马铃薯茎尖组织脱毒培养应用及前景1
马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点#亚龙组培分享#
马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点在马铃薯栽培过程中,植株的逐年变小,叶片皱缩卷曲,叶色浓淡不均,茎块变形龟裂,产量逐年下降等现象。
就表明马铃薯已经发生“退化”,种薯“退化”是其产量降低和商品形状变差的主要原因。
科学家经过对马铃薯“退化”深入的研究,最终明确了病毒的侵染及其在薯块内积累是马铃薯“退化”的主要原因。
目前应用最广泛而且在农业生产和商业生产中取得巨大成功的植物脱毒技术,是生物技术中的植物茎尖分生组织培养脱毒技术,也就是马铃薯脱毒种薯生产中常说的“茎尖脱毒”,此项技术是根据植物细胞全能性学说、病毒在植株体内分布不均匀及茎尖分生组织带毒少的原理,结合使用钝化病毒的热处理方法,通过剥取茎尖分生组织进行培养获得脱毒植株,从而获得脱毒马铃薯。
现将马铃薯茎尖组织培养脱毒技术介绍一下,仅供参考。
@亚龙组培1.马铃薯茎尖组织培养脱毒技术1.1选择优质健康的材料田间选择要注意这样几方面的事项:所选的植株必须是表现典型的本品种特性的植株,符合准备脱毒品种的特征包括株型、叶形、花色等植物学性状及成熟期等农艺性状;植株生长健壮,无明显的病毒性、真菌性、细菌性病害症状;单株产量和大薯率高,适时早收,选择符合品种特性,无病斑、虫蛀和机械创伤的大薯块。
1.2 选择培养基一般MS培养基适用于大多数双子叶植物,B5和N6适合大多数单子叶植物,马铃薯茎尖培养基以MS+GA30.05mg/l+6-BA0.5-0.1mg/l+NAA0.1-0.2mg/l+2%蔗糖+0.9%琼脂效果比较好。
1.3 剥离和接种将薯块经渡过休眠后进行室内催芽,待芽长至1~2cm还未展叶时,将芽剪下,然后将其放入烧杯,用纱布封口,在自来水下冲洗半个小时,取出放到操作台上进行消毒。
消毒方法是将芽在75%的酒精中过一遍(约20秒),然后用次氯酸钠溶液稀释为2%~3%,浸泡2分钟,然后用无菌水清洗3~5次。
将消毒过的芽放在垫有吸水纸的培养皿上,每次消毒的芽不要太多,以防放置时间过长,茎尖褐变(消毒过程中所用器具均已事先高温灭菌)。
马铃薯茎尖培养脱毒快繁技术及产业发展优势
马铃薯茎尖培养脱毒快繁技术及产业发展优势作者:田凤芝王萍来源:《吉林蔬菜》2016年第06期随着农业产业结构的调整,我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加。
但在连年的栽培过程中,病毒在马铃薯植株中易系统感染,能阻碍病毒增殖的药剂往往也会影响寄主植物的代谢系统,到目前为止,还没有像防治病虫害一样能有效防治植物病毒病的化学剂。
病毒的侵染及其在薯块内积累引起了马铃薯的退化,马铃薯退化后一般减产20%~30%,严重者减产80%以上。
随着病情逐年加重,严重者失去发芽能力,最后失去利用价值,给马铃薯生产带来十分严重的危害,将使得栽培面积及产量难以进一步提高。
采用无病毒植株是解决马铃薯退化的有效途径,获得无病毒植株的途径有自然选择、物理学方法、化学药剂处理和生物学方法。
最行之有效的方法便是生物学方法中的茎尖脱毒。
马铃薯茎尖脱毒的效果最好,其原理是利用病毒在植物体内分布的不均匀性,即根尖和芽尖的分生组织含病毒量少或不含病毒的特性。
导致这一现象的原因可以由以下因素引起:①分生组织旺盛的新陈代谢活动。
病毒的复制须利用寄主的代谢过程,无法与分生组织旺盛的代谢活动竞争。
②分生组织缺乏真正的维管组织。
大多数病毒在植株内通过韧皮部进行迁移,或在细胞间通过胞间连丝传输,因为细胞与细胞间的移动速度较慢,在快速分裂的组织中病毒浓度高峰被推迟;③高浓度的生长素。
分生组织的生长素浓度通常很高,可能影响病毒的复制。
根据这些原则,利用茎尖组织培养,获得了无病毒植株。
现在几乎所有马铃薯生产区都在使用茎尖脱毒技术,去除了主要病毒,恢复了原品种的特征特性,有效解决了马铃薯退化的问题。
1 脱毒种薯生产过程采用微茎尖组织培养的方法,诱导出苗,采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒,鉴定后,无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。
采无菌条件下采用固体、液体培养基相结合的方法,进行扩繁基础苗,在防虫网室栽植或封闭温室扦插,生产出原原种(脱毒小薯)。
马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展
马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展第一组:郭保密、尹韵绮、张岳摘要:马铃薯茎尖脱毒技术的应用克服了马铃薯的病毒病和类病毒病的危害,是目前解决马铃薯退化最为有效的途径。
文章从马铃薯茎尖脱毒的原理、过程以及影响病毒去除的因素等方面进行了综述,以期为马铃薯茎尖脱毒技术的深入研究提供一定的理论依据。
关键词:马铃薯;茎尖脱毒;病毒类型;影响因素栽培种的马铃薯(Solanum tuberosumL.,2n=48)是双子叶种子植物,属茄科(Solanceae)茄属(Solanum)的一年生草本植物,生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖[1]。
马铃薯栽培种起源于南美洲秘鲁以及沿安第斯山脉智利沿岸、玻利维亚等地,在五大洲140多个国家都有种植和分布。
2004年国际马铃薯中心(CIP)和国际食品政策中心(IFPRI)合作研究表明,在世界范围内,到2020年对马铃薯的需求将有望增长40%,超过水稻、小麦和玉米的增长。
特别是在亚洲和非洲,对马铃薯的需求将增长更快[2]。
随着农业产业结构的调整,我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加,到2010年,我国马铃薯种植面积达到600万hm2,产量达到1.8亿t[3]。
但在连年的栽培过程中,病毒或类病毒不断的侵染和积累,而病毒在马铃薯植株中是系统感染,能阻碍病毒增殖的药剂往往也会影响寄主植物的代谢系统,到目前为止,还没有像防治病虫害一样能有效防治植物病毒病的化学药剂。
病毒的侵染及其在薯块内积累引起了马铃薯的退化,马铃薯退化后一般减产20%~30%,严重者减产80%以上[4]。
随着病情逐年加重,严重者失去发芽能力,最后失去利用价值,给我国马铃薯乃至世界马铃薯生产带来十分严重的危害,使得栽培面积及产量难以进一步提高[5]。
在我国主要侵染马铃薯的病毒有7种,它们是PVX、PVY、PVS、PVM、PAMV、PAV、PLRV[6],其余侵染马铃薯的病毒是来自其它寄主植物的病毒。
采用无病毒植株是解决马铃薯退化的有效途径,获得无病毒植株的途径有自然选择、物理学方法、化学药剂处理和生物学方法[7]。
植物组织培养脱毒快繁技术在马铃薯育种中的应用
植物组织培养脱毒快繁技术在马铃薯育种中的应用摘要:脱除病毒是植物组织培养深入探讨研究中的一个技术难题。
本文简要介绍植物组织培养的基本原理和方法,综述植物脱除病毒的热处理、茎尖培养和抗病毒药剂三种方法的原理和技术方法,介绍了几种常用的病毒检测方法。
本文以马铃薯为例,重点介绍了利用热处理加茎尖组织培养法获得马铃薯脱毒苗的具体技术方法,脱毒率可达100%。
同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了分析。
关键词:茎尖培养,脱毒快繁技术,病毒检测,应用前景.1.脱毒技术及其原理植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分,在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物,脱除病毒得到无毒苗株,继而在大田快速繁殖的技术。
脱毒及离体快繁,是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。
现在植物的脱毒技术有多种,其中应用最广泛的有三种:热处理法、茎尖培养脱毒法、抗病毒药剂法,将不同的方法相结合起来应用效果更好。
1.1 热处理法1.1.1 概述热处理法是利用病毒和寄主植物对高温的忍耐性的差异,使植物的生长速度超过病毒的扩散速度,得到一小部分不含病毒的植物分生组织,然后进行无毒个体培育。
热处理可通过热水浸泡或湿热空气进行。
热水浸泡对休眠芽效果较好,湿热空气对活跃生长的茎尖效果较好,既能消除病毒又能使寄主植物有较高的存活机会。
热空气处理比较容易进行,把旺盛生长的植物移入到1个热疗室中,在35~40℃下处理一段时间即可,处理时间的长短,可由几分钟到数月不等[3] 。
热处理的方法有恒温处理和变温处理,处理的材料可以是植株,也可以是接穗。
1.12原理热处理脱毒是根据病毒与寄生细胞对高温的忍耐程度不同,选择适当的温度和处理时间,植物组织中的很多病毒被部分地或完全地钝化而可控制其的活动,但很少伤害甚至不伤害寄主组织,从而让植物细胞加快生长,使生长点附近不带病毒,从而达到脱毒的目的。
1.2 茎尖培养脱毒法1.2.1 概述茎尖培养脱毒就是采取茎尖分生组织离体培养的方法获取无病毒试管苗,其方法是在解剖镜下,用解剖刀进行迅速准确地茎尖剥离,因为茎尖分生组织基本不带病毒,利用植物茎尖分生组织进行离体培养,再结合病毒检测,就可以获得无病毒的植株。
马铃薯脱毒种薯应用及发展的思考
由于现代社会市场经济的迅速发展,马铃薯脱毒种薯在现实种植业中的运用也越来越普遍,在一定程度上,这一应用有效解决了因马铃薯病引起的产品质量不高的实际问题,进而有效增加了马铃薯种植业生产。
因此,马铃薯栽培中,深入研究脱毒薯栽培体系,包括种植、田间管理、收薯和储存等关键技术,推动地区主导产业发展壮大,为农户提供更多的效益,推动当地市场经济蓬勃发展。
马铃薯的适应性很强,宜粮宜菜,且养分全面,为全球第三大经济效益粮食作物。
我国作为马铃薯主要栽培的国家,栽培面积约为全球国土面积不到29.65%,而单产水平却不及全球均产15.6%,而导致这一现象产生的主要因素,便是我国马铃薯脱毒种薯的应用并没有得到很好的发展。
因此,此文主要针对马铃薯脱毒种薯的应用给出了一点认识,并对脱毒薯种的研究开发给出了一点思路,以供马铃薯从业人员阅读与借鉴。
一、关于马铃薯脱毒种薯1、马铃薯脱毒的起因马铃薯为无性繁殖粮食作物,生长过程中更易于带有并积聚病毒、类病毒、菌类、细胞等病原。
真菌类病原虽可以采用化学方式预防,但病毒却无有效药物抑制,因而会逐代生长、累积,从而引起种类衰退,致使马铃薯的生产大幅度降低,商品性也大为减少,使马铃薯的种类缺乏优种特性,无法持续地在生产上使用,如不处理,会对马铃薯产品带来致命危害。
必须利用各种技术手段,获得不带病毒、类病毒的脱毒马铃薯种子并运用于农业生产,才能从根本上解决这一问题。
2、脱毒种薯技术体系及分级标准为了克服因马铃薯病毒病造成的种薯退化问题,研发中心技术人员开展了各种途径的科技研究,通过了多次实验,目前在全球各地使用的最为普遍的技术开发体系为:利用茎尖组织培育工艺技术、病毒查杀工艺技术,获得了不带病毒的脱毒试管苗;脱毒试管苗利用组织培育及切段扦插等快繁工艺技术大规模繁育;而大规模繁殖后代的试管苗在综合无土壤基质栽培技术,产出大批脱毒微薯种子(简称微型薯)后,以微薯作为脱毒种薯的原原种,直接进入大田薯种繁育系统以实现对脱毒薯种子的繁殖。
马铃薯脱毒种薯的应用及发展思考
马铃薯脱毒种薯的应用及发展思考作者:庞淑敏方贯娜张新岭来源:《科学种养》2018年第12期马铃薯适应性广,宜粮宜菜,营养全面,是世界第三大粮食作物。
我国是马铃薯种植第一大国,种植面积占世界总面积的29.6%,但单产水平低于世界均产15.6%,造成这一局面的重要原因之一就是马铃薯脱毒种薯的应用不够深入广泛。
本文针对马铃薯脱毒种薯的应用提出一些看法,同时对脱毒种薯的发展提出一些思考,以供马铃薯从业者阅读参考。
一、关于马铃薯脱毒种薯(一)马铃薯脱毒的起因马铃薯是无性繁殖作物,繁育过程更易携带和积累病毒、类病毒、真菌、细菌等病原。
真细菌类病原能够通过化学方法防治,而病毒却无有效药剂控制,因此会逐代增殖、积累,导致品种退化,造成马铃薯的产量大幅度降低,商品性大幅下降,使马铃薯品种失去优良种性,无法长期在生产上应用,如不解决,会对马铃薯产业造成致命影响。
通过各种技术手段,获得不带病毒、类病毒的脱毒种薯并应用于生产,可以从根本上解决这一问题。
(二)马铃薯脱毒种薯繁育技术体系及种薯分级标准为解决马铃薯病毒病引起的种薯退化问题,研究人员进行了多种途径的技术探索,经过多年实践,目前世界各国应用最广泛的技术体系是:通过茎尖组织培养技术、病毒检测技术获得不带病毒的脱毒试管苗;脱毒试管苗通过组织培养切段快繁技术大量繁殖;大量繁殖后的试管苗结合无土基质栽培技术生产脱毒微型种薯(简称微型薯),以微型薯为脱毒种薯的原原种,进入大田种薯繁育体系进行脱毒种薯的繁育。
我国已制定脱毒种薯的国家标准(GB18133-2012),根据这一标准,我国脱毒种薯的级别分为原原种(微型薯)、原种、一级种、二级种四个级别。
二、客观认识及合理应用马铃薯脱毒种薯(一)客观认识马铃薯脱毒种薯马铃薯种薯是农业生物技术的产物,脱毒种薯的推广和应用已经成为马铃薯生产的发展趋势,但仍有部分种植者对马铃薯脱毒种薯的优势、潜力以及应用缺乏客观认识,生产中无法正确应用脱毒种薯,因而不能很好地发挥出脱毒种薯的增产潜力。
马铃薯脱毒技术
二、马铃薯无病毒苗的鉴定材料
1、指示植物鉴定 在马铃薯的病毒鉴定中,汁液鉴定是最常用的 方法,X病毒、S病毒和纺锤块状病毒很容易通 过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红, 茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫 网室中培养。 3.接种液制备及接种 放置防虫室中,一般5-10d可发病。
用微茎尖组织培养法,诱导出苗,联免疫
吸附法或指示植物法鉴定马铃薯病毒,经 鉴定后无主要病毒的试管苗可定为脱毒试 管基础苗。
试管基础苗在无菌条件下,采用固体、液 体培养基相结合的方法,进行扩繁基础苗, 在防虫网室栽植或封闭温室扦插,生产出原
原种(或称脱毒小薯)。用原原种在一定隔 离条件下产生原种1代,以后逐级称为原种2
25 ℃ ,3000-4000LX,14-16h/d,每3周继代一次,单 芽茎段约1cm,可插也可平放,原则试管苗用2年-3年。
(3) 驯化移植
3. 脱毒苗切繁
基础苗成活后便可切繁,但切繁量的多 少和质量的高低,除与水与温湿度条件有
关外,正确的切繁方法和适宜的切繁苗龄
也非常重要。脱毒苗切繁主要是剪取顶部
三、马铃薯无病毒株的繁殖和保存
通过茎尖培养只能得到很少的无病毒植 株,而生产上需要数以万计的健康种薯。 同时无病毒植株并没有对该病毒获得免疫 能力,仍会在繁殖中再次侵染。如何在以 后繁殖中防止受病毒再侵染是很关键的一 环。 繁殖主要: (1) 直接块茎繁殖 (2) 扦插繁殖 (3) 组织培养切段繁殖 A:继代培养 B:低温保存
3--6月长成2-3cm小芽。
(2) 继代和生根
脱毒苗经ELISA(试剂盒)鉴定 后,采用固、液培养基相结合方法 扩繁。取试管苗单节切段扦插, 每瓶插20个茎段,20d长成5-10cm 高小植株,继续切段繁殖,每月可繁5~8倍。 试管苗多 节接种进行浅层静止液体培养。 培养基: MS+NAA
浅谈脱毒马铃薯高产栽培技术
浅谈脱毒马铃薯高产栽培技术脱毒马铃薯是指通过特殊的处理方法将马铃薯繁殖材料中的病毒、细菌和真菌等病原体去除或减少到一定数量以下的一种农业生产材料。
获得脱毒马铃薯后,再通过高产栽培技术的应用,可以有效提高马铃薯的产量和质量,从而提高农民的收益。
本文将从脱毒马铃薯的意义、处理方法和高产栽培技术三方面进行浅谈。
一、脱毒马铃薯的意义脱毒马铃薯的意义主要体现在以下两个方面:1.降低病害风险。
马铃薯是我国重要的粮食作物之一,但由于长期种植和疾病传播,容易受到多种病害的侵害,如马铃薯块茎疱痨病、疫病、早疫病等。
而脱毒马铃薯经过处理后,可以有效减少病原体的传播,降低病害的发生,提高马铃薯的产量和质量。
2.提高经济效益。
种植脱毒马铃薯可以有效提高马铃薯的产量和品质,从而增加农民的收益。
还可以通过脱毒马铃薯育种,培育出新的高产、抗病种质资源,为我国的农业生产提供更多的选择。
获得脱毒马铃薯有多种方法,一般分为生理处理和化学处理两大类。
1.生理处理生理处理是指利用植物生理学理论和实验手段对马铃薯种薯进行生物处理。
常用的生理处理方法有:(1)热水处理。
将种薯放入温水中浸泡,使种薯温度升高,通过温水对抗病毒的作用,去除种薯中的病毒。
(2)生长调节剂处理。
利用生长调节剂对种薯进行处理,如赤霉素、谷氨酸,通过生长调节剂的调控作用,去除种薯中的病毒。
2.化学处理化学处理是指通过用化学药剂对种薯进行处理,去除或减少种薯中的病毒。
常用的化学处理方法有:三、脱毒马铃薯高产栽培技术脱毒马铃薯获得后,如何进行高产栽培是农民关注的焦点。
下面将介绍几种脱毒马铃薯高产栽培技术。
1.栽培地选择马铃薯对土壤的要求比较简单,但是还是对土壤的肥力有一定的要求。
土壤肥力有没有达到一定的标准不适合种植马铃薯等作物。
马铃薯象征着农民的希望,所以应该选择土质肥沃、排水性好,阳光充足、温暖的地方进行种植。
2.肥料施用肥料要选择生产厂家生产的脱毒马铃薯专用肥料最好,其次是通用的马铃薯专用肥料。
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广
脱毒马铃薯种植技术是在保障农业生产质量与效益的前提下,利用现代生物技术手段对马铃薯进行病毒检测、预防和治疗,从而实现马铃薯病毒的消除或降低,降低马铃薯种植的风险和成本的一种种植技术。
脱毒马铃薯技术的优势:
1、提高种薯质量。
经过脱毒处理的种薯,不但无毒、无病,而且茎木生长繁茂、塔田输出多、地下结节健壮,可大大增加马铃薯的产量和质量。
2、减少种植成本。
脱毒马铃薯生长周期短、生长势旺、抗逆性强,能适应不同环境条件,降低了农民的种植成本。
3、保障食品安全。
脱毒马铃薯不含有害微生物和病毒,更能保障食品安全。
4、促进经济持续发展。
脱毒马铃薯种植技术能提高农民收入,养活更多人口,促进经济稳定和社会发展。
推广脱毒马铃薯种植技术的方法:
1、建立脱毒马铃薯示范基地。
可以通过对基地的产品、技术等方面的展示,吸引更多的农民参与脱毒马铃薯种植,增加其信心。
2、开展培训。
通过开展脱毒马铃薯种植技术的专题培训班,让更多的农民掌握脱毒马铃薯的种植技术和管理知识,提高其脱毒马铃薯种植的技能。
3、加大宣传力度。
可以通过传统媒体、社交媒体、宣传标语等多种方式,宣传脱毒马铃薯种植技术的优势和影响,吸引更多农民积极参与。
4、建立政策支持。
对于脱毒马铃薯种植企业、农民等,给予一些税收、财政补贴、贷款等政策性的支持,引导更多农民选择脱毒马铃薯种植。
总之,脱毒马铃薯种植技术的推广需要政府、企业、农民共同努力,通过共同推动,实现脱毒马铃薯种植技术在我国的广泛应用,提高我国马铃薯产业水平,促进经济社会的发展。
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广脱毒马铃薯是指采用组织培养、病毒消除等生物技术手段,使种薯中的病毒、细菌等有害生物得到彻底消除或有效抑制,从而获得无病害、无有害生物、高质量的种薯。
脱毒马铃薯种植技术对环境友好、产品质量高、生产效益显著,是我国马铃薯产业发展的重点和方向之一。
下面就脱毒马铃薯种植技术及推广进行浅谈。
1.品种选择:选用适宜当地种植的抗病性好、丰产性高、商品性好、适宜加工的品种。
2.种薯处理:选用病毒检测合格、品种纯度高、规格整齐、外观健康、没有机械伤害的种薯,并在种植前进行化学处理或热处理,彻底消除或减轻种薯中的病毒和细菌。
3.田地选址:选择土层深厚、富含有机质、排水良好、阳光充足、风力适中、病虫害较少的土地。
4.肥料施用:施用有机肥和化肥,注意控制肥料和氮磷钾比例,避免长势过旺导致病害加重。
5.田间管理:注意病虫害防治,及时发现病虫害并进行制定合理的防治措施。
及时进行追肥,除草,保持土壤湿润等。
1.建立病毒检测体系,加强病毒检测对种薯的质量进行保障。
2.加强科普宣传,普及农业知识,让广大农户了解脱毒马铃薯的特点和好处,提高认识。
3.财政部门可以出台扶持政策,帮助农户更好地推广脱毒马铃薯,鼓励农民种植脱毒马铃薯,切实保障农民的利益。
4.鼓励科研院所和企业加强技术研发,推进脱毒马铃薯技术的发展,为推广打下坚实的科技基础。
5.政府可以制定土地管理政策,鼓励农民种植脱毒马铃薯,保护良好土地资源。
结论:脱毒马铃薯是未来马铃薯产业发展的方向,是农业生产的一大转型。
通过不断完善技术和政策的支持,不断提高农民的生活质量和经济效益,推动脱毒马铃薯技术向更广阔的领域发展。
脱毒马铃薯是怎么回事,它有什么好处
脱毒马铃薯是怎么回事,它有什么好处
马铃薯在种植过程中,易感病毒。
马铃薯脱毒就是用茎尖组织培养无毒苗,同时生产脱毒小薯原种,纳入良种繁育体系进行扩繁,生产无毒的马铃薯种薯。
脱毒马铃薯的植株光合生产率高,光合强度增强,无病毒的植株水分代谢旺盛,同时抗高温、抗干旱的能力都有所增强。
矿质营养吸收能力强,上述这些生理特性,形成了其高产的生理基础。
怎样防治马铃薯病毒病
马铃薯的病毒病是人类发现最早的植物病害之一。
在相当长的时期内曾是马铃暮生产中急需解决的重要问题。
试验证明,马铃薯退化的真正原因,是由于病毒侵染并通过块茎无性繁殖逐代增殖和为害的结果。
因此马铃薯病毒病的防治对马铃薯高产栽培具有特殊重要的意义。
防治的主要方法是采用脱毒种薯生产,防止通过接触感染病株和感染块茎。
种植抗病和耐病品种,同时进行合理轮作,消除各种虫害引起的交叉感染。
马铃薯环腐病的发病条件有哪些
环腐病棒状杆菌的最适宜生长温度20-23℃,最高生长温度31- 33℃,最低生长温度为1-2℃,致死温度为50℃10分钟。
在田间土壤温度18-22℃时此病发展极快,而在高温31℃以上和干燥气候条件下则病害停止发展,症状的出现推迟。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是世界上重要的粮食作物之一,广泛种植于全球各地。
目前马铃薯种植中存在一个重要问题,就是马铃薯的毒素含量较高。
马铃薯中的毒素主要来自于马铃薯根茎中的龙葵碱成分,长期摄入会对人体健康造成一定的危害。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术的研究和应用,对于提高马铃薯生产的安全和质量具有重要的意义。
一、马铃薯脱毒试管苗快繁技术的意义马铃薯脱毒试管苗快繁技术是利用植物组织培养技术,将健康的母株马铃薯组织培养在营养基上,通过细胞分裂和组织再生的方式,快速繁衍大量健康的马铃薯试管苗。
这项技术对于解决马铃薯繁殖过程中的病虫害传播、品种保存、疫病侵染和生产质量的提高都具有非常积极的意义。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术可以有效地防止病虫害的传播。
传统方式繁殖的马铃薯苗地下茎或种子上易携带病菌,一旦植入下一代土壤中,会进一步传播疾病。
而试管苗快繁技术可以通过无菌培养的方式,快速繁殖大量无病繁殖的健康马铃薯试管苗,有效地避免了这一现象的发生。
该技术可以用作品种保存和资源库的建设。
通过马铃薯脱毒试管苗技术,可以将母株的遗传物质以及优良品种进行保存和繁殖,确保了马铃薯种质资源的多样性和稳定性,为马铃薯品种的改良和繁衍提供了重要的物质基础。
马铃薯脱毒试管苗技术还可以提高生产的质量和效率。
传统的马铃薯繁殖方式往往需要较长的时间,且容易受到疾病和气候等环境因素的影响,生产效率较低。
但是通过试管苗快繁技术,可以快速地繁殖大量高质量的马铃薯试管苗,提高了生产效率和质量,对于整个马铃薯产业的发展具有重要的意义。
二、马铃薯脱毒试管苗快繁技术的关键技术马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一项复杂的技术,其成功应用需要掌握一系列关键技术。
以下是该技术的关键技术要点:1. 母株选择母株的选择是马铃薯脱毒试管苗快繁技术的第一步。
选择健康、无病毒的母株进行组织培养,是保证繁殖出的试管苗质量的基础。
只有健康的母株才能够保证繁殖出的试管苗也是健康的。
脱毒马铃薯种植技术的重点分析
脱毒马铃薯种植技术的重点分析一、脱毒马铃薯种植技术的意义和现状马铃薯是我国重要的粮食作物之一,是居民餐桌上的主食之一。
由于马铃薯病害的严重危害,使得马铃薯的产量和质量大打折扣。
为了提高马铃薯的产量和质量,保障食品安全,脱毒种植技术应运而生。
脱毒马铃薯种植技术是指用无病蚀的种薯进行种植,尽可能减少病毒和霉菌的传播,提高马铃薯的生长速度和产量。
目前,脱毒马铃薯种植技术已经得到了广泛的应用和推广,但也存在一些问题和困难。
1. 选用病毒抗性强的种薯:选择抗病毒性能强、无病害的种薯进行种植,可以有效减少病毒的传播和蔓延,提高马铃薯的抗病能力。
还要选择适应当地气候和土壤条件的种薯,提高种植的适应性和产量。
2. 合理施肥和灌溉:合理施肥和灌溉是保障马铃薯健康生长的重要方法。
在施肥过程中,要充分考虑马铃薯对养分的需求,选择合适的肥料种类和施肥量,保证植株的生长健康。
及时合理的灌溉也是关键,保证植株的水分供给,防止出现水分缺乏或积水现象,提高产量和品质。
3. 防病虫害:在整个种植过程中,要加强对马铃薯的病虫害防治工作,定期喷洒农药,防治病毒和霉菌的侵害,保证马铃薯的健康生长。
4. 合理密植和间作:密植和间作是提高产量和品质的重要手段。
适当的密植和间作可以增加单位面积的产量,提高经济效益,但也要注意避免马铃薯的过度密植,影响植株的生长和品质。
5. 科学控制收获和贮藏期:在收获和贮藏过程中,要科学控制温度、湿度和光照条件,避免霉变和病毒的传播,保证马铃薯的质量和食用安全。
随着农业生产技术的不断发展和创新,脱毒马铃薯种植技术也在不断完善和提高,但也面临一些挑战和困难。
1. 技术水平不高,资源投入少:目前,脱毒马铃薯种植技术在一些地区的推广应用还不够普及,农民对这项技术的认识和了解程度不够,导致资源投入较少,技术水平相对较低。
2. 病毒病害的防治难度大:由于地域、气候和土壤的不同,不同地区对病毒病害的防治难度也会有所不同,需要根据当地的具体条件采取相应的防治措施,增加了技术实施的难度。
马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展
生 组织 旺 盛 的新 陈 代谢 活 动 。病 毒 的 复制 须利 用 寄 理后 再 进 行茎 尖 剥 离 ,发 现 可 以完 全脱 除 马 铃薯 卷 主 的 代谢 过 程 ,无 法 与分 生 组织 旺盛 的代 谢 活 动竞 叶病 毒 ( L V) P R ,用 变 温 培 养 处 理 ,V 脱 毒 率 为 PX 争 ; 2 分生 组 织 缺乏 真 正 的维 管组 织 。大 多 数 病 毒 9 。 , () 62 比恒 温热 处 理 P X 的脱 毒 率高 。王 秀英 l研 % V 1 l 】 在 植 株 内通 过 韧 皮部 进行 迁 移 ,或 在 细胞 间通 过胞 究 表 明 : 高温 预 处 理对 提 高茎 尖 脱 毒率 效 果 明显 , 可 问连 丝传 输 , 为细 胞 与细 胞 间 的移 动速 度 较慢 , 因 在 以把 不易脱 去 的 P X、V 、A v P S P MV脱 去 。 S V P T d是 最 快 速 分 裂 的组 织 中病 毒浓 度 高 峰被 推 迟 ;3 高 浓 度 难 以除去 的 , 一 般 的方 法很 难 获得 无 病 毒植 株 , () 用 但 的生 长素 。分 生组 织 的生长 素 浓度通 常 很高 , 可能 影 经过 热处 理则 可 以除去 。 罗玉等 _采 取选 健康 整薯 室 l 7 J
因素 做 出综 述 .以期 为 马铃 薯茎 尖 脱 毒技 术 的 深入 而 很少 伤 害 寄 主组 织 , 而抑 制病 毒 的增殖 、 缓病 从 减 研 究 提供参 考 。
毒 在植 株体 内的扩增 速度㈣。 因此 热处 理 可 以提 高 培 养 中去 除病 毒 的能 力 ,但 不 同病 毒 对 高温 预 处 理 的
病 毒是 来 自其 它寄 主植 物 的病毒 。
由于 不 同病 毒在 茎尖分 布 不 同 , 脱毒 的效 果也 与
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广
浅谈脱毒马铃薯种植技术及推广脱毒马铃薯是指消除某种特定病毒的马铃薯株系。
目前,脱毒马铃薯种植技术已经相对成熟,并被广泛应用于农业生产中。
本文将从脱毒马铃薯的概念、种植技术以及推广等方面进行阐述。
脱毒马铃薯是指在马铃薯种苗繁殖过程中通过科学的病毒检测和处理方法,将马铃薯等传播病毒的媒介如昆虫、土壤等消灭或减少,从而获得健康无病毒的种苗。
脱毒马铃薯通过杀菌或烘干等方式进行病毒消毒,使得种植的马铃薯具有较高的产量和优良的品质。
脱毒马铃薯种植技术的关键在于病毒检测和处理。
病毒检测是通过采集植株和地下茎块样本,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)或聚合酶链式反应(PCR)等方法进行检测,以确保马铃薯无病毒。
处理方法包括杀菌、烘干等方式。
杀菌是通过浸泡马铃薯种薯或利用杀菌剂进行处理,以杀死植株上的病毒,达到脱毒的目的。
烘干是通过将种薯暴晒在阳光下,使其迅速干燥,病毒受到高温和干燥的影响而死亡。
脱毒马铃薯种植技术的推广可以从以下几个方面进行。
加强相关人员的培训和技术指导。
通过组织专家进行技术培训和现场指导,提高农民对脱毒马铃薯种植技术的认识和掌握程度。
落实相关政策和措施。
政府应制定扶持政策,如提供财政补贴和税收优惠等,鼓励农民种植脱毒马铃薯,推动其产业化发展。
加强市场拓展和宣传推广。
组织专门的团队或机构,通过农产品展销会、农民培训会等方式,向农民和消费者普及脱毒马铃薯的优势和价值,提高其知名度和市场占有率。
加强科研力量和技术创新。
加大对脱毒马铃薯种植技术的科学研究和推广应用,不断提高该技术的可行性和实用性,推动其在农业生产中的广泛应用。
脱毒马铃薯是一项重要的农业种植技术,可以提高马铃薯的产量和品质。
通过加强技术培训、落实政策措施、拓展市场和加强科研创新,可以推动脱毒马铃薯种植技术的广泛应用,促进农业产业的发展。
浅谈马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展
20I3(2)
西 昌 农 业 科 技
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的发 育 ,但 可 以提高 脱 毒率 . 制 剂对 马 铃薯 茎 尖 培养脱 毒是 否有 相 同 的效果 ,值 得研 究和探 讨 。刘 华 、冯高 采用 不 同浓 度 高 锰 酸钾 、过 氧 化氢 、新 洁 尔灭 、尿素稀 释 液对 马铃 薯进 行浸 种处 理 ,发 现 病毒 钝 化 明显 。用处 理 过 的薯 块 做种 薯 ,产 量 明显 提 高 。 而Cassells,A.C等 (m 将 病 毒 唑加 入 培养 基 中 ,培 养 马 铃薯 的分 生组 织 和外 植 体 ,可脱 除 马铃 薯 的X、Y、S 和M病 毒 。 2.3 热 处理 的使 用
马铃薯茎尖培养脱毒研究进展
组培课程论文题目马铃薯茎尖培养脱毒研究进展学院生命科学技术学院专业生物技术(制品方向)姓名刘小强指导教师李胜职称教授甘肃农业大学生命科学技术学院二〇一一年六月马铃薯茎尖培养脱毒研究进展刘小强(甘肃农业大学生命科学技术学院09级甘肃兰州 730070)摘要: 综述了马铃薯茎尖培养脱毒的原理,影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素,马铃薯试管苗快繁技术与培养条件优化等方面的研究进展,指出了茎尖培养脱毒中尚存在的一些问题。
关键词: 马铃薯;茎尖培养脱毒;脱毒试管苗;前景马铃薯是世界上第四大粮食作物,属茄科茄属双子叶植物,其特点是产量高、营养丰富、适应性强、经济价值较高,又是重要的工业原料。
随着农业产业结构的调整和国内外马铃薯加工业的不断发展扩大,市场对马铃薯的需求也逐渐增多,近年来,我国马铃薯的栽培面积不断扩大,占世界第二位。
但是长期以来有“植物癌症”之称的病毒病一直困扰着马铃薯生产的发展。
马铃薯整个生育期均易感染多种病毒病,在我国马铃薯产区危害马铃薯的主要病毒和类病毒有:马铃薯X 病毒(PVX)、马铃薯Y 病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯A 病毒(PVA)、马铃薯S病毒(PVS),还有一种类病毒-马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD)。
其中PVY、PLRV、PVX 是危害马铃薯最严重的病毒。
田间表现使植株矮小,叶片翻卷、花叶、皱缩,马铃薯品种种性退化,品质变劣,甚至失去种用价值。
目前主要通过茎尖脱毒获得脱毒试管苗的方法防治该病的发生。
目前,马铃薯茎尖培养脱毒的研究及在生产上的广泛应用取得了巨大的经济效益。
近年来, 这方面的研究又取得了不少研究成果, 现作一综述。
1 马铃薯病毒病及茎尖培养脱毒原理目前, 在马铃薯作物上已发现了多种病毒、类病毒以及植原体, 已报道的就有25 种之多, 但仅少数病毒危害严重, 如马铃薯Y 病毒( PVY) 、马铃薯卷叶病毒(PLRV) 、马铃薯A 病毒和 X 病毒(PVA、PVX) 以及马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD) 等。
马铃薯茎尖脱毒技术 (1)精选全文完整版
可编辑修改精选全文完整版马铃薯茎尖脱毒技术作者:刘学武方大雨关永明来源:《吉林蔬菜》2014年第03期马铃薯(Solanurn tuberosurn),茄科、茄属作物,作为一种蔬菜,深受人们的喜爱。
目前在我国的栽培面积大约有500多万公顷,已经成为世界上栽培面积最大的国家,但在其繁殖过程中退化问题比较严重,症状是叶片卷缩,产量降低,实验研究表明,病毒浸染是其退化的根源。
因此生产脱毒种薯成了在马铃薯生产过程中的关键环节,常用的马铃薯脱毒技术是茎尖组织培养,下面介绍一下马铃薯的茎尖脱毒技术。
1 取材进行脱毒培养的材料,可以直接从大田取。
一般当苗高约15厘米时,将顶端切下6~8厘米,去掉下面2片叶,在切口处涂上生根激素后,把切条植入一个口径为10厘米、内装有消毒营养土的花盆中,然后用玻璃烧杯罩上,保持10天。
然后将其转入生长箱中,光照3 000~4 000Lx,每天光照16小时。
两周后去掉顶芽,以促使腋芽的生长。
当腋芽长出约1~2厘米时,折下腋生枝,用于消毒,接种。
2 消毒及接种一般来说,茎尖分生组织由于彼此重叠的叶原基的严密保护,只要仔细解剖,不进行表面消毒也能得到无菌的外植体,但分生组织不带菌,并不等于包在它外面的叶片及其下部的茎段不带菌,将外植体从超净台外面的空间拿进去可能会带进一些菌。
因此,在切取外植体之前仍需对茎芽进行表面消毒。
常用的消毒方法是,先剥去大叶片,用自来水冲洗干净,在75%酒精中浸泡30秒钟左右,用1%~3%次氯酸钠或5%~7%的漂白粉溶液消毒10~20分钟(或用0.1%HgCl2消毒数分钟),最后用无菌水冲洗材料4~5次。
接种时,先把解剖显微镜置于超净工作台,然后把茎芽置于解剖镜下,左手用一把镊子将它按住,右手用解剖针将叶片和叶原基剥掉。
当形似一个闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来后,用锋利的长颈刀片将分生组织切下来,一般以0.2~0.3毫米,带1~2个叶原基为好,然后再用刀片将其接种到培养基上。
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马铃薯茎尖组织脱毒培养应用及前景林英烨222012326012094(农学四班)西南大学农学与生物科技学院,重庆400715摘要:此文总结了近几年来马铃薯茎尖脱毒技术的研究进展,从马铃薯生产概况及危害马铃薯的病毒种类、茎尖剥离发展历史及原理、茎尖脱毒技术要点、影响马铃薯茎尖脱毒效率的因素方面做了概述并对其发展进行了展望。
关键词:马铃薯;茎尖;组织培养;应用;前景An Review On virus-free technoligy of potato meristem tip tissue culture Lin ying ye studentid(The four class of AgricultureCollege of Agronomy and Biotechnology,Southwest University,Chongqing400715,China Abstract:This paper summarizes the research progress of potatostem apex virus-free technology in recent years,from thevirus species,potato production situation and the harm of potato shoot tip development history and theory,stem apexvirus-free technology points,effect of potato stem apex detoxification efficiency factors are summarized and the prospect for its development Keywords:Potato;shoot tip;tissue culture;application;Prospect前言马铃薯栽培分布较广,世界上共有148个国家栽培,主要分布在欧洲和亚洲。
据联合国粮农组织资料统计表明,全世界现有马铃薯栽培面积为1838.1万公顷,总产29511.8万吨,平均单产16吨每公顷。
我国是马铃薯种植大国,种植总面积达460多万公顷,届时我国马铃薯产量将达到1.8亿吨。
尤其是近年随着我国农业产业结构调整和种薯、商品薯、加工企业市场的发展,优质马铃薯加工产品供不应求,加工用薯比例大幅度增加,马铃薯栽培正成为种植业结构调整和增加农民收入的一项战略选择,种植逐步走向规模化、标准化、区域化。
但马铃薯在连年的栽培过程中,由于病毒或类病毒的侵害和积累,造成了马铃薯质量退化和产量下降,因而无病毒植株具有重要的生产价值。
解决马铃薯退化,获得无病毒植株的途径由自然选择、物理学方法、化学药剂处理、生物学方法。
其中最行之有效的方法便是生物学方法中的茎尖脱毒。
1马铃薯生态习性和种类1.1生长周期(1)休眠期土豆块茎收获以后,放到适宜发芽的环境中而长时间不能发芽,属于生理性自然休眠,是一种对不良环境的适应性。
块茎休眠始于匍匐茎尖端停止极性生长和块茎开始膨大的时刻。
休眠期的长短关系到块茎的贮藏性,关系到播种后能否及时出苗,因而关系到产量的高低。
土豆休眠期的长短受贮藏温度影响很大,在26摄氏度左右的条件下,因品种的不同,休眠期从1个月左右至3个月以上不等。
在温度为0-4摄氏度的条件下,块茎可长期保持休眠。
土豆块茎的休眠过程,受酶的活动方向决定,与环境条件密切关联。
(2)发芽期土豆的生长从块茎上的芽萌发开始,块茎只有解除了休眠,才有芽和苗的明显生长。
从芽萌生至出苗是发芽期,进行主茎第一段的生长。
发芽期生长的中心在芽的伸长、发根和形成匍匐茎,营养和水分主要靠种薯,按茎叶和根的顺序供给。
生长的速度和好坏,受制于种薯和发芽需要的环境条件。
生长所占时间就因品种休眠特性、栽培季节和技术措施不同而长短不一,从1个月到几个月不等。
(3)幼苗期从出苗到第六叶或第八叶展平,即完成1个叶序的生长,称为“团棵”,是主茎第二段生长,为土豆的幼苗期。
幼苗期经过的时间较短,不论春作或秋作只有短短半个月。
(4)发棵期从团棵到第十二或第十六叶展开,早熟品种以第一花序开花;晚熟品种以第二花序开花,为土豆的发棵期,为时1个月左右,是主茎第三段的生长。
发棵期主茎开始急剧拔高,占总高度50%左右;主茎叶已全部建成,并有分枝及分枝叶的扩展。
根系继续扩大,块茎膨大到鸽蛋大小,发棵期有个生长中心转折阶段,转折阶段的终点以茎叶干物质量与块茎干物质量之比达到平衡为标准。
(5)结薯期即块茎的形成期。
发棵期完成后,便进入以块茎生长为主的结薯期。
此期茎叶生长日益减少,基部叶片开始转黄和枯落,植株各部分的有机养分不断向块茎输送,块茎随之加快膨大,尤在开花期后10天膨大最快。
结薯期的长短受制于气候条件、病害和品种熟性等,一般为30-50天。
1.2生态环境马铃薯性喜冷凉,是喜欢低温的作物。
其地下薯块形成和生长需要疏松透气、凉爽湿润的土壤环境。
对温度的要求:块茎生长的适温是16℃~18℃,当地温高于25℃时,块茎停止生长;茎叶生长的适温是15℃~25℃,超过39℃停止生长。
对土壤的适应性很强,但对气候要求凉、冷、燥,在湿热地区虽然也能生长,不过一代以后品种就会演化,需要经常从寒冷地区引进新的种。
种薯在土温5~8℃的条件下即可萌发生长,最适温度为15~20℃。
适于植株茎叶生长和开花的气温为16~22℃。
夜间最适于块茎形成的气温为10~13℃(土温16~18℃),高于20℃时则形成缓慢。
出土和幼苗期在气温降至-2℃即遭冻害。
开花和块茎形成期为全生育期中需水量最大的时期。
马铃薯在原产地就有几百个品种,在世界各地又不断地培养新品种,目前全世界有几千个品种,有含淀粉比例较高,适合作为主食的,也有适合作为蔬菜食用的。
人们根据不同的用途培养出很多新品种,花色有白色、红色、紫色等品种,地下块茎有圆形、卵形和椭圆形,其皮色有红色、黄色、白色和紫色的不同品种。
一般用块茎上的“芽眼”切下播种,如果用种子种植,很快就会产生变异,因此非常容易出现新品种。
2马铃薯茎尖的组织培养植物组织培养:是指通过无菌操作分离植物体的一部分(外植体),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。
(主要有原生质体),悬浮细胞,组织(愈伤组织Callus、茎尖分生组织),器官(胚,花药,子房,根和茎)的培养。
植物组织培养是20世纪初发展起来的一门新兴技术,随着这项技术的日益完善,其应用也越来越广泛,可用于种苗快繁、植物脱毒、植物育种、种质资源保存以及次生代谢物提取等方面。
尤其植物快繁和脱毒是应用最多和最广的方面,而且许多花卉苗木的试管育苗已进入了商品化生产。
通过茎尖分生组织培养脱除病毒自上世纪70年代以来在马铃薯上推广应用,种薯生产技术随着生物技术的发展不断改进。
利用马铃薯茎尖组织培养结合病毒检测,进行马铃薯脱毒的组织培养技术,可大批量地进行种薯繁殖,又可防止亲代植株的病毒传染给子代。
作为马铃薯生产第一大国,中国的马铃薯单产低于世界平均水平。
种薯问题是限制其单产提高的主要因素,要提高种薯质量,茎尖分生组织培养脱毒、组培苗离体快繁和(或)试管薯生产方面的研究是其技术基础,植物生长物质在上述三方面的应用是研究方向之一。
马铃薯薯块及芽外植体消毒灭菌后在MS基本培养基中培养效果最好。
黄萍等认为在马铃薯初代培养基(作茎尖培养用)和增殖培养基(作试管苗快速繁殖用)中分别加入25μg/ml链霉素、四环素和苯甲酸钠3种抗污染剂,结果发现:苯甲酸钠在初代培养基中抑菌效果最好;而在增殖培养基中以四环素的抑菌效果最佳。
植物组织中普遍存在内生菌,当植物组织进行离体培养时,这些内生菌就会产生污染。
为了消除植物组织培养过程中出现的真菌和细菌污染,而又不杀伤植物组织,采用多菌灵和青霉素混合溶液浸泡污染的组培苗茎段的结果发现,多菌灵对真菌有杀灭作用,对细菌没有明显作用;青霉素只对细菌有抑制作用,继代后细菌污染照常存在;而对污染的组培苗采用75%乙醇和0.1%Hg Cl2处理可彻底杀灭真菌和细菌。
3茎尖脱毒技术的原理马铃薯茎尖培养,由叫分生组织培养,是包括马铃薯在内的许多植物脱毒的重要手段。
茎尖培养脱毒的原理是利用病毒在植物体内分布的不均匀性,即根尖和芽尖的分生组织含病毒量少或不含病毒。
尽管导致这一现象的原因还未明确,但可能是下列之一:()病毒的复制需利用寄主的代谢过程,无法与分生组织旺盛的代谢活动竞争;()分生组织缺乏真正的维管组织,大多数病毒在植株内通过韧皮部进行迁移,或在细胞间通过胞间连丝运输。
病毒在细胞与细胞间的移动速度较慢,在快速分裂的组织中病毒浓度高峰被推迟,()分生组织的生长素浓度通常很高,可能影响病毒的复制。
也有一些病毒如PVX,在人们所有观察的分省组织中都发现有其存在,但通过茎尖培养依然可以脱去PVX,这说明PVX是在培养过程中可以被脱去的,其机制可能是由于分离组织所产生的某种钝化因子或培养基中某种成分对病毒的效应所致,也可能是由于分离组织与培养基接触的结果。
病毒复制时,需要某些作用靠近分生组织圆锥体细胞的酶类,当茎尖被剥成很小时,它们的生长过程暂时被打乱了,病毒复制时所需要的酶失去作用,从而中断了传染性病毒的复制,一般认为类病毒是无法脱除的,但结合热处理经过重复茎尖培养也可脱去PSTVd,只是脱毒率太低,具体机制尚待研究。
4具体实验方案4.1外植体培养从已催出芽(芽长一般2—4cm)的干净健康马铃薯块茎上掰下芽,用自来水冲洗干净,放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟,在超净工作台上消毒完后,放入无菌水中浸泡6次,每次5分钟,然后接种到MS+6-BA1.5mg/L(毫克/升)+GA30.5mg/L+IBA0.5mg/L +琼脂8g/L+蔗糖30g/L(PH值为5.8)的培养基上,每个培养瓶接种1—5个外植体。
4.2茎尖剥离及初代培养外植体培养20天后,在超净工作台上解剖镜下用解剖针将生长点0.1——0.5mm部分剥离出来,转接到MS+肌醇100mg/L+6-BA1.5mg/L+GA30.5mg/L+泛酸钙1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L+活性炭0.17g/L(PH值为5.8)的培养基上,每个培养瓶接种4—5个生长点。
光照保持3000—6000Lux(勒克斯)左右,每天照光13—16小时,温度控制在23℃,经2—6个月左右培养诱导,其间转接2——3次,生长点即可长成新的小植株。
经病毒检测不带病毒的株系就可进行扩繁,未脱毒的株系淘汰。
4.3试管苗扩繁扩繁前的准备扩繁培养基的制备。
扩繁培养基以MS培养基为扩繁基本培养基,外加6—BA0.5mg/L+NAA0.5-1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L+活性炭0.17g/L,pH值为5.8。