浙江福立FL2200液相色谱仪操作规程和注意事项 (含原理图)

FL2200Ⅱ高效液相色谱仪操作规程和注意事项操作规程：

1.样品前处理。请严格按要求配制流动相、标样和样品溶液，具体注意事项看仪器使用说明书；

2.打开电脑电源，打开FL2200反控色谱工作站；

3.打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源开关，仪器自动自检；

4.仪器自检完毕后直接进入工作界面，此时工作站上相应图标变得可操作；

5.设定泵A的流量为1mL/min，点击A【泵启动】，如果使用梯度泵，则先填写梯度程序。此时泵图

标由白色变成蓝色，表示泵工作；

6.设置柱温箱温度，点击【柱箱开】，柱箱自动升到设定温度；

7.设置检测器波长为实际分析样品所需波长；

8.设置自动进样器参数，自动进样器的位置参数在出厂时已经设置好，在此只需要设置与样品相关

的参数即可；

9. 待基线稳定，进行进样操作，点击自动进样器启动，自动进样器根据我们实际设定值进行自动进

样；

10. 做样结束，进行清洗；

A、仪器系统的清洗，如有必要，再执行以下清洗

仪器做样完毕后，关闭检测器→停泵→把吸滤头放于甲醇：水=10：90的溶液中→打开“放空阀”

→点击“清洗”→清洗2~5分钟→停泵→关闭“放空阀”→调节流量为1.00ml/min→启动泵→清洗系统30min（具体视柱子在冲洗时压力是否正常，如一般10%甲醇水清洗稳定的压力在10~11之间，要求色谱柱为[C18 4.6*250mm 5um]，如果大于该值，说明冲洗不完全，请继续清洗）→压力正常→把吸滤头放于纯甲醇中→冲洗30min（具体视柱子在冲洗时压力是否正常，如一般甲醇清洗稳定的压力在5~7之间，要求色谱柱为[C18 4.6*250mm 5um]，如果大于该值，说明冲洗不完全，请继续清洗）→清洗完毕→关闭泵电源。

B、清洗进样针、进样器

做样完毕后，请及时清洗自动进样器进样针、进样器。

C、清洗柱塞杆

做样结束后，定时间清柱塞杆，清洗柱塞杆一般用10%甲醇水溶液清洗30ml

11. 清洗完毕，关掉仪器和电脑的电源开关

仪器原理介绍

1、色谱分析原理：使用外力使含有样品的流动相

平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。利用

样品中各组份在两相（固定相、流动相）中具有

不同程度的作用(吸附作用、分配作用)。与固定

相作用强的组份随流动相流出的速度慢，反之，

与固定相作用弱的组份随流动相流出的速度快。

由于流出的速度的差异，使得混合组份最终形成

各个单组份的“带(band)”或“区(zone)”，对

依次流出的各个单组份物质可分别进行定性、定

量分析。

1906年，Tsweet发现色谱分离现象

2、高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压

输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米

塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。

3、高效液相色谱（HPLC）是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液

体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但

是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系

统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效液相色

谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用非常广泛，几乎遍及定量定

性分析的各个领域。