞增生、参与细胞信号转导和维持细胞骨架等。

我们在前期的研究中发现,calponin-1在分娩活跃期子宫体部与子宫下段平滑肌细胞中表达均上调,由此推测calponin-1与分娩发动后子宫平滑肌的收缩有必然联系,可能是分娩发动的调节因子。

我们应用RNA干扰(RNA i )技术构建calponin-1重组腺病毒质粒,并转染原代培养的人子宫平滑肌细胞,观察抑制calponin-1表达对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响,进一步探讨妊娠时人子宫平滑肌细胞中calponin-1蛋白表达上调在分娩发动中的作用机制。

1材料与方法1.1材料细胞培养、质粒构建及细胞转染等所用材料及试剂见参考文献[1-2]。

其他主要试剂:Transwell 小室(Corning Costar ,美国),四甲基偶氮唑蓝(MTT )(Amresco ,美国),AnnexinV-Cy5/PI Assay Kit (深圳晶收稿日期:2009-12-05基金项目:湖南省科技计划项目(2008SK3116)作者简介:谷永红(1966-),女,博士,副主任医师,E-mail:guyonghong0815@通讯作者:周昌菊,女,主任医师,E-mail:huangdong6619@2010;30(6)南方医科大学学报(J South Med Univ)1369··图1Transwell 侵袭实验检测转染前后子宫平滑肌细胞的侵袭能力A:RNAi +;B:RNAi -;C:PBSRNAi +RNAi -PBS150100500细胞数A BC美),DMEM (Gibco ,美国),TritonX-100(Sigma ,美国),Matrigel 基质胶(BD ,美国),Rhodamine-Phalloidin (Molecular Probes ,美国),核染试剂Hoechst (Sigma ,德国),CO 2细胞培养箱(长沙长锦科技),免疫荧光显微镜(Axioskop2Plus,德国),图像分析软件(LaserPix,Version4.0,Media Cybernetics.LP,美国)。

1.2方法1.2.1实验分组实验分3组实验组(calponin-1RNAi+组):pShuttle -mU6pro-calponin-1-siRNA 处理的细胞;空载体组(calponin-1RNAi-组):pShuttle-mU6pro-control-siRNA 处理的细胞;空白对照组:PBS 处理的细胞。

细胞培养、质粒构建、细胞转染、转染效率检测等见参考文献[1-2]。

1.2.2Transwell 小室侵袭实验先将Matrigel 预先用4℃的DMEM 稀释至200μg/mL ,取200μl 稀释的DMEM 置于孔径为8μm 的Transwell 的聚碳脂膜上,使膜上所有的微孔被Matrigel 覆盖,37℃过夜干燥。

取处理干扰后的子宫平滑肌细胞细胞,按细胞数2×104加入每个小室,培养基用无血清的DMEM ,放置于配套的24孔板上。

下室加入无血清DMEM 培基。

5%CO 2、37℃孵育24h ,取出小室,用棉签擦尽上室面的Matrigel 和细胞,下室面用甲醇固定10min 后,常规HE 染色,置光镜下观察。

随机取5个高倍镜视野,计数小室下室面的细胞数即为穿透Matrigel 的细胞数,实验重复3次,取平均数作为实验结果。

1.2.3MTT 法检测细胞生存率用含10%特级胎牛血清的DMEM 培养液配成单个细胞悬液,以每孔4000个细胞接种到96孔板,每孔体积200μl ,培养5d 。

从培养第2d 开始,每天取6孔用于比色。

于转染24、48、72h 后每孔加MTT 溶液(5mg/mL)20μl ,继续孵育4h ,弃上清,每孔加150μl DMSO ,振荡10min 。

选择490nm 波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值(OD 值),重复三次实验取其均值,并按公式计算细胞存活率:细胞存活率﹦(实验组OD 值-空白组OD 值)/(空载体组OD 值-空白组OD 值)×100%]。

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