胚胎移植注意事项

胚胎移植注意事项

胚胎移植是一项操作严谨，要求高的技术。胚胎移植每个操作环节都十分重要，都直接影响胚胎移植成败。因此作为手术人员，我们应该有很强的责任意识，正规的操作理念，严格的无菌操作观念。

为了使胚胎移植技术严谨、规范，提高胚胎移植成功率，现将胚胎移植中的注意事项归纳如下：

一、同期发情及超排处理

1、供体超排处理

①供体放栓（撤栓）时间：19﹕00；

②超排处理的时间为早7﹕00，晚19﹕00；

③第一次试情时间为撤栓后第二天早5﹕00，配种时，每间隔6h配1次。

2、受体同期发情处理

①“PG”法，注射时间为处理当天下午16﹕00；

②“海绵栓+PG”法，撤栓和PG处理时间为处理当天下午16﹕00；

③受体试情时间为PG处理后的第二天早8﹕00，下午16﹕00，晚20﹕00；

④试情时，记录具体的发情时间，认真做好发情记录，按照《受体羊发情记录表》的要求填写。

二、超排的具体要求

1、严格遵守超排时间，按照超排方案的剂量要求注射，做到剂量准确，注射完全；

2、超排所用的注射器，用于PMSG的注射器要求1批换1次，用于FSH的注射器，每天要求换1次；

3、超排所用的注射器、CIDR栓、药瓶统一收回，统一处理，严禁乱扔，乱放；

4、超排时人员安排，要求每批由专人负责，即注射PMSG 1人，注射FSH 1人；、符《胚胎移植所用药品跟踪单》；56、符《胚胎移植人员安排表》；

7、符《受体羊发情记录表》。

三、手术前的准备工作

1、羊只手术部位的消毒

①用肥皂温水将手术部位剃干净，擦干；

②清水冲洗干净；

③0.1%新洁尔灭消毒手术部位，擦干；

④5%的碘酊消毒和75%酒精脱碘。

2、手术器械的准备

①手术器械在使用之前在0.1%新洁尔灭溶液中浸泡30min，并打开器械开关；

②使用时浸泡在生理盐水中（注意及时更换）；

③与PBS液接触的注射器及冲卵管在使用之前，用PBS液清洗1次。

3、手术人员手臂的消毒

①手臂要严格消毒，先剪短磨光指甲，用肥皂水清洗手臂；

②在0.1%新洁尔灭消毒盆中浸泡5min；

③在生理盐水盆中清洗干净；

④注意消毒液和生理盐水的及时更换。

4、手术后手术器械及器械盘的清洗与灭菌

①手术后，手术器械需认真、彻底的清洗，以便下次使用；

②用清水及洗涤液将手术器械和器械盘上的污垢或斑点清洗干净；

③用流水冲洗5次；

④用蒸馏水冲洗5次；

⑤放入恒温干燥箱，将干燥箱的温度调至160℃，处理1.5h。

四、手术时操作要求

、手术时，必须戴医用手套；12、手术要求仔细、规范、准确、迅速、手法轻柔、配合默契，及时喷洒生理盐水，尽可能的缩短冲胚时间、移植时间；

3、手术缝合要仔细、认真、保证缝合质量，促进伤口愈合。

五、黄体鉴别

1、供体采卵时黄体的鉴别

①正常黄体

黄体情况（直径）黄体级别标记方法

1 5-6mm A n

2 3-4mm B n

3 2mm

C n

4

2mm

n

D＜

注：“n”表示黄体个数，A、B、C、D分别表示黄体级别

②异常黄体

m n；n”表示个数A、中间有“红心”周围包裹发白的组织，用)表示(“n n )。

“表示(n”表示个数B、类似于黄体退化后形成的白体，凸起，用 2、受体羊卵巢情况及处理办法

表示方法处理方黄体级卵巢情两侧大黄体或同侧两个大黄体1选择较大黄体

侧移没有卵移植黄体2一侧大黄体，没有卵一侧大黄体，一侧小卵3刺破卵泡移植在黄体同侧大黄体和小卵4刺破卵泡移植在黄体同侧或对侧有大黄体和大卵不移5

小黄不移6

注：①大黄体是指颜色鲜红，突出卵巢表面部分直径4mm以上的黄体；

②小黄体是指直径小于4mm的小黄体；

以下的卵泡；2mm③小卵泡指直径在．

④大卵泡指直径在2mm以上的卵泡；

⑤“1”表示黄体，A、B、C、D、E、F分别表示黄体级别。

六、检胚室的操作要求

1、Holding液及冷冻液的灭菌：使用前用0.22um的滤器，过滤时应弃取开始2—3滴，然后使用。

2、移植针的消毒程序：第一次使用之前用Holding 液清洗，移植针使用过程消毒时，其消毒程序：先用75%酒精棉擦洗，在用0.9%生理盐水棉擦洗，最后在用Holding液清洗。

3、检胚针的清洗：第一次使用之前用Holding 液清洗清洗，每检一只羊的胚胎时，用Holding 液清洗一次。

4、解冻胚胎时，胚胎细管的消毒，用灭菌布擦干。

5、冷冻胚胎标记：

①胚胎细管：按照品种、耳号、胚胎类型、胚胎个数标记，具体表示方法如下：道塞特（Dorset）：红色标记，用“D”表示；

萨福克（Suffolk）:黑色标记，用“S”表示；

杜泊（Dorper）:蓝色标记，用“P”表示；

德美（Merino）:绿色标记，用“M”表示。

②拇指管：按照胚胎类型、冷冻日期装管，编号，具体表示方法：1号管用“1”表示，2号管用“2”表示，依次类推，胚胎类型的表示方法：在拇指管上分别标注“M”、“B”、“EXB”，最后标注冷冻胚胎的日期；

③提漏：按照胚胎冷冻日期装管，在提漏上标注冷冻日期。

七、定期讨论总结

每完成一次胚胎移植工作，都要及时总结讨论胚胎移植过程中的成功、失败的原因，形成材料，获得经验，指导下步工作，提高技术水平。