巢湖市危险废物鉴定

危险废物鉴定-硝基芳烃和硝基胺的测定

中国科学院广州化学研究所分析测试中心

卿工----189--3394--6343

附录10固体废物硝基芳烃和硝基胺的测定高效液相色谱法

1范围

本方法适用于固体废物中14种硝基芳烃和硝基胺，包括八氢-1,3,5,7-四硝基-1,3,5,7-双偶氮辛因（HMX）、六氢-1,3,5-三硝基-1,3,5-三嗪（RDX）、1,3,5-三硝基苯（1,3,5-TNB）、1,3-二硝基苯（1,3-DNB）、甲基-2,4,6-三硝基苯基硝基胺（Tetryl）、硝基苯（NB）、2,4,6-三硝基甲苯（2,4,6TNT）、4-氨基-2,6-二硝基甲苯（4-Am-DNT）、2-氨基-4,6-二硝基甲苯（2-Am-DNT）、2,4-二硝基甲苯（2,4-DNT）、2,6-二硝基甲苯（2,6-DNT）、2-三硝基甲苯（2-NT）、3-三硝基甲苯（3-NT）、4-三硝基甲苯（4-NT）的高效液相色谱测定方法。

本方法对上述14种硝基芳烃和硝基胺物质在水和土壤中的定量限见表1

2原理

液态样品用乙腈和氯化钠盐析萃取操作法进行萃取和反萃取（高浓度的水体样品可直接稀释后过滤；土壤和沉积物样品可用乙腈在超声浴中萃取后过滤），用高效液相色谱检测，经C18反相色谱柱分离，紫外检测器检测。

3试剂和材料

3.1水试剂水，纯水，其中不含任何超过检出限的目标待测物，或超过检出限之三分之一的干扰物质。3.2乙腈，HPLC级。

3.3甲醇，HPLC级。

3.4氯化钙，分析纯，配制成5g/L水溶液。

3.5氯化钠，分析纯。

3.6标准溶液

3.6.1标准储备溶液

在暗处干燥真空干燥器内的固体分析物标样至恒重，将约将0.100g（称重至0.0001g）一种分析物

放入100ml容量瓶中用乙腈稀释至定容。存放于4℃冰箱中的避光处。由实际称出的重量计算标准储备溶液的浓度（表观浓度为1,000mg/L），标准储备溶液可在一年内使用。

3.6.2标准溶液

如果2,4DNT和2,6DNT均要测定，则分别配制二种标准工作溶液：（1）HMX,RDX,1,3,5-TNB,

1,3-DNB,NB,2,4,6TNT和2,4DNT，和（2）Tetryl，2,6DNT,2-NT,3-NT,4-NT。标准工作溶液应配制成1000mg/L，分析土壤样品时标准液中溶剂为乙腈，分析水体样品时标准液中溶剂为甲醇。

用合适的溶剂稀释两种浓的间接标准液至浓度范围从2.5-1000μg/L，这些溶液在配制时应冷藏，

可以使用30天。

作为测定低浓度的方法，必须测定检测限，并设计一系列与要求范围相适应的稀释液。低浓度方法

所需的标准液必须在使用前即时配制。

3.6.3标准工作溶液

校正用标准液至少要配制5个不同的浓度，用5g/L氯化钙溶液（3.4项）按50%（v/v）将标准溶

液稀释，这些稀释液必须冷藏于阴暗处，并于校正的当天新鲜配制。

3.7替代物配制液

应检查萃取和分析系统的性能以及方法对不同样品基质的效率。每种样品基质加入每种样品，标样

和含一种或两种替代物（即样品中不存在的分析物）的空白试剂水。

3.8基体配制液

基体配制液用甲醇，样品浓度应是其实测定量限（表1）的5倍。所有目标分析物均应包括在内。

4仪器、装置

4.1高效液相色谱仪，带有紫外检测器。

4.2天平，±0.0001g。

4.3Vortex混合器。

4.4带温度控制的超声水浴。

4.5带搅拌子的磁搅拌器。

4.6电炉，鼓风式，不加热。

4.7高压注射针筒，500μl。

4.8一次性滤芯式过滤器，0.45μm，Teflon过滤器。

4.9玻璃移液管，A级。

4.10Pasteur移液管。

4.11玻璃闪烁瓶，20ml。

4.12玻璃样品瓶，带Teflon衬里的盖，15ml。

4.13玻璃样品瓶，带Teflon衬里的盖，40ml。

4.14一次性注射器，Plastipak，3ml和10ml或同类产品。

4.15带磨口塞容量瓶A级适当规格

备注：作磁搅拌器萃取用的100ml和1L容量瓶必需是圆形。

4.16真空干燥器，玻璃。

4.17研钵和捣捶，钢制。

4.18筛子，30目。

5分析步骤

5.1样品制备

5.1.1水质样品，工业流程废水样品先用高浓度方法筛选来决定是否需用低浓度方法（1-50μg/L）处理。

5.1.1.1低浓度处理法（盐析萃取）

5.1.1.1.1加251.3g氯化钠至1L容量瓶（圆形）中，量出770ml水样（用1升带刻度量筒）倒入含盐的容量瓶内，加入搅拌子在磁搅拌器上用最高转速混合容量瓶内物质直至盐全部溶解为止。

5.1.1.1.2在溶液搅拌时加164ml乙腈（用250ml带刻度量筒量出），并继续搅拌15min，关闭搅拌器，静止约10min，使相分离。

5.1.1.1.3用Pasteur移液管将上层乙腈（约8ml）吸出转入100ml容量瓶（圆形）中，加10ml新鲜乙腈到含水样的1L容量瓶中，再搅拌15min，静止10min，使相分离。将第二部分乙腈与第一部分合并，

此时即使含几滴盐水无关紧要。

5.1.1.1.4将84ml盐水（每1000ml试剂水含325g NaCl）加到100ml容量瓶中的乙腈萃取液中，加入

搅拌子放在磁搅拌器上搅拌溶液15min，再静止10min，使相分离。用Pasteur移液管小心转移乙腈相

至一个10ml带刻度量筒内。此时随乙腈转移的水量必须降至最低，因为水含有高浓度的NaCl，会在色谱图的起始部分产生一个大峰，干扰HMX的测定。

5.1.1.1.5再加1.0ml乙腈至100ml容量瓶中，再次搅拌15min，静止10min，使相分离。把第二部分乙腈合并在第一次乙腈萃取物的10ml量筒内（如果体积超过5ml需转移至25ml有刻度的量筒内）记下乙腈萃取液的总体积数至最接近的0.1ml（用此数为萃取液体积（Vt）），分析前将生成的萃取液约

5-6ml用无有机物的试剂水按1：1稀释（如Tetryl也要分析，必须pH<3）。

5.1.1.1.6如果稀释的萃取液混浊，用一次性针筒将溶液通过0.45m Teflon过滤器，进行过滤。丢弃最初的0.5ml，其余部分保留在带Teflon衬里瓶盖的样品瓶中备RP-HPLC分析用。

5.1.1.2高浓度处理法

样品过滤：取每种水样一份5ml加到闪烁管内，再加5ml乙腈充分摇动。用一次性注射器将溶液通

过0.45μm Teflon过滤器过滤，弃去前3ml滤液，其余保留在带Teflon衬里瓶盖的样品瓶中备RP-HPLC 分析用。用甲醇替代乙腈进行稀释再过滤可以改善HMX的定量测定。

5.1.2土壤和沉积物样品

5.1.2.1样品均相化

土壤样品在空气中于室温或较冷的温度下干燥至恒重，小心防止样品受阳光直射。在乙腈淋洗过的

研钵中充分磨碎和混匀样品，过30目筛。

5.1.2.2样品萃取

5.1.2.2.1每种土壤样品取2.0g一份放入一个15ml的玻璃样品瓶内加10.0ml乙腈用含Teflon衬里的瓶盖盖好，涡流振荡1min，再放入冷的超声浴中18h。

5.1.2.2.2超声完成后，让样品静止30min,取出5.0ml上清液与20ml样品瓶内5.0ml氯化钙溶液混合，摇匀后静止15min。

5.1.2.2.3用一次性注射器抽取上清液通过0.45μmTeflon过滤器过滤，弃去前3ml，其余保留在带Teflon 衬里瓶盖的样品瓶中备RP-HPLC分析用。

5.2色谱条件（推荐用）

5.2.1色谱柱：

首选色谱柱：C18反相色谱柱25cm×4.6mm(5μm)；

确证色谱柱：CN反相色谱柱25cm×4.6mm(5μm)。

5.2.2流动相：50/50（v/v）甲醇/水。

5.2.3流速：1.5ml/min。

5.2.4进样体积：100μL。