Waters 2695 操作规程
Waters_2695_型高效液相色谱仪操作方法
Waters 2695 型高效液相色谱仪操作方法1 仪器组成及开机1.1 仪器组成本仪器由Waters 2695 分离单元、2996型二极管阵列检测器、2420蒸发光散射检测器、色谱管理工作站和打印机组成。
2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机（或氦气脱气机），可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。
1.2 开机依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
接通2695 分离单元后，约20s 仪器开始自检，约1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区出现“Idle ”时，仪器进入待命状态。
2 溶剂管理系统的准备2.1 流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按【Menu/Status 】，进入“Status （1 ）”屏幕，光标选“Degasser ”，按【Enter 】，显示选项屏幕，光标下移选“Continuous ”，按【Enter 】。
2.2 启动溶剂管理系统2.2.1 干启动，当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status （1 ）”屏幕下，按【Direct Function 】，光标选“Dry Prime ”，按【Enter 】，显示“Dry Prime ”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如【OpenA 】，光标选“Duration ”，按数字键输入5min ，按【Continue 】，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2.2.2 湿启动在“Status （1 ）”屏幕下，光标选“Compomtion ”中欲使用的流动相，输入10 0％，按【Direct Function 】，光标选“Wet Prime ”，按【Enter 】，显示“Wet Prime ”屏幕，输入7.5Ml/min 和6min ，按【OK 】，待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。
WATERS液相操作规程
WATERS2695液相色谱仪操作规程一、液相主机操作：1、准备流动相，不同的流动相组分放在不同的溶剂瓶中。
注意：D瓶为洗泵杆溶液（甲醇-水）20：80，E瓶为洗针头溶液（甲醇-水）80：20。
2、打开液相主机电源开关，机器进行自校，约5分钟。
3、在线脱气（Degasser）：光标移到(Mode)下按Enter选On后按Enter。
4、样品池温度（Sample）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。
5、柱温（Column）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。
6、流动相比例（Composition）：光标移到相应位置直接输入比例数，每输一个数值按Enter确认；比例数之和应为100。
7、更换管路流动相：按直接功能（Direct Function）进入直接功能菜单选（2 Wet Prime）按Enter输入流速（Flow Rate）和时间(Time)按OK开始。
8、更换完成后自动返回主页面，按Next Page回到主菜单。
9、光标移到流速（Flow）下输入流速值，按Enter，液相主机开始工作。
10、打开样品室门，选择要操作的样品盘，按顺序放入样品，记下样品与样品位置号，关上样品室门。
11、实验完毕后，先关检测器电源以延长紫外灯寿命，色谱柱处理完毕后，再关主机电源。
二、紫外检测器操作：打开紫外检测器电源开关，机器进行自校，自检完毕后两个指示灯长亮。
三、软件操作：1、打开显示器电源，再打开主机电源，启动Windows XP。
2、点击桌面上的“Empower 登录”图标启动软件。
输入用户名“hplc”按“确定”进入主选单。
3、点击“运行样品”，“确定”进入运行样品界面。
选择一种仪器方法，单击“编辑”进入仪器状态设置界面，选择色谱仪的脱气状态、输入样品室温度、柱温箱温度、流动相比例、积分波长范围、监视波长；设定完成后注意保存。
4、单击“监视器”钮，色谱仪按重新设定后的参数运行。
Waters2695操作规程
Waters2695高效液相色谱操作规程[开机程序]1. 状态检查：1）检查仪器外观是否完好2）检查各种线缆连接是否稳固，外表有无损伤痕迹3）确认环境温度在15至35℃之间4）相对湿度在20%至80%之间2．配件安装：无3. 接线要求：1）高效液相色谱主机电源2）连接电脑主机和显示器电源4. 开机步骤：1）打开电脑电源，进入windows系统2）打开高效液相色谱电源，仪器开始自检（约5～6min），待仪器操作面板上出现“Idle”字样表示自检成功，仪器进入待命状态。
[测试步骤]1. 进入软件1）双击电脑桌面上的Empower快捷图标，出现Empower登陆窗口。
输入用户名与密码，默认账号为“system”，密码为“manager”，点击“OK”进入Empower 工作站。
2）选择“运行样品”界面，点击“确定”,然后选择待选定的操作项目以及色谱系统2 编辑仪器方法和方法组1）在“运行样品”界面中，监视区单击方法组编辑向导。
2）选择新建按钮，弹出仪器方法编辑器。
3）通用编辑页面中，可设置单次输送体积，查看脱气选项，确认设置正确，选择等度或者梯度，总流量以及流动相配比等选项。
4）单击2475图标，弹出2475编辑界面，在波长模式中选择相应的波长模式，单波长或者双波长，输入所需的波长，选择相应的采样速率，一般为2点/秒。
5）点击“文件”，选择“另存为”，输入仪器方法名称，点击“保存”，退出。
6）在被选项中选择所需的仪器方法名称，点击“下一步”。
7）在下拉菜单中选择所需的处理方法和报告方法（如果没有合适的方法选择"无处理"、"无报告"），点击“下一步”。
8）输入方法组名称，单击"完成"。
3 运行方法进样1）在“运行样品”界面中，选择相应的仪器方法，点击“监视器”，在监视窗口监视基线至系统平衡，停止系统监视状态，点击停止按钮。
单进样，点击参数编辑快捷方式进入定义单进样参数编辑界面，输入样品名、功能、方法组等参数。
Waterse2695高效液相色谱仪操作规程
Waterse2695高效液相色谱仪操作规程1目的指导和规范Waterse2695高效液相色谱仪的操作。
2适用范围该操作规程适用于Watere2695高效液相色谱仪的操作。
3职责检验员应按操作规程进行仪器操作，质量监督员负责监督该操作规程的正确执行。
4操作4.1仪器组成和开机仪器组成本仪器由Waterse2695分离单元、Waters2998二极管阵列检测器、WatersELSD2424蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站和打印机组成。
Waterse2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气，可容纳120个样品瓶的自动分离单元，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘；显示器，键盘用户界面。
开机依次接通Waterse2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
接通Waterse2695分离单元后，约20s仪器开始自检，约3mn内各部件的初始化完成，待主屏幕上方标题区出现“Idle”时，仪器进入待命状态。
4.2溶剂管路系统的准备流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按［Menu/Status】，进入“Status(1)”屏幕，光标选“Degasser”，按［Enter】。
、•^、、灌注当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时，需进行干灌注(DryPrime)，注入流动相。
否则，进行湿灌注(WetPrime)以驱除气泡。
干灌注：按主机面板上［Menu/Status］,进入“Status(1)”显示，按［DirectFunction］,选择“DryPrime”，选溶剂通道，如OpenA,选“Durationlli按数字键输入5分钟，按”COntinue”，待限定时间结束后，重复操作，使所需的溶剂通道注满流动相。
湿灌注：进入“Status(1)”显示，选溶剂通道，输入100%,按［DirectFunction］，选“WetPrime”，按【OK］,根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7.5ml/min,一般不用更改，时间可设置为5min)，按【0K］。
Waters2695HPLC系统操作规程
Waters2695HPLC系统操作规程Waters 2695 HPLC 系统操作规程一、溶剂和样品的准备要求：流动相：按方法要求配制流动相，经0.45μm微孔滤膜过滤，并超声波脱气。
样品溶液：按方法要求配制样品溶液，并过滤除去溶液中的固体微粒。
二：开机及平衡系统：1、打开网络连接设备及计算机；Winows XP启动完毕后打开各单元电源；待各单元自检完毕；2、配制好的流动相放入瓶槽中，2695自检完毕后按面板Menu/Status 键，显示于控制主菜单画面；3、按2695 面板Direct Function 键，选择Dry Prime(干灌注))或Wet Prime(湿灌注))功能来灌注所需流路通道的输液系统，保证流路中充满了流动相；5、用手动控制模式设定流速、柱温、在线脱气机等参数；6、将2695泵清洗管路（不透明管）和洗针管路（绿管）分别放入适当的溶剂中，按2695面板Diag 键，选择Prime SealWash ，清洗泵头约1分钟；再选择Prime NdlWash ，清洗进样针1-2次；7、压力稳定后按2695面板Direct Function 键选择Purge Injector ，冲洗进样器；8、运行Empower软件，选择存放数据文件的项目（Project），选择运行样品（Run Samples）；按建立方法组（Develop Methods）按钮，建立方法组；按选择仪器方法并设置或监视按钮，观察基线，待基线平稳，可准备进样。
三、进样进样：1、将样品放入2695样品盘中，记录每一样品对应的管号；2、先在单次进样（Single ）状态下进样一次，若条件适合，确定运行时间 (Run Time)；在样品（Samples ）状态编辑样品表，开始自动进样。
四、数据处理及打印：1、选择运行浏览项目（Browse Project ），在通道（Channels ）中选择要处理的原始色谱图数据；2、使用指定的▲▲▲处理方法定量处理；3、在结果（Results ）中就可看得到结果色谱图数据，选择后右键可查看或预览结果。
waters2695操作规程
进样器进样量范围
0.1-100 μL，进样精度：<±1%。
检测器波长范围
UV-Vis检测器通常为190-600 nm，荧光 检测器则根据具体型号而定。
色谱柱规格
内径2.1-4.6 mm，长度50-300 mm，填 料粒径1.5-5 μm。
02
安装与调试
安装前准备工作
确认waters2695仪 器型号和配置，准备 相应的安装工具和材 料。
样品前处理要求
01
02
03
样品清洁度
确保样品中无颗粒物或杂 质，以避免对仪器造成损 害或影响分析结果。
适当的溶剂
选择与样品相容的溶剂， 确保样品在溶剂中均匀分 散，提高分析的准确性。
样品浓度
根据分析方法的要求，调 整样品的浓度至合适范围 ，避免过高或过低的浓度 导致分析误差。
进样针使用注意事项
选择合适的进样针
实验前准备
1
2
检查waters2695系统状态，确保各部件正常工作 。
3
准备实验所需试剂和标准品，检查其纯度和有效 期。
实验操作规范流程
01
清洁实验台面和仪器表面，避免污染。
02
实验操作过程
03 按照实验需求设置waters2695参数，如流速、压 力、温度等。
实验操作规范流程
01 连接色谱柱和检测器，确保流路畅通。
THANKS
感谢观看
软件功能概述
方法开发与管理
支持多种液相色谱方法的创建 、编辑和管理。
数据采集与处理
实时采集色谱数据，提供多种 数据处理选项，如峰检测、积 分、校正等。
报告生成与导出
生成定制化的分析报告，支持 多种数据格式导出。
WatersHPLC2695操作规程
Waters HPLC 2695操作规程一、日常开机步骤1. 制备新鲜流动相和清洗液流动相●水纯净水。
●缓冲剂首先溶解盐，调节pH值，然后过滤除去不溶解的物质，缓冲盐浓度≤100mMol。
●四氢呋喃使用不稳定的THF时，请确保溶剂是新鲜的。
先前打开过的THF瓶含有过氧化物杂质，将导致基线漂移。
●有机相原装进口的色谱纯。
清洗液●洗针液根据样品和流动相的化学性质选用洗针液，确保所有溶液和缓冲剂都是易混合和可溶解的，最好选择与最终梯度条件相似的洗针液。
推荐使用的洗针液：80%甲醇/20%水●清洗柱塞密封垫（seal wash）的溶液含5% ~ 10%甲醇的超纯水（一般放在弱洗溶液中）注意：所有流动相和清洗液均需盛放于硼硅玻璃制作的高质量实验室玻璃器皿中，混合均匀并在使用前要经过0.45µm的膜式过滤器的过滤，超声脱气1-2min。
2. 开机及系统准备2.1 开机先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器的电源。
接通2695分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上主标题区出现“Idle”仪器自检通过，表示开机测试正常，之后启动Emperor软件。
A管带黄色标记、B管带蓝色标记号、C管带红色标记、D管带绿色标记，绿色管为冲洗泵头用，白色管为冲洗进样器用，将各泵头放到相应的溶剂瓶中备用。
2.2灌注(Prime)当溶剂的管路是干的或存在较多气泡不易排出时，需进行灌注。
可向管理员求助。
2.3 平衡色谱柱在“Status”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，设置流速，平衡色谱柱30-60min。
（可在工作站中设置）。
2.4 样品的配制所有样品均需经过滤膜过滤，置于液相小瓶内，达到样品瓶的1/3以上。
二、基本操作1. 创建项目双击电脑桌面图标“Empower”，用户名输入“system”密码输入“manager”选中操作项目和色谱系统→确定。
在菜单栏“管理”→创建新项目→选择父项目→下一步→输入表空间值→按“下一步”逐步设置→完成→管理→改变/项目，在该窗口切换项。
WATERS_2695操作流程
WATERS 2695仪器操作简明流程2695分离单元使用操作：1)开机自检打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。
2)脱气（Degas）按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。
3)设定柱温（可选项）在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter即可。
（可在工作站方法中设置）4)Prime Seal Wash（清洗柱塞杆）按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。
5)Wet Prime在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。
将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。
6)Purge Injector（注射器排气泡及清洗）进入“Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。
7)Prime Needle Wash（清洗注射针）进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。
注：以上4）-7）为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。
若发现注射器中有气泡，则可重复6）直至排除。
如果流动相中含有盐类，则实验结束后必须用水清洗柱塞杆（即操作4））。
Water 2695 高效液相色谱仪操作规程
Water 2695 高效液相色谱仪操作规程1目的用于规范检验人员正确操作使用Waters 2695 高效液相色谱仪。
2 适用范围适用于使用Waters 2695高效液相色谱仪检测分析的操作管理。
3 职责使用Waters 2695高效液相色谱仪进行检验的检验员应对本规程负责，相关项目经理负责监督该操作规程的正确执行。
4仪器组成及原理4.1仪器组成本仪器由Waters 2695 高效液相色谱仪、检测器(2996型二极管阵列检测器、2487紫外检测器、2489紫外检测器、474型荧光检测器)、Empower色谱作站组成。
2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面等组成。
4.2高效液相色谱法是将具一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液，经色谱柱进行分离，检测器检测分离后的不同组分，数据处理装置记录色谱图或进行数据处理。
5.仪器的操作5.1仪器的准备5.1.1 检查流动相（使用前应首先脱气）、在线清洗溶液（10%甲醇-水溶液seal wash）、进样针清洗溶液（90%甲醇-水溶液injector wash）是否足够。
5.1.2 检查色谱柱的使用是否正确（方向是泵出来进检测器的方向，正常的话是色谱柱上所标示的箭头向上；一般情况下不能将色谱柱反过来用，除非柱子确实无法使用可考虑反方向使用）、连接是否有误，有无漏液，废液瓶的容量是否足够。
5.2开机、自检与仪器预备5.2.1依次开启不间断稳压电源、开启2695 分离单元电源和计算机电源；仪器开始自检（约5～6min），待仪器操作面板上出现“Idle”字样表示自检成功，仪器进入待命状态。
5.2.2按动仪器面板右下方“Menu/Status”键进入操作状态，按动“Direct Function” 功能键，若仪器是首次使用或溶剂的管路充满空气时，先选择Dry Prime，按动OK，对管路进行排空；此时开启仪器下方purge阀，用专用注射器手工抽出管路内部的空气。
Waters2695操作规范
Empower软件一．登录1.双击电脑桌面上的Empower图标，出现Empower登录窗口。
2.输入用户名和密码，然后单击“确定”,进入Empower。
每次登录前必须输入用户名和密码。
注：出厂设置的用户名为 system，密码为 manager。
二．项目管理（一）新建项目3.鼠标左键单击图标,进入“配置系统"。
4.在如下界面中，选中“项目”后，单击“新建项目"。
8出现“新建项目向导”，如下图所示:a.“表空间”中接受50MB的表空间缺省设置.在该向导步骤中，系统默认设置了“支持‘全面审计追踪'”.如果不需要，可取消“支持‘完全审计追踪'”复选框，以取消对项目元素（如方法和样品）所做的所有修改的记录。
如需要，则选中该复选框之后，还再选择是否需要对“方法变化"、“结果变化"、“样品信息变化”和“删除”的更改进行注释。
单击“下一步”。
注:“完全审计追踪”功能用于支持法规的要求，如果没有法规要求可以不选，这样可以简化实验和节省硬盘空间。
b.出现“选项"页。
选择用于本项目的选项.单击“下一步"。
注：如果无法确定适当的设置，请接受默认选项。
c.出现“访问控制”页。
根据需要选择设置对您所创建的项目具有访问权限的用户和用户组，或者接受缺省的选项，然后单击“下一步".注：如果无法确定适当的设置，请接受默认选项.d.在“复制”页中，接受默认的选项,然后单击“下一步”。
e.在“输入名称"页中,输入项目的名称,必要时输入注释内容。
最后单击“完成”来结束新项目的创建。
注:项目名中不能出现空格.可使用下划线（_ ）分隔词。
另外，名称不能以数字开头。
如果在前面选中了“完全审计追踪”选项，则必须在文本框中输入注释.注：项目是方法、结果、自定义字段、视图筛选器和原始数据的集合，由用户定义。
该集合驻留在Empower数据库中并在“浏览项目"中显示.项目是为了方便用户归类、管理和检索相应的数据，应根据实际情况来决定是否建立，并不是每次开机都要创建。
waters 2695高效液相色谱仪操作规程
浙江省制药工程重点实验室Waters 2695高效液相色谱仪安全操作规程1 开机1.1开主机和二极管阵列检测器（PADA），仪器进入自检阶段。
约2分钟后PADA两个灯都亮，正常；主机自检所需时间较长，自检完后显示idle。
1.2 打开电脑及软件。
1.3待软件打开后，单击系统配置，选定所需操作系统，进入工作站画面。
1.4 点“编辑”，选中“仪器方法”，设置流速、流动相比例、柱温、各通道的溶剂说明和检测波长。
1.5 点“编辑新建方法组”，使用向导创建新方法组，选择仪器方法，最后填写方法组。
1.6 把流动相放入溶剂瓶中。
1.7在控制面板上点击Direct function，再选定wet primer ，设定所需气泡的管路，设定流速与时间，按ENTER,直到所有要用通道无气泡为止。
1.8 运行样品，在采集数据项目栏中选定项目（即将此次实验数据选择存放位置），按确定,出现运行样品表：分为单一与样品组进样。
单一进样:左栏可以设置有关样品的信息（样品名，功能，方法组，样品瓶，进样体积，运行时间），右栏出图，左下栏给出仪器信息，最下栏显示仪器状态。
样品组进样：左栏可以设置有关样品的信息（每一栏的设置为下拉式菜单），右栏出图，左下栏给出仪器信息，最下栏显示仪器状态。
与单一进样相比少了进样按钮。
代替进样按钮的是“运行”按钮。
1.9 选定好仪器方法后即可监视基线，基线稳定后→中断按钮→仪器空闲后→点运行按钮，出现运行样品组对话框，设置好后点运行。
运行完后点文件中的“退出”。
1.10数据处理。
点开“浏览项目”，选定要要浏览的项目。
PDA数据处理：点“通道”→双击要处理的原始数据（点查看图标）→进入查看主窗口（此时点窗口中的工具栏可以看到等高图或3D图）→提取光谱图，找到最大吸收波长→提取色谱图→点“处理方法向导”按照提示建立处理方法→PDA光谱对照→处理方法名→完成（然后又出现主窗口，处理结果自动给出）→点“方法组”图标，选好后点“文件”下的“另存为”→“方法组”，设定即可。
WATERS2695仪器操作简明流程
WATERS2695仪器操作简明流程1.准备工作a.检查仪器的所有部件是否完好无损，包括柱温箱、泵、自动采样器等。
b.检查色谱柱是否安装到正确的位置，确保柱子的连接处密封良好。
c.打开电源，启动电脑并登录系统。
2.参数设置a.打开测量软件，并选择所需的实验方法。
如果没有现成的方法，可以新建一个。
b.在方法设置中，选择适当的波长、流速、温度等参数，并设置运行时间和梯度程序。
c.确定所需的样品数量和浓度，并在自动采样器中设置相应的参数。
3.样品准备a.准备样品溶液，将固体样品溶解在适当的有机溶剂中，确保浓度适中。
b.如果样品中有固体颗粒或大颗粒的杂质，可以使用过滤装置过滤样品。
c.适量的样品注入到自动采样器的样品盘中，确保清洁和良好的密封。
4.运行实验a.将样品盘插入自动采样器，并关闭盖子。
在测量软件中选择自动采样模式。
b.点击“运行”按钮开始实验，仪器会按照预设的梯度程序自动运行。
c.实时监控仪器的运行状态，确保一切正常。
如果出现异常情况，及时停止实验并检查故障。
5.数据分析a.在实验过程中，测量软件会自动生成数据文件。
实验结束后，可以在软件中打开文件。
b.分析数据，观察色谱图和峰的形态、保留时间等信息。
c.应用适当的数学模型和算法，计算出样品中目标物质的浓度。
6.结果记录a.将分析结果和实验条件记录在实验报告中，包括样品编号、浓度、峰面积等信息。
b. 如果需要保存数据文件，可以将其导出为适当的格式，如PDF、Excel等。
以上是WATERS2695仪器操作简明流程的一般步骤。
根据实际需求和仪器的配置，有时可能需要进行调整。
操作时务必遵守仪器使用手册和相关安全规定，确保操作正确和安全。
(完整)Waters2695高效液相色谱仪操作规程
Waters2695高效液相色谱仪操作规程一、开机前的准备工作：1．检查设备电源、流路、信号连接是否完好；2．流动相：配制相应的流动相，经0.22μm微孔滤膜抽真空过滤后，或检查是否需要添加。
适当选择滤膜，水系/有机系（反光面朝上）。
3．样品溶液：按方法取样或配制标准样品溶液，0.22μm滤膜过滤。
二、开机平衡系统：1．开机自检：打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”自检完成。
2．脱气：按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。
一般默认是开的。
3．设定柱温：在“Status”界面，光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter。
4．清洗柱塞杆：按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。
5．Wet Prime：在“Status”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。
将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。
（也可各通道选25%v 5ml/min，3min）。
6．注射器排气泡及清洗：进入“Direct Function”界面后，选择“Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。
7．清洗注射针：进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。
注：以上4-7为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。
waters 2695 HPLC 操作规程
Waters 2695 HPLC 操作规程一．开机程序1、首先制备新鲜流动相，清洗液以及样品A. Alliance对流动相的要求●有机溶剂要求用色谱纯，经0.45μm微孔滤膜（有机膜）过滤●水或缓冲盐溶液要用超纯水（18.2MΩ）当天制备，经0.45μm微孔滤膜（水膜）过滤●超声波脱气约2分钟B. Alliance对清洗液的要求●密封圈清洗液（seal wash）用含5%-10%甲醇的超纯水●洗针液（needle wash）用较高比例的甲醇/水或乙腈/水C. Alliance对样品的要求●按方法要求配制样品溶液，并以过滤或高速离心方式（10000转/分钟以上）除去溶液中的固体微粒。
2、打开计算机电源，进入Windows操作系统3、打开仪器硬件电源（依次打开网络集线器，2695，检测器）4、进行仪器的Start up 操作（Alliance面板操作）●Prime seal wash：Diag →Prime seal wash，直至入口管没有可见气泡，按Halt键停止Prime，再按close关闭界面；●Prime needle wash：Diag →Prime needle wash，清洗进样针1-2次。
Close并Exit，退出Diag界面；●Dry Prime：打开泵抽液阀→Menu/Status →Direct Function →Dry Prime→依次选择A、B、C、D，同时用注射器抽取液体，结束后按cancel，切记完成后将抽液阀关闭；●Wet Prime：依次将实验所涉及的流路设为100%→Direct Function →WetPrime，确保流路中为新鲜溶剂；●设定流速、柱温等参数，平衡系统约30分钟；●Purge injection：Direct Function →Purge injection5、登录Empower 软件，进入运行样品界面●双击Empower3图标，输入用户名和密码。
(完整)waters 2695 高效液相色谱仪操作规程
Waters Alliance 高效液相色谱仪操作规程一、概述1.设备使用范围：主要用于样品中食品添加剂、农药残留、兽药残留、毒素、污染物、非法添加物测定。
2.设备主要技术/性能指标：四元溶剂混合支持等度和梯度应用，具有11个独特的梯度曲线。
自动混合持术能够以任何比例混合四种溶剂。
先进的溶剂分配功能。
串联流路具有无脉冲溶剂分配，无需使用湿润器。
在线溶剂脱气和溶剂自动压缩实现准确的流路。
集成的密封清洗实现稳定操作，并且所有溶剂类型均符合规格。
检测器包括光电二极管阵列、示差折光检测器。
二、使用要求1.存放环境温度10～30℃，湿度≤80%，电压220V。
2.流动相和纯水应用微孔滤膜过滤（纯有机相或含一定比例有机相的用有机系的滤膜，水相或缓冲盐的用水系滤膜）。
一次制得的纯水或缓冲盐流动相应在连续24小时内使用完，如未使用完也应弃去不用，并重新配制新鲜的流动相。
如需使用，应重新过滤。
流动相的pH值应在色谱柱填料允许的范围内。
该泵带有真空脱气机，可不超声，但要在泵电源开启后，等脱气机停止工作后（约需5分钟）再进行泵的其它操作。
3.流动相禁止使用氯仿、三氯（代）苯、亚甲基氯、四氢呋喃、甲苯等；慎重使用四氯化碳、乙醚、异丙醚、酮、甲基环己胺等，以免造成对柱塞密封圈的腐蚀。
三、操作程序A：开机步骤1.打开计算机，进入Windows界面。
2.打开仪器电源，待仪器各部分自检完成。
3.将2695泵密封垫清洗管路、洗针管路以及ABCD管路分别放入适当的溶剂。
4.Prime seal wash：按2695面板Diag键，选择Prime SealWash，清洗泵头，直至出口管有液滴流出，按Halt，停止Prime，再按close关闭界面。
5.Prime needle wash：再选择Prime NdlWash，清洗进样针1-2次,直至黄管有液体喷出。
Close并Exit，退出Diag界面。
6.Dry Prime：按2695面板Menu/Status键,再按Direct Function键做Dry Prime (注: 此操作仅在管路中没有液体时执行,否则直接进入步骤6)。
Waters_2695_型高效液相色谱仪操作方法
Waters 2695 型高效液相色谱仪操作方法1 仪器组成及开机1.1 仪器组成本仪器由Waters 2695 分离单元、2996型二极管阵列检测器、色谱管理工作站和打印机组成。
2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机（或氦气脱气机），可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。
1.2 开机依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
接通2695 分离单元后，约20s 仪器开始自检，约1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区出现“Idle ”时，仪器进入待命状态。
2 溶剂管理系统的准备2.1 流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按【Menu/Status 】，进入“Status （ 1 ）”屏幕，光标选“Degasser ”，按【Enter 】，显示选项屏幕，光标下移选“Continuous ”，按【Enter 】。
2.2 启动溶剂管理系统2.2.1 干启动，当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status （1 ）”屏幕下，按【Direct Function 】，光标选“Dry Prime ”，按【Enter 】，显示“Dry Prime ”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如【OpenA 】，光标选“Duration ”，按数字键输入5min ，按【Continue 】，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2.2.2 湿启动在“Status （1 ）”屏幕下，光标选“Compomtion ”中欲使用的流动相，输入10 0％，按【Direct Function 】，光标选“Wet Prime ”，按【Enter 】，显示“Wet Prime ”屏幕，输入7.5Ml/min 和6min ，按【OK 】，待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。
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2695-2489 HPLC系统 操作规程
2695-2489系统的标准化操作规程
一、 开机及准备系统
开机自检
详见1.1
是 执行干灌注
详见1.6
管路是否已干？
准备流动相
详见1.2
否
执行湿灌注
详见1.7
灌注柱塞密封清洗
详见1.3
灌注针头清洗
详见1.4
设定流动相平 衡色谱柱
详见1.8
冲洗进样器
*特别提示: z 玻璃容器必须使用超纯水清洗； z 所有溶剂和溶液在使用前必须ᠭ0.45Ǻ m᧣滤ሻ过滤，并超声脱气1分钟； z ᠭ洁净᧣玻ሒᠤᕬፕ溶液和流动相，ᶲቿ污ᝦ
1.3 灌注柱塞密封清洗泵 (Priming the Plunger Seal Wash Pump)
操作步骤： 1. 回到Menu 画面，选择Diag。
z Develop Method： 编辑、修改、删除仪器方法。 z Run Sample： 执行样品注射、仪器分析条件。 z Diag： 诊断维护仪器。 z Config： 设置仪器系统装置。 z Log： 查询仪器使用记录。
5
Log：又称“日志”，是仪器的使用记录。 这是一个非常有用的工具，在这里可以查
1.10. 装载样品转盘 (Loading Carousels)
样品盘的颜色及编号如下
代号
颜色
A
蓝色
B
黄色
C
红色
D
绿色
E
白色
z 打开样品管理器门，放入样品盘。
编号 1 – 24 25 – 48 49 – 72 73 – 96 97 - 120
z 若要换下一个样品盘时请按Next。 z 将样品瓶放入样品盘内，并记录各瓶号名称. z 当所有样品盘都放入时，关起舱门转盘会自动定位。
键来控制仪器。
当此处显示“Remote”即“远程控制” 时，表明仪器处于 Empower 软件控制， 则仪器面板上的按键无效。
自检测试结果画面
操作画面说明:
Banner Area：当前仪器状态显示区。 Data Area：操作画面显示区，可分为两大功能画面，可利用面板的Menu / Status键进行切换。 Screen Keys（屏幕功能键） 菜单（Menu ）画面下： Screen Keys（屏幕功能键）如下：
1. 按“Menu/Status” 键，进入Status (1)画面，在设定溶剂的画面中设定适当的流速与溶剂 比例（针对缓冲盐或离子对试验，建议设定50%乙腈：50%水的溶剂来冲洗进样器）。
2. 按“Direct Function” 键，选择Purge Injector，按Enter。
3. 输入Sample Loop 体积清洗的倍数(原定值为6 倍)，按Enter。 4. 压缩测试(Compression Check)请先不需要测试，设定完成后按OK。
1. 按“Menu/Status” 键，进入Status (1)画面，利用方向键将光标移至“Composition”字段， 将欲Wet Prime 的溶剂输入100%.
2. 按“Direct Function” 功能键，选择 Wet Prime，按Enter。 Wet Prime 的设定值，一般为Flow Rate : 7.5mL/min，Time: 3.0min， 然后按下“OK” 键，泵即开始进行Wet Prime 操作。
1.4 灌注针头清洗泵 (Prime the Needle Wash Pump)
操作目的： z 防止执行样品进样时的交叉污染。 z 当流动相为缓冲液或样品在注射针头内，延长进样器密封圈（Injector Seal）使用寿命。
溶剂的选择： z 根据样品及流动相的化学特性来作选择。 z 若为浓度较高的样品需要较强的溶剂来清洗。 z 不同的色谱实验，所建议使用的清洗溶剂如下表：
1.5 打开真空脱气机 (Degasser)
1. 按“Menu/Status” 键，进入Status (1)画面.
2. 利用方向键
将光标移至“Degasser”位置，按Enter。
3. 利用上下键
选择模式为ON，如下图所示：
真空脱气机degasser的 模式mode调至ON
注意： 在开启真空脱气机时，要确认所有溶剂管路都充满溶剂；若没有溶剂时请执行溶剂 的Dry Prime 操作。
10 12
充分，继续
缓冲盐
210
湿灌注
13
≦ 40
清洗单向阀 阀芯a和吸 滤头b；或排 气不充分， 继续湿灌注
注：
a清洗单向阀：单向阀（共两个）先放在超纯水中超声10分钟，再放在甲醇中超声10分钟。 b清洗在线过滤器或吸滤头：将在线过滤器拆下，取出筛板，用30% H3PO4水溶液超声清洗20分钟，纯水反复超声清洗至清洗后的水 pH值呈中性，然后用甲醇超声清洗10分钟。
三、 关机 实验结束后，退出Run Samples界面，退出Empower2软件，关闭检测器电源；然后依次进
行以下操作： 1. 清洗色谱柱约60分钟（详见附录一） 2. 灌注柱塞密封，清洗1分钟 （详见1.3） 3. 灌注针头清洗2次 （详见1.4） 4. 冲洗进样器（详见1.9，对于缓冲盐或离子对试验，建议用50%乙腈：50%水冲洗进样器） 5. 降低流速至0，待系统压力回零后，关闭2695电源。关闭计算机及显示器电源。
1.1 开机 (Powering On)
1. 打开Alliance 2695和2489 的电源开关至 ON (1) 的位置，仪器开始进行自检。 2. 仪器将进行大约5分钟的自检过程，待仪器自我测试完毕后，出现以下画面，画面上方的状
态显示区会出现“Idle” 状态，表示开机测试正常。
5
当此处显示“Idle”即“空闲”时，表明仪 器处于待命状态，可以用仪器面板上的按
2. 确定Seal Wash的管路放在正确的位置。 3. 按Prime Seal Wash ，再按Start ，
直到清洗溶剂流出泵杆密封圈冲洗废液 管，按Halt。 4. 按Close。
注意： 密封圈清洗(Seal wash)的溶液，在反相液相色谱中可使用90％水/10％甲醇或者使用 95％水/5％乙腈(体积比，根据实际需要进行选择)。
2. 设定好新的溶剂组成比例后，按 “Change Comp” 功能键（即改变溶剂组成比例 change composition），新设定的溶剂组成比例即确定为当前的比例。
3. 利用方向键将光标移至“Flow”字段，利用仪器面板右侧的数字键设定流速，此时仪 器即用设定的溶剂组成比例和流速来平衡色谱柱。
到仪器的开关机时间、错误的使用记录等
有用的信息！
Status / Control 画面下：
(1) Status(1)画面 z 脱气装置(Degasser)的开启 z 仪器流速(Flow Rate)的设定 z 溶剂比例(Solvent Composition) 的设定
(2) Status (2)画面 z 显示仪器内部工作状态，如系统与注 射器压力、压力变化(Delta psi)、阀 门运转状态
两天； z 首先要检查6根管子是否在液面下，必须确保6根管子全部插到溶剂瓶的底部； z 溶剂瓶液面必须高于溶剂混合阀(Gradient Proportioning Valve)的位置；而洗针液
的溶剂瓶应放于试验台面上，与2695仪器底部位于同一水平面上； z 清洗柱塞密封垫(Seal Wash)的溶液配制： 含5%-10%甲醇的超纯水 z 洗针液（Needle Wash）的配制：50%甲醇：50%水（该比例仅适用于反相实验）
*特别提示: 常规的反相色谱条件约需要20～30倍柱体积的流动相来平衡色谱柱；对于离子 对方法，可能需要多达500倍柱体积的流动相来平衡色谱柱。
1.9. 冲洗进样器 (Purge Injector)
何时执行？ z 改变溶剂时。 z 发现注射器及其管路内有气泡时。 z 每天开机和关机的时候。
操作步骤：
详见1.9
打开真空脱气机
详见1.5
放入样品盘
详见1.10
二、 实验 打开计算机，运行Empower软件，选择存放数据文件的Project，运行Run Samples；按软
件中的Develop Methods按钮，建立仪器方法,并保存至方法组；按Monitor按钮，观察基线， 待基线平稳，可准备进样。
3. 重复上述的步骤直到对所有溶剂的Wet Prime执行完毕。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1.8 设定流动相条件来平衡色谱柱
1. 按“Menu/Status” 键，进入Status (1)画面，利用方向键将光标移至“Composition” 字段，利用仪器面板右侧的数字键设置试验要求的溶剂组成比例，此时会在原溶剂比例 表的下方出现新编辑溶剂比例表（New Composition），如下图所示：
色谱条件 反相缓冲溶液 反相非缓冲溶液
洗针液 50% 水，50% 甲醇
100% 甲醇
注意： 若上述清洗溶剂无法避免进样时的交叉污染，请用较强的溶剂系统进行清洗。 洗针液的溶剂瓶应放于试验台面上，与2695仪器的底部同一水平面上。
操作步骤： 1. 回到Main 的画面，选择Diag，选 择Prime Ndl Wash。 2. 缺省设定值为30 秒，若想要多清洗 几次时，请按Start Again。
附录一 反相色谱柱的使用注意事项
新色谱柱的安装和平衡 使用新色谱柱前需要对色谱柱进行润湿和平衡，注意确保您所使用的流动相和色谱柱储 存溶剂“相溶”。Symmetry/Sunfire 反相色谱柱是在 100％乙腈中储存的。 a) 依次用水和乙腈（或甲醇）冲洗液相色谱泵系统中含有缓冲盐的流路，然后将色谱 柱按照标签上的箭头方向连接到进样器或保护柱的出口端，标签上的箭头指向检测 器流向（先不要接检测器） b) 在 0.1ml/min 流速条件下用 100％纯甲醇或乙腈冲洗色谱柱，然后在 5 分钟内将 流速升至 1 ml/min。 c) 当溶液均匀地从柱子出口流出时，停掉流速，将色谱柱出口端接到检测器上（这样 操作可以避免气泡进入检测系统，并且可快速达到基线平衡） d) 按照步骤 b）的方法逐渐提高流速 e) 当压力达到稳定值并且基线平稳后，缓慢降低流速，停泵 f) 用 5：95 乙腈：水（体积比）冲洗色谱柱 30 分钟【注意流速要从 0.1 ml/min 缓 慢上升至 1 ml/min】 g) 换上含有离子对试剂的流动相，对色谱柱进行平衡，直到基线平稳 h) 进标准溶液和样品溶液进行分析