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(1)了解

基因工程的基本概念。(2)基因操作的工具和基本操作程序。(3)

运用所学的DNA重组技术,模拟制作DNA重组模型。

(1)用类比的方法比较基因工程的三种基本工具及其作用。(2 )通过模拟

制作充足DNA分子模型理解基因工程的原理

(1)通过对基本概念基本原理科学方法的正确理解和掌握,逐步形成比较判断推理分

析综合等思维能力具备能利用学到的生物知识评价和解决某些实际问题的能力。

基因操作的工具和基本程序及应用。

1 •限制酶和运载体的作用。

2 •提取目的基因的方法和目的基因导入受体

细胞的途径。3 •基因工程的应用。

[第一课时]:DNA重组技术的基本工具

一.复习导入新课

1.遗传的物质基础是什么? 2 .生物体遗传的基本单位是什么? 3 .为什么生物界的

各种生物间的性状有如此大的差别呢?4.生物的性状是怎样表达的? 5 .各种生物的

性状都是基因特异性表达的结果,那么,人类能不能改造基因呢?使原来本身没有某一性状的生物而具有

某个特定的性状呢?6.各种生物间的性状千差万别,这是为什么呢?

引导学生回答:生物体的不同性状是基因特异性表达的结果。

教师举例:1.青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素2.豆科植物的根瘤菌能

够固定空气中的氮气3 .人的胰岛B细胞能分泌胰岛素调节血糖的浓度教师提问:以上几种生物各有其特

定的性状,这些性状都是基因特异性表达的结果。

但是人类能不能改造基因呢?

二、讲授新课

1.基因工程的概念:又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础

以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外

构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。

2 .基因操作的工具

学习探究1:在基因工程培育抗虫棉的过程中,关键步骤或难点是什么?

学生活动:分析、讨论,学生与教师共同对基因工程关键归纳总结。

关键步骤一:抗虫棉从苏云金孢杆菌细胞内提取。

关键步骤二:抗虫基因与运载体DNA拼接。

关键步骤三:抗虫基因进入棉花细胞。

学习探究2 :怎样才能在苏云金芽孢杆菌DNA分子中的众多基因中找到所需抗虫基因呢?又怎样将它从DNA长链中提取出来?又如何将提取出的抗虫基因与棉花细胞的DNA结合

在一起呢?引导学生探究、分析、总结:

(1)“分子手术刀”又叫基因剪刀一一限制性内切酶

①分布:主要在微生物中

②作用特点:特异性,即识别特定的核苷酸序列,切割特定的切点。

③结果:产生黏性末端(碱基互补配对)。

举例:基因工程培育抗虫棉的简要过程

(2)“分子缝合针”又叫基因针线一一DNA连接酶①连接部位:磷酸二酯键。②结

果:两个相同的黏性末端的连接。

学习探究3:用DNA连接酶连接两个相同的黏性末端要连接几个磷酸二酯键?用限制性内切酶切一个特定基

因要切断几个磷酸二酯键?

(3)“分子运输车”又叫基因的运输工具一一基因进入受体细胞的载体①作用:将外

源基因送入受体细胞。② 具备的条件:能在宿主细胞内复制并稳定地保存;具有多个限

制酶切点;具有某些标记基因。③ 种类:质粒、噬菌体和动植物病毒。④ 质粒的特占:

八、、♦

质粒是基因工程中最常用的运载体; 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒;是细胞染色体外

能自我复制的小型环状DNA分子;质粒的大小只有普通细菌染色体的1%左右;存

在于许多细菌及酵母菌等微生物中; 质粒的存在对宿主细胞生存没有决定性的作用;质

粒的复制只能在宿主细胞内完成。(自身细胞中也可)

阅读理解课本相关内容,完成课后练习和成才之路

(1)简述基因工程的原理和技术。(2)明确获取目的基因的途径

基因表达载体的模式结构将目的基因导入受体细胞的技术和检测与鉴定

(1)通过对插图照片等的观察学会科学的观察方法培养

观察能力(2)对相关知识的理解能力及良好的语言表达能力。

通过对基因工程基本操作程序的介绍,引导学生主动参与乐于探究培养学

生收集和处理科学信息的能力与获取新知识的能力

基因工程的基本操作程序

目的基因获取的手段,基因表达载体的构建

基因工程的基本操作程序

一、目的基因的获取:

1、从基因文库中获取目的基因:

基因文库:将某种生物体内的DNA全部提取出来,选用适当的限制性核酸内切酶,将

DNA切成一定范围大小的DNA片段,然后将这些DNA片段分别与运载体连接起来,导入受体菌的群体中储存,每个受体菌包含了一段不同的DNA片段就叫基因组文库。cDNA

文库:用某种事物发育的某个时期的MRNA反转录产生的多种互补DNA(也叫cDNA片

段与运载体连接后储存在一个手提军群中,那么这个手提军群体就叫做这种生物的

cDNA文库。

2、利用PCR技术扩增目的基因:(1)原理:利用DNA双链复制的原理,将基因的核苷酸序列不断地

加以复制,使其数量呈指数方式增加。(2)条件:已知目的基因

的核苷酸序列、引物、模板DNA DNA聚合酶。(3)过程:目的基因DNA受热变性

后解链为单链,与引物结合,然后在DNA聚合酶的作用下进行延伸形成DNA.

3、人工合成目的基因:(1)反转录法:已知MRNA( 2)化学合成法:已知蛋白质的氨基酸序列,通

过密码子推算出基因序列,然后直接合成目的基因。

二.基因表达载体的构建(核心)

1目的:使目勺基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时能够使目勺基因能够表达和发挥作用。2•组成:启动子+目的基因+终止子+标记基因。3•目的基因与运载体的结合:(1)用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有黏性末端的切口。(2)用同种

限制酶切断目勺基因,产生相同的黏性末端。(3)强切下的基因片段,插入到质粒的切口

处,再加入适量的DNA连接酶,使质粒与目的基因结合成重组质粒。(4)差异性:由于受

体细胞有动物、植物、微生物之分,加之目的基因导入受体细胞的方法不同,所以表达载体的构建也会有差异性。

三•将目的基因导入受体细胞

(1)将目的基因导入植物细胞:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法

(2)将目的基因导入动物细胞:显微注射法

(3)将目的基因导入微生物细胞:Ca+处理法,感受态细胞

四、目的基因的检测与鉴定

检测:方法:DNA分子杂交。基因探针:是一段带有检测标记,且序列已知的,与目的基因互补的核酸序列。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。

①是否插入目的基因:DNA分子杂交

②是否转录:探针和转基因生物的mRNA杂交

③是否翻译:方法——抗原-抗体杂交

鉴定:

①分子水平鉴定

②个体生物学水平鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等

完成成才之路练习。

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