生物化学：04章核苷酸和核酸3

1. 限制性内切酶的分类
➢Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ ➢ 基因工程技术中常用Ⅱ型
2. II型限制性内切酶
➢ 不需要ATP参加； ➢ 不对DNA进行甲基化或其它方式修饰。 ➢ 专门识别和切割特定的核苷酸序列，这个
序列一般含4—6 个核苷酸残基，并具回文 结构。
Ⅱ类酶识别序列特点
回文结构
palindrome
切口（kerf）：粘端，平端
3.限制性内切酶的种类（约1000多种）
4.限制性内切酶 在基因重组中的 应用
核酸链片段。 • 外切核酸酶：从核酸链的一端逐个切断磷酸二
酯键，释放单核苷酸。按磷酸二酯键断裂方式： 3’-核酸酶和5’-核酸酶
核酸酶对其底物的作用具有特异性
二、限制性内切酶（restriction endonuclease）
限制性内切酶是从细菌中分离的一类专门 识别和水解特定核苷酸序列的内切酶类。这类 酶在原核生物体内，用于“防御”外来DNA的 入侵，将外来DNA以独特的方式切成无感染能 力的片段，而自身不受损害（甲基化作用） 。
第八节 核酸酶和DNA限制
性内切酶
一、核酸酶（nuclease）
➢ 能水解核酸的酶为核酸酶 ➢ 核酸酶都是磷酸二酯酶（phosphodiesterases）
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核酸酶的分类
➢ 按底物专一性分类：核糖核酸酶(RNase)和脱 氧核糖核酸酶(DNase)
➢ 按作用方式分类：内切核酸酶和外切核酸酶 • 内切核酸酶：从核酸的内部切割核酸链，产生