结核分枝杆菌痰培养及耐利福平药敏试验分析
结核杆菌耐药实验工作总结
结核杆菌耐药实验工作总结
结核病是一种严重的传染病,由结核杆菌引起,严重威胁着全球人类的健康。
随着抗生素的广泛使用,结核杆菌对抗生素的耐药性也在不断增加,给结核病的治疗带来了巨大挑战。
为了更好地了解结核杆菌的耐药性,我们进行了一系列的实验工作,并取得了一些重要的成果。
首先,我们收集了不同地区的结核病患者的痰样本,并从中分离出结核杆菌。
然后,我们对这些结核杆菌进行了药敏试验,测试它们对不同抗生素的耐药性。
结果显示,一些结核杆菌对一线抗结核药物如异烟肼、利福平等产生了耐药性,甚至对二线抗结核药物如利福平、卡那霉素也表现出了耐药性。
这些发现提示我们,结核杆菌的耐药性已经成为了一个严重的问题,需要引起我们的高度重视。
接着,我们对耐药结核杆菌的耐药机制进行了深入研究。
我们发现,结核杆菌的耐药性主要是由于其基因突变导致了药物的靶标蛋白的结构改变,从而使得药物无法起到预期的治疗效果。
这些研究成果为我们进一步探索克服结核杆菌耐药性提供了重要的理论基础。
最后,我们还对一些新型抗结核药物的活性进行了测试。
结果显示,这些新型抗结核药物对耐药结核杆菌具有较好的抑制作用,为我们寻找新的治疗方案提供了新的思路。
总的来说,我们的实验工作为我们更好地了解结核杆菌的耐药性提供了重要的数据支持,为我们开发新型抗结核药物提供了重要的理论基础。
我们相信,通过我们的不懈努力,一定能够克服结核杆菌的耐药性,为全球结核病的控制和治疗做出更大的贡献。
结核分枝杆菌药敏试验结果的判读
果的读取依赖专业设备,有利于质量控制。
以固体药敏试验为对照评估板式药敏试验结果
70人份对照药物符合率统计
总数/ 符合数/ 符合率
91.18%
91.49%
88.57%
93.48%
INH 耐药 (初治)
68.97%
93.66%
46.51%
97.42%
INH 耐药 (复治)
92.59%
87.04%
78.13%
95.92%
李卫彬.中华临床医师杂志.2012
全自动的利福平耐药检测实时PCR体系 (Xpert MTB/RIF)
Migration Health Department
66 94.30%
4人份中敏对耐药
17
分子药敏试验
V.S.
V.s.
基因芯片
HAIN Test
GeneXpert
18
19
结核分枝杆菌耐药机制
p基因型耐药:相关的耐药基因发生突变,是生长活跃的细菌 的主要耐药机制,导致疗效降低。 p表型耐药或药物耐受:由于一些表观遗传学改变,如蛋白表 达水平变化,蛋白修饰等导致的持留菌对药物的敏感性降低, 导致治疗的周期延长、复发。
69 98.60% 68 97.10% 69 98.60%
17993(0.8浓度敏感对1浓度敏感) 2人份敏感对耐药17999、18044 1人份敏感对耐药18026(NTM)
70 100%
--
57
81.40%
10份是中敏对耐药17076、17081、17082、17085、18013、18014、18026、18043、18049、 18051,3份是敏感对耐药18002、18015、18050
胸水两种方法结核分枝杆菌培养及药物敏感性检测结果分析
胸水两种方法结核分枝杆菌培养及药物敏感性检测结果分析摘要】目的探讨胸膜炎患者胸水两种方法培养结核分枝杆菌的效果和耐药情况,为临床提供诊断和制定治疗方案提供依据。
方法采集患者胸水分别采用BacT/ALERT@3D系统和罗氏法进行结核分枝杆菌的培养及药物敏感性测定。
结果 183例胸膜炎胸水两种方法共38例培养阳性,总阳性率20.8%,3D法优于罗氏法(P<0.05),25株菌株药敏测定结果有3株出现耐药,耐药率为12%。
结论虽然3D法在胸水培养方面优于罗氏法,但两种方法相互结合更能提高其检出率。
胸水结核菌培养和药敏实验可为临床诊断和指导用药提供重要依据。
【关键词】胸水结核分枝杆菌培养【中图分类号】R446.5【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)02-0110-02胸膜炎又称“肋膜炎”,是致病因素(病毒或细菌)刺激胸膜所致的胸膜炎症。
结核性胸膜炎是结核病的一种常见类型,其与肺结核病的诊断和治疗一样,主要依赖病源菌检测,因耐药率的上升给临床的治疗带来困难,故探讨不同方法对结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌培养和耐药性试验显得很重要。
1 材料与方法1.1 病例来源183例标本均来自2007年1月~2011年12月到我院就诊患者的胸水,其中男137例,女51例,年龄为10~86岁。
1.2 仪器法国生物梅里埃公司提供的BacT/ALERT@3D120 (以下简称3D)微生物检测系统。
1.3 试剂 3D培养基由法国生物梅里埃公司提供;罗氏培养基和pH 6.8的磷酸盐缓冲液、消化液等相关试剂均为本室自备。
1.4 方法先用消化液将胸水标本进行消化15 min后加缓冲液中和,3000r/min离心取沉淀分别接种于1瓶3D培养基(接种量为0.5 ml)和1支罗氏培养基(接种量为0.2 ml)。
3D培养基用3D系统培养,按说明书操作,阳性立即转种到罗氏培养基,阴性42d发阴性报告;罗氏培养基置于37℃的孵育箱进行培养,阳性用含各种药罗氏培养基管进行药敏试验,阴性56d发报告。
结核分枝杆菌药敏试验分析
公 司生产 。结核分枝 杆菌药 敏培养 基 ( 比例 法 ) 由广 州凯升 生物科 技有 限公 司生 产。
果 9 6例药敏试验 中, 结核分枝杆菌总耐药菌株为 4 1 例, 总耐药率为 4 2 . 7 %, 其 中耐多药菌株 2 9株 , 耐 药率为 3 0 . 2 % 。结论
复治 。
本市结核患者 已出现耐药趋势 , 且有向耐多药发展 , 而在 没有 出现更有 效新药替
代 已产生耐药 的药物前 , 必须坚 持科 学合理 的抗 结核病 药物 治疗原 则 , 从 而 减少传 染性 肺结 核患 者 的
培养基 , 接种完毕 置 3 7  ̄ C恒温培养箱 内培养 。
1 . 2 . 2 药 敏试验
将所有培养 出的 阳性 标本待 测菌液 制备
成1 0~ 2 g / L和 1 O一 4 g / L菌悬液 , 分 别用 2 2 S WG标 准接种 环蘸取 1 环( 即0 . 0 1 m 1 ) 的菌液 , 用划线法将 l O~2 g / L菌悬 液均 匀 接 种 分 别 含 异 烟 肼 ( I N H) 、 利福 平 ( R F P) 、 链 霉 素 ( S M) 、 吡 嗪酰 胺 ( P Z A) 、 乙胺 丁 醇 ( E M B) 、 对 氨 基 水 杨 酸 ( P A S ) 、 丙硫异烟胺 ( 1 3 2 1 T H) 、 卡那 霉 素 ( K M) 、 卷 曲霉 素 ( C P M) 药敏 培养基表面 , 将l 0— 4 g / L菌悬 液接种 于对 照培 养基表 面 , 应注意是 菌液尽 可能均匀 分散于培 养基斜 面。接
肺结核病人的痰培养和药敏检测情况研究
Vo 1 3 O
.
No . 6
2 01 7
文章 编 号 : 1 0 0 4 — 4 3 3 7 ( 2 0 1 7 ) 0 6 — 0 8 6 8 — 0 2
中 图分 类 号 : R 4 4 6 . 5
的 疑 似肺 结 核 患 者 1 4 0例 , 均 开展 痰 培 养 与药 敏 检 测 , 分析其结果 。结果 : 1 4 0例 患 者 中涂 阳 率 为 2 7 . 1 , 涂 阳患 者 中培 养 结 核 分 歧
杆菌阳性率为 7 8 . 9 , 涂阴患者中培养阳性率为 2 2 . 5 %, 对 比差 异 明显 ( Pd o . 0 5 ) ; 总耐药率为 9 . 3 , 多耐 药率为 8 . 6 , 耐 多 药 率 为
者, 开展痰培养与药敏试验 。 1 资 料 与 方 法 1 . 1 一 般 资 料
对 比为 ; ( 检验 , P< O . 0 5为代 表 差 异 有 统 计 学 意 义 。
2 结 果
2 . 1 涂 片 与 培 养
1 4 0 例 患 者 中涂 阳率 为 2 7 . 1 ( 3 8 / 1 4 0 ) , 涂 阴率 为 7 2 . 9
2 . 2 结 核 分 歧 杆 菌 培 养 结 果
1 4 0例 患 者 培 养 阳 性 率 为 3 7 . 9 ( 5 3 / 1 4 0 ) , 其中2 5 . 7
本次研究对 象来 源于我 院 2 0 1 5年 1 2月 ~ 2 0 1 6年 1 2月 收治的疑似肺结核患者 1 4 0例 , 其中1 0 4例 为 男 性 , 3 6 例 为 女 性, 年龄为 1 8 ~7 9岁 , 平 均( 4 2 . 8 ±7 . 5 ) 岁; 1 2 1例 为 初 治 占 8 6 . 4 , 1 9例 为 复 治 占 1 3 . 6 。
结核分枝杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测与痰培养及药敏试验结果比较分析
结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测与痰培养及药敏试验结果比较分析作者:徐婧孔维顺来源:《中国社区医师》2019年第01期doi:10.3969/j .issn.1007-614x.2019.01.092摘要目的:探讨结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)与痰培养及药敏试验结果的差异。
方法:收治检测的可疑肺结核患者30例进行Xpert MTB/RIF和痰培养及药敏试验。
结果:患者30例经过跟踪观察,确诊肺结核21例,排除肺结核9例。
痰液涂片抗酸染色:30例患者找到抗酸杆菌10例,阳性检出率33.30A(10/30),正确诊断率47.6%(10/21);痰培养及药敏试验结果:痰培养阳性15例,阳性检出率50.0%(15/30),正确诊断率71.4%(15/21),药敏试验利福平耐药4例,耐药率19.0% (4/21)。
Xpert MTB/RIF:结核分支杆菌阳性21例,阳性检出率70.0%(21/30),正确诊断率100.0%(21/21);利福平耐药3例,耐药率14.3% (4/21)。
结论:结核分枝杆菌/利福平耐药Xpert MTB/RIF与痰培养及药敏试验均是诊断结核病的重要手段,Xpert MTB/RIF检查更快速,值得临床推广。
关键词结核分枝杆菌;Xpert MTB/RIF:痰培养;抗酸染色;药敏试验结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病,痰液涂片抗酸染色是诊断结核病的重要依据,但是痰涂片阳性率低,结核分枝杆菌培养及药敏试验条件要求苛刻且耗时长,影响了诊断和治疗。
结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)是一項在全球获得广泛认可的结核快速诊断技术[1],近年来在临床广泛应用,为探讨探讨结核分枝杆菌/利福平耐药XpertMTB/RIF与痰培养及药敏试验结果的差异,2017年1月-2018年1月收治可疑肺结核患者30例进行Xpert MTB/RIF和痰培养及药敏试验结果,现将结果汇报如下。
治疗结核分枝杆菌的药物实验分析
治疗结核分枝杆菌的药物实验分析作者:刘凯来源:《中小企业管理与科技》2009年第04期摘要:目的分析结核分枝杆菌对利福平的耐药现况,为结核病的防治提供依据。
方法采用直接涂片检查法和培养法,对肺结核病人的痰液进行检查,阳性标本经抗酸染色镜检确认后,采用绝对浓度法的间接法进行耐药性测定。
结果131例疑似肺结核病人痰标本中,直接涂片法检出阳性标本21例,阳性检出率为16.0%(21/131):培养法共检出阳性标本56例,阳性检出率为42.7%(56/131)。
比较两种检测方法的阳性检出率,差异有显著性(P<0.05)。
培养法高于直接涂片法。
将培养阳性标本进行利福平药物敏感性试验,其中有17株发生耐药,耐药率为30.4%(17/56)。
结论结核杆菌对利福平的初始耐药率仍处在较高水平,必须进一步加强对耐药结核杆菌的监控。
关键词:结核分枝杆菌福平药敏试验0引言全球80%的结核患者分布在22个结核病高负担国家,中国是其中之一,结核患者人数仅次于印度居世界第二位。
但是,近10年来,临床上发现抗结核药的耐药性对结核病化疗效果的影响日益严重,尤其是利福平耐药的发生率不断上升给抗结核治疗带来较大的困难。
为了解结核杆菌对利福平耐药的状况,为临床合理、联合用药提供依据,特作本研究。
结果报告如下。
1材料与方法1.1病例来源某医院检查首次确诊为肺结核的病人,共131例。
病例发病前均未服用过抗结核药物。
结核分枝杆菌参考菌株为H37Rv敏感株,由中国结核病防治临床中心国家参比实验室提供。
1.2痰液直接涂片检查用接种环取脓性痰液1~2环,均匀涂于载玻片上,待自然干燥,微火焰固定,经抗酸染色后镜检。
1.3分枝杆菌培养1.3.1培养基为酸性罗氏培养基。
成分谷氨酸钠(纯度95%以上)7.2g,KH2PO4 14g,MgSO4·7H2O 0.24g,枸橼酸镁0.6g,甘油12mL,蒸馏水600mL,马铃薯淀粉30g,新鲜鸡卵液1000mL,2%孔雀绿水溶液20mL。
肺结核患者痰培养的菌谱及药敏分析
肺结核患者痰培养的菌谱及药敏分析【关键词】肺结核;菌谱;药敏1 资料与方法1.1 标本来源2006年1月至2008年9月内科和胸外科经临床确诊为肺结核的住院患者同时伴有呼吸系统感染患者晨起第一次咳出的痰液,要求标本置于无菌瓶中,留取标本后,立即送检。
1.2 药敏纸片选用16种:均购自北京天坛药物生物技术开发公司。
1.3 细菌分离培养与鉴定方法均按新版《全国临床检验操作规程》有关章节进行操作。
1.4 药敏试验方法抗生素敏感试验采用纸片扩散法(Kirby-Bauer)。
挑取分离鉴定的菌落,用无菌生理盐水制成菌悬液,用无菌棉签均匀涂布于培养基中,15 min之内贴药敏纸片,35℃培养箱中孵育18 h测量抑菌环直径,并根据NCCLS 标准判断敏感(S)、中介度(I)、耐药(R)。
同时定期用标准金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCD27853)、大肠埃希菌(ATCC25922)菌株做药敏质控。
2 结果2.1 从呼吸系统感染患者痰液中分离出18种属795株细菌,其中革兰氏阳性菌87株,革兰氏阴性菌708株。
菌株的分布情况见表1。
2.2 对分离菌株做药敏实验,经统计学处理,对抗生素的耐药率见表2,较常见菌株耐5种及5种以上常用抗生素的情况见表2。
3 讨论3.1 呼吸系统感染性疾病如咽喉炎、气管炎、支气管炎、肺炎等疾病是临床的常见病,而肺结核合并以上疾病的病例在临床上也较常见。
细菌耐药性迅速增长已成为当今全球关注的热点[1]。
笔者提供的资料表明,引起肺结核合并呼吸系统感染的常见菌中革兰阴性杆菌占绝对优势,约89%,其中感染率最高的是大肠埃希菌,占42.1%。
而排在第3、5、6位的依次为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、肠杆菌属所占比率分别是8.9%、5.3%、4.5%。
革兰阳性球菌中的金黄色葡萄球菌虽然排在第2位,但只占感染总数的12.7%,排在第4位的肺炎链球菌占7.4%。
总之肺结核合并呼吸系统感染常见菌依次为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯氏菌,而以革兰阴性杆菌为主。
结核分枝杆菌的耐药性及检测方法
结核分枝杆菌的耐药性及检测方法结核病是一种由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的慢性传染病,主要累及肺部,但也可侵犯其他器官。
然而,近年来出现了结核分枝杆菌对抗生素的耐药性问题,给结核病的防治带来了巨大挑战。
本文将就结核分枝杆菌的耐药性机制以及常用的检测方法进行论述。
一、耐药性机制1.多重耐药(MDR)多重耐药是指结核分枝杆菌对两种最主要的抗结核药物——异烟肼和利福平同时产生耐药现象。
这种耐药形式使得传统治疗手段无法有效控制感染,并且增加了传播风险。
2.延迟耐药(XDR)延迟耐药是在MDR基础上,又产生对氟喹诺酮类等二线抗结核药物的耐药性。
这使得治疗选择更加有限,且通常需要使用更昂贵和毒副作用更大的抗结核药物。
3.全耐药(TDR)全耐药是指对所有一线和二线抗结核药物都产生耐药现象,这种情况下仅能依靠其他的药物才能进行治疗。
然而,这些替代治疗方案费用昂贵且可行性有限。
二、检测方法1.传统的抗生素敏感性测试传统的抗生素敏感性试验使用培养分枝杆菌,并将其接种于含有抗生素的琼脂平板上。
通过观察细菌在不同浓度抗生素下的生长情况来判断其对该抗生素是否具有耐药性。
尽管这种方法简单易行,但其确诊时间较长,且容易出现误判。
2.分子检测方法随着分子生物学技术的进步,利用PCR技术可以更快速地检测结核分枝杆菌的耐药基因突变。
这种方法通过检测与耐药性相关基因序列的存在与否来确定细菌对特定抗生素是否具有耐药性。
由于PCR技术高灵敏度和高特异性,它已成为常用的结核分枝杆菌耐药性检测方法之一。
3.流式细胞术流式细胞术利用荧光标记的结核分枝杆菌单个细胞对特定抗生素的反应进行测定。
通过测量细胞内荧光信号的变化来判断其对抗生素是否产生了耐药性。
这种方法具有高通量和快速的优势,但需要对样本进行前期处理以获得单个菌落。
4.质谱法质谱法利用MALDI-TOF质谱仪检测结核菌代谢产物图谱与数据库匹配,从而快速确定结核分枝杆菌的耐药类型。
痰标本中结核分枝杆菌培养及药敏检测结果分析
痰标本中结核分枝杆菌培养及药敏检测结果分析陈爱蓉;李建武;温贵华【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2012(033)015【摘要】目的探讨结核分枝杆菌在变色液体培养基中快速培养及药敏试验可靠性.方法分别采用新型变色液体培养基和改良罗氏培养基对198例痰标本进行分枝杆菌培养及药敏试验,对比分析试验结果.结果变色液体培养基及改良罗氏培养基检出阳性率分别是37.9%和37.4%.变色液体培养基试验结果平均时间为28 d,耐药率分别为链霉素8.00%、异烟肿5.33%、利福平4.00%和乙胺丁醇4.00%;改良罗氏培养基试验结果平均时间为62天,耐药率分别为链霉素8.11%、异烟肿5.41%、利福平4.05%和乙胺丁醇4.05%;两者结果差异无统计学意义(P>0.05).多重耐药结果分别为5.33%和5.41%.结论变色液体培养基是一种适合在基层实验室推广应用的结核分枝杆菌辅助诊断方法,具有快速、简单、灵敏度高的优点.【总页数】3页(P1860-1862)【作者】陈爱蓉;李建武;温贵华【作者单位】北京大学深圳医院,广东深圳,518035;北京大学深圳医院,广东深圳,518035;广东深圳宝安区慢病防治院,518036【正文语种】中文【相关文献】1.MGIT960与罗氏培养法在结核分枝杆菌培养及药敏试验中的比对分析 [J], 张娟;蒋俊;张红;贾琳;魏成翠;石莲;马静红;杨立军2.淋巴结结核脓液中结核分枝杆菌的培养和药敏 [J], 王朝辉;张洁;李国星3.BacT/ALERT3D在结核分枝杆菌快速培养和药敏试验中的应用 [J], 徐东芳;王庆4.微量液体培养基最低抑菌浓度法与罗氏比例法在结核分枝杆菌药敏试验中的价值比较 [J], 刘金娜5.结核分枝杆菌快速培养及常规药敏试验在脊柱结核治疗中的应用研究 [J], 周曙光因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
结核分枝杆菌的病原学检测及耐药性分析
关键词:结核分枝杆菌;病原学;耐药性
一、 结核分枝杆菌的生物学特点
结核分枝杆菌简称结核杆菌,属于分枝杆菌属,1882 年
由德国学者 Koch 发现并证实是引起结核病的病原菌。 结核
分枝杆菌细长略弯曲,有时呈分枝状,抗酸染色阳性细菌呈
红色,为专性需氧菌,无芽胞,无鞭毛。 在 37℃ 环境中生长良
吕少恒,大城县疾病预防控制中心。
( MDR-TB) 的概念,即对利福平( RFP) 、异烟肼( INH) 同时
耐药。 2006 年 3 月 首 次 提 出 并 报 道 严 重 耐 多 药 结 核 病
( XDR-TB) 的念,XDR-TB 定义为除了对利福平、异烟肼耐
药之外,对 6 种主要二线抗结核药物( 氨基糖甙类、多肽类、
氟喹诺酮类、硫代酰胺、环丝氨酸、对氨基水杨酸) 中至少 2
抗原,此为血清抗体检测诊断的基础。 血清结核抗体检测方
法操作简单,重复性好,结果判断清楚,避免人为因素的干扰
及主观判断对结果的影响,对于涂片阴性、无痰患者、儿童及
肺外结核的临床诊断有重要参考价值。 结核菌素试验操作简
单,但既往感染过结核分枝杆菌而治愈的人群也会出现阳性
结果。 由于我国结核分枝杆菌感染率高,因此,该试验在人群
中有着极高的假阳性率。 而感染结核分枝杆菌 15 个月后,体
内结核抗体也已消失。 因此,人群结核分枝杆菌高感染率对
血清结核抗体检查的影响较结核菌素试验小。 此外,结核菌
素试验结果会受到接种卡介苗的影响。
参考文献:
[1] 吴丹丹.应用逆转录-环介导等温扩增技术检测结核
分枝杆菌 16S rRNA 的研究[ D] .承德:承德医学院,2019.
肺结核诊断方法,具有简便、快捷、低廉的优点,特异性强。 但
分枝杆菌快速培养鉴定及耐药性检测的结果分析
It a dA g s 21,o.2N .2 n LbMe, uut 01V 1 ,o1 J 3
・l 5 ・ 27
・
论
著 ・
分 枝杆 菌 快 速培 养 鉴 定及 耐药 性检 测 的结 果分 析
温贵 华 , 刘晋 洪 , 刘 婷 , 伊 , 陈 郭夏 娜 , 翁琼琳 , 勇龙 , 惠婷 邱 赖
( 东省 深 圳 市 宝 安 区 慢 性 病 防 治 院 5 8 3 ) 广 1 1 3
摘 要 : 目的 评 价 变 色液 体 培 养基 快 速 一 步 法 检 测 试 剂 对 分 枝 杆 菌培 养 、 定 和 药敏 测 定 的 效 果 。方 法 采 用 快 速 变 色液 鉴 体 培 养 基 和 传 统 酸性 罗氏 培 养 法 对 1 8例 痰 标 本 进 行 结 核 分 枝 杆 菌检 测 。结 果 快 速 变 色液 体 培 养 法 和 酸 性 罗 氏 培 养 法 , 个 9 整
Cu e Ho p t l S e z e a gd n 1 1 3, i a r s ia , h n h n Gu n o g 5 8 3 Ch n )
Ab ta t Obe t e To e au t h feto fc l v t n,d n iiain a d d u ss s e tbl y tsig frMy o a tru sr c: jci v v laet e efcin o ut ai ie t c t n r g u c p ii t e t o c b ceim i o f o i n
Th n y i f i ntf c to a ug t l r n e t s i g f r M yc ba t r u ub r u o i hr ug t a d c tva i n e a al s s o de i i a i n nd dr o e a c e tn o o c e i m t e c l s s t o h he r pi uli to
利福平耐药结核病患者表型药敏试验结果分析及与Xpert_MTB
㊃论 著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2024.03.009利福平耐药结核病患者表型药敏试验结果分析及与X pe r t MT B /R I F 结果比较*万 荣1,李光妹1,季永静1,黄 艳1,刘 蕾2,李明武1ә1.云南省昆明市第三人民医院结核二科,云南昆明650041;2.大理大学公共卫生学院,云南大理671000摘 要:目的 分析利福平(R I F )耐药结核病患者表型药敏试验结果,并与结核分枝杆菌(MT B )及R I F 耐药菌检测(X pe r t MT B /R I F )结果进行对比㊂方法 回顾性收集2019年1月至2021年12月昆明市第三人民医院收治的经X pe r t MT B /R I F 证实R I F 耐药的288例结核病患者的临床资料,其中MT B 培养阴性63例,MT B 培养阳性225例㊂除8例患者因联系不上未行药敏试验外,其余213例MT B 培养阳性患者均采用微孔板比例法进行药敏试验㊂比较表型药敏检测结果及其与X pe r t MT B /R I F 结果的差异㊂结果 行药敏试验的213例R I F 耐药结核病患者中,M D R 患者比例最高,占53.5%(114/213),广泛耐药患者占22.5%(48/213);男性耐药患者比例[65.7%(140/213)]高于女性[34.3%(73/213)],但差异无统计学意义(P >0.05);R I F 耐药结核病患者中,初治患者耐药发生率较高;在M D R 和广泛耐药患者中,复治患者耐药发生率均高于初治患者,差异均有统计学意义(χ2=5.648㊁13.385,P <0.05)㊂一线抗结核药物耐药率从高到低依次为R I F ㊁利福喷汀㊁异烟肼㊁链霉素㊁乙胺丁醇,其耐药率分为96.7%(206/213)㊁96.7%(206/213)㊁76.1%(162/213)㊁26.8%(57/213)㊁20.2%(43/213)二线抗结核药物耐药率从高到低依次为利福布汀㊁莫西沙星㊁左氧氟沙星㊁对氨基水杨酸钠㊁阿米卡星㊁帕司烟肼㊁卡那霉素㊁卷曲霉素㊁丙硫异烟胺㊁克拉霉素㊁氯法齐明,耐药率分别为93.8%(200/213)㊁19.2%(41/213)㊁18.8%(40/213)㊁6.1%(13/213)㊁4.7%(10/213)㊁4.7%(10/213)㊁4.7%(10/213)㊁4.2%(9/213)㊁1.4%(3/213)㊁1.4%(3/213)㊁0.9%(2/213)㊂进行表型药敏试验的213例患者中,有7例(3.3%)显示基因耐药表型敏感,206例(96.7%)显示基因耐药表型耐药㊂结论 氟喹诺酮类耐药率在二线药物中耐药率最高,故应加强X pe r t MT B /R I F 检测和抗结核药物表型药敏试验,以指导临床用药㊂关键词:利福平; 耐药; 结核分枝杆菌; 表型药敏; 结核病中图法分类号:R 446.5,R 52文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)03-0325-04A n a l y s i s o f p h e n o t y p i c d r u g s e n s i t i v i t y t e s t r e s u l t s i n r i f a m pi c i n -r e s i s t a n t t u b e r c u l o s i s p a t i e n t s a n d c o m p a r i s o n w i t h X pe r t M T B /R I F r e s u l t s *WA N R o n g 1,L I G u a n g m e i 1,J I Y o n g j i n g 1,HU A N G Y a n 1,L I U L e i 2,L I M i n gw u 1ә1.T h e S e c o n d D e p a r t m e n t o f T u b e r c u l o s i s ,K u n m i n g T h i r d P e o p l e 's H o s p i t a l ,K u n m i n g ,Y u n n a n 650041,C h i n a ;2.S c h o o l o f P u b l i c H e a l t h o f D a l i U n i v e r s i t y ,D a l i ,Y u n n a n 671000,C h i n a A b s t r a c t :O b je c t i v e T o a n a l y z e t h e r e s u l t s of p h e n o t y p i c d r ug s e n s i t i v i t y t e s t r e s u l t s i n r i f a m p i c i n (R I F )-r e s i s t a n t t u b e r c u l o s i s p a t i e n t s ,a n d c o m p a r e th e r e s u l t s o f M yc o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s (MT B )a nd R I F re s i s t -a n c e (X p e r t MT B /R I F )a s s a y.M e t h o d s T h e c l i n i c a l d a t a o f 288p a t i e n t s w i t h t u b e r c u l o s i s a d m i t t e d t o t h e T h i r d P e o p l e 's H o s p i t a l o f K u n m i n g C i t y w i t h R I F -r e s i s t a n c e c o n f i r m e d b y X p e r t MT B /R I F f r o m J a n u a r y2019t o D e c e m b e r 2021w e r e r e t r o s p e c t i v e l y c o l l e c t e d ,o f w h i c h 63c a s e s w e r e MT B c u l t u r e n e ga t i v e a n d 225c a s e s w e r e MT B c u l t u r e p o s i t i v e .A l l 213MT B c u l t u r e -p o s i t i v e p a t i e n t s w e r e s ub j ec t ed t o d r u g se n s i t i v i t yt e s -t i n g b y t h e m i c r o t i t e r p l a t e p r o p o r t i o n a l m e t h o d ,e x c e p t f o r 8p a t i e n t s w h o d i d n o t u n d e r g o d r u g s e n s i t i v i t yt e s t i n g b e c a u s e t h e y c o u l d n o t b e c o n t a c t e d .T h e p h e n o t y p i c d r u g s e n s i t i v i t y re s u l t s a n d t h e i r d if f e r e n c e s w i t h X p e r t MT B /R I F r e s u l t s w e r e c o m p a r e d .R e s u l t s A m o ng th e 213R I F -r e s i s t a n c e t u b e r c u l o s i s p a t i e n t s w h o u n d e r w e n t d r u g s e n s i t i v i t y t e s t i n g ,t h e p r o p o r t i o n o f M D R p a t i e n t s w a s t h e h i g h e s t ,a c c o u n t i n g fo r 53.5%(114/213),a n d t h e p r o p o r t i o n o f e x t e n s i v e l y d r u g -r e s i s t a n t p a t i e n t s w a s 22.5%(48/213);t h e p r o p o r t i o n o f d r u g -r e s i s t a n t p a t i e n t s i n m e n [65.7%(140/213)]w a s h i gh e r t h a n t h a t i n w o m e n [34.3%(73/213)],b u t t h e d i f f e r e n c e w a s n o t s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t (P >0.05);a m o n g RI F -r e s i s t a n c e t u b e r c u l o s i s p a t i e n t s ,t h e i n c i -d e n c e o f r e s i s t a n c e w a s h i g h e r i n p r i m a r y -t r e a t e d p a t i e n t s ;a m o n g M D R a n d e x t e n s i v e l y re s i s t a n t p a t i e n t s ,t h e ㊃523㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第3期 L a b M e d C l i n ,F e b r u a r y 2024,V o l .21,N o .3*基金项目:云南省昆明市卫生健康委员会卫生科研课题项目(2021-03-08-006)㊂ 作者简介:万荣,女,副主任医师,主要从事耐药结核病诊治方向的研究㊂ ә 通信作者,E -m a i l :yn k m l m w@s i n a .c o m ㊂i n c i d e n c e o f R I F-r e s i s t a n c e i n r e t r e a t e d p a t i e n t s w a s h i g h e r t h a n t h a t i n p r i m a r y-t r e a t e d p a t i e n t s,a n d t h e d i f f e r e n c e s w e r e s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(χ2=5.648,13.385,P<0.05).T h e r e s i s t a n c e r a t e s o f f i r s t-l i n e a n t i-t u b e r c u l o s i s d r u g s w e r e R I F,r i f a p e n t i n e,i s o n i a z i d,s t r e p t o m y c i n a n d e t h a m b u t o l i n d e s c e n d i n g o r d e r,w h i c h w e r e96.7%(206/213),96.7%(206/213),76.1%(162/213),26.8%(57/213)a n d20.2%(43/213),r e s p e c-t i v e l y;w h i l e t h e r a t e s o f s e c o n d-l i n e a n t i t u b e r c u l o s i s d r u g s w e r e r i f a b u t i n,m o x i f l o x a c i n,l e v o f l o x a c i n,s o d i u m p a r a a m i n o s a l i c y l a t e,a m i k a c i n,p a s i n i z i d,k a n a m y c i n,c a p r e o m y c i n,p r o p i o n a t e i s o n i a z i d,c l a r i t h r o m y c i n,c l o f a z i-m i n e i n d e s c e n d i n g o r d e r,w i t h r e s i s t a n c e r a t e s o f93.8%(200/213),19.2%(41/213),18.8%(40/213),6.1% (13/213),4.7%(10/213),4.7%(10/213),4.7%(10/213),4.2%(9/213),1.4%(3/213),1.4%(3/213)a n d 0.9%(2/213)r e s p e c t i v e l y.I n213p a t i e n t s w h o u n d e r w e n t p h e n o t y p i c d r u g s u s c e p t i b i l i t y t e s t i n g,7c a s e s(3.3%)s h o w e d g e n e t i c a l l y r e s i s t a n t p h e n o t y p i c s e n s i t i v i t y a n d206c a s e s(96.7%)s h o w e d g e n e t i c a l l y r e s i s t-a n t p h e n o t y p i c r e s i s t a n c e.C o n c l u s i o n F l u o r o q u i n o l o n e s h a v e t h e h i g h e s t r a t e o f r e s i s t a n c e a m o n g s e c o n d-l i n ed r u g s,s o X pe r t MT B/R I F t e s t i n g a n d p h e n o t y p i c d r u g s e n s i t i v i t y t e s t i n g of a n t i-T B d r ug s sh o u l d b e s t r e n g t h-e n e d t o g u i d e c l i n i c a l m e d i c a t i o n.K e y w o r d s:r i f a m p i c i n;r e s i s t a n t; M y c o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s;p h e n o t y p i c d r u g s e n s i t i v i t y;t u b e r-c u l o s i s结核病是全球面临的重大公共卫生问题,尤其是近些年耐药菌株的流行,使结核病的控制面临更加严峻的局面㊂耐多药(M D R)结核病是指结核病患者感染的结核分枝杆菌(MT B)经体外药物敏感性试验(以下简称药敏试验)证实至少同时对异烟肼和利福平(R I F)耐药[1]㊂世界卫生组织(WHO)2022年发布的‘全球结核病年度报告“显示,2021年我国估算的结核病新发患者数量为78万,实验室确诊病例16826例,仍是耐药高负担国家之一[2]㊂由于90%的R I F耐药株同时也对异烟肼耐药,因此,R I F耐药被认为是M D R的重要标志[3]㊂研究R I F耐药患者耐药情况,对后期制订合理用药方案有重要意义㊂笔者通过对288例R I F耐药结核病患者对一线㊁二线抗结核药物耐药情况进行分析,以期为临床用药提供参考㊂现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料回顾性收集2019年1月至2021年12月昆明市第三人民医院收治的经结核分枝杆菌及利福平耐药快速检测(X p e r t MT B/R I F)鉴定为MT B 感染㊁并对R I F耐药的288例患者的临床资料㊂其中经B A C T E C MG I T960S y s t e m鉴定MT B培养阴性63例,男39例㊁女24例,平均年龄(42.5ʃ12.0)岁,初治肺结核30例㊁复治肺结核33例;MT B培养阳性225例,男148例㊁女77例,平均年龄(41.4ʃ10.5)岁,初治肺结核78例㊁复治肺结核147例㊂本研究经本院医学伦理委员会审批通过(审批号: 2021021806)㊂所有研究对象对本研究均知情同意㊂1.2方法225例MT B培养阳性患者中,除8例患者因联系不上未行药敏检测外,其余213例患者均采用微孔板比例法进行表型药敏试验,主要包括异烟肼㊁R I F㊁乙胺丁醇㊁链霉素㊁利福喷汀5种一线抗结核药及左氧氟沙星㊁阿米卡星㊁卷曲霉素㊁丙硫异烟胺㊁帕司烟肼㊁莫西沙星㊁对氨基水杨酸钠㊁克拉霉素㊁利福布汀㊁卡那霉素㊁氯法齐明11种二线抗结核药物㊂1.3观察指标比较表型药敏结果及其与X p e r t MT B/R I F结果的差异㊂1.4统计学处理采用S P S S22.0统计软件进行数据分析㊂计数资料以例数或百分比表示,组间比较采用χ2检验;符合正态分布计量资料以xʃs表示,组间比较采用t检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1 R I F耐药结核病患者耐药情况分析213例行微孔板药敏试验的结核病患者中,M D R患者比例最高,占53.5%(114/213),广泛耐药患者占22.5% (48/213),且男性耐药患者比例[65.7%(140/213)]高于女性[34.3%(73/213)],但差异无统计学意义(P>0.05);单耐R I F的结核病患者中,初治患者耐药发生率较高;在M D R和广泛耐药患者中,复治患者耐药发生率均高于初治患者(χ2=5.648㊁13.385,P< 0.05)㊂见表1㊂表1 R I F耐药结核病患者耐药情况分析[n(%)]耐药情况n性别男女治疗史初治复治全敏53(60.0)2(40.0)3(60.0)2(40.0)单耐异烟肼22(100.0)0(0.0)0(0.0)2(100.0)单耐R I F3924(61.6)15(38.4)21(53.8)18(46.2)多耐药55(100.0)0(0.0)2(40.0)3(60.0) M D R11473(64.0)41(36.0)37(32.6)77(67.5)a 广泛耐药4833(68.8)15(31.2)8(16.7)40(83.3)a 合计213140(65.7)73(34.3)71(33.3)142(66.7)注:与同一耐药情况初治患者比较,a P<0.05㊂2.2213例行微孔板药敏试验患者中一㊁二线抗结核㊃623㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第3期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y2024,V o l.21,N o.3药物耐药情况一线抗结核药物耐药率从高到低依次为R I F㊁利福喷汀㊁异烟肼㊁链霉素㊁乙胺丁醇,其耐药率分别为96.7%(206/213)㊁96.7%(206/213)㊁76.1%(162/213)㊁26.8%(57/213)㊁20.2%(43/ 213);二线主要抗结核药物耐药率从高到低依次为利福布汀㊁莫西沙星㊁左氧氟沙星㊁对氨基水杨酸钠㊁阿米卡星㊁帕司烟肼㊁卡那霉素㊁卷曲霉素㊁丙硫异烟胺㊁克拉霉素㊁氯法齐明,耐药率分别为93.8%(200/ 213)㊁19.2%(41/213)㊁18.8%(40/213)㊁6.1%(13/ 213)㊁4.7%(10/213)㊁4.7%(10/213)㊁4.7%(10/ 213)㊁4.2%(9/213)㊁1.4%(3/213)㊁1.4%(3/213)㊁0.9%(2/213)㊂见表2㊂表2213例行微孔板药敏试验患者中一㊁二线抗结核药物耐药情况[n(%)]药物名称耐药数量药物名称耐药数量异烟肼162(76.1)丙硫异烟胺3(1.4) R I F206(96.7)帕司烟肼10(4.7)乙胺丁醇43(20.2)莫西沙星41(19.2)链霉素57(26.8)对氨基水杨酸钠13(6.1)利福喷汀206(96.7)克拉霉素3(1.4)左氧氟沙星40(18.8)利福布汀200(93.8)阿米卡星10(4.7)卡那霉素10(4.7)卷曲霉素9(4.2)氯法齐明2(0.9) 2.3 X p e r t MT B/R I F与R I F耐药表型药敏检测结果比较本研究X p e r t MT B/R I F检出R I F耐药患者288例,有75例(26.1%)显示基因耐药表型未知;进行表型药敏试验的213例患者中,有7例(3.3%)显示基因耐药表型敏感,206例(96.7%)显示基因耐药表型耐药㊂3讨论有学者研究发现,约80%的R I F耐药结核病患者同时并发异烟肼耐药[3],WHO推荐单耐R I F的结核病患者可按照M D R结核病患者进行治疗[4]㊂但由于早期耐药方案缺乏其他药物的表型药物敏感试验结果支撑,一旦这些药物已发生耐药,则会明显影响其治疗效果及预后[5]㊂本研究288例X p e r t MT B/ R I F检测R I F耐药患者中,但有26.1%耐药表型药敏试验结果为未知㊂因此,为进一步了解R I F耐药的结核病患者对其他结核药物的耐药情况,笔者对R I F耐药结核病患者的表型药敏试验结果进行分析,为制订有效的治疗方案提供参考㊂2022全球结核病年报,再次推荐快速分子诊断检测,实现更早和更准确诊断结核病㊂2021年640万新发结核病病例中,仅有38%使用WHO推荐的快速分子检测[2]㊂G e n e X p e r t MT B/R I F检测整合了MT B 核酸及R I F耐药基因检测技术,灵敏度及特异度均较高,具有良好的可靠性[6-8]㊂2013年WHO将X p e r t MT B/R I F作为MT B感染的首选复筛查方法,替代传统的抗酸杆菌涂片和结核菌培养[9]㊂有研究发现, G e n e X p e r t MT B/R I F检测结果与R I F表型耐药检测结果具有高度一致性,可高达95%左右,已成为当前诊断MT B R I F耐药的金标准[10]㊂本研究以X p e r t MT B/R I F检测显示的R I F耐药结核病患者288例为研究对象,其中225例R I F耐药结核病患者培养阳性;行表型药敏试验的213例患者中,表型结果显示有5例全敏,2例为单耐异烟肼,R I F耐药(包括单耐R I F㊁多耐㊁耐多㊁广泛耐药)206例(96.7%),与文献[13]研究结果相似㊂本研究中有7例(3.3%)药敏检测结果显示基因耐药表型敏感,但依据‘结核病病原学分子诊断专家共识“[11],认为此种情况多为表型药敏试验耐药检测错误所致,推荐参照X p e r t MT B/ R I F检测结果㊂罗嘉韵等[12]研究X p e r t MT B/R I F 检出耐药菌株92.31%,表型药敏检测为96.15%,二者灵敏度㊁特异度比较差异均无统计学意义(P> 0.05),二者检测一致性检的K a p p a值为0.795㊂同时本研究发现X p e r t MT B/R I F检测阳性但培养阴性63例,培养阳性有225例㊂方木通等[13]研究发现,在R I F耐药患者中,41.04%的患者为初治患者,说明耐药MT B的传播是R I F耐药结核病的重要来源,管理并治愈R I F耐药患者,尽早降低其传染性,是控制R I F耐药结核病的根本方法㊂根据‘耐药结核病化学治疗指南(2019年简版)“[1]进行耐药分类,本研究结果显示耐多药结核病例数最高达53.5%(114/213),广泛耐药的比例也高达22.5%(48/213),且2种耐药患者中以复治患者占多数㊂本研究发现,一线抗结核药物耐药率从高到低依次是R I F㊁利福喷汀㊁异烟肼㊁链霉素㊁乙胺丁醇,其耐药率分别为96.7%㊁96.7%㊁76.1%㊁26.8%㊁20. 2%;异烟肼耐药率为76.1%,与WHO估算的全球异烟肼平均耐药水平(78%)基本一致,这也是WHO主张将R I F耐药结核病与M D R结核病同样对待的重要原因[2]㊂‘中国结核病预防控制工作技术规范“在R I F耐药方案中,左氧氟沙星和莫西沙星位于A组内首位,可见其组成耐药方案的重要性[12]㊂本研究中二线抗结核药物敏感性试验发现,莫西沙星和左氧氟沙星耐药率较高(19.2%㊁18.8%),明显高于其他二线抗结核药物,且M D R与广泛耐药患者中,复治患者耐药发生率明显高于初治患者(P<0.05)㊂方木通等[13]研究结果显示,当以R I F表型耐药结果为金标准时,其耐药率达到26.30%,且复治患者耐药发生比例较多㊂左氧氟沙星和莫西沙星作为核心药物,若出现此类药物耐药,会明显降低治疗方案的疗效,使治疗失败率上升[14-17]㊂治疗强化期应选择至少4种可能有效的抗结核药物组成方案,巩固期应选择至少3㊃723㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第3期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y2024,V o l.21,N o.3种可能有效的抗结核药物组成方案[18];评估某种药品在治疗方案中能否有效,需要综合多方面因素考量,包括患者个体药物敏感性试验结果㊁患者感染来源者的药敏试验结果㊁患者是否对存在交叉耐药的药物有耐药性㊁患者所在地区药物耐药水平,以及在患者既往治疗失败的方案中是否包含这一药品[19-20]㊂因此,临床医生在制订治疗方案之前,要详细询问其用药史,同时启用分子生物学方法检查氟喹诺酮类药是否存在耐药基因突变,并对培养阳性患者进行一㊁二线抗菌药物药敏试验十分必要㊂本研究不足之处为未对分子生物学基因突变与表型药物敏感试验进行对比研究㊂综上所述,R I F耐药结核病患者中,初治患者耐药发生率较高,在初治患者中开展X p e r t MT B/R I F 检测非常必要,M D R患者耐药多发生于复治患者,对于复治患者除常规开展X p e r t MT B/R I F检测外,还必须行MT B培养及一㊁二线抗结核药物表型药敏试验,且氟喹诺酮类耐药率在二线药物中耐药率最高,应加强分子生物学和表型试验对氟喹诺酮类药物灵敏度检测㊂参考文献[1]中国防痨协会.‘中国耐药结核病化学治疗指南“编委会.耐药结核病化学治疗指南(2019年简版)[J].中国防痨杂志,2019,41(10):1025-1073.[2]S A N J E E T B.WHO's g l o b a l t u b e r c u l o s i s r e p o r t2022[S].L a n c e t M i c r o b e,2023,4(1):e20.[3]S OMO S K O V I A,P A R S O N S L M,S A L F I N G E R M.T h em o l e c u l a r b a s i s o f r e s i s t a n c e t o i s o n i a z i d,r i f a m p i n,a n d p y r a z i n a m i d e i n M y c o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s[J].R e s p i r R e s,2001,2(3):164-168.[4]T I B E R I S,U T J E S A N O V I C N,G A L V I N J,e t a l.D r u g r e-s i s t a n t T B-l a t e s t d e v e l o p m e n t s i n e p i d e m i o l o g y,d i a g n o s-t i c s a n d m a n a g e m e n t[J].I n t J I n f e c t D i s,2022,124(S u p p l 1):S20-S25.[5]中华医学会结核病学分会.中国耐多药和利福平耐药结核病治疗专家共识(2019年版)[J].中华结核和呼吸杂志,2019,42(10):733-749.[6]GÜN T H E R G,R U S WA N,K E L L E R P M.D r u g-r e s i s t-a n t t ub e rc u l o s i s:ad v a n ce s i n d i a g n o s i s a n d m a n a g e m e n t[J].C u r r O p i n P u l m M e d,2022,28(3):211-217. 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[14]姚嵩,方雪晖.‘中国结核病预防控制工作技术规范(2020年版)“解读与思考[J].热带病与寄生虫学,2020,18(3): 138-141.[15]S I N G H N,S I N G H P K,S I N G H U,e t a l.F l u r o q u i n o l o n ed r u g re s i s t a n c e a m o n g M D R-T B p a t i e n t s i n c r e a s e s t h e r i s k of u n f a v o u r a b l e i n t e r i m m i c r o b i o l og i c a l t r e a t m e n t o u t c o m e:a n o b s e r v a t i o n a l s t u d y[J].J G l o b A n t i n l i c r o b R e s i s t,2021,24:40-44.[16]T A H S E E N S,K HA N Z A D A F M,R I Z V I A H,e t a l.I s o n i-a z i d r e s i s t a n c e p r o f i l e a n d a s s o c i a t e d l e v o f l o x a c i n a n dp y r a z i n a m i d e r e s i s t a n c e i n r i f a m p i c i n r e s i s t a n t a n d s e n s i-t i v e i s o l a t e s/f r o m p u l m o n a r y a n d e x t r a p u l m o n a r y t u b e r-c u l o s i s p a t i e n t s i n P a k i s t a n:a l a b o r a t o r y b a s e d s u r v e i l-l a n c e s t u d y2015-19[J].P L o S O n e,2020,15(9): e0239328.[17]Z HA N G X,C H E N X,WA N G B,e t a l.M o l e c u l a r c h a r a c-t e r i s t i c o f b o t h L e v o f l o x a c i n a n d M o x i f l o x a c i n r e s i s t a n c e i n M y c o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s f r o m i n d i v i d u a l s d i a g n o s e dw i t h p r e e x t e n s i v e d r u g-r e s i s t a n t t u b e r c u l o s i s[J].M i c r o bD r u g R e s i s t,2022,28(3):280-287.[18]V A N I N O E,G R A N O Z Z I B,A K K E R MA N OW,e t a l.U p d a t e o f d r u g-r e s i s t a n t t u b e r c u l o s i s t r e a t m e n t g u i d e-l i n e s:a t u r n i n g p o i n t[J].I n t J I n f e c t D i s,2023,130(S u p-p l1):S12-S15.[19]首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所,中国防痨协会‘中国防痨杂志“编辑委员会.耐药肺结核全口服化学治疗方案中国专家共识(2021年版)[J].中国防痨杂志,2021,43(9):859-866.[20]F E L K E R I,T R A J MA N A.S h o r t e r r e g i m e n s f o r m u l t i-d r u g-/r i f a m p i c i n-re s i s t a n t T B[J].I n t J T u b e r c L u n g D i s,2023,27(1):3-4.(收稿日期:2023-04-10修回日期:2023-11-25)㊃823㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第3期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y2024,V o l.21,N o.3。
结核分枝杆菌的实验室检测方法学评价及耐药分析
·医学检验·0 引言近几年的调查结果显示,随着人口的剧增,以及世界范围内人口大面积流动、菌株变异以及耐药性的产生,HIV感染流行等因素的影响,使得结核病的发病率有回升趋势[1]。
结核分支杆菌为结核病的主要致病菌,在人群中进行传播,对外界环境具有较强的抵抗力,因此,耐药菌株产生比较容易[2]。
本次研究中,以对结核分枝杆菌的实验室检测方法学评价及耐药性进行分析探讨为目的,对我院收治的疑似结核病患者1221例的3663份标本分别进行了涂片镜检、罗氏固体培养、MGIT960液体培养等3种实验室检测,并对检测结果进行统计分析,结果汇报如下。
1 资料与方法1.1 一般资料研究中资料来源于我院收治的疑似结核病患者,共计选择1221例,采集所有受试者痰液标本3份,共计3663份作为研究对象。
受试者中包括有男性685例,女性536例,受试者年龄在19-67岁之间,平均(44.5±11.5)岁。
所有受试者均自愿接受临床检查,并签署了知情同意书。
1.2 方法1.2.1 研究方法选择2015年1月至2017年6月间,我院收治的疑似结核病患者1221例的标本3663份作为研究对象,对其展开涂片镜检、罗氏固体培养、MGIT960液体培养等3种实验室检测,并对检测结果进行统计分析,同时展开药敏分析。
1.2.2 检测方法检测中所需仪器包括:美国BD公司生产的BACTEC MGIT 960 全自动分枝杆菌快速培养仪及其配套试剂;梅里埃公司生产的化学发光检测仪LEADER 50I及其配套探针、检测试剂盒。
按照BACTEC MGIT 960 全自动分枝杆菌检测系统操作指南要求,采集标本沉渣0.5mL,将其接种在MGIT培养管上,同时取沉渣0.2mL接种在罗氏培养基中,展开涂片处理,涂片自然干燥后,实施抗酸染色,对初始涂片阳性率进行统计。
药敏实验采用比例法进行,操作以BACTEC MGIT 960 操作指南为依据进行。
微孔板法检测痰标本结核分枝杆菌及耐药多因素分析
微孔板法检测痰标本结核分枝杆菌及耐药多因素分析李静;白广红;魏墚铉;曹琳;王卓【摘要】目的:评价微孔板法用于检测痰标本结核分枝杆菌(MTB)耐药的临床价值及探讨结核分枝杆菌耐药的影响因素.方法:采用MGIT960快速药敏法(MGIT法)和微孔板法对298例肺结核患者痰标本中的MTB进行药敏试验,并对其耐药多因素进行Logistic回归分析.结果:298例痰液标本中有人结核分枝杆菌293例,牛结核分枝杆菌5例,对比差异无统计学意义(P>0.05).与MGIT法测定结果比较,微孔板法检测利福平耐药性的敏感度为95.2%,特异度为97.4%;异烟肼耐药性的敏感度为91.8%,特异度为92.3%,Kappa值分别为0.689及0.653.多因素Logistic回归分析结果显示,吸烟史、诊断延误与合并HIV对MTB耐药性影响显著(P<0.05).结论:微孔板法检测痰标本中MTB耐药性与MGIT960快速药敏法有较高一致性.【期刊名称】《大众科技》【年(卷),期】2018(020)006【总页数】4页(P82-84,109)【关键词】微孔板法;结核分枝杆菌;药敏试验【作者】李静;白广红;魏墚铉;曹琳;王卓【作者单位】陕西省结核病防治院,陕西西安 710100;陕西省结核病防治院,陕西西安 710100;陕西省结核病防治院,陕西西安 710100;陕西省结核病防治院,陕西西安710100;陕西省结核病防治院,陕西西安 710100【正文语种】中文【中图分类】R974结核病(Tuberculosis,TB)俗称“痨病”,由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引发的一种慢性疾病。
我国公元前400年的《黄帝内经素问》中就已有结核病症相关方面的记载;英国出土的2200年前的人颅骨中也含有结核杆菌[1]。
19世纪时,欧洲和北美区域曾大面积发生过结核病害,但因缺乏有效的诊治方法,导致大量的患者死亡。
肺结核球中结核分枝杆菌药物敏感实验结果临床意义分析
肺结核球中结核分枝杆菌药物敏感实验结果临床意义分析目的:通过研究分析肺结核球中结核分枝杆菌培养和药物敏感实验结果,指导肺结核球的临床治疗。
方法:采用手术切除肺结核球并对其中的结核分枝杆菌进行培养和药物敏感实验。
结果:除异烟肼外肺结核球中结核分枝杆菌对其他抗结核药物的敏感性均在81.13%以上,结核分枝杆菌对抗结核药物组合后的敏感性也较好。
结论:绝大部分肺结核球的治疗不需要采用复治和耐多药方案,应尽快手术切除,手术后仍可采用2HRZS/4HRZ方案治疗且效果满意。
[Abstract] Objective: To determine the evidence of culture and sensitivity in lung tuberculoma for guiding clinical treatment of lung tuberculoma. Methods: Tubercle bacillus culture and sensitivity test were applied in resecting lung tuberculoma. Results: The sensitivity rates to Rifampicin,Pyrazinamide,Ethambutol and Streptomycin exceeded 81.13% except Isoniazid.And the sensitivity result was satisfactory to combination of anti-tuberculotic. Conclusion: It is no need to provide the treatment regimens for treating drug resistant TB and MDRTB and most of the lung tuberculoma should be operated as soon as possible. The therapeutic regiment with 2HRZS/4HRZ could be used and theoutcome of treatment will be satisfactory after operation.[Key words] Tuberculosis;Lrng;Drug sensitivity test肺结核球是一种特殊类型的肺结核,在我国现行的结核病分类法中归属于浸润型肺结核[1]。
结核分枝杆菌痰培养及耐利福平药敏试验分析
结核分枝杆菌痰培养及耐利福平药敏试验分析发表时间:2018-07-13T13:57:23.327Z 来源:《心理医生》2018年16期作者:张婷[导读] 在进行结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的过程当中。
(甘肃省临夏州疾病预防控制中心甘肃临夏 731100)【摘要】目的:研究结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的结果。
方法:选择2016年1月—2017年10月临夏地区结核病定点医院接诊的痰涂片阳性病患200例,对所有病患都施以痰培养和耐利福平试验,并对其痰培养和药敏试验的结果进行综合分析。
结果:本组200例病患当中,有195例痰培养提示阳性,占总比例的97.5%;有1例为涂阳培阴,占总比例的0.5%;有4例污染,占总比例的2.0%。
患者耐利福平药敏试验的结果提示,新患者的耐利福平率为10.63%,复治者的耐利福平率为22.86%,初治失败者的耐利福平率为40.0%。
结论:严格按照相关的标准和流程进行结核分枝杆菌培养与药敏试验,复治者与初治失败者明显比新患者多。
【关键词】耐利福平;结核分枝杆菌;药敏试验;痰培养【中图分类号】R52 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2018)16-0106-02在进行结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的过程当中,比较容易受多种因素的影响而出现涂阳培阴亦或者是污染的情况[1],所以,在实际操作期间要严格按照相关的步骤和标准进行,全面落实标本的收集、接种与保存等环节。
此研究,笔者将以200例痰涂片阳性病患(接诊于2016年1月—2017年10月)为对象,重点分析结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的结果,现作出如下报道。
1.资料与方法1.1 一般资料2016年1月—2017年10月临夏地区结核病定点医院接诊的痰涂片阳性病患200例,包含男性患者104例,女性患者96例;年龄在18~76岁的范围之内,平均(46.28±11.34)岁;复发者,35例;新患者,160例;初治失败者,5例;职业为农民者,92例;无业者,11例;工人;60例;离退休人员,37例。
结核分枝杆菌依赖利福平的实验观察
结核分枝杆菌依赖利福平的实验观察李强;马丽萍;高孟秋【摘要】Objective To investigate the drug dependency of clinical isolated strains of M. tuberculosis ( MTB) on rifampicin. Method 248 sputum samples of pulmonary tuberculosis were collected in Beijing Chest Hos-pital from January, 2008 to December, 2009. The samples were inoculated to Lowenstein-Jensen medium. Drug sus-ceptibility test and dependency test were performed for the culture-positive samples. Results The culture-positive rate of the specimens was 82. 7% ( 205/248 ) . The drug susceptibility test showed that 96 culture-positive samples were resistant to rifampicin, and the rate was 46. 8% (96/205). Among these rifampicin-resistant samples, 27 sam-ples were dependent on rifampicin and the drug-dependent rate was 28. 1% (27/96). The drug-dependent rate at low concentration was 11. 1% (3/27), and 88. 9% (24/27) at high concentration. Conclusion The clinical isolated strains of MTB showes high rifampicin-dependent rate, and the dependency is related with rifampicin concentration.%目的:观察结核分枝杆菌临床分离株对利福平的依赖状况。
结核杆菌对利福平药物的灵敏性实验
结核杆菌对利福平药物的灵敏性实验【摘要】目的分析结核分枝杆菌对利福平的耐药现况,为结核病的防治提供依据。
方式采纳直接涂片检查法和培育法,对肺结核病人的痰液进行检查,阳性标本经抗酸染色镜检确认后,采纳绝对浓度法的间接法进行耐药性测定。
结果 131例疑似肺结核病人痰标本中,直接涂片法检出阳性标本21例,阳性检出率为%(21/131);培育法共检出阳性标本56例,阳性检出率为%(56/131)。
比较两种检测方式的阳性检出率,不同有显著性(P<)。
培育法高于直接涂片法。
将培育阳性标本进行利福平药物灵敏性实验,其中有17株发生耐药,耐药率为%(17/56)。
结论结核杆菌对利福平的初始耐药率仍处在较高水平,必需进一步增强对耐药结核杆菌的监控。
【关键词】结核分枝杆菌福平药敏实验Study on the primary drug resistance against rifampicin for tubercolusisZHANG Sheng, CHEN Si dong, WANG Bao guo,ZHOU Yong,ZHOU Wei ping(Institute of Disease Prevent and Control of Songgang Town,Shenzhen 518105; Guangdong College ofPharmacy,Guangzhou,Guangdong 510006,China)Abstract:Objective To study the situation and trend of rifampicin resistance for tuberculosis and provide the basis for tuberculosis prevention and treatment. Methods Sputum fluid is examined with direct smear and culture on modified Lowenstein-Jensen medium after treatment with 4% NaOH. Then the positive samples were subjected to susceptibility testing against rifampicin using absolute concentration method. Results The positive rate with culturing and smearing method was %(56/131),and the positive rate with direct smearing method %(21/131). The prevalence rate of primary drug resistance was %(17/56). Conclusion The rate of primary drug against rifampicin is still at a higher level. Monitoring of the resistance of tuberculosis should be strengthened.Key words: mycobacterium tuberculosis; rifampicin; drug resistance test结核病是我国重点操纵的重大疾病之一,也是全世界关注的公共卫生问题和社会问题,世界卫生组织已将结核病作为重点操纵的传染病之一。
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结核分枝杆菌痰培养及耐利福平药敏试验分析
发表时间:2018-07-13T13:57:23.327Z 来源:《心理医生》2018年16期作者:张婷
[导读] 在进行结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的过程当中。
(甘肃省临夏州疾病预防控制中心甘肃临夏 731100)
【摘要】目的:研究结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的结果。
方法:选择2016年1月—2017年10月临夏地区结核病定点医院接诊的痰涂片阳性病患200例,对所有病患都施以痰培养和耐利福平试验,并对其痰培养和药敏试验的结果进行综合分析。
结果:本组200例病患当中,有195例痰培养提示阳性,占总比例的97.5%;有1例为涂阳培阴,占总比例的0.5%;有4例污染,占总比例的2.0%。
患者耐利福平药敏试验的结果提示,新患者的耐利福平率为10.63%,复治者的耐利福平率为22.86%,初治失败者的耐利福平率为40.0%。
结论:严格按照相关的标准和流程进行结核分枝杆菌培养与药敏试验,复治者与初治失败者明显比新患者多。
【关键词】耐利福平;结核分枝杆菌;药敏试验;痰培养
【中图分类号】R52 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2018)16-0106-02
在进行结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的过程当中,比较容易受多种因素的影响而出现涂阳培阴亦或者是污染的情况[1],所以,在实际操作期间要严格按照相关的步骤和标准进行,全面落实标本的收集、接种与保存等环节。
此研究,笔者将以200例痰涂片阳性病患(接诊于2016年1月—2017年10月)为对象,重点分析结核分枝杆菌痰培养与耐利福平药敏试验的结果,现作出如下报道。
1.资料与方法
1.1 一般资料
2016年1月—2017年10月临夏地区结核病定点医院接诊的痰涂片阳性病患200例,包含男性患者104例,女性患者96例;年龄在18~76岁的范围之内,平均(46.28±11.34)岁;复发者,35例;新患者,160例;初治失败者,5例;职业为农民者,92例;无业者,11例;工人;60例;离退休人员,37例。
所有患者都自愿参与此研究,临床资料完整,依从性良好,获得医学伦理委员会批准。
1.2 纳入标准[2]
(1)既往有结核病史且现痰涂片检查提示阳性。
(2)痰涂片检查提示(++)-(++++)。
(3)治疗5个月后痰涂片检查提示阳性。
1.3 方法
将所选病例都转录到肺结核患者培养与药敏登记表中,并对患者的基本信息进行详细的记录,比如:性别、职业、来源以及痰检结果等。
采集患者的痰标本,并将之置于冰箱中进行低温保存。
根据临床要求对采集到的痰标本进行登记,并在生物安全柜中,同时采取分枝杆菌分离培养法,对痰标本进行规范化的处理。
所有试验用品和废弃物都经高压蒸汽进行消毒灭菌处理。
以结核杆菌涂片镜检的相关操作规程,对痰标本进行结核分枝杆菌痰培养,并将培养结果准确记录在化验单以及结核病细菌学实验室登记册上。
痰培养选择使用改良罗氏培养基(由“省结核病实验室”提供),利用分枝杆菌分离培养法进行痰培养,同时根据分枝杆菌分离培养法的要求,对生长结果进行准确的记录,并报告结果。
药敏试验时,选取经抗酸染色明确为结核分枝杆菌的阳性标本。
培养基产自“省结核病实验室”,利用结核分枝杆菌药敏试验法,同时根据结核分枝杆菌药敏试验的标准,对结果进行记录和报告。
1.4 统计学分析
用SPSS20.0统计学软件分析研究数据,t用于检验计量资料,即(x-±s),χ2用于检验计数资料,即[n(%)],P<0.05差异有统计学意义。
2.结果
本组200例病患当中,痰培养提示阳性者有195例,占总比例的97.5%,当中有27例耐利福平,上述菌株都根据实验室的要求进行保存。
新患者的耐利福平率为10.63%,初治失败患者的耐利福平率为40.0%,复发患者的耐利福平率为22.86%。
经比较发现,新患者的耐利福平率明显低于初治失败患者以及复发患者,P<0.05。
本组的涂阳培阴率为0.5%(1/200),污染率为2.0%(4/200)。
详见表。
3.讨论
现阶段,肺结核病在我国临床上比较常见,属于是一种慢性传染性疾病,能经呼吸道进行传播,可对人类的生命健康造成较大危害[3]。
因不合理亦或者是不规则化疗、贫困、病后监测力度削弱以及健康水平低下等因素的影响,可引发结核菌耐药的情况,从而导致获得性耐药、自然耐药、初始耐药以及原发性耐药[4]。
所以,临床需要充分了解耐药结核菌株的形成情况,然后再为患者制定出具有较高针对性的结核病治疗方案以及结核病疫情防控方案。
如此,方可有效降低结核病的发病率,提高患者临床病症控制的效果。
此研究中,选择了200例痰涂片阳性病患,当中有35例为复发患者,占总比例的17.5%;有5例为初治失败患者,占总比例的2.5%;有160例为新患者,占总比例的80.0%。
200例病患当中有92例为农民,占总比例的46.0%;有11例无业,占总比例的5.5%;有60例为工人,占总比例的30.0%;有37例为离退休人员,占总比例的18.5%。
可见,农民感染结核病的概率明显高于无业人员、工人以及离退休人员,P <0.05,这和农民的生活习惯、营养状况与休息等因素密切相关。
患者药敏试验的结果提示,新患者的耐利福平率为10.63%,复治患者的耐利福平率为22.86%,初治失败患者的耐利福平率为40.0%。
经比较发现,复治患者以及初治失败患者的耐利福平率明显比新患者高,P <0.05,这和患者不合理亦或者是不规则化疗有着较密切的关系。
涂阳培阴1例,原因为:(1)标本保存不恰当,在制作好痰涂片后,需将涂片放在冰箱中进行保存,并于24h内严格按照相关的标准和流程进行培养;(2)过处理,应利用浓度为4%的氢氧化钠溶液进行处理,用量为1~2倍体积,处理时间为20min[5];(3)痰标本选择不恰当,需选择标本中干酪样亦或者是脓样的可疑部分;四,患者未停药,在进行结核分枝杆菌痰培养的过程当中,需要求患者停药;五,接种量比较小,通常情况下,每管的接种量应为0.1ml。
污染4例,原因为:
(1)未对痰标本进行妥善的保存,在留取涂片后,需于24h之内进行培养,若不能及时培养,需将涂片置于4℃的环境中进行保存;(2)未充分进行前处理,应加入浓度为4%的氢氧化钠溶液进行20min的充分混旋处理[6];(3)未对试验材料进行充分的灭菌处理,应采取高压灭菌法对接种吸管进行彻底的灭菌处理;四,操作不恰当,应严格按照相关的标准和流程进行痰培养。
【参考文献】
[1]丁丽,王伟,许雪春等.矽肺患者结核分枝杆菌临床分离培养与抗结核药物敏感检测[J].中国职业医学,2015,(1):46-48.
[2]吴皖卿,张坚华,刘勤连等.1976例肺结核患者痰培养及其药敏检测的分析[J].现代预防医学,2013,40(19):3687-3690.
[3]丁海榕,林树柱,卢锦标等.耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株的筛选[J].微生物与感染,2014,(2):83-88.
[4]张志平,李贤相,文育锋等.342例痰培养阳性肺结核菌株耐药特征分析[J].现代预防医学,2015,42(3):522-525.
[5]彭亦平,宗佩兰,辛茶香等.应用PCR-反向点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐药突变基因[J].中国防痨杂志,2016,38(8):619-622.。