维生素的分析

维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
一、 结构与性质 （一）为一个具有共轭多烯醇侧链的 环己烯 具有UV吸收 存在多种立体异构化合物 天然维生素A主要是反式
易发生脱氢生成去氢维生素A2
易脱水生成去水维生素A3
易聚合反应生成无活性维生素A
（二） 共轭多烯侧链 易被氧化
4.测定方法
（1）第一法（直接测定法，适用于纯度高的维生素 A醋酸酯环己烷溶解） • 1）方法 在300、316、328、340、 360nm测吸收 度 • 2）计算 A 1% 1% E1cm A为A 328或为A 328校正 a.吸光系数E 1cm
Cl
b.求效价（IU/g）：效价指每g供试品所含维生素 的A的国际单位数。IU/g= E1% 1cm 1900 c.求维生素A醋酸酯占标示量的百分含量 A D 1900 W 标示量（%） 100% W 100 L 标示量
度减小；
② 物质对光的吸收具有加和性。
2 波长的选择：最大吸收波长，及两侧各 选一波长
① 第一法（等波长差法） 1 =328nm，
2 =316nm， 3 =340nm，△ =12nm VitA的max（328nm） Ch.P用于测定维生素A醋酸酯
② 第二法（等吸收比法）
分别在1的两侧各选一点
A 2 = A3 =6/7A 1 1= 325nm， 2=310nm， 3 =334nm
Ch.P用于测定维生素A醇
3. 杂质的吸收 • 对V.A有影响的杂质主要有以下几种： • (1) V.A2 和V.A3 • (2)维生素A的氧化产物 • (3) 维生素A在光照下产生的无活性的聚合物 • (4)维生素A的异构体等。 以上这些杂质在310nm-340nm的波长范围内有吸 收，干扰维生素A的测定。
立体异构体 氧化产物及光照产物 均对测定 有干扰，
合成中间体
去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
故采用三
点校正法
1：测定原理，三个波长的吸收度，公 式计算校正吸收度，再计算含量。故
得名。该法的依据：
① 杂质的吸收在310~340nm波长范围 内呈一条直线，且随波长的增大吸收
二、鉴别试验 （一） 三氯化锑反应
VitA 蓝色 紫红
CHCl3
SbCl 3
条件 无水无醇
蓝色
紫红
（Hale Waihona Puke Baidu） UV法
VitA 去水VitA △
无水乙醇-盐酸溶液溶解
300-400nm扫描
300-400nm扫描
λmax为326nm
一个吸收峰
384、367、389nm
3）A值的选择
如果最大吸收波长在323-327nm之间， 且A300 /A325比值≤0.73，按下法判断： a. 若（A325校正-A325）*100%/A325 所得的数值的绝 对值在3%，可直接用A325 代入E=A/C.L b.若（A325校正-A325）*100%/A325 所得的数值的绝 对值超过3%，则用应用A325校正代入E=A/C.L 如果最大吸收波长不在323-327nm之间， 或A300/A325比值>0.73，表示供试品中杂质含量太高， 应采用色谱法将未皂化部分纯化再进行测定。
三个吸收峰
VitA
↓
CH 2
去水VitA（VitA3）
（三） TLC法 BP 对照品法 显色剂 三氯化锑
三、含量测定
目前各国药典均采用紫外分光光度法替 代三氯化锑比色法
（一）、紫外分光光度法
利用维生素A醇和其醋酸酯分子中具
多烯共轭体系结构，在325～328nm处 有选择性吸收峰，故可进行含量测定。
如果最大吸收波长不在326-329nm之间，也 不能用本法测定。采用第二法 第一法的校正公式为： A328校正=3.52（2 A328 –A316-A340）
（2）第二法（皂化法，适用于维生素A醇）
• 1）方法 精密称取一定量的供试品，加KOH乙醇溶 液后煮沸回流，得到的皂化液再经过提取、 洗涤、滤过、浓缩和干燥等处理，最后用 异丙醇溶解残渣并稀释成每1ml中含维生素 A为9-15个国际单位数的溶液，在300、310、 325、334nm波长处测定吸收度，并确定最 大吸收波长（应为325nm）。 • 2）计算 同第一法。见书p250-251
第二法的校正公式： A325校正=6.815 A325 –2.555A310-4.260A334
VitA
紫外线、 O2、氧化剂
环氧化物
VitA醛 VitA酸
△或有金属离子存在时更易氧化
环氧化物
VitA醛
VitA酸
（三） 、与三氯化锑发生呈色反应
VitA 蓝色 紫红
CHCl3
SbCl 3
（四） 、溶解性
不溶于水 易溶于有机溶剂和植物油等
概
维生素：
述
是维持人体正常代谢机能所 必需的 微量营养物资。 人体不能合成维生素。
分类
按溶解度分
VitA、D2、D3、 E、K1 等
脂溶性
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12)
VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。
本章仅对维生素(A、B1、C、 E)进行学习讨论
第一节 维生素A
R:
-H -COCH3 -COC15H31
• 3）换算因子： • 4）A值的选择： a.计算吸收度比值：与中国药典的吸收度比值相比 较，判断每个差值的绝对值是否超过0.02。 b.判断法 最大吸收波长在326-329nm之间，且5个波长下的 绝对值差值均不超过0.02时，可直接用328nm波 长处的测得的吸收度值求得吸收系数。
最大吸收波长在326-329nm之间，计算5个波长下 的绝对差值，如果有一个或几个超过0.02，应按 以下的方法进行判断： 若（A328校正-A328）*100%/A328 所得的数值在 ±3.0%，则仍不用校正公式计算吸收度。可直接 用A328代入E=A/C.L 若（A328校正-A328）*100%/A328 所得的数值 在-15.0%到-3.0%，则应用A328校正代入E=A/C.L 若（A328校正-A328）*100%/A328 所得的数值在小于 -15%或大于+3%，则不能用本法测定，应使用第 二法。