DNA亲子鉴定测试的常见问题
DNA测序技术的使用中常见问题
DNA测序技术的使用中常见问题DNA测序技术是一项重要的科学工具，被广泛应用于生物医学研究、进化学、司法科学等领域。
然而，在使用DNA测序技术的过程中，常常会遇到一些问题。
本文将介绍DNA测序技术使用中常见的问题，并提供相应的解决方案。
1. 样品质量问题在DNA测序之前，样品质量是至关重要的。
低质量的样品会导致测序结果的偏差和错误。
常见的样品质量问题包括样品的纯度不高、浓度不足或者样品受到了污染。
解决方案：- 提高样品纯化方法：使用恰当的纯化试剂和技术来提高样品的纯度，例如使用芳香族化合物或异维酮类物质。
- 检测样品浓度：使用光谱法或者比色法来测量样品中DNA的浓度，确保其符合测序要求。
- 避免样品污染：在样品处理过程中，严格遵守无菌操作规程，使用经过无菌过滤器过滤的试剂和器具。
2. 序列读取长度问题DNA测序技术可以产生从数十个碱基对到上百万个碱基对的序列。
然而，部分DNA测序技术的读取长度有限，这可能影响到某些研究或应用的结果。
解决方案：- 选择合适的测序方法：不同的测序方法具有不同的读取长度，选择适合自己研究目的的测序方法，以满足相关的研究需求。
- 使用测序技术的新发展：不断发展的测序技术，如第三代测序技术，具有较长的读取长度和更高的准确性，可以解决传统测序方法的限制。
3. 突变检测问题DNA测序技术不仅可以用于确定特定序列的顺序，还可以用于检测和鉴定突变。
然而，突变的检测可能受到多种因素的影响，如检测方法的灵敏度和特异性、突变类型的多样性等。
解决方案：- 选择合适的突变检测方法：不同的突变具有不同的检测方法，如SNP分析、插入和缺失突变的分析等。
选择合适的方法来检测特定类型的突变。
- 结合多种检测方法：结合使用不同的突变检测方法可以提高突变检测的准确性和可靠性。
- 验证突变结果：通过使用其他独立的测序技术或方法来验证突变结果，以确保结果的可靠性。
4. 数据分析问题DNA测序技术生成的数据量巨大，数据分析是一个复杂而耗时的过程。
DNA测序结果中常见的几个问题
1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱，几乎难以辨别?这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致，该干扰峰和正常序列峰重叠在一起；另外，测序电泳开始阶段电压有一个稳定期，所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚，有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生N 值，峰图较杂?由于测序反应的信号是逐渐减弱的，所以序列末端的信号会很弱，峰图自然就会杂乱，加上测序胶的分辨率问题，如果碱基分不开，就会产生N 值，正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列?如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的，因为引物本身是不被标记的，所以在测序报告中是找不到的；如果找不到克隆片段中的扩增引物，可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到扩增引物；另外插入片段的插入方向如果是反的，此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点?可能的原因同上，您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物，当然，若是样品出现意外原因，如空载、载体自连等，克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致，给我的结果与我需要的序列有差距，这是怎么回事? 首先，我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号，如果对应的是您的样品，由于不知您的实验背景，测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断，我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)?是否会影响测序结果?序列图的背景杂带是由荧光染料引起，如果太强会影响测序结果，要看信噪比，我们给的结果信噪比大都在98%以上。
7 、测序结果为什么与标准序列有差别？原因可能有：样品个体之间的差别、测序准确率的问题，自动测序仪分析序列的准确并非100%，建议至少测一次双向，通过双向测序可以最大限度减少测序的错误。
DNA测序常见问题分析及解决办法总结
请提供详细资料我们会根据结果具体分析。
常见问题
具体情况
可能的原因
处理办法
备注
样品准备问题
菌培养不好或失败
抗性不对或菌已死
核对抗性，尽可能提供载体信息。
或菌培养条件特殊
重新提供菌液，或提供2ug纯化质粒。
质粒提不出
质粒拷贝数极低或
客户自己采取大量提取的方法提供2ug纯化质粒。
培养方式不当
质粒产量很低
低拷贝数质粒或
客户自己采取大量提取的方法提供2ug纯化质粒。
培养方式不当
自带质粒或已纯化PCR产物量极低
是否为电泳法定量，
质粒：电泳检测浓度大于100ng/ul，体积大于20ul。
测OD值法不可靠,电泳检测
总量是否足够
已纯化PCR产物：根据片段长度提供足够量的模板，一般要求是100ng/反应/Kb，进行多个反应的应相应增加量。
测序出现双峰或信号中断
双峰
重复序列，如polyT、polyA或几个碱基重复
质粒产量极低
客户自己提供2ug纯化好的质粒
PCR产物定量极低
重新电泳检测已纯化的PCR产物，确认有足够的量，或提供PCR原液由公司进行纯化
测序结果正常，与预期不符
找不到引物
质粒模板
检测是否为空载体，从其互补链上寻找，克隆位点离测序引物太近，长插入片段未测通。
PCR模板
不可能找到所用的测序引物，短片段可以从互补链上找到另一段的引物，长片段由于测不通，无法找到相应序列想得到全序列，短片段可以从两端进行测序，长片段需要经克隆后进行测序。
用反向引物中出现套峰
可能是样品非单克隆，挑其他克隆测序。
PCR产物测序中，某一点后序列变乱
做亲子鉴定注意事项
做亲子鉴定注意事项亲子鉴定是一项非常重要且敏感的工作，主要用于确定父母和子女之间的亲属关系。
随着社会的进步和科技的发展，亲子鉴定的方法也日益成熟和准确。
然而，由于其涉及到家庭关系和个人隐私，需要注意一些事项，以确保鉴定结果的准确性和客观性。
首先，选择正规机构进行亲子鉴定是非常重要的。
正规机构通常具有专业的实验室和专业的技术人员，他们能够提供准确和高质量的鉴定结果。
在选择机构时，可以参考一些公认的权威机构或是咨询专业人员的意见，确保选择到的机构是具有良好声誉和信誉的。
其次，需要确保鉴定样本的准确性和完整性。
亲子鉴定的样本主要是父母和孩子的DNA样本，因此，采集样本时需要注意一些细节。
首先，应确保样本的来源清晰明确，避免混淆和交叉感染。
其次，应采用专业的采样工具和方法，确保样本的纯净和完整。
对于孩子的样本采集，需要在监护人的陪同下进行，以确保过程的合法性和透明性。
第三，亲子鉴定过程中需要尊重个人隐私和家庭关系。
亲子鉴定涉及到家庭的私密问题，因此，在进行鉴定前，需要征得相关当事人的同意，并对个人信息和鉴定结果进行保密。
鉴定机构需要严格遵守相关的法律法规，保护被鉴定人的合法权益，不得将相关信息泄露给外部。
第四，监督和信任也是亲子鉴定中需要注意的事项。
亲子鉴定是一项严肃而庄重的工作，需要有专业的利益监督机构进行监督和审查。
此外，在鉴定过程中，相关当事人也需要保持对鉴定结果的信任和尊重，不得对结果进行任意质疑或者扭曲解释。
只有通过维护鉴定的专业性和客观性，才能达到亲子鉴定的真实和公正。
最后，亲子鉴定的结果需要正确使用和解读。
亲子鉴定的结果是科学和实验的产物，对于家庭和个人的重大影响，因此，在使用和解读结果时需要谨慎而专业。
首先，需要对鉴定结果进行全面的了解和解读，避免片面和错误的理解。
其次，要正确使用鉴定结果，不能将其作为个人攻击或者其他不当用途。
亲子鉴定的结果应该用于解决鉴定问题，维护家庭和个人的合法权益。
DNA亲子鉴定常见问题
DNA亲子鉴定常见问题DNA亲子鉴定是一种可以通过比对个体间的DNA序列来确定亲子关系的科学技术。
近年来，随着亲子鉴定的广泛应用，人们对于这个领域的了解也越来越多。
然而，仍然存在一些常见问题困扰着公众。
在本文中，我们将回答一些关于DNA亲子鉴定的常见问题，帮助读者更好地了解这一科学技术。
问题一：什么是DNA亲子鉴定？DNA亲子鉴定是一种利用DNA序列来确定亲子关系的方法。
DNA 是人体细胞内的遗传物质，它由碱基对组成，其中包括腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）。
每个人的DNA序列都是独一无二的，在親子鉴定中，相互比对被鉴定者和被比对者的DNA 序列，通过分析DNA序列的相似性，来确定两者之间是否存在亲子关系。
DNA亲子鉴定的原理是通过比较被鉴定者与被比对者之间的DNA 序列，寻找两者之间的相似性。
在进行DNA亲子鉴定时，常用的方法是提取被鉴定者和被比对者的DNA样本，然后通过PCR扩增特定的DNA片段，接着使用电泳技术将扩增的DNA片段进行分离。
最后，通过比对两者的DNA分离片段，来确定是否存在亲子关系。
问题三：DNA亲子鉴定的可靠性有多高？DNA亲子鉴定的可靠性非常高。
由于每个人的DNA序列都是独一无二的，所以DNA亲子鉴定可以比对个体间的DNA序列，只要比对结果达到一定的相似性阈值，就可以确定是否存在亲子关系。
根据国际标准，DNA亲子鉴定的可靠性可以达到99.9%以上。
进行DNA亲子鉴定需要提供被鉴定者和被比对者的DNA样本。
常见的DNA样本来源有口腔黏膜刷取、血液、毛发根部、指甲、尿液等。
一般来说，提供足够的DNA样本可以提高亲子鉴定的可靠性。
问题五：DNA亲子鉴定会对个体造成伤害吗？DNA亲子鉴定不会对个体造成伤害。
提取DNA样本时，常使用非侵入性的采样方法，例如口腔黏膜刷取或者取指甲、毛发等样本。
这些采样过程对个体没有任何危害。
此外，亲子鉴定的分析过程也是非侵入性的，不会对个体造成伤害。
胎儿亲子鉴定常见问题
更多详情咨询DNA亲子鉴定中 心。
（1）绒毛亲子鉴定一般在孕八周 至16周进行采样，我们目前不提 供采样服务，如果您能在医院采 样我们可提供鉴定服务。
（2） 羊水亲子鉴定在孕16-24周 采集羊水。羊水量这时候是最充 足的，这时候进行抽取羊水最为 安全期，抽取少量（3-5毫升）的 羊水对胎儿的健康成长是不会造 成不良影响的。
2.胎儿亲子鉴定如何收费。
胎儿羊水鉴定价格为3800元检测 费（不包含羊穿费），目前只提 供广州亲子鉴定预约。其他地区 可在医院抽取寄送样本至我中心 （建议选择三甲医院）
胎儿绒毛亲子鉴定为绒毛的是 4100元，父母提供常规标本。若 父或母提供特殊样本，则每个样 本加500元检测费
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胎儿亲子鉴定常见问题
近日，DNA亲子鉴定中心工作人员 接到不少客户咨询胎儿DNA鉴定的 问题，在此，我中心就相关胎儿 DNA亲子鉴定的问题跟大家一一解 答。
1. 胎儿亲子鉴定什么时间做？
胎儿亲子鉴定可以选择二个时间 段做，根据这二个间段可将胎 儿亲子鉴定分为绒毛亲子鉴定和 胎儿羊水亲子鉴定。
拓展分析《DNA的粗提与鉴定》十大疑难
拓展分析《DNA的粗提与鉴定》十大疑难曾小军（江西省泰和县第二中学343700）1、实验中成功的关键是什么？应特别注意哪些过程？本实验成功的关键，是保证提取到足量且较纯净的DNA。
因为DNA在细胞中含量少，所以在下列步骤中应特别注意：在步骤1中使用的鸡血的量要在180mL左右，提取细胞核物质时要充分搅拌。
在步骤2中要充分晃动烧杯，在步骤3中加蒸馏水要控制好量，在步骤4中要使用多层纱布过滤，在步骤5中要充分搅拌，步骤7中使用冷酒精等。
因为DNA易吸附在玻璃容器上，所以实验中要使用塑料烧杯和试管，以减少DNA的丢失。
270．在DNA粗提取实验中，鉴定DNA为什么不用2M/L的NaCl溶液而用0.015M/L 的NaCl溶液？答：①教材中所选用“0.015M/L的NaCl溶液”，起溶解DNA的溶剂作用，成功率低，用时较长。
②若改为“2M/L的NaCl溶液”，起溶解DNA的溶剂作用，则实验成功率高，所用时间较短（有实验证明）。
③通过实践证明：用2M/L的NaCl溶液比用0.015M/L的NaCl 溶液效果更好2、本实验用鸡血细胞液而不用鸡全血，原因如何？能否用哺乳动作的肝脏作为实验材料？鸡全血包括血浆和血细胞，血浆中无DNA。
全血除去血浆后即是浓缩的血细胞，DNA的含量相对提高了，便于DNA的提取。
将哺乳动物肝脏组织剪碎、研磨，并让其吸水胀破后可释放较多的DNA，因而可以用哺乳动物的肝脏作实验材料。
3、生活在牧区的学生，采集牛、马和羊血比较方便，他们按照教材的实验要求，能否观察到实验现象？不能。
哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，无染色体和DNA，提取不到DNA，当然观察不到实验现象。
4、实验最好用塑料容器（如塑料烧杯、试管等），不宜用玻璃容器？鸡血细胞破碎后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。
因此，实验过程最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。
DNA测序结果中常见的几个问题
D N A测序结果中常见的几个问题公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱，几乎难以辨别这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致，该干扰峰和正常序列峰重叠在一起；另外，测序电泳开始阶段电压有一个稳定期，所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚，有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生 N 值，峰图较杂由于测序反应的信号是逐渐减弱的，所以序列末端的信号会很弱，峰图自然就会杂乱，加上测序胶的分辨率问题，如果碱基分不开，就会产生N 值，正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的，因为引物本身是不被标记的，所以在测序报告中是找不到的；如果找不到克隆片段中的扩增引物，可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到扩增引物；另外插入片段的插入方向如果是反的，此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点可能的原因同上，您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物，当然，若是样品出现意外原因，如空载、载体自连等，克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致，给我的结果与我需要的序列有差距，这是怎么回事首先，我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号，如果对应的是您的样品，由于不知您的实验背景，测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断，我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)是否会影响测序结果序列图的背景杂带是由荧光染料引起，如果太强会影响测序结果，要看信噪比，我们给的结果信噪比大都在98%以上。
DNA测序常见问题分析及解决办法
请提供详细资料我们会根据结果具体分析。
关于DNA测序服务的说明
1、如需TA克隆后测序，提供PCR产物的量不少于50ul。我们在收到样品后，先进行回收纯化，再进行克隆实验。
2、目的基因亚克隆实验，请提供含有目的基因的质粒及亚克隆载体质粒，如果质粒量少请提供保存菌种，我们需要额外收取转化或质粒提取费用。我们在收到样品后，先进行预实验检测，检测结果与背景资料一致时开始实验。
培养方式不当
自带质粒或已纯化PCR产物量极低
是否为电泳法定量
质粒：电泳检测浓度大于100ng/ul，体积大于20ul；已纯化PCR产物：根据片段长度提供足够量的模板，一般100ng/反应/Kb，进行多个反应的应相应增加量。
只测OD值不可靠
总量是否足够
测序出现双峰
双峰
重复序列，如polyT、polyA或几个碱基重复
质粒测序时整个结果双峰
引物特异性不好，改用其他引物测序。
质粒和PCR产物测序出现双峰
引物不纯，测序时只要单一引物，请不要将双向PCR引物混合；合成的引物没有纯化或纯化不好。重新合成引物测序。
信号
信号迅速衰减或
中断
模板GC二级结构区后
难以得到好的测序结果，亚克隆成较小的片段进行测序
模板GT二级结构区后
现象
可能原因
是否收费
收
不收
反应无信号或全部杂峰
引物与模板结合不好（引物或模板原因）
不收
质粒抽提未成功
质粒太大或活化方式不好、转化不好
不收
鉴定质粒或PCR浓度
建议50ul(pcr)/20ul(质粒)去离子水溶解
不收
帮助客户设计引物和序列拼接
不收
300bp以前中断或衰减
DNA测序常见问题解析
Q：为什么我在测序报告上找不到我的引物序列？A：这里分以下几种情况：1. PCR引物作为测序引物进行测序时，所测序列是从引物3'末端后第一个碱基开始的，而且刚刚开始的碱基由于在毛细管电泳中不能很好地分离而导致准确性下降，所以找不到您的引物序列。
对于较短的PCR产物（<600 bp），可以用另一端的引物进行测序，从另一端测序可以一直测到序列的末端，就可以在序列的末端得到您的引物的反向互补序列。
对于较长的序列，一个测序反应测不到头，因此就只能将您的PCR产物片段克隆到适当的载体中，用载体上的通用引物进行测序。
由于载体上的通用引物与您的插入序列之间还有一段距离，因此就可以得到您的完整的引物序列。
由于在测序的起始端总会有一些碱基无法准确读出，因此，您如果想得到您的PCR产物的完整序列，最好克隆后进行测序。
2. 有时质粒做模板进行测序时，由于某些原因，质粒上没有插入外源片段，为空载体，所测的序列完全为载体序列，此时也找不到引物序列。
3. 找不到克隆片段的扩增引物。
发生这种情况原因有2个：（1）您在构建质粒时采用的工具酶的酶切位点距离您的测序引物太近，由于荧光染料的干扰在序列开始的部分会不十分准确。
比如pBluescript ⅡKS这个质粒如果采用Sac I做工具酶，采用T7引物测序：那么从T7引物末端到Sac I的酶切位点只有6个bp，这样酶切位点后的扩增引物序列在测序报告上很可能不完整。
解决的办法是采用M13 Forward引物来测序，这样可以保证Sac I的位点和之后的引物序列都可以完整的出现在报告中。
（2）您的插入片段的插入方向是反的，这时您不妨找一下您引物的反向互补序列。
或者您插入的片段可能不是您的目的片段，而是由于非特异性扩增出来的片段，还有可能您送过来的样品被污染。
Q：测序发现引物有突变或缺失是什么原因？A：测序发现引物区有突变，主要考虑三个方面的原因：测序，PCR/克隆过程，引物本身。
法医DNA鉴定实验常见问题解答
法医DNA鉴定实验常见问题解答1、 Chelex配制需要注意哪些方面？推荐按每次检验的实际消耗少量配制，迅速用完。
不推荐一次配制较大的体积，长时间使用。
2、 Identifiler，Identifiler Plus，Identifiler Direct试剂盒包含的基因座相同吗，引物序列相同吗？基因座相同，引物序列相同。
3、 Identifiler Plus可否用于建库样品的检测，同样，Identifiler Direct等直扩试剂盒可否用于案件样品的检测？每种试剂盒都是按其应用，如案件和建库，进行设计和优化的，因此都有其针对性，不建议将建库试剂盒用于案件检测，反之亦然。
4、 Sinofiler与Huaxia试剂盒包含的基因座相同吗，引物序列相同吗？基因座相同，引物序列相同。
5、 Yfiler与Yfiler Direct试剂盒包含的基因座相同吗，引物序列相同吗？基因座相同，引物序列相同。
6、上面七款试剂盒，相同基因座的引物序列相同，这样设计对案件检测有哪些好处？好处在于对同一个体提供的检材，相同基因座的检测结果一定相同，极大的保持了检测结果的一致性，便于以后的数据复核工作。
7、新的CODIS多少基因座，包含哪些基因座？新的CODIS包括20个基因座：CSF1PO, D3S1358, D5S818, D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11, FGA, TH01, TPOX, vWA, D1S1656, D2S441, D2S1338, D10S1248, D12S391, D19S433, D22S1045。
8、 GlobalFiler试剂盒包含哪些基因座？GlobalFiler试剂盒包含所有新的CODIS基因座，和SE33，Amelogenin，DYS391以及Y indel。
9、 GlobalFiler试剂盒使用几色荧光？使用Thermo Fisher公司的六色荧光（J6），即6-FAM, VIC, NED, TAZ, SID, LIZ。
亲子鉴定不准确的案例
亲子鉴定不准确的案例亲子鉴定是指通过DNA检测等方法来确定亲子关系的一种鉴定方式。
然而，在实际操作中，也存在着一些亲子鉴定不准确的案例。
这些案例不仅对当事人造成了困扰，也给亲子鉴定行业带来了一定的负面影响。
下面将介绍一些亲子鉴定不准确的案例，以引起大家对亲子鉴定准确性的重视。
案例一，A先生与B女士因离婚纠纷进行亲子鉴定，结果显示两人的孩子并非A先生的亲生子女。
然而，A先生对结果表示怀疑，并要求重新进行鉴定。
经过多次鉴定，结果仍然是相同的。
最终，A先生通过法院调解，进行了全面的调查，最终发现是B女士在孩子出生后进行了偷换婴儿的行为，导致亲子鉴定结果不准确。
案例二，C女士在进行亲子鉴定时，结果显示她与孩子的亲子关系不成立。
C女士对结果表示怀疑，并提出了异议。
经过进一步调查，最终发现是实验室在进行鉴定时出现了操作失误，导致结果不准确。
案例三，D先生与E女士在进行亲子鉴定时，结果显示两人的孩子并非他们的亲生子女。
然而，D先生与E女士对结果表示怀疑，并提出了质疑。
经过多次鉴定，结果仍然相同。
最终，经过法院调解，发现是D先生在进行亲子鉴定前进行了DNA样本的篡改，导致结果不准确。
以上案例表明，亲子鉴定不准确可能的原因有很多，包括操作失误、DNA样本篡改、婴儿偷换等。
这些都对当事人造成了极大的困扰和伤害，也对亲子鉴定行业带来了一定的负面影响。
因此，我们在进行亲子鉴定时，必须选择正规、专业的实验室进行鉴定，确保鉴定结果的准确性。
同时，对于亲子鉴定不准确的案例，我们也需要引起重视，加强对亲子鉴定行业的监督和管理，严格规范鉴定程序，杜绝操作失误和不当行为的发生。
只有通过这样的方式，才能保障亲子鉴定结果的准确性，维护当事人的合法权益，促进亲子鉴定行业的健康发展。
总之，亲子鉴定不准确的案例给我们敲响了警钟，我们应当引起重视，加强对亲子鉴定行业的监管，确保鉴定结果的准确性，维护当事人的合法权益。
希望通过大家的共同努力，亲子鉴定行业能够更加规范、专业，为社会提供更好的服务。
DNA测序过程可能遇到的问题及分析
DNA测序过程可能遇到的问题及分析对于一些生物测序公司（如Invitrogen等），我们的菌液或质粒经过PCR和酶切鉴定都没问题，但几天后的测序结果却无法另人满意。
为什么呢？PCR产物直接进行测序，在PCR产物长度以后将无反应信号，机器将产生许多N值。
这是由于Taq酶能够在PCR反应的末端非特异性地加上一个A碱基，我们所用的T载体克隆PCR产物就是应用该原理，通常PCR产物结束的位点，PCR产物测序一般末端的一个碱基为A（绿峰），也就是双脱氧核甘酸ddNTP 终止反应的位置之前的A,A后的信号会迅速减弱。
N值情况一般是由于有未去除的染料单体造成的干扰峰。
该干扰峰和正常序列峰重叠在一起，有时机器377以下的测序仪无法正确判断出为何碱基。
有时，在序列的起始端的小片段容易丢失，导致起始区信号过低，机器有时也无法正确判读。
在序列的3’端易产生N值。
一个测序反应一般可以读出900bp以上的碱基（ABI3730可以达到1200bp），但是，只有一般600bp以前的碱基是可靠的，理想条件下，多至700bp的碱基都是可以用的。
一般在650bp以后的序列，由于测序毛细管胶的分辩率问题，会有许多碱基分不开，就会产生N值。
测序模板本身含杂合序列，该情况主要发生在PCR产物直接测序，由于PCR产物本身有突变或含等位基因，会造成在某些位置上有重叠峰，产生N值。
这种情况很容易判断，那就是整个序列信号都非常好，只有在个别位置有明显的重叠峰，视杂合度不同N值也不同。
测序列是从引物3’末端后第一个碱基开始的，所以就看不到引物序列。
有两种方法可以得到引物序列。
1.对于较短的PCR产物（<600bp），可以用另一端的引物进行测序，从另一端测序可以一直测通，可以在序列的末端得到该引物的反向互补序列。
对于较长的序列，一个测序反应测不通，就只能将PCR产物片段克隆到载体中，用载体上的通用引物(T7/SP6)进行测序。
载体上的通用引物与所插入序列间有一段距离，因此就可以得到完整的引物序列。
女儿质疑dna报告
女儿质疑DNA报告一、引言DNA报告在现代社会中被广泛应用于亲子鉴定、遗传疾病筛查等领域，被认为是一种高度可靠的科学方法。
然而，尽管如此，仍然有一些人对DNA报告的准确性产生了质疑。
本文将探讨当女儿对DNA报告提出质疑时，我们应如何进行思考和解答。
二、女儿的疑问女儿质疑DNA报告的准确性，这是一个值得认真对待的问题。
作为父母，我们应该理解她的疑虑，并用科学的方法去解答。
以下是一些常见的质疑：1.报告的可信度：女儿可能会对DNA报告的可信度提出疑问。
她可能认为DNA测试有可能出错，从而导致报告结果的不准确。
她可能会问DNA测试的准确性如何保证。
2.样本收取的过程：女儿可能对DNA样本的收取过程提出质疑。
她可能会问收取样本时是否存在干扰因素，以及护士在收集样本时是否有操作上的错误。
3.报告的解读：女儿可能会对DNA报告的解读过程产生疑问。
她可能不理解报告中使用的术语或者数据，从而对报告的准确性产生怀疑。
三、解答女儿的疑问1.解释报告的可信度：我们可以向女儿介绍DNA测试的原理和过程，并强调现代DNA测试技术的高准确性。
我们可以解释说，DNA测试通过分析某些特定的基因片段，通过与数据库中的样本进行比对来确定亲子关系。
我们可以告诉女儿，DNA测试的准确性通常可以达到99%以上。
2.说明样本收取的过程：我们可以向女儿详细介绍样本收取的过程，强调专业的护士和医生会严格按照操作规程进行样本收取，以确保样本的准确性和可靠性。
我们可以解释说，DNA样本的收取通常是通过简单的口腔拭子或者血液样本进行的，并且收取过程非常迅速和简单。
3.解读报告的术语和数据：我们可以帮助女儿理解报告中的术语和数据。
我们可以解释说，报告中的术语和数据是经过专业的DNA分析师解读的，他们具有丰富的经验和专业的知识。
我们可以告诉女儿，如果她对报告中的内容有任何疑问，我们可以随时咨询专业的遗传学家或者医生。
四、总结当女儿质疑DNA报告的准确性时，我们要以理性和科学的态度进行回答。
法医DNA鉴定常见问题解答
法医DNA鉴定常见问题解答法医DNA鉴定常见问题解答（Frequently Asked Questions, FAQs）1.GeneMapper ?ID X 1.2对安装系统的要求？软件只能安装在Windows Vista? Business (SP1)，Windows XP Professional (SP2 & SP3), Windows 2000 Professional (SP4)操作系统中，不⽀持在Microsoft? Windows? 7 Professional系统上进⾏安装；只⽀持32位的操作系统安装，不⽀持64位操作系统。
2.GeneMapper ID?X 1.3软件可以安装在Microsoft? Windows? 7 Professional吗？GeneMapper ID?X 1.3及以后版本的软件可以安装在Microsoft?Windows?7 Professional操作系统中，但必须是32位的操作系统。
同时，1.3及以后版本的软件也可以安装在Windows Vista? Business (SP1)，Windows XP Professional (SP2 & SP3)，Windows 2000 Professional (SP4)，32位的操作系统中。
3.GeneMapper ID? X 1.2及1.3软件可以安装在中⽂操作系统中吗？只⽀持英⽂操作系统的安装。
4.35XX与之前31XX和310遗传分析仪电泳⽣成的⽂件格式相同吗？不相同。
31XX和310遗传分析仪电泳⽣成的⽂件格式为.fsa，⽽35XX遗传分析仪电泳⽣成的⽂件格式为.hid。
5.GeneMapper ID?哪款软件可以分析后缀为.hid的⽂件？GeneMapper ID?X 1.2，1.3及以后版本的软件可以分析.hid和.fsa的⽂件；⽽之前版本的软件，包括GeneMapper ID? X 1.0，1.0.1，1.1和GeneMapper ID? 3.2.1，3.3软件只能分析.fsa的⽂件。
孩子做亲子鉴定采集样本注意事项
孩子做亲子鉴定采集样本注意事项亲子鉴定是一种通过DNA检测来确定亲子关系的方法。
在进行亲子鉴定的过程中，正确采集和保护样本非常重要。
特别是对于孩子来说，因为他们在采集过程中可能感到不适或害怕，所以需要特别注意以下事项。
首先，要选择适合的采样时间和环境。
最好选择孩子平静和舒适的时候进行采样，避免在他们情绪不稳定或焦虑的时候进行，这样可以减少孩子的不适感。
其次，要确保采集过程的卫生环境。
为了防止交叉污染，采集样本的地方应该保持清洁，并确保采集器具是干净的，最好使用一次性工具。
接下来，要选择合适的采集方法。
对于孩子，通常采集样本的方法有口腔黏膜刷采集、指纹或指甲采集、头发根部采集等。
要根据孩子的年龄和情况选择适合的采集方式，以确保采样的准确性和可靠性。
在采集样本之前，要与孩子进行必要的沟通和解释。
告诉他们采集过程的目的和意义，以减少他们的恐惧和不安。
尽量让他们参与和理解整个过程，并在可能的情况下得到他们的同意。
在进行采集时，要保持温和和耐心。
尽量不给孩子造成疼痛或不适。
如果孩子害怕或不愿意合作，可以适当地给予安抚和鼓励，并与他们建立良好的沟通和信任。
另外，要注意采样的正确操作。
根据所采集的样本类型，要掌握正确的采样方法和技巧。
遵循相应的操作规范和要求，避免污染或损坏样本。
最后，要选择可靠和具有资质的实验室进行亲子鉴定。
确保实验室有相关的执照和认证，并能提供可靠的结果和保密的服务。
总之，孩子做亲子鉴定采集样本需要引起足够的重视和关注。
在整个过程中，保护孩子的权益和隐私是最重要的考虑因素。
通过遵循上述注意事项，我们可以确保采样的准确性和可靠性，同时最大程度地减少孩子的不适感。
亲子鉴定应注意什么问题 - 亲子鉴定
亲子鉴定应注意什么问题 - 亲子鉴定亲子鉴定应注意什么问题核心内容：对于对婚生子女进行亲子鉴定，应有其中一方当事人进行申请，而另一方同意，法院才可启动亲子鉴定程序。
在另一方不同意进行亲子鉴定时，该方可能需承担不能举证的不利后果。
下面，法律编辑为您详细介绍关于亲子鉴定的注意事项。
根据《关于人民法院在审判工作中能否采用人类白细胞抗原作亲子鉴定问题的批复》(以下简称《批复》)这一司法解释，对于婚生子女涉及亲子鉴定问题的，应当注意以下几个问题：一、法院无权强迫当事人进行亲子鉴定。
法院要启动亲子鉴定程序，首先要有当事人一方的申请，其次要征得另一方的同意。
在当事人没有申请的前提下，即使法官对案情有所怀疑，也不能主动启动鉴定程序。
《批复》规定：“一方当事人要求作亲子鉴定的，或者子女已超过三周岁的，应视具体情况，从严掌握，对其中必须作亲子鉴定的，也要做好当事人及有关人员的思想工作。
”在一方当事人申请鉴定，而另一方当事人拒绝鉴定的情况下，根据《批复》从严掌握的原则，法院仍然不能启动亲子鉴定程序。
这是因为亲子鉴定需要父、母、子三方基因样本来鉴定，基因样本的涉及人身权问题，在目前法律没有明确规定的前提下，不能采取强制性的手段获取样本。
二、对于亲子关系应当首先适用婚生子女推定规则。
婚生子女，是指在存续期间受胎或出生的子女。
按照一般的亲子法原理，凡是在合法婚姻关系存续期间受胎的子女，不管是否在婚姻关系存续期间出生，均为婚生子女；凡是合法婚姻关系存续期间出生的子女，不管是否婚前受胎，也为婚生子女。
许多国家的法律对婚生子女的推定制度作了规定，我国虽然没有明确设定婚生子女推定制度，但在审判实践中，将婚姻关系存续期间妻子受胎所生的子女推定为夫妻双方的婚生子女已经成为认定的默认规则。
三、否认父母与子女的婚生关系，需要证据证明。
有关当事人要求否认父母与婚生子女的关系，目的常常是为了否定相应的权利义务。
要对婚生子女进行否认，就需要足够的证据来予以推翻。
DNA亲子鉴定测试的常见问题
DNA亲子鉴定测试的常见问题第一篇：DNA亲子鉴定测试的常见问题DNA亲子鉴定测试的常见问题1.什么是DNA亲子鉴定测试?DNA(脱氧核糖核酸)是人身体内细胞的原子物质.每个原子有46个染色体,另外,男性的精子细胞和妇人的卵子, 各有23个染色体,当精子和卵子结合的时候.这46个原子染色体就制造一个生命, 因此,每人从生父处继承一半的分子物质, 而另一半则从生母处获得。
DNA亲子鉴定测试与传统的血液测试有很大的不同.它可以在不同的样本上进行测试, 包括血液,腮腔细胞, 组织细胞样本和精液样本.由于血液型号, 例如A型, B型, O型或RH型, 在人口中比较普遍, 用于分辨每一个人, 便不如DNA亲子鉴定测试有效.除了真正双胞胎外, 每人的DNA是独一无二的.由于它是这样独特, 就好像指纹一样, 用于亲子鉴定, DNA是最为有效的方法.2.DNA亲子鉴定有多准确?DNA亲子鉴定是目前亲子测试中最准确的一种.如果小孩和测试男子的DNA模式在一个或多个的DNA探针上不吻合, 那么被测试男子便被100%排除, 即他是0%可能是亲生父亲.他不可能是孩子的生父.如果是母亲, 孩子和被测试父亲的DNA模式完全吻合, 那么可以计算出99.9%或更大的或然率.，这个结果证明他是实则完全证实小孩的亲生父亲.大部分的美国法庭接受90%或然率作为生父证明的证据.3.孩子要到某一年龄才可接受DNA亲子鉴定测试吗?DNA亲子鉴定测试是无年龄限制.传统的血型测试要小孩至少6个月.还有,要大量的血液样本, 通常是要两大茶匙以上.这种方法应用于小孩身上较困难。
相反, DNA亲子鉴定只是要很少几滴的血液(约1/4 或 1/2 茶匙), 或是口腔抹擦所得的腮细胞, 这种用少量的血液或口腔测试,使DNA测试甚至可以在新生婴或小孩身上进行。
由于DNA是形成于结合期, 测试甚至可以在小孩末出世之前, 使用(Chorionic villi Sampling/CVS)胎盘素或抽羊水(amniocentesis)方法来进行.亲子鉴定可以在已逝世的人的由殡仪馆工人收集的样本上进行.当一个人已辞世或失踪,还可以在其有血缘关系的亲属上重新编排他或她的DNA组织。
《DNA的粗提取和鉴定》实验中的两个常见问题_百替生物
加入二苯胺試劑 A 6ml ：加入二苯胺試劑 A 後試管中出現白色渾濁，震盪後白色渾 濁即可消失
出現藍色 出現藍色
service@
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3.
二苯胺試劑鑑定 DNA 的原理：DNA 分子中的去氧核糖在酸性環境下生成 ω-羥 基-γ-酮基戊醛，再與二苯胺試劑結合顯藍色，顏色的深淺與溶液中的 DNA 含 量成正比。
4.
鑑定實驗的一些問題：在學生實際的實驗過程中，在水浴後 15 分鐘內出現明 顯實驗現象的比例往往非常低，經常會出現整個班級沒有明顯鑑定結果的現 象。根據實際操作的結果，我認為很可能取決於以下幾個因素： I. 試管中加入一定量 10%氯化鈉溶液，然後再將提取出來的 DNA 溶解於其 中，在實驗過程中，經常會出現纏繞於玻璃棒末端的 DNA 的量過少的情 況，如果溶解於氯化鈉溶液中的 DNA 的量過少的話，與過量的二苯胺試 劑共熱時，出現的藍色會比較淺。 II. 加入二苯胺試劑時，首先觀察二苯胺試劑 A 的顏色。新配的二苯胺試劑 A 呈無色，而如果放置一段時間之後，逐漸呈現淺綠色，放置幾天之後，變 為藍色，如果使用該變色後的試劑，對實驗結果有很大影響。因此，實驗 應使用新配製試劑，同時使配製好的試劑儘量避免受到強光照射。實驗 時，可先將試劑 A 滴加入溶有 DNA 的氯化鈉溶液的試管後，再滴加幾滴 試劑 B，震盪均勻（試劑 A 與試劑 B 不要事先混合）。 III. 滴加入一定量的二苯胺試劑並震盪後，溶液會呈現白色渾濁（二苯胺遇水 後大量析出），水浴加熱後，白色渾濁可能會消失，由於二苯胺的熔點較 低，最初我認為很有可能是析出的二苯胺轉化為液態油滴的緣故。經多次 實驗，我發現白色渾濁的消失與否實際上和加入的二苯胺試劑的量的多少 有關。當二苯胺試劑加入較多時，整個混合溶液體系中的醋酸濃度會相應 的增大，由於二苯胺能很好的溶解與醋酸中，因此白色渾濁消失也就不足 為怪了。具體的實驗結果可參見下面的表格。 IV. 水浴加熱 5~10 分鐘後，撤去酒精燈，使試管冷卻，靜置一段時間後，試 管中溶液變為藍色。在實際操作過程中，我發現如果沒有將試管及時冷卻 的話，多數情況下試管內的物質不會變色。而水浴一段時間後靜置冷卻， 試管內會或深或淺的呈現出藍色。因此加熱後建議冷卻一段時間。冷卻後
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DNA亲子鉴定测试的常见问题
1. 什么是DNA亲子鉴定测试?
DNA(脱氧核糖核酸)是人身体内细胞的原子物质. 每个原子有46个染色体,另外,男性的精子细胞和妇人的卵子, 各有23个染色体,当精子和卵子结合的时候.这46个原子染色体就制造一个生命, 因此,每人从生父处继承一半的分子物质, 而另一半则从生母处获得。
DNA亲子鉴定测试与传统的血液测试有很大的不同. 它可以在不同的样本上进行测试, 包括血液,腮腔细胞, 组织细胞样本和精液样本. 由于血液型号, 例如A型, B型, O型或RH 型, 在人口中比较普遍, 用于分辨每一个人, 便不如DNA亲子鉴定测试有效. 除了真正双胞胎外, 每人的DNA是独一无二的. 由于它是这样独特, 就好像指纹一样, 用于亲子鉴定, DNA是最为有效的方法.
2. DNA亲子鉴定有多准确?
DNA亲子鉴定是目前亲子测试中最准确的一种. 如果小孩和测试男子的DNA模式在一个或多个的DNA探针上不吻合, 那么被测试男子便被100%排除, 即他是0%可能是亲生父亲. 他不可能是孩子的生父.
如果是母亲, 孩子和被测试父亲的DNA模式完全吻合, 那么可以计算出99.9%或更大的或然率.，这个结果证明他是实则完全证实小孩的亲生父亲.大部分的美国法庭接受90%或然率作为生父证明的证据.
3. 孩子要到某一年龄才可接受DNA亲子鉴定测试吗?
DNA亲子鉴定测试是无年龄限制. 传统的血型测试要小孩至少6个月. 还有,要大量的血液样本, 通常是要两大茶匙以上. 这种方法应用于小孩身上较困难。
相反, DNA亲子鉴定只是要很少几滴的血液(约1/4 或1/2 茶匙), 或是口腔抹擦所得的腮细胞, 这种用少量的血液或口腔测试,使DNA测试甚至可以在新生婴或小孩身上进行。
由于DNA是形成于结合期, 测试甚至可以在小孩末出世之前, 使用(Chorionic villi Sampling/CVS) 胎盘素或抽羊水(amniocentesis) 方法来进行.
亲子鉴定可以在已逝世的人的由殡仪馆工人收集的样本上进行. 当一个人已辞世或失踪,还可以在其有血缘关系的亲属上重新编排他或她的DNA组织。
4. 亲子鉴定可以在没有母亲参与情况下进行吗?
可以. DNA亲子鉴定是非常有效, 即使在母亲不在的情形下依然有效. 在母亲参与或不参与的情况下, 而孩子和被测试男子的DNA组织排列不吻合, 那么被测试者便100%排除为亲生父亲. 如果组织排列吻合, 那么我们可计算出99%或更大的生父或然率. 个人如带未成年小孩测试,携带身份文件并签署一份有关他/她在法律上有权带小孩来测试的表格。
5. 口腔(腮)抹试准确吗?
测试血液的另一变通办法是一种叫腮抹试(buccal swab)的样本收集方法, 由于DNA存在于身体内每个细胞之中, 使用抹试方法收集的样本而得出的试验结果的准确性和血液样本一样。
收集样本时用棉签在小孩口内轻轻抹试, DNA便可以从此抽取, 这种程序是不强制和无
痛, 最适宜于小孩, 由于用这种方法提取DNA,更多的步骤，可以在大人身上取血而用口腔擦试在小孩上取得样本,，大人也可选择使用口腔抹擦测试.
6. 被测试的人分布在不同的城市可以吗?
完全无问题。
7.要医院证明或律师信才可以做DNA亲子鉴定吗?
不一定。
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8. 亲子鉴定可以在小孩出世前做吗?
可以，用DNA鉴定, 亲子测试可以在小孩未出世前进行, DNA测试可通过CVB胎盘素, 常在怀胎10到13个星期, 或用抽羊水方法在怀孕14到24星期内进行. 任何一种手术要由一位OB/GYN医生实施。
9. DNA亲子鉴定的原理和程序
DNA是从几滴血, 腮细胞或培养的组织纤内提取而来. 用畴素将DNA样本切成小段, 放进喱胶内, 用电泳槽推动DNA小块使之分离--最细的在最远, 最大的最近. 之后, 分离开的基因放在尼龙薄膜上, 使用特别的DNA探针去寻找基因, 相同的基因会凝聚于一, 然后, 利用特别的染料,在X光的环境下, 便显示由DNA探针凝聚于一的黑色条码. 小孩这种肉眼可见的条码很特别---- 一半与母亲的吻合,一半与父亲的吻合. 这过程重覆几次, 每一种探针用于寻找DNA的不同部位并影成独特的条码, 用几组不同的探针, 可得到超过99,9%的父系或然率或分辨率.
10. 可否请解释亲子鉴定测试的结果?
孩子会有一条纹与亲生母亲相同而另一条码与待证实父亲1号(AF1)相同,此人是生父; 被排除的男子(AF2),则与小孩并无相同的条码.
肯定父系关系= 99.99%或更大的生父或然率(法律上证明是生父)
否定父系关系= 0% 生父或然率(100%排除为生父)
由于国内人口基数较大，一般建议采用20个以上STR位点比对方可得出正确结论。