园艺生物技术复习题及答案

植物组织培养部分7、与常规苗相比，试管苗具有哪些特点？(1)生长细弱；(2)光合作用差(3)叶片气孔数目少，活性差(4)根的吸收功能弱(5)对逆境的适应和抵抗能力差8、简述原生质体作为遗传操作和生理生化研究的材料有何特点？（1）没有细胞壁，有利于体细胞融合、体细胞杂交、基因转移和单细胞培养。

（2）原生质体能比较容易摄取外来的遗传物质。

基本概念1、植物组织培养(plant tissue culture)：是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也叫植物克隆。

亦称为离体培养或试管培养。

2、脱分化（dedifferentiation）：将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。

一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化。

3、再分化（redifferentiation）：经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。

4、外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。

包括各种器官、组织、细胞或原生质体等5、愈伤组织(callus)：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。

6、器官发生(organ genesis)：由愈伤组织或外植体诱导形成不定根或不定芽，再获得再生植株的方法。

7、胚状体发生(embryo genesis)：是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构，而发育成再生植株的途径。

8、细胞全能性（cell totipotency）：即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。

9、母液（mother liquid）：是欲配制液的浓缩液。

配成比所需浓度高10-100倍。

母液配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等。

好处: ①保证各物质成分的准确性②配制时的快速移取③便于低温保藏。

10、褐变(brown change)：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响材料的培养。

11、玻璃化现象（vitrification phenomenon）：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。

12、消毒（disinfection ）：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。

13、灭菌(sterilization)：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。

14、接种(inoculation)：在无菌条件下，用灼烧过的镊子将外植体放到培养基上的操作过程。

15、愈伤组织培养(callus culture):是指将母体植株上的外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。

16、继代培养(subculture)：愈伤组织在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养。

这个过程叫做继代培养17、形态建成（organogenesis）：外植体在适宜的培养条件下经脱分化、再分化形成不定根（adventitious roots）、不定芽（adventitious shoots）或直接发育成形态完整的植物体的过程。

18、体细胞胚（somatic embryo）又称胚状体（embryoid）：指在组织培养中，由一个非合子细胞(体细胞)，经过胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成的具有双极性的胚状结构。

19、快速繁殖(微繁殖)(micropropagation)：用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织迅速扩大培养，并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。

20、原生质体融合(protoplast fusion)也称体细胞杂交（somatic hybridization）：就是使分离下来的不同亲本的原生质体，在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合，像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象。

21、原生质体（protoplast）：是指除去了细胞壁后的裸露的植物细胞。

22、无病毒苗（virus-free plantlets）：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。

泛的培养基。

特点是无机盐离子浓度较高(2)hite培养基：无机机盐浓度较低，适于生根培养。

(3)N6培养基：KNO3和（NH4）2SO4含量高，不含钼。

广泛应用于禾谷类植物的花粉和花药培养。

(4）B5培养基：主要特点是含有较低的铵盐，较高的硝酸盐和盐酸硫胺素。

适宜双子叶植物特别是木本植物的培养(5)M—8P培养基：为原生质体培养而设计的。

其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素3、植物组织培养技术主要包括哪些环节？各环节的主要工作内容？（1）培养基的配制及灭菌（2）外植体的选择及灭菌（3）外植体的接种及培养（4）试管苗的驯化与移栽4、组织培养中常用的灭菌方法？分为物理的和化学的两类，（1）物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤和大量无菌水冲洗等措施；（2）化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。

5、怎样进行培养基的高压湿热灭菌?方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到49kPa时，打开放气阀，放出空气（注意完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底），待压力表指针归零后，再关闭放气阀。

当压力表上升达到108kPa时，锅内温度达121℃（在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢），维持20-30min。

6、如何对外植体进行表面消毒？(1) 将需要的材料用水洗干净。

(2) 表面灭菌：用70%酒精浸30-60s左右。

(3) 灭菌剂处理：0.1%升汞10分钟、或在10%漂白粉上清液中浸泡10-15分钟。

(4) 用无菌水冲洗3-5次左右9、植物脱毒的主要方法有哪些？其主要原理是什么？（1）茎尖培养脱毒：病毒在植物体内的分布并不均匀，越靠近茎端的病毒的感染深度越低，生长点则几乎不含或含病毒很少（2）愈伤组织培养脱毒法：通过植物的器官和组织的培养，脱分化诱导产生愈伤组织，然后从愈伤组织再分化产生芽，长成小植株，可以得到无病毒苗（3）珠心胚培养脱毒：病毒一般不通过种子传播，由珠心细胞发育成的胚再生的植株是无毒的，并具有与母本相同的遗传特性。

（4）茎尖微体嫁接：将实生苗砧木在人工培养基上种植培育，再从成年无病树枝上切取0.4—1.0mm茎尖，在砧木上进行试管微体嫁接，以获得无病毒幼苗。

（5）花药培养脱毒（6）热处理脱毒：一些病毒对热不稳定，在高于常温的温度下（35-40℃），即钝化失活（7）化学处理：抑制或杀死病毒基因工程部分基本概念1、基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。

2、基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。

3、基因工程：有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

4、转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。

5、感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

6、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。

7、转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

8、DNA变性：在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键则不受影响。

9、DNA复性：当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构。

10、分子克隆：在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。

11、RFLP：即限制性片段长度多态性，个体之间DNA的核苷酸序列存在差异，称为DNA多态性。

若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化，称为RFLP。

12、PCR技术：聚合酶链反应，它是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA 聚合酶（Taq酶）、RNA引物和四种dNTP的情况下，通过高温变性（90℃－95℃，1－2min）,低温退火（25℃－37℃，1－2min）,中温延伸（60℃－75℃，90 sec-5min）,这样反复循环的过程中，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。

13、RT-PCR：反转录PCR ，先将mRNA反转录成cDNA，然后再以cDNA为模板，用PCR 方法加以扩增。

14、同尾酶：有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同，但切割DNA后，产生相同的粘性末端，称为同尾酶。

15、克隆载体：为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体称为克隆载体。

16、表达载体：为使插入的外源DNA序列可转录翻译成肽链而特意设计的载体称为表达载体。

17、质粒：细菌细胞质中独立于细菌染色体之外能自主地进行复制的遗传单位。

18、染色体组性：染色体组型是指生物体细胞所有可测定的染色体特征总称。

包括染色体总数、染色体组数、每条染色体大小和形态、着丝点的位置等。

19、带型：用染色体分带技术体所产生的明显的染色带（暗带）和未染色的明带相间的带纹，使染色体呈现鲜明的个体性的技术。

20、RAPD：随机引物扩增多态性DNA（Random Amplified Polymorphic DNA，RAPD）是在PCR 技术的基础上，以一系列不同的，随机排列的寡聚核苷酸单链为引物，与变性后的模板链退火，在DNA聚合酶的作用下，合成一段新的互补DNA链。

21、卫星DNA：真核生物基因组酶切、离心后，在主带附近会出现（AT）含量很高的简单高度重复序列。

22、AFLP：扩增片段长度多态性Amplified fragment length polymorphism（AFLP）是在随机扩增多态性（RAPD）和限制性片段长度多态性（RFLP）技术上发展起来的DNA 多态性检测技术。

23、基因芯片技术：是指通过微阵列(Microarray)技术将高密度DNA片段阵列通过高速机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃片等固相表面，以荧光标记的DNA探针，借助碱基互补杂交原理，进行大量的基因表达及监测等方面研究的最新革命性技术。