慢性乙型肝炎病毒新标识乙型肝炎病毒核心抗体定量的临床意义与应用

2.1 Anti-HBc定量试剂：高度均一的重组HBcAg全长颗粒的获得
CpC
cAg 1mg/ml
cAg-HRP
CpD
高度稳定的重组核心抗原， 标记后仍然维持良好的颗粒抗原 性。是实现双抗原夹心法检测 HBcAb的关键基础。
Clin. Vaccine Immunol. Mar. 2010, p. 464-469
2.2 Anti-HBc定量试剂：双抗原夹心法Anti-HBc检测试剂
竞争法
灵敏度较低
重现性不佳
不适合定量检 测
1、雅培Axysm 2、罗氏Elecsys
间接法
灵敏度提高
重现性提高
可用于定量检 测
夹心法
灵敏度/特异性 更佳
特异性更高
适合定量检测
1、雅培Architect
(暂无定量检测模式）
最适合抗体定量检测
0.5-1ng/ml
EIA (酶免法）
0.2-1ng/ml
LIA (发光法）
0.05-0.2ng/ml
HBsAg定量
近年来，HBsAg定量的意义逐渐被揭示并在临床广泛应用
HBsAg定量指导PEG-IFN治疗
Stopping rule:
• PEG-IFN治疗第12周HBsAg水平无下降并且HBV DNA下 降<2 Log10 IU/mL时应该停止治疗
4.1 治疗前qAnti-HBc水平预测阿德福韦酯治疗应答 ——北京佑安医院李卓教授合作研究
Sensitivity
1.0
optim al cutoff: 29000 IU/m L
0.7
0.7
0.6
0.6
optimal cutoff:
在低复制期， qAnti-HBc 水 平与HBsAg呈 正相关， 在HBV感染各 自然历史时期， qAnti-HBc 水 平 均 与 ALT 水 平呈现正相关
Clin Microbiol Infect. 2015 Feb;21(2):197-203
多因素分析中其他基线参数包括性别，年龄，HBsAg定量，HBV DNA 定量，ALT，HBeAg状态
主要内容
1 背景介绍 2 Anti-HBc定量检测试剂 3 HBV感染自然史过程中qAnti-HBc水平 4 治疗前qAnti-HBc水平预测治疗应答 5 qAnti-HBc水平:HBV引起肝脏疾病的特异性指标 6 qAnti-HBc水平指示肝组织炎症状态
4~4.5
805 89 9565.2 920 2.72 (1.76-4.21) <0.001 1.33 (0.81-2.18)
>=4.5
370 61 4127.6 1477.9 4.41 (2.79-6.99) <0.001 1.86 (1.11-3.13)
P value
0.356 0.272 0.255 0.019
p
Log10(anti-HBc)
<3
57
3~3.5
53
3.5~4
63
4~4.5
130
>=4.5
76
HBV DNA,
copies/mL
≥106
317
105-106
31
104-105
15
<104
15
qHBsAg, IU/mL
≥103
333
102-103
29
<102
11
HBV genotype
B/B+C
155
慢性乙型肝炎病毒新标识：
乙型肝炎病毒核心抗体定量的临床
意义与应用
厦门大学公共卫生学院 分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心
夏宁邵
主要内容
1 背景介绍 2 Anti-HBc定量检测试剂 3 HBV感染自然史过程中qAnti-HBc水平 4 治疗前qAnti-HBc水平预测治疗应答 5 qAnti-HBc水平:HBV引起肝脏疾病的特异性指标 6 qAnti-HBc水平指示肝组织炎症状态
2.3 Anti-HBc定量方法重复性评价
20个独立测试：高值 cv<5%，中值 cv<10%，临界低值cv<13%
定量标准品R2范围：0.9920~0.9993
0.5
R2>0.99
0.0
100份临床标本两次独立定量 一致性R2>0.99，平均定量偏差为
9.3±10%(以log10计为1.2±1.5%)
87 817.1108 10647.3 66 1536.528 4295.4
Reference
Reference
0.34 (0.24-0.47) <0.001 0.37 (0.23-0.57) <0.001
HBeAg阳性379人，平均随访6.7年，172人出现HBeAg自然阴转
基线不同qAnti-HBc水平累积HBeAg自然阴转率
21 22 21
27
24
HBsAg loss
<1
0
2
0
3
3
3
VR
40-44 21
67 60 76
25
69
Cost/year (RMB) 8000 10000 15000 10000 12000 60000
68000
Nature Reviews Gastroenterology and Hepatology 8, 275-284 , 2011
• PEG-IFN治疗第12周HBsAg水平无下降或者 HBsAg>20,000 IU/mL时考虑停止治疗
EASL guideline 2012
反映宿主免疫应答强弱的临床指标，用
?
于慢乙肝感染者的管理及指导临床治疗
1.2 Anti-HBc
Anti-HBc定性检测在临
床上使用已超过35年
Anti-HBc是既往和现症
主要内容
1 背景介绍 2 Anti-HBc定量检测试剂 3 HBV感染自然史过程中qAnti-HBc水平 4 治疗前qAnti-HBc水平预测治疗应答 5 qAnti-HBc水平:HBV引起肝脏疾病的特异性指标 6 qAnti-HBc水平指示肝组织炎症状态
1.1 临床常用的HBV相关诊断靶标
Viral
genotype
Viral
Mutation
HBsAg
HBeAg HBV DNA
AntiHBs
AntiHBe
AntiHBc
Viral polymorphisms
Viral production
Host response
HBsAg诊断试剂的发展
RPHA (反向血凝法） 5-10ng/ml
RIA (放免法）
基线高Anti-HBc水平有效预测HBeAg高自然阴转率
3.3 基线qAnti-HBc水平预测HBsAg自然阴转
2149例HBeAg阴性慢乙肝感染者，平均随访8年，421人出现HBsAg阴转 基线低Anti-HBc水平有效预测HBsAg高自然阴转率
基线不同qAnti-HBc/HBsAg水平累积HBsAg自然阴转率
0.36 0.22 0.19 0.058 0.045
3.4 基线qAnti-HBc水平高是自然过程中肝硬化的危险因素
Incidence
No. of Year of
Total
rate (per
LC follow-up
100,000)
Crude hazard ratio (95% CI)
Adjusted hazard P value ratio (95% CI)
在自然随访队列中， qAnti-HBc水平与ALT显著 相关(p<0.001), 与HBV DNA (p=0.98) 或者HBsAg (p=0.45) 无显著相关。 在HBV合并其它肝脏疾病 的情况下，ALT的异常可 能不伴有qAnti-HBc水平 的升高
Clin Microbiol Infect. 2015 Feb;21(2):197-203
0.014 0.002 <0.001
148 2332.9 6344.2
Reference
Reference
15
160.2
9362.5 1.46 (0.86-2.48) 0.164 0.77 (0.37-1.60) 0.488
6
45.3
13257.2 2.43 (1.07-5.50) 0.034 2.55 (0.71-9.12) 0.151
5600.4 10815.1 20806.8 24108.4
Reference 2.15 (1.30-3.58) 5.44 (2.91-10.18) 5.41 (3.09-9.45)
0.003 <0.001 <0.001
Reference 2.37 (1.19-4.73) 4.25 (1.69-10.72) 8.21 (3.15-21.40)
感染的标志
在低流行区用于血液筛
查
由于方法学的限制，
Anti-HBc定量水平的临 床意义一直没有被揭示
NEJM, 2005
主要内容
1 背景介绍 2 Anti-HBc定量检测试剂 3 HBV感染自然史过程中qAnti-HBc水平 4 治疗前qAnti-HBc水平预测治疗应答 5 qAnti-HBc水平:HBV引起肝脏疾病的特异性指标 6 qAnti-HBc水平指示肝组织炎症状态
low normal
133 positive negative
high elevated
Anti-HbB1c.0定量水平反映肝脏炎c症1.0 状态，可能是宿主对乙肝
病毒的免疫反应的一个指标。 0.9
optimal cutoff:
0.8
89 IU/mL
0.9
0.C8 lin Microbiol Infect. 2015 Feb;21(2):197-203
3.1 HBV感染自然史过程中的qAnti-HBc水平
a
p=0.22
p=0.20
6.0
p<0.001
p<0.001
5.0
Anti-HBc level log10 (IU/mL)
4.0
p<0.001
3.0
2.0
1.0
0.0
-1.0
PBI OBI
IT
IC
LR ENH
Numbers: HBsAg: HBeAg: Viral load:
4. 治疗前qAnti-HBc水平预测治疗应答
现有药物治疗效果及费用
Treatment response(%) LMV ADV ETV LDT TDV Peg-IFN PegIFN+LMV HBeAg-positive patients at week 49 or 52
HBeAg SR
16-21 12
C
186
11
491.8
2236.6
Reference
Reference
18
350.2
5140.4 2.55 (1.20-5.40) 0.015 3.38 (1.16-9.89) 0.026
35
434.1
8063.1 3.87 (1.97-7.64) <0.001 4.49 (1.66-12.12) 0.003
66
855.0
wenku.baidu.com
7718.9 3.99 (2.10-7.56) <0.001 6.40 (2.47-16.57) <0.001
42
445.1
9435.9 5.00 (2.57-9.73) <0.001 7.69 (2.88-20.53) <0.001
129 2303.425 17 157.1874 11 52.86731 14 58.07114
3.2 基线qAnti-HBc水平预测HBeAg自然阴转 ——台湾大学陈培哲院士合作研究
Total
No. of ec
Year of follow-
up
Incidence rate (per 100,000)
Crude hazard ratio (95% CI)
p
Adjusted hazard ratio (95% CI)
n=2844
Log10 (anti-HBc)
<3
615 26
7619.7
341.2
Reference
Reference
3~3.5
579 40 7073.9 565.5 1.66 (1.01-2.72) 0.045 1.28 (0.76-2.16)
3.5~4
681 53 8102.3 654.1 1.93 (1.21-3.08) 0.006 1.33 (0.80-2.20)
5 Y=0.989X R2>0.99
4
Log10 OD Log10 IU/mL(1st test)
3
-0.5
2
-1.0 -2.0
-1.5
-1.0
Log10 Con.
-0.5
1
1
2
3
4
5
Log10 IU/mL (2nd test)
主要内容
1 背景介绍 2 Anti-HBc定量检测试剂 3 HBV感染自然史过程中qAnti-HBc水平 4 治疗前qAnti-HBc水平预测治疗应答 5 qAnti-HBc水平:HBV引起肝脏疾病的特异性指标 6 qAnti-HBc水平指示肝组织炎症状态
ALT:
535 negative negative negative normal
56 negative negative very low normal
108 positive positive very high normal
209 positive positive
high elevated
148 positive negative