禽支原体病

安伟捷技术指导

TS2004-10

美国安伟捷育种公司

北京代表处顾敏清(编译)

禽支原体病

败血性支原体(MG)和滑液支原体(MS)是一种没有细胞壁的细菌，可以感染鸡和其它家禽, 在某些情况下引发疾病。有些感染虽不表现临床症状但仍对生产造成影响，譬如：减少总产蛋/产雏数或降低肉鸡生产性能。

败血性支原体(MG)通常更易致病，因而比滑液支原体（MS）对生产造成的影响更大。然而，不同的种类和分离株之间的特性差异很大，包括毒力与动力学血清学反应。疾病的表现（和血清学反应）受其它许多因素如管理，环境和免疫力的影响而不同。

支原体导致的临床疾病通常是呼吸道疾病，单纯的感染大体上可见到气囊炎，（见图1）。有时也会见到关节炎，气管炎，窦肿胀和结膜炎，（见图2）。肉鸡感染MG 和MS会增加屠宰次品率。父母代种鸡产蛋期感染MG和MS会降低产蛋率，胚胎气囊炎及后期死胚增加（已啄壳的胚胎可看到气囊炎）。在商品蛋鸡中，无临床症状下感染MG预计每只入舍母鸡可减少产蛋10-20枚。

图1. 经实验：同时感染MS和传染性支气管炎10天后的气囊炎

在呼吸道病毒，灰尘，氨气和条件性致病菌（如大肠杆菌及类似细菌）的相互作用下，MG和MS都能使呼吸道疾病恶化。这样就导致慢性呼吸道病（CRD）的发生，死淘率有所提高，这通常称之为大肠杆菌性败血症。良好的空气质量和足够的最小通风量具有保护作用。（见图3）。

图2. 肉用父母代种鸡野外感染MS并发病毒性关

节炎的情形。MS的有些毒株更易引发腿病问题。

MG在许多国家是官方控制与监测的疾病，但MS 则常常由企业自主控制。育种公司会控制MS，但这种控制会减少下一代次的产蛋性能。在商品蛋鸡常常很难控制MS的感染，因为产蛋期间鸡群通常被置于多个年龄的鸡场中，也是其它鸡群转群后留下的感染源。因为邻近的商品蛋鸡有可能就是一个巨大的感染源，所以肉用父母代种鸡群在控制MS的方式方法方面是一个重大问题。

自从发现MG在鸡群呼吸道病中的重要性后，家禽业想方设法来生产无MG感染的鸡群。由于MG的垂直传播，传统的诊断方法不能诊断所有感染鸡群，有些感染缺乏临床症状，慢性自然感染的状态以及抗生素无法可靠地消除感染等等使控制MG变得甚为复杂。

无细胞壁的支原体意味着它非常脆弱，并且离开鸡体会很快死亡。作用于细胞壁的抗生素如青霉素,头孢霉素对支原体没有效果。支原体对四环素，泰乐菌素，泰妙菌素，喹诺酮类（恩诺沙星）较敏感，但这些抗生素大多数是抑菌性的而非杀菌性的抗生素。抗生素有多种给药途径如注射，饮水或添加于饲料中，大多数药物会产生抗药性。磺胺类药物现已被限制使用。一般来说，抗生素不能根除支原体感染但可以减轻临床症状和减少支原体数量。我们必须认识到鸡群一旦发生感染，这种感染会伴随鸡群整个一生，这样对未感染的鸡群就是一种威胁。

为防止垂直传播，原种鸡群就要根除MG和MS并要进行连续监测。无支原体鸡群来源是控制支原体的第一步。

败血性支原体（或滑液支原体）

大肠杆菌灰尘、氨气

沙门氏菌呼吸道病毒

空气质量差

图3. 多种因素的相互影响发展成慢性呼吸道疾病。这样一个模式对控制支原体

有助于降低CRD导致的死亡率和其它损失，同时控制其它相关因素也会有作用。

如果生物安全控制的非常好就有可能防止水平传播。支原体在鸡群中的感染主要是通过气源性传播，接触其它家禽，人员的机械性传播或者是这些因素共同作用所致。距离能尽可能地保护鸡群免受气源性感染。鸡群与鸡群之间MS的传播距离似乎比MG远的多。与鸡群密切相关的其它禽类如火鸡，珍珠鸡，鹧鸪，野鸡，鹌鹑，鸭等等都是鸡群感染支原体的最大威胁。机械性传播也是可能的：人类鼻孔和头发上携带的支原体可存活三天。洗澡和必要的检疫隔离时间可有助于防止这种传播。

某些管理方法如替换公鸡能造成鸡场内传播支原体。必须采取预防措施及检测试验以减少这些管理程序造成传播感染的危险。

生物体检测诊断

细菌培养和聚合酶链式反应（PCR）试验是目前最好的确诊试验。气管或鼻管棉试放入支原体培养基后送实验室。这种样品或风干的棉试也能进行PCR测定。（见图4）。

图4. 干棉试PCR试验取样。

有些家禽支原体是无致病性的，所以培养后进行特异性鉴定对判定问题是十分必要的。可以用特定抗体进行鉴定。培养支原体时培养基中必须有额外的烟酰胺腺嘌呤二核杆酸（NAD）。

图5. 支原体菌落具有典型的煎蛋型外观，支原体种

类应进行鉴定因为无致病性的支原体也能感染鸡群。

支原体培养比较特别，并不是任何地方都能轻易做到

。

如果在实验室进行PCR试验时不小心会使样品受到污染，就会出现PCR试验假阳性反应。例如，所收集的一日龄苗鸡样品的PCR试验结果阳性，但是种鸡群常规的血清学监测却是阴性，很可能PCR的结果不正确。对PCR试验方案要持怀疑态度。最近的环状试验（试管凝集试验）7家实验室中有5家被报告MG PCR试验有假阳性反应。（图6-PCR试验例子）。

图6. 支原体PCR带显示样品中特定的支原体。许

多不同的支原体也会产生PCR试验反应,但是,如

果不是特定品种,试验结果与临床样品不能确定。

血清学监测

对鸡群的MG和MS感染情况的日常监测通常采用RSA（快速血清凝集试验），RSA（也被称作平板试验SPA）或ELISA试验。在高风险地区通常建议每3周检测一次，以便发现问题时可以把种蛋从孵化器中取出销毁，免疫接种死苗后3周内不应进行检测因为常常会产生假阳性反应。RSA试验应将血清在72小时之内进行并小心处理样品尽可能减少假阳性反应。对血清进行热处理（56度30分钟）是普遍的操作方法可以使试验时血清反应与滴定更积极。MS和MG都要进行检测，因为新近感染的MS会引起MG假阳性反应。RSA试验出现少量反应时对鸡群进行隔离检疫并且用血清学或PCR重新检测或进行细菌培养以确认结果。当出现大量阳性反应时（热处理后大于15%的样本出现阳性）鸡群很可能真正感染了支原体，应该采取适当的隔离措施并进行确认检测。

蛋黄样本可以被用来进行ELISA试验而且比较实用，特别是由于生物安全原因而不能接近种鸡群时。检测一日龄苗鸡的血清尚存在一定的问题，但所有样本试验应进行热处理或假阳性比例明显地超过15%时。

不要依赖于一日龄雏鸡的血清检测结果，假阳性的结果非常常见。

RSA试验需要全方位的质量控制以确保操作准确，（见图7）。通常抗原应用标准的冻干阳性（和阴性）血清滴定。新批号抗原应该进行检测以确信抗原的特异性是否适合需要。不适合的抗原退还给厂家。

图7. 4+血清凝集试验